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Relationship between Apoptosis and E-cadherin Expression in Bronchial Epithelium of Smoking Mouse 被引量:10
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作者 刘丽芳 袁永辉 +1 位作者 李钫 刘红云 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2003年第3期216-218,共3页
To investigate whether apoptosis is associated with cell adhesion in bronchial epithelium, and whether it contributes to the kinetics of injury and repair of surface epithelia, this study was performed for E-cadherin ... To investigate whether apoptosis is associated with cell adhesion in bronchial epithelium, and whether it contributes to the kinetics of injury and repair of surface epithelia, this study was performed for E-cadherin expression by using immunohistochemistry technique and for apoptosis by TUNEL method An animal model of smoking was used for this study The results showed that epithelial cells with membrane anchored E-cadherin decreased remarkably at several time points during 6 months of exposure to smoke ( P< 0 01) and then restored to normal level This fluctuation was associated exclusively with the alteration in number of apoptotic cells ( P <0 01) There was no significant difference in activation of nuclear transcription factor NF-kappa B among groups ( P> 0 05) All these suggested that apoptosis is associated with E-cadherin expression in bronchial epithelium of smoking mouse 展开更多
关键词 APOPTOSIS E-CADHERIN bronchial epithelia SMOKING
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呼吸道合胞病毒感染诱导人支气管上皮细胞表达胸腺基质淋巴生成素的信号转导机制探讨 被引量:6
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作者 涂海燕 陈新 李静 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1581-1583,1587,共4页
目的探讨哮喘发病过程中呼吸道合胞病毒(RSV)感染通过诱导支气管上皮细胞表达胸腺基质淋巴生成素(TSLP)来加重哮喘症状的具体信号转导机制。方法构建RSV病毒F蛋白真核表达载体pcDNA3-F,转染体外培养的人气管上皮细胞株CRL-9483,同时转染... 目的探讨哮喘发病过程中呼吸道合胞病毒(RSV)感染通过诱导支气管上皮细胞表达胸腺基质淋巴生成素(TSLP)来加重哮喘症状的具体信号转导机制。方法构建RSV病毒F蛋白真核表达载体pcDNA3-F,转染体外培养的人气管上皮细胞株CRL-9483,同时转染Smad7表达载体pcDNA3/Smad7或者添加p38、ERK1/2、JNK、JAK/STAT通路选择性阻断剂,24h后利用RT-PCR观察各组细胞中TSLP mRNA量的改变情况,观察哪些抑制剂可以下调TSLP mRNA水平。对TSLP显著下调的实验组扩大细胞培养规模,提取细胞浆蛋白后,利用Western Blotting在TSLP蛋白水平进行观察。结果体外培养的CRL-9483细胞在转染空载体pcDNA3情况下基本不表达TSLP蛋白(TSLP/GAPDHPCR产物相对灰度0.10±0.03),F蛋白的转染可以明显促进其mRNA水平的增高(0.42±0.20,P=0.024),这种增高可以部分被p38抑制剂(0.14±0.04)和JNK抑制剂(0.23±0.07)所阻断,与F蛋白转染组相比P值分别为0.036和0.048,而Smad7阻断剂(0.60±0.25)、ERK1/2抑制剂(0.45±0.23)以及JAK/STAT1阻断剂(0.44±0.25)无此阻断作用,与单纯F蛋白转染组相比P>0.05。利用Western Blotting分析发现与单独RSV病毒F蛋白表达组(TSLP/GAPDH蛋白条带相对灰度8.13±2.20)相比,p38抑制剂(3.67±1.18)和JNK抑制剂(1.48±0.77)也可以导致TSLP蛋白水平的下降。结论RSV感染可以通过其F蛋白来刺激气道上皮细胞表达TSLP,p38和JNK信号通路参与到该过程中,这可能是RSV感染诱导或加重哮喘气道炎症的一个重要原因。 展开更多
关键词 哮喘 胸腺基质淋巴生成素 支气管上皮细胞 信号转导
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Ag85B慢病毒抑制人支气管上皮细胞TSLP及其受体的表达 被引量:1
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作者 房祥峰 钱江 +2 位作者 孟锦绣 李东风 吴健 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2015-2020,共6页
目的:研究结核分枝杆菌抗原85B(Ag85B)慢病毒对正常人支气管上皮细胞(NHBEC)表达胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)和其受体TSLPR的影响,探究Ag85B抑制哮喘气道炎症的机制。方法:将Ag85B基因重组质粒转入293T... 目的:研究结核分枝杆菌抗原85B(Ag85B)慢病毒对正常人支气管上皮细胞(NHBEC)表达胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)和其受体TSLPR的影响,探究Ag85B抑制哮喘气道炎症的机制。方法:将Ag85B基因重组质粒转入293T细胞,构建携带Ag85B和EGFP报告基因的慢病毒载体p LVXIRES-Neo-EGFP-Ag85B(Ag85B慢病毒)。用鉴定后的Ag85B慢病毒感染HEK293细胞,计算滴度并观察感染效率。利用Lipofectamine? 2000使Ag85B慢病毒感染体外培养NHBEC,设立空病毒感染和空白对照组。Real-time PCR和Western blotting检测Ag85B、TSLP和TSLPR mRNA和蛋白表达水平。结果:成功构建Ag85B慢病毒感染NHBEC体系,Ag85B慢病毒感染NHBEC 48 h后,荧光显微镜下可见强绿色荧光蛋白表达,细胞生长状态良好,病毒滴度为2×1011TU/L,感染效率达到90%以上。Real-time PCR和Western blotting结果显示Ag85B慢病毒成功感染NHBEC,可见相应Ag85B mRNA和蛋白表达。与空病毒感染和空白对照组比较,Ag85B慢病毒感染组TSLP mRNA表达有下降趋势,TSLPR mRNA与TSLP和TSLPR的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:Ag85B慢病毒感染NHBEC可以抑制NHBEC的TSLP和TSLPR的表达,提示Ag85B可能通过靶向阻滞TSLP-TSLPR途径抑制哮喘气道炎症。 展开更多
关键词 胸腺基质淋巴细胞生成素 胸腺基质淋巴细胞生成素受体 慢病毒载体 抗原85B 人支气管上皮细胞
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TG2与卷烟烟气致支气管上皮细胞恶性转化的相关性研究
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作者 姚虎胜 易克 +1 位作者 杨陟华 朱茂祥 《湖南农业科学》 2011年第8期111-113,共3页
以卷烟烟气总粒相物(TPM)为材料,以永生化人支气管上皮细胞为靶细胞,通过调节专管酰胺酶-2(TG2)的表达及活性研究TG2基因在卷烟烟气致细胞恶性转化过程中的作用。结果表明,TG2在恶性转化的支气管上皮细胞中表达下调,并且TG2的表达及活... 以卷烟烟气总粒相物(TPM)为材料,以永生化人支气管上皮细胞为靶细胞,通过调节专管酰胺酶-2(TG2)的表达及活性研究TG2基因在卷烟烟气致细胞恶性转化过程中的作用。结果表明,TG2在恶性转化的支气管上皮细胞中表达下调,并且TG2的表达及活性的改变对细胞的凋亡、增殖、周期等产生影响。这说明,TG2可能通过调控细胞的凋亡、增殖、周期等影响卷烟烟气对支气管上皮细胞的恶性转化。 展开更多
关键词 卷烟烟气 支气管上皮细胞 恶性转化
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气道上皮中pendrin的研究进展
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作者 朱康(综述) 李文言(审校) 卢根(审校) 《国际儿科学杂志》 2023年第6期378-382,共5页
Pendrin是一种电中性的离子交换转运蛋白,在气道上皮中主要表达于上皮细胞膜的顶端,负责氯离子(Cl^(-))的重吸收并交换碳酸氢根(HCO_(3)^(-))或硫氰酸根(SCN^(-))至管腔液,主要参与调节气道表面液体层(airway surface liquid,ASL)的酸... Pendrin是一种电中性的离子交换转运蛋白,在气道上皮中主要表达于上皮细胞膜的顶端,负责氯离子(Cl^(-))的重吸收并交换碳酸氢根(HCO_(3)^(-))或硫氰酸根(SCN^(-))至管腔液,主要参与调节气道表面液体层(airway surface liquid,ASL)的酸碱度和厚度、黏蛋白分泌及气道防御过程,对于维持气道表面微环境的稳态具有重要意义。在支气管哮喘中,pendrin的表达明显上调,与支气管哮喘的重要病理过程如气道高反应性、中性粒细胞浸润和黏蛋白分泌增加密切相关。抑制pendrin的功能可能是支气管哮喘治疗的新靶点。 展开更多
关键词 PENDRIN 阴离子转运蛋白 气道上皮 支气管哮喘 气道防御
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苯并(a)芘致人支气管上皮细胞DNA损伤及与组蛋白H2A单泛素化水平的关系 被引量:8
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作者 王志武 贾利娜 +1 位作者 牛侨 杨瑾 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2012年第3期136-138,143,共4页
[目的]通过体外细胞培养途径,探讨苯并(a)芘(benzo[a]pyrene,B[a]P)作用下人支气管上皮细胞(16HBE)DNA损伤与组蛋白H2A单泛素化表达水平的关系。[方法]取对数生长期16HBE细胞,采用2μmol/L B[a]P染毒不同时间(0、1、2、4、8、12、24、4... [目的]通过体外细胞培养途径,探讨苯并(a)芘(benzo[a]pyrene,B[a]P)作用下人支气管上皮细胞(16HBE)DNA损伤与组蛋白H2A单泛素化表达水平的关系。[方法]取对数生长期16HBE细胞,采用2μmol/L B[a]P染毒不同时间(0、1、2、4、8、12、24、48h)进行实验,用碱性单细胞凝胶电泳实验检测细胞DNA损伤水平,并以Olive尾矩值(olivetail moments,OTM)评价DNA损伤程度;用Western-blot法检测组蛋白H2A单泛素化水平。[结果]单细胞凝胶电泳结果显示:2μmol/L B[a]P染毒不同时间时,随着染毒时间的延长,各染毒组细胞DNA损伤程度均明显增高,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01);Western-blot结果显示:2μmol/L B[a]P染毒不同时间时,与对照组相比,组蛋白H2A的单泛素化水平增高,且在染毒2h后,差异有统计学意义(P<0.01);回归分析显示,单泛素化H2A的表达水平与DNA损伤程度存在高度相关,决定系数(R2)为0.910,P<0.01。[结论]B[a]P染毒致16HBE细胞DNA损伤与组蛋白H2A单泛素化水平之间存在密切关系。 展开更多
关键词 苯并(A)芘 组蛋白H2A 人支气管上皮细胞株 DNA损伤
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苯并芘处理对人支气管上皮细胞热休克蛋白70和着色性干皮病G蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 杨瑾 刘晓勇 +3 位作者 邹云锋 牛丕业 段燕英 邬堂春 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期267-270,共4页
目的探讨苯并芘(Benzo[a]pyrene,BaP)作用下的人支气管上皮细胞(16HBE)热休克蛋白70(Heatshock protein 70,Hsp70)和着色性干皮病G蛋白(Xeroderma pigmentosum group G,XPG)表达的时间效应特征,并分析二者之间可能存在的关联性。方法用8... 目的探讨苯并芘(Benzo[a]pyrene,BaP)作用下的人支气管上皮细胞(16HBE)热休克蛋白70(Heatshock protein 70,Hsp70)和着色性干皮病G蛋白(Xeroderma pigmentosum group G,XPG)表达的时间效应特征,并分析二者之间可能存在的关联性。方法用8μmol/L BaP处理16HBE细胞0、1、2、4、8、12、24和48 h,以彗星实验检测细胞DNA损伤并以Olive尾矩值(Olive Tail Moments,OTM)评价DNA损伤程度,以Western-blot检测Hsp70和XPG的表达水平,并以激光共聚焦法检测二者的共定位。结果染毒1~2h时OTM值变化率最大,与正常细胞相比,除染毒1h组外其余各组OTM值均显著性增高(P﹤0.01);Hsp70和XPG的表达随染毒时间逐渐增高,12 h时达到峰值,激光共聚焦结果显示BaP染毒细胞后Hsp70和XPG的结合在细胞核内增强。结论在该试验条件下,XPG在执行核苷酸切除修复作用时可能有Hsp70的参与,其具体机制还有待其他实验进一步加以证实。 展开更多
关键词 苯并(A)芘 人支气管上皮细胞 热休克蛋白70 着色性干皮病G蛋白
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苯并(a)芘作用下人支气管上皮细胞蛋白表达谱的改变
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作者 杨瑾 刘晓勇 +2 位作者 段燕英 牛丕业 邬堂春 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2009年第2期110-114,共5页
[目的]观察苯并(a)芘(BaP)作用下人支气管上皮细胞(16HBE)蛋白表达谱的改变。[方法]以0、1、2、4、8、16、32、64μmol/L的BaP染毒细胞24h,应用双向凝胶电泳和ImageMaster软件分析BaP处理后细胞内蛋白质表达谱的改变,基质辅助激光解吸... [目的]观察苯并(a)芘(BaP)作用下人支气管上皮细胞(16HBE)蛋白表达谱的改变。[方法]以0、1、2、4、8、16、32、64μmol/L的BaP染毒细胞24h,应用双向凝胶电泳和ImageMaster软件分析BaP处理后细胞内蛋白质表达谱的改变,基质辅助激光解吸附电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF)结合数据库检索鉴定差异表达蛋白质斑点。[结果]各浓度染毒组与对照组相比,成功鉴定了17个差异表达蛋白质斑点,其中表达上调的有9种,下调的有8种。这些蛋白质包括细胞骨架蛋白、与能量代谢有关的蛋白、与DNA损伤修复有关的蛋白、肿瘤标志物、伴侣蛋白、与信号转导有关的蛋白和与氧化应激有关的蛋白。[结论]BaP作用于16HBE后导致与细胞损伤、DNA修复、应激、细胞恶性转化等有关的蛋白质表达发生改变。 展开更多
关键词 苯并(A)芘 双向电泳 人支气管上皮细胞
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