马钱子碱抑制豚鼠心室肌细胞钠电流的作用研究

目的本研究旨在分析马钱子碱(brucine)对分离的单个豚鼠心室肌细胞钠电流(INa+)的作用,并探索其抗心律失常的可能机制。方法共选取24只健康的成年豚鼠作为实验对象,雌雄不拘,随机分为4组,每组6只:第1组是未接受任何处理的对照组,之后通过微量加样器使培养皿中brucine药物的终浓度分别达到3μmol/L、10μmol/L、30μmol/L。采用急性酶解法分离获得单个豚鼠心室肌细胞,通过全细胞膜片钳技术测量离子通道电流,以检测不同浓度的brucine对豚鼠心室肌细胞INa+的影响。结果正常的对照组没有明显的INa+电流峰值的变化,而brucine 3μmol/L组给药前后基本不影响INa+电流峰值,当brucine的浓度增加到10μmol/L时,给药前后INa+电流峰值显著下降(P<0.05),在30μmol/L组给药前后INa+电流峰值大幅度减少(P<0.01),并且这种抑制作用呈浓度依赖性。正常对照组及brucine 3μmol/L剂量组中,电流-电压曲线(Ⅰ~Ⅴ曲线)并未受到显著的影响;然而,10μmol/L、30μmol/L剂量组与对照组比较,INa+的Ⅰ~Ⅴ曲线上移,无平行移动,且曲线形状不变。结论Brucine能够通过抑制心室肌细胞钠通道电流发挥抗心律失常作用。

炙马钱子和马钱子碱氮氧化物的毒性研究

目的明确炙马钱子和马钱子碱氮氧化物的毒性。方法选用C57BL/6小鼠210只,雌雄各半,随机分为对照组10只,生马钱子组、炙马钱子组、马钱子碱组、马钱子碱氮氧化物组,各50只。对照组正常饲养饮水,其他组灌胃给药,观察24 h内小鼠中毒死亡情况,然后持续观察记录14 d内小鼠死亡情况,逐日记录各组小鼠死亡数量和中毒症状。灌胃给药,观察小鼠的一般状态、死亡情况、给药后14 d内的体质量变化;采用HE染色观察死亡小鼠心、肝、脾、肾组织的病理损伤情况。结果给药后四种药品的小鼠中毒反应类似,并呈现剂量依赖性加重。14 d内各给药组小鼠的体质量变化较对照组无明显异常。炙马钱子的LD50约为生马钱子的1.6倍;马钱子碱氮氧化物的LD50可达马钱子碱的31倍左右。相较于炙马钱子和马钱子碱氮氧化物,生马钱子和马钱子碱的死亡-剂量曲线,较为陡直,均呈剂量依赖性。与对照组相比,四种药品最高剂量组中毒死亡小鼠心、肝、脾、肾组织HE染色均未见明显异常。结论炙马钱子和马钱子碱氮氧化合物比生马钱子和马钱子碱毒性更小,治疗窗更大,更安全。

不同批次马钱子种仁生品及醋制品中生物碱含量测定

目的比较不同批次马钱子种仁生品及醋制品中生物碱含量,为马钱子醋制工艺的科学性提供一定参考依据。方法收集12批次的马钱子种仁,使用高效液相色谱法测定12批次马钱子种仁生品及其醋制品中士的宁及马钱子碱含量,比较炮制前后两种生物碱成分含量变化。结果12个批次马钱子种仁生品中士的宁含量为1.68%~2.11%,马钱子碱含量为0.99%~1.43%;经醋制后,12个批次马钱子种仁醋制品中士的宁含量为1.21%~1.48%,马钱子碱含量为0.65%~0.94%;两者比例分别降低21.47%~38.89%和27.35%~50.35%。结论马钱子种仁经醋制后士的宁和马钱子碱含量均显著降低,可能是马钱子炮制减毒的原理。

中药马钱子商品中士的宁和马钱子碱的含量测定

目的：对我国１５个省区产的中药马钱子商品及炮制品中的士的宁和马钱子碱进行含量测定。方法：应用反相高效液相色语法。结果：发现部分省市的生马钱子商品的士的宁含量偏高，个别炮制品的士的宁含量也超过了国家药典规定的标准。结论：因士的宁为剧毒成分，应引起足够的重视。

马钱子总生物碱提取纯化工艺及抗肿瘤研究

目的:探讨马钱子总生物碱提取纯化工艺及其体外抗肿瘤研究。方法:采用氨性氯仿浸提、酸水纯化得到总生物碱,HPLC测定提取液及纯化后浓缩液中马钱子碱和士的宁的含量,以转移率为指标考察提取和纯化工艺。采用MTT法,以IC50为指标比较马钱子总生物碱的体外抗肿瘤活性。结果:采用5倍量氯仿提取5次,每次12h;1mol/L盐酸纯化1次为最佳工艺制备马钱子总生物碱,平均得率为3.49%,其中士的宁和马钱子碱分别占46.76%和26.51%。马钱子总生物碱对十种细胞的抑制效果在72h通过IC50值来比较:MGC-803>A2780>LoVo>SMMC-7721>Hela>A549>MDA-MB-231>MKN-45>BGC-823>SGC-7901,总生物碱对MGC-803,A2780细胞株的IC50分别达到了295.79ng/mL,419.07ng/mL。结论:优选的纯化工艺简便,效率高;马钱子总生物碱的抗肿瘤效果显著,值得进一步研究。

高效液相色谱法同时测定马钱子总生物碱脂质体中士的宁和马钱子碱的含量

目的：采用高效液相色谱法测定马钱子总生物碱脂质体中马钱子碱和士的宁的含量。方法：马钱子总生物碱脂质体与甲醇按1：9混合后离心取上清液用甲醇稀释进样。色谱条件：采用Lichrospher C18柱（4．6mm×250mm，5μm），乙腈-0．01mol·L^-1庚烷磺酸钠与0．02mol·L^-1磷酸二氢钾等量混合（用10％磷酸调pH值2．8）（24：76）为流动相，流速1．0mL·min^-1，检测波长254nm，柱温30℃，结果：马钱子碱、士的宁的线性范围均为1～20mg·L^-1，r=0．9999。低、中、高浓度士的宁平均加样回收率分别为（101．2±1．8）％，（99．2±1．3）％，（99．1±1．2）％（n=3）；低、中、高浓度马钱子碱的加样回收率分别为（103．9±2．8）％，（100．4±0．4）％，（102．7±1．2）％（n=3）。结论：本方法操作简便，是在药典方法基础上的改进，可用于控制马钱子总生物碱脂质体的质量。

不同粒径马钱子粉中马钱子碱、士的宁的含量分析与比较

为考察粒径对马钱子粉中活性(毒性)成分含量的影响,制备了20～200目下的马钱子粉样品;采用扫描电子显微镜(SEM)观察各样品的微观形貌,利用薄层色谱法(TLC)对各样品进行定性鉴别并用高效液相色谱法(HPLC)测定各样品中马钱子碱、士的宁含量。结果表明:不同粒径下马钱子粉样品微观形态组成比例存在差异,而且马钱子碱、士的宁含量不同,马钱子碱(或士的宁)在部分样品中的含量存在显著性差异。因此在马钱子药粉入药时,应严格控制其粒径,结果显示宜将马钱子粉的粒径控制在100～200目之间。

马钱子碱对豚鼠心脏乳头肌动作电位的影响

研究马钱子碱对心肌电生理方面的影响。采用常规微电极技术同步记录收缩力的方法，观察了马钱子碱对豚鼠心脏乳头肌动作电位（Ａｐ）及收缩力（Ｆｃ）的影响。实验结果表明：马钱子碱在浓度大于等于１×１０－６ｍｏｌ·Ｌ－１时，浓度依赖地延长快反应动作电位（ＦＡＰ）及高钾除极组织胺和氯化钡诱发的慢反应动作电位ＳＡＰ的ＡＰＤ５０、ＡＰＤ９０，在浓度大于等于３×１０－６ｍｏｌ·Ｌ－１时，抑制ＦＡＰ及ＳＡＰ的Ｆｃ，在浓度大于等于１×１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１时，还可抑制ＦＡＰ及ＳＡＰ的ＡＰＡ、Ｖｍａｘ。提示马钱子碱具有阻断心肌Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｃａ２＋通道的作用。

炮制对马钱子中生物碱的影响

应用薄层扫描法测定了按不同方法炮制的中药马钱子中士的宁、马钱子碱、异士的宁、异马钱子碱的含量，并就马钱子中生物碱的含量分布与其炮制方法之间的关系进行了研究。

马钱子碱对小鼠肿瘤的抑制作用

目的:评价马钱子碱对移植性肿瘤模型荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用和生存时间的影响.方法:用ICR小鼠接种S180、 EAC、 Heps瘤株造成相应的移植性荷瘤小鼠模型,考察马钱子碱对实体瘤模型(S180、 Heps)小鼠的抑瘤率和对腹水瘤模型(EAC、 Heps)小鼠生命延长率以研究其抗肿瘤活性.结果:马钱子碱在1.61～6.46 mg·kg-1对实体瘤Heps模型小鼠和S180模型小鼠的抑瘤率均不低于30%.马钱子碱能还能提高小鼠的免疫器官的重量及其指数,但其对腹水瘤模型(EAC、Heps)荷瘤小鼠的生存时间无明显延长作用.结论:马钱子碱能一定程度地抑制实体瘤模型小鼠体内肿瘤生长,值得进一步研究.

马钱子碱及其脂质体对移植性荷瘤小鼠抗肿瘤作用的对比研究

目的评价和比较马钱子碱及其脂质体对移植性肿瘤模型荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用和生存时间的影响。方法用ICR小鼠接种S180、EAC腹水瘤、肝癌Heps瘤株造成相应的移植性荷瘤小鼠模型,考察马钱子碱及其脂质体对实体瘤模型(S180和Heps)小鼠的抑瘤率和对腹水瘤模型(EAC和Heps)小鼠生命延长率的作用以研究两者的抗肿瘤活性。结果马钱子碱及其脂质体能有效抑制实体瘤模型荷瘤小鼠体内肿瘤生长,1.61、3.23、6.46mg/(kg·d)马钱子碱对Heps小鼠的抑瘤率分别为35.05%、43.70%和46.09%,而1.61、3.23mg/(kg·d)马钱子碱脂质体的抑瘤率分别为45.41%和58.19%;1.61、3.23、6.46mg/(kg·d)马钱子碱对S180小鼠的抑瘤率分别为37.59%、36.13%和38.87%,而1.61和3.23mg/(kg·d)马钱子碱脂质体的抑瘤率分别为53.00%和48.37%,明显高于马钱子碱;但两者对腹水瘤模型(EAC和Heps)荷瘤小鼠的生存时间均无延长作用。结论马钱子碱及其脂质体有显著的抑制荷瘤小鼠肿瘤生长作用,马钱子碱脂质体抗肿瘤作用明显强于马钱子碱。

马钱子碱和士的宁镇痛作用的初步探讨

本文研究了中药马钱子的主要成份马钱子碱、士的宁的镇痛作用,并与哌替啶作了比较。小白鼠醋酸扭体法:①量效关系:马钱子碱、哌替啶抑制ip HAC引起的扭体半数有效量(ED_(50))分别为12.68(8.12～14.15)mg/kg;2.69(2.21～3.29)mg/kg(Litchfield-Wilcoxon-method)。士的宁与对照组无显著差异。②时效关系:马钱子碱抑制扭体作用持续时间较哌替啶为长约4倍。小白鼠热板法:马钱子碱、哌替啶在一定剂量和时限内均有明显镇痛作用,士的宁无显著镇痛作用。马钱子碱39.81(38.95～51.29)mg/kg、哌替啶41.69(38.19～45.5)mg/kg时,两药100min时限内平均镇痛阈提高百分率相等。

Brucine对Heps荷瘤小鼠的抗肿瘤作用和毒性的研究

目的观察和评价B ruc ine对移植性肝癌Heps模型荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用和生存时间的影响,同时考察B ru-c ine对其免疫系统、造血系统及肝、肾的毒性。方法用ICR♂小鼠接种肝癌Heps瘤株造成移植性肝癌Heps小鼠模型,以B ruc ine对荷瘤小鼠的抑瘤率和生命延长率代表B ruc ine的抗肿瘤活性;以小鼠的体重、免疫器官指数、血细胞指数和肝、肾指数为指标观察B ruc ine对小鼠的毒性及可能的作用机制。结果B ruc ine对移植性肝癌Heps荷瘤小鼠的抑瘤率分别为30.34%(1.61 mg.kg-1)、46.21%(3.23mg.kg-1)和42.07%(6.46 mg.kg-1)。3.23 mg.kg-1(1/20 LD50)是其最佳剂量。但对其生存时间无延长作用。毒性考察实验显示B ruc ine对肝癌Heps小鼠的造血、免疫系统以及肝、肾无明显的毒性。相反B ruc ine还能提高其免疫器官的重量和指数,提高肝癌Heps小鼠的白细胞和血小板数,并能降低小鼠因接种肝癌Heps瘤株而造成的AST、ALT和BUN异常升高。结论B ruc ine能有效抑制移植性肝癌模型荷瘤小鼠体内肿瘤生长,短期对动物的造血、免疫系统以及肝肾没有明显的毒性,相反还能刺激和促进造血系统和免疫系统的功能,恢复小鼠因接种肝癌Heps瘤株而造成的肝肾功能的损伤。通过深入研究B ruc ine有可能发展成为一种新型抗癌药。

马钱子生物碱成分的研究

从马钱子的种子中分得13种生物碱,其中异马钱于碱、异马钱子碱N-氧化物、异士的宁N-氧化物为首次从该植物中鉴定。

高效液相色谱法测定马钱属植物中士的宁和马钱子碱的含量

高效液相色谱法测定马钱属植物中士的宁和马钱子碱的含量顾志平张曙明王春兰连文琰肖培根陈建民（中国医学科学院、中国协和医科大学药用植物研究所，北京１０００９４）马钱属植物我国产１０种，主要分布于广东、广西、海南、云南等省区。士的宁和马钱子碱是该属植物的主...

马钱子碱对小鼠淋巴细胞功能的影响

目的 观察镇痛剂量的马钱子碱（ Ｂｒｕ） 对小鼠淋巴细胞功能的影响。方法 测定绵羊红细胞（ Ｓ Ｒ Ｂ Ｃ） 致敏小鼠血清溶血素及脾抗体分泌细胞（ Ａ Ｆ Ｃ） 水平， 二硝基氯苯（ Ｄ Ｎ Ｃ Ｂ） 所致小鼠迟发性超敏反应（ Ｄ Ｔ Ｈ） ，以及丝裂原诱导小鼠脾淋巴细胞增殖和产生 Ｉ Ｌ２ 能力。结果 Ｂｒｕ（１０ 及２０ ｍｇ·ｋｇ － １ ，ｉｐ 显著增强小鼠对 Ｄ Ｎ Ｃ Ｂ 的特异性细胞免疫反应，但５ ，１０ 及２０ ｍｇ·ｋｇ － １ 不影响对 Ｓ Ｒ Ｂ Ｃ 的特异性体液免疫反应。对环磷酰胺（ Ｃｙｃ） 降低的上述反应，３ 个剂量的 Ｂｒｕ均有显著恢复作用（ Ｐ＜ ００５ ～００１） 。 Ｂｒｕ １０ ｍｇ·ｋｇ－ １ ｉｐ增强 Ｃｏｎ Ａ 及 Ｌ Ｐ Ｓ 诱导的脾淋巴细胞增殖（ Ｐ＜ ００５） ，对 Ｃｙｃ 所降低的脾淋巴细胞尤其 Ｔ 细胞增殖反应， Ｂｒｕ ５ ～２０ｍｇ·ｋｇ － １ 范围内均使其恢复（ Ｐ＜ ００５ ～００１） 。 Ｂｒｕ ０１ ～１００ ｍｇ· Ｌ－ １ 在体外对丝裂原诱导小鼠脾淋巴细胞产生 Ｉ Ｌ２能力无明显影响。结论 镇痛有效剂量的 Ｂｒｕ

HPLC法测定马钱子及其炮制品中士的宁和马钱子碱的含量

目的:用HPLC法对马钱子的江西炮制方法及其改良法炮制品中士的宁和马钱子碱含量进行测定。方法:色谱柱填料为硅胶,流动相为正己烷-二氯甲烷-甲醇-浓氨溶液(47.5:47.5:5:0.35),检测波长为254 nm。结果:江西法炮制品中士的宁和马钱子碱的含量较低。结论:该法精确、简便、重现性好。

高效液相色谱法同时测定制马钱子中士的宁和马钱子碱的含量

建立了用高效液相色谱法同时测定制马钱子中士的宁和马钱子碱的含量。氯仿－浓氨溶液（９０∶１０）作溶剂，超声波振荡提取。硅胶柱，氯仿－甲醇－浓氨溶液（９０∶１０∶０．３）为流动相，紫外２５４ｎｍ波长检测。平均加样回收率（ｎ＝５）士的宁为９８．２％，ＲＳＤ＝１．４％；马钱子碱为９９．３％，ＲＳＤ＝３．３％。日内、日间精密度（ＲＳＤ）士的宁分别为０．６％和１．３％；马钱子碱分别为１．１％和２．４％。

马钱子总生物碱的含量测定

目的建立马钱子总生物碱的含量测定方法并用于提取工艺的评价。方法采用酸性染料比色法测定总生物碱含量:以马钱子碱和士的宁为对照品,溴麝香草酚蓝为酸性染料,在pH7.2缓冲溶液条件下,用氯仿萃取。结果马钱子碱在0.0412～0.206mg/mL范围内,士的宁在0.0428～0.214mg/mL范围内浓度与吸光度值呈良好的线性关系。马钱子碱的平均回收率为(101.8±4.6)%(n=5);士的宁的平均回收率为(103.3±2.7)%(n=5)。结论所建立的总生物碱测定方法简便、准确、稳定,可以满足马钱子总生物碱提取工艺考察的需要。

HPLC测定马钱子配伍生地黄前后马钱子碱和士的宁的含量

目的:研究马钱子配伍生地黄(以下简称马生)不同比例水煎剂中马钱子碱和士的宁的含量变化。方法:采用HPLC分别对马生前后主要生物碱成分马钱子碱和士的宁的含量进行测定。结果:与马钱子单煎剂比较,马生1∶2煎剂中马钱子碱和士的宁分别下降19.49%和0.23%;马生1∶4煎剂中马钱子碱和士的宁分别下降59.93%和31.95%;马生1∶6煎剂中马钱子碱和士的宁分别升高6.25%和43.22%。结论:马生1∶21、∶4煎剂可降低马钱子毒性成分,起到减毒作用。减毒较佳配伍比例为马生1∶4。