刺葡萄ISSR分子标记体系的建立及种质资源聚类分析

【目的】建立刺葡萄(Vitis davidii Fo?x.)的ISSR分子标记体系以及分析刺葡萄种质资源的亲缘关系,为刺葡萄的保护和利用提供依据。【方法】以8份外缘葡萄品种或类型为对照,52份刺葡萄类型为材料,采用改良CTAB法提取植物基因组DNA,以基因组DNA为模板,用同一试验考察多个因素及水平的筛选方式对ISSR-PCR扩增反应体系中的Mg2+、d NTPs、引物、模板DNA的浓度及循环数进行优化,建立适用于刺葡萄的最佳ISSR-PCR反应体系;在优化的反应体系中进行多态性引物的筛选并进行分析,同时根据Jaccard遗传相似系数进行UPGMA聚类分析。【结果】采取改良CTAB法提取的刺葡萄DNA质量优于常规的CTAB法,在优化的ISSR-PCR反应体系中,从100条ISSR引物筛选出了13个具有多态性的引物,共检测到139个位点,其中多态性位点116个,多态位点百分率为83.45%。聚类结果显示,对照组8份外缘资源均在刺葡萄种群外,刺葡萄与华东葡萄的遗传距离较腺枝葡萄近;52份刺葡萄类型分为三大组群,两大江西刺葡萄组群及湖南与福建刺葡萄组群,而在湖南与福建刺葡萄种群中又分为4个群组。【结论】刺葡萄种质资源具有丰富的遗传多样性,ISSR分子标记可有效揭示刺葡萄种质资源的遗传多样性和亲缘关系,对刺葡萄种质资源的保护和利用有重要的意义。

刺葡萄新类型——水晶刺葡萄的生物学性状研究

在对怀化野生刺葡萄种质资源调查中发现了一个新类型——"水晶"刺葡萄。该类型葡萄植株生长势强,适应性广,耐旱,抗病性强,可粗放栽培,适合在南方高温、多湿气候条件下栽培,且产量较高,果实味甜、风味好。

刺葡萄皮花色苷色素果冻的研制

本文研究刺葡萄皮色素在果冻生产中的添加量、应用条件及对果冻品质的影响，考察了刺葡萄皮色素在果冻贮藏中的稳定性，确定了刺葡萄皮色素液的最佳添加量为3％（刺葡萄皮色素液的花色苷含量为1．0126mg／mL，果冻产品花色苷含量约为3．0378mg／100g）；甜味剂的添加种类和量为：8％白砂糖＋2％果葡萄糖浆；酸味剂的添加种类和量为：0．14％柠檬酸＋0．01％苹果酸＋0．01％乳酸＋0．15％柠檬酸钾；刺葡萄皮色素果冻在常温避光、不避光贮藏180d，产品颜色稳定，是一种值得开发的新型、保健果冻。

刺葡萄幼胚愈伤组织诱导及其高产原花青素细胞系筛选

以刺葡萄幼胚为材料,研究不同培养方式、培养基配方和培养条件对其愈伤组织诱导的影响,采用正交试验设计法筛选刺葡萄愈伤组织继代增殖的培养基配方,并对继代保持的培养条件和方式进行优化,同时进行了高产原花青素刺葡萄愈伤组织细胞系的筛选研究。结果表明,刺葡萄幼胚以平放的方式接种到MS+1.0 mg·L-1 2,4-D或MS+1.0 mg·L-1 2,4-D+0.5mg·L-1 KT的固体培养基上,在黑暗的条件下,能有效的诱导出愈伤组织,诱导效率为80%;刺葡萄愈伤组织继代增殖以MS+1.5 mg·L-1 2,4-D或MS+1.5 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-1 KT的固体培养基为佳,并且采用此两种培养基交替继代培养,在光照条件下能长期保持旺盛且生长一致的刺葡萄愈伤组织;筛选出了紫红色松脆状的高产原花青素的刺葡萄愈伤组织细胞系,培养35 d后每克鲜样的原花青素含量可达1 671.16μg。