Breaking and Characteristics of Ganoderma Lucidum Spores by High Speed Entrifugai Shearing Pulverizer

The spores of Ganoderma lucidum were ground and broken to ultrafine particles by high speed centrifugal shearing（HSCS） pulverizer. The characteristics of Ganoderma lucidum spores were analyzed by scanning electron microscope （SEM）, Fourier transform infrared spectrophotometry （FTIR）. Ultraviolet-visible pectrophotometer was used to determine the extraction ratio of aqueous solubility polysaccharide between the raw and broken spores. The immunological function on the mice before and after the breaking of spores wan investigated. The experimental results show that after being ground, the sporoderm-broken ratio reachs 100%, the original active ingredients of ganoderma lucidum spores do not change, and the extraction ratio of aqueous solubility polysaccharide is greatly increased by 40.08%. The broken spores show much higher immunological activity comparing with original spores of Ganoderma lucidum.

破壁灵芝孢子粉中多种重金属元素及硒含量检测方法探讨

采用微波消解进行前处理,三重四极杆-电感耦合等离子体质谱法测定破壁灵芝孢子粉中镉、铬、镍、砷、铅、汞及硒元素含量,对方法条件进行优化和讨论,并对20批次破壁灵芝孢子粉进行测定。结果表明,镉、铬、镍、砷、铅和汞元素在氦气碰撞模式,硒元素在氧气反应模式下,采用内标校正定量,可达到良好的测定效果。在优化的条件下,各元素线性关系良好,检出限均可达μg·kg^(-1)级别;镉、铬、镍、砷、铅及硒元素的加标回收率在90.3%~105.0%,汞的加标回收率在82.1%~92.5%;方法精密度在5%以内。此方法前处理操作简便,检测灵敏度高,稳定性好,给灵芝孢子粉多元素测定提供了良好的技术支撑。

破壁灵芝孢子的体外模拟消化特性研究

为探究破壁灵芝孢子在口腔和胃肠道中的消化吸收情况以及对肠道环境的影响。以机械碾压法、微波法和超声法破壁的灵芝孢子(Ganoderma lucidum spore,GLS)为研究对象,经体外模拟人体口腔、胃、小肠消化系统及透析模型,随后将消化后的底物进行体外发酵。测定消化各个阶段的灵芝孢子失质量率、多糖和三萜化合物释放量、生物可接受率和透析率以及小肠消化底物在0、6、12、24、48 h体外发酵过程中pH变化。结果显示,胃和小肠是灵芝孢子的主要消化场所,破壁组平均失质量率达到23.84%,其中机械碾压组更易被消化,其失质量率为29.46%。97%的多糖在胃肠液中溶出,机械碾压组多糖的生物可接受率具有最高水平,为87.33%。三萜只在破壁组小肠模拟消化中有微量溶出,平均约1.50±0.04 mg/g,95.2%的三萜随沉淀进入结肠。体外发酵结果显示,发酵液pH在0~12 h持续下降,并在12 h基本到达发酵终点。对比三种破壁灵芝孢子的消化特性,机械碾压法破壁的品质可观,不失为企业规模化破壁生产的优选。综上所述,破壁有利于提高灵芝孢子的有效成分在人体消化环境内释放量和生物可接受率,促进结肠发酵产酸,有助于调节人体肠道环境。

灵芝破壁孢子粉的抗肿瘤活性研究

目的研究灵芝破壁孢子粉对乳腺癌和口腔癌生长的抑制作用。方法采用灵芝破壁孢子粉乙醇提取物处理乳腺癌MCF-7细胞、口腔癌KB细胞和宫颈癌HeLa细胞,检测三种细胞的增殖情况。构建裸鼠乳腺癌MCF-7移植瘤和口腔癌KB移植瘤模型,评价灵芝破壁孢子粉进行灌胃治疗后的肿瘤生长抑制情况。结果灵芝破壁孢子粉乙醇提取物显著抑制MCF-7、KB和HeLa细胞的增殖,且该抑制效应呈剂量依赖性。在MCF-7移植瘤模型中,低、中、高3组灵芝破壁孢子粉给药剂量均有显著的肿瘤生长抑制作用,肿瘤抑制率分别为50.35%、65.72%和80.55%;但在KB移植瘤模型中,低剂量组没有显示显著的肿瘤生长抑制作用,而中剂量组和高剂量组表现出明显的抗肿瘤作用,3组肿瘤抑制率分别为4.03%、37.63%和40.59%。结论灵芝破壁孢子粉能够抑制MCF-7乳腺癌和KB口腔癌荷瘤裸鼠肿瘤的生长。

灵芝破壁孢子粉中粗多糖含量测定的不确定度评估及控制

为明确用于食用菌粗多糖含量测定的苯酚-硫酸分光光度法中对结果可靠性的影响因素,根据标准NY∕T 1676—2008中的方法对一个灵芝破壁孢子粉样品的粗多糖进行测定,分析该方法在测定过程中的不确定度来源,计算各分量的不确定度和合成不确定度,并对各分量不确定度对合成不确定度的贡献大小进行排名。结果表明:灵芝破壁孢子粉样品的粗多糖含量为2.71%±0.09%(k=2),影响不确定度的主要来源是标准品溶液配制和稀释、标准曲线拟合、样品重复性。增加标准工作溶液的配制量可有效降低苯酚-硫酸分光光度法的不确定度,并能提高其可靠性。

响应面法提取优化破壁灵芝孢子粉多糖及其分级醇沉组分的抗氧化活性研究

目的:对破壁灵芝孢子粉多糖(BGP)的最佳提取工艺、各分级醇沉多糖组分的抗氧化性进行探究。方法:以破壁灵芝孢子粉为原料,采用内部沸腾法探究提取温度、提取时间、料液比对BGP得率的影响;利用响应面法分析优化BGP的提取参数。用不同浓度的乙醇醇沉多糖,通过测定其DPPH自由基以及羟自由基的清除力,测定其抗氧化性。结果:根据回归模型分析预测结果,最佳提取工艺参数为提取温度83℃、提取时间7 min、料液比1:21。在此条件下BGP的得率为9.10%。以不同浓度的乙醇分级醇沉BGP,得到5种醇沉BGP组分。乙醇浓度为90%时,所得BGP的得率最高。抗氧化实验表明各醇沉BGP都具有一定的抗氧化活性。90%-BGP的抗氧化性稍强于其他醇沉多糖,并且随着多糖浓度的增加,各醇沉多糖的抗氧化性均有一定的增加的趋势。结论:利用最佳提取参数提取,不同乙醇浓度醇沉的BGP均具有一定的抗氧化活性。

响应面法优化破壁灵芝孢子粉中甘油三油酸酯提取工艺

目的:优化破壁灵芝孢子粉中甘油三油酸酯的提取工艺。方法:利用超声波法提取破壁灵芝孢子粉中甘油三油酸酯,以甘油三油酸酯提取率为响应值,在提取条件单因素试验的基础上,根据响应面Box-Behnken试验设计,优化壁灵芝孢子粉的提取工艺。结果:破壁灵芝孢子粉中甘油三油酸酯最佳提取参数为料液比0.1:25(g·mL-1),超声功率560W,超声时间30min。在此最优提取条件下,破壁灵芝孢子粉中甘油三油酸酯提取率为5.01%。结论:本方法利用超声波提取法可以有效提取破壁灵芝孢子粉中的甘油三油酸酯。

化学视角下破壁灵芝孢子粉工艺研究

为了研究破壁灵芝孢子粉生产的关键技术,建立灵芝孢子粉制备破壁灵芝孢子粉胶囊生产工艺,测定了其20项指标,并依据国标和中国药典对试样进行了风险评估。结果表明:精深加工后的灵芝孢子粉呈棕褐色,有细微清淡的独特香味,孢子粉比较分散疏松,无颗粒感,无结块。按照指标要求中的国标方法检测发现破壁灵芝孢子粉胶囊中的水分为3.72%<8.0%、总灰分为0.89%<3.0%、过氧化值未检出、菌落总数为2.1×10^(3) CFU/g<10000、大肠菌群为0.3 MPN/g<0.92 MPN/g、霉菌和酵母为5 CFU/g<20 CFU/g、沙门氏菌未检出、金黄色葡萄球菌未检出、As为0.6 mg/kg<1.0 mg/kg、Ni为0.11 mg/kg<1.0 mg/kg、Pb为0.154 mg/kg<2.0 mg/kg、Cd为0.034 mg/kg<0.5 mg/kg、Cr未检出、Hg为0.036 mg/kg<0.1 mg/kg,说明中药饮片破壁灵芝孢子粉胶囊理化指标符合国家标准。

灵芝孢子粉破壁技术、质量分析与深加工相关研究进展

破壁灵芝孢子粉为一种灵芝深加工产品,具有多种药理学活性,更易被人体吸收。灵芝孢子的破壁方法包括生物化学法、物理法和机械法等,工业生产多综合利用多种方法。破壁灵芝孢子粉的质量分析还没有统一的国家标准,灵芝孢子粉质量可以参考地方标准进行综合评价,还可以参考近期发表的一些分析方法。灵芝孢子粉提取物产品以孢子油为主,其它产品也有研发并推出市场。药理学研究表明,灵芝孢子油、灵芝孢子粉水提物和醇提物均具有抗癌活性,有良好的应用前景。

破壁提取法的灵芝孢子破壁

提出了将灵芝孢子破壁和有效成分提取结合起来,经过一次加工处理就能同时完成灵芝孢子的破壁和提取的破壁提取法。详细阐述了该方法中灵芝孢子的破壁情况。实验结果表明:最佳破壁提取工艺的参数为:5%酒精为溶剂,超声波处理10min,高压处理的压力为400MPa,保压5min。

破壁灵芝孢子粉对大鼠睡眠功能改善效果及机制的研究

目的观察破壁灵芝孢子粉对正常大鼠睡眠功能的影响,初步探讨其作用机制。方法将雄性SD大鼠随机分成正常对照组、阳性对照组、破壁灵芝孢子粉低、中、高剂量组(0.42、0.84、1.68 g/kg),每组9只,灌胃剂量为10 mL/(kg·d-1),连续灌胃14 d。末次灌胃后分别进行直接睡眠实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验、阈上剂量睡眠潜伏期及睡眠时间实验,并测定大鼠血浆5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA),及下丘脑中5-HT、谷氨酸(glutamic acid,Glu)、γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid,GABA)的含量。结果破壁灵芝孢子粉能明显缩短大鼠睡眠潜伏期,提高大鼠睡眠率(P<0.05),对睡眠总时长的影响虽无统计学差异,但有延长睡眠时间的趋势。中、高剂量的破壁灵芝孢子粉能够提高大鼠下丘脑5-HT、GABA含量(P<0.05,P<0.01),同时也能提高血浆中5-HT水平、降低DA的含量(P<0.05,P<0.01)。结论破壁灵芝孢子粉具有睡眠改善作用,其作用机制与调节大鼠脑内5-HT和Glu/GABA平衡,以及血中兴奋-抑制中枢神经系统的神经递质有关。

原木灵芝破壁孢子粉对小鼠免疫功能的影响

通过设3个浓度的原木灵芝破壁孢子粉药物组和阴性对照组,分别进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,绵羊红细胞诱导小鼠DTH试验,小鼠血清溶血素测定,抗体生成细胞检测,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验,小鼠碳廓清试验,NK细胞活性测定试验和脏器指数测定。结果表明,与阴性对照组比较,低、中、高3个剂量原木灵芝破壁孢子粉均能提高小鼠脾淋巴细胞的增殖能力,差异均有显著性;高剂量组能提高小鼠左后足跖部24h与0h厚度差,差异有显著性;中剂量、高剂量组均能提高小鼠溶血空斑数,差异有显著性。说明原木灵芝破壁孢子粉具有较强的免疫调节作用。

灵芝孢子对肿瘤细胞生长的抑制效果研究

应用3种肿瘤细胞模型对未破壁灵芝孢子、机械破壁灵芝孢子和全灵芝剥壁孢子进行抗肿瘤试验研究。结果表明,未破壁及不同破壁方式的灵芝孢子对人恶性乳腺癌细胞(MT-1)、人恶性淋巴癌细胞株(Jurkat)、人恶性脑肿瘤细胞(U343)均有不同程度的抑制作用,抑制效果强弱为全灵芝剥壁孢子>机械破壁灵芝孢子>未破壁灵芝孢子,表明破壁的确能提高灵芝孢子对肿瘤细胞的抑制作用,而且选择破壁的方法也很重要,生物酶法破壁能使灵芝孢子的生物活性成分得到充分释放,所以大大提高灵芝孢子的功效。

破壁灵芝孢子油急性毒性与致突变性的研究

目的观察破壁灵芝孢子油的急性毒性及致突变作用。方法分别进行急性毒性实验、骨髓嗜多染红细胞微核实验、精子畸形实验。结果破壁灵芝孢子油对雌雄小鼠经口半数致死量(LD50)均大于10g/kg体重,为实际无毒级物质;骨髓嗜多染红细胞微核实验和精子畸形实验未发现破壁灵芝孢子油对小鼠有致突变作用。结论破壁灵芝孢子油是一种安全而且具有很高药用和食用价值的物质。

超高压超临界流体撞击流方法制备破壁灵芝孢子粉的工艺研究

介绍了超高压超临界撞击流技术制备破壁灵芝孢子粉的方法及基本原理,对制备工艺进行了研究。加载压力、系统加热温度、保压时间及撞击靶距是影响灵芝孢子粉破壁率的因素,通过正交试验及对加热温度和撞击靶距所做的后续试验,确定了采用自行研制开发的试验系统进行灵芝孢子粉破壁的最佳工艺条件是加载压力300MPa,系统加热温度250°C,保压时间1h,撞击靶距10mm。在此工艺条件下,灵芝孢子粉的破壁率为88.48%。

不同产地原料生产的破壁灵芝孢子粉品质比较分析

为比较不同产地原料生产的破壁灵芝孢子粉的品质差异和加工适用性,以我国四大主产地的灵芝孢子粉为研究对象,经破壁处理得到破壁灵芝孢子粉,测定了破壁灵芝孢子粉的色泽、粒径和比表面积、破壁率、松密度及堆积密度、灰分、粗多糖含量、脂肪含量、DPPH自由基清除率、-OH自由基清除率及还原能力等指标。结果表明:大别山产区、长白山产区原料生产的破壁灵芝孢子粉松密度、堆积密度较高,更适合于作为片剂、胶囊剂等产品的加工原料;大别山产区原料生产的破壁灵芝孢子粉粗多糖含量(以葡聚糖计)最高,为1.38 g/100 g,且抗氧化能力最强,其中DPPH自由基清除能力、-OH自由基清除能力、还原能力均高,分别可达72.55%、33.44%和46.4%。

响应面优化灵芝孢子粉挤出破壁工艺

采用双螺杆挤出技术对灵芝孢子粉进行破壁处理,利用响应面对影响挤出破壁工艺的主要因素:挤出温度、螺杆转速、物料含水量进行优化。结果表明:当挤出温度110℃、物料含水量27%、螺杆转速640 r/min时,灵芝孢子粉破壁率可达到96.48%。方差分析结果表明,影响挤出破壁灵芝孢子粉工艺的因素由强到弱依次为挤出温度>物料含水量>螺杆转速。

破壁灵芝孢子粉的质量探讨

研究和探讨破壁灵芝孢子粉的质量标准,利用性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别和主要成分含量测定的方法,初步掌握破壁孢子粉质量特性。薄层色谱鉴别可见清晰荧光斑点,其醇溶液加入硫酸后可见棕色环。总灰分测定显示:采自岫岩灵芝孢子粉和山东一等孢子粉灰分较低,山东三等孢子粉灰分含量较高。不同来源的样品总三萜类含量各不相同,高者达2.24%,低者1.26%。综合各项检测结果,初步确定了破壁灵芝孢子粉质量评价指标,方法稳定,可操作性强。

灵芝孢子粉生物酶破壁技术的研究

选择专一性较强的溶壁酶Ⅲ,结合超声波处理南韩赤芝、台芝和中华黑芝孢子粉孢子壁,破壁率可达98%以上。应用冷冻干燥技术,可使溶壁酶破壁灵芝孢子粉的有效成分(多糖)的保护率在99%左右。

超高压超临界撞击流技术制备破壁灵芝孢子粉

介绍了一种制备破壁灵芝孢子粉的新方法。此方法在现有撞击流技术的基础上,引入超临界流体作为撞击流技术应用的工作流体,对现有撞击流技术作了改进,使得该项技术可以应用于超高压领域。由此,提出了超高压超临界撞击流技术的概念。将此技术应用于灵芝孢子粉的破壁研究,并研制开发了一套新的实验系统,此系统具有操作简便,效率高,产品纯度高等特点。初步研究结果表明,灵芝孢子有效破壁率达75%。