Effect of Low Temperature Treatment on Agrobacterium-mediated Transformation of Maize Seed Buds

[Objectives]This study was conducted to improve the genetic transformation rate of maize. [Methods]The seeds of maize ＂ Zheng 58＂ as the experimental material were germinated and treated under freezing temperature of-18 ℃ for 30 and 35 min. The EGFP gene was transformed into the growth points of these seed buds by Agrobacterium tumefaciens EHA105. The transformation effect was determined by fluorescence protein detection on transformed buds. [Results]After a certain period of treatment at-18 ℃ following germination and transformation of maize bud growth points with A. tumefaciens,although the survival rate of maize buds was reduced,the percentage of transformed cells significantly increased. [Conclusions]Low temperature treatment can improve the transformation efficiency of A. tumefaciens to the growth point of maize bud.

鲁丽苹果叶片高效不定芽再生体系的优化

以鲁丽和GL-3等苹果组培苗离体叶片为外植体,研究了极性及伤口处理对叶片高效不定芽再生的影响。结果表明:放置叶片时,远轴面接触培养基时,鲁丽和GL-3叶片不定芽再生率分别为81.14%、93.21%;近轴面接触培养基时,叶片不定芽再生率分别为92.71%和95.73%,且鲁丽叶片平均不定芽数高于GL-3。处理伤口时,鲁丽整叶横切叶片不定芽再生率为91.20%,显著高于0.8 cm×0.5 cm横切处理;GL-3整叶横切叶片不定芽再生率也高于0.8 cm×0.5 cm横切处理,且2个品种叶片横切处理后不定芽玻璃化程度均显著降低。鲁丽不定芽再生,最适叶片放置方式为近轴面接触培养基,适宜伤口处理方式为整叶横切,研究结果为种质资源的挖掘利用和基因功能验证奠定基础。

药剂处理对红松截顶苗木不定芽发生的影响

为探究药剂处理对红松截顶苗木不定芽发生的影响,以5年生红松裸根苗为试验材料,于生长季初期统一截顶后,每15 d采用不同的药剂赤霉素(GA_(3))(200、500、1000 mg/L)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)(100、300、500 mg/L)、KMnO_(4)(0.1%、0.2%、0.3%)对苗木进行喷施处理,以喷施清水处理为对照,调查经不同药剂处理红松截顶苗木的不定芽发生情况。结果表明,药剂处理(除1000 mg/L GA_(3)和0.1%KMnO_(4)外)提高了红松截顶苗木不定芽的发生率,与对照相比,萌芽株率提高了5.72%~48.58%,萌条数提高了15.37%~175.94%。GA_(3)促进红松截顶苗木的适宜质量浓度为200 mg/L,该处理可提高萌芽株率34.28%,萌条数提高了33.63%;6-BA促进红松截顶苗木的适宜质量浓度为500 mg/L,该处理可提高萌芽株率48.58%,萌条数提高了175.94%;KMnO_(4)促进红松截顶苗木的适宜质量浓度为0.2%,该处理可提高萌芽株率42.85%,萌条数提高了95.18%。采用500 mg/L 6-BA对红松截顶苗木进行处理可以获得促进不定芽发生的较好效果。

尾梢去除处理对板栗结果枝基部芽激素含量的影响

分析尾梢去除处理对基部芽激素含量的影响,可为了解隐芽萌发条件提供一定的参考。本研究以燕秋为试验材料,分别在花后第1 d(TA,5月25日)、第21 d(TB,6月14日)和第41 d(TC,7月4日)进行尾梢去除处理,并在每次去除尾梢后第5 d、第10 d、第15 d、第20 d取1次基部芽。采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术测定不同处理的板栗结果枝基部芽中的独脚金内酯(SL)含量、赤霉素(GA)含量、生长素(Auxin)含量、细胞分裂素(CTK)含量、脱落酸(ABA)含量及其比值变化。结果表明,对板栗结果枝去除尾梢后均促进了基部芽平均萌发一年生枝条总数;TA处理提高了基部芽平均萌发一年生结果枝占比(16.67%)、一年生枝平均发育枝枝长及结果枝枝粗;TB处理、TC处理后基部芽只萌发出了发育枝。对照基部芽未萌发,仅顶端芽萌发一年生枝,平均为3.0个,其中结果枝占比为20.00%。尾梢去除后SL含量在TA处理下降幅度较大;GA含量在TB处理下降幅度较大;Auxin含量在TA处理下降,TB处理上升幅度较大;CTK含量波动幅度与对照相似,差异不显著;ABA含量在TC处理上升幅度较大,而在TA处理下降。吲哚-3-乙酸(IAA)含量与ABA含量的比值总体下降,其中TC处理下降幅度较大;IAA含量与GA含量的比值在TC处理上升幅度较大,波动较明显;ABA含量与GA含量的比值在TA处理下降,TC处理上升幅度较大。此外,相关性分析结果显示,对照基部芽赤霉素含量和脱落酸含量呈显著正相关(r=0.646),而处理基部芽29种激素间相关性主要集中在细胞分裂素和生长素之间,其中IA(吲哚-3-丙烯酸)含量与IAA-Ala[N-(3-吲哚乙酰基)-L-丙氨酸]、ICA(吲哚-3-甲酸)、TRA(色胺)、cZROG(顺式-玉米核苷-O-糖苷)、ABA-GE(脱落酸葡萄糖酯)、DHZ7G(双氢玉米素-7-糖苷)、ICAld(吲哚-3-甲醛)、tZOG(反式-玉米素-9-B-葡萄糖苷)的含量呈极显著正相关;IPR(异戊烯腺嘌呤核苷)含量、tZR(玉米素核苷)含量均与TRA含量、ILA(吲哚-3-乳酸)含量、cZROG(顺式-玉米核苷-O-糖苷)含量呈极显著负相关。综合考虑,对板栗进行尾梢去除后会促进基部芽的萌发,同时TA处理会促使基部腋芽萌发结果枝。尾梢去除后整体上降低了GA的含量,低水平的GA含量有助于促进腋芽生长。低水平的ABA含量有助于基部芽萌发结果枝;高水平ABA含量与GA含量的比值会抑制腋芽萌发结果枝。合理区间内的低水平IAA含量,可能会促进板栗基部芽萌发结果枝。

真空处理和花蕾时期对百日草花序浸染法的影响

在百日草(Zinnia elegans)S5头状花序形态和子房细胞学观察的基础上,通过不同配比农杆菌重悬液、真空处理方法和头状花序发育时期对非组培的花序浸染法进行百日草转化技术适用性探索。结果表明,S5花序发育的外部形态和细胞学观察发现小花蕾7及以后发育时期的心皮处于开放状态。农杆菌重悬液为1/2 MS+0.03%Silwet L-77+10%蔗糖+0.01 mg/L 6-BA(OD600 nm=0.4)处理蕾3头状花序得到0.35%的转化率。真空断续处理有利于转化率的提高,较好的处理组合是真空断续2 min+30 s处理蕾5至蕾7头状花序,收获其中的小花蕾7至蕾9的转化率可达3.23%~5.00%。

吡嗪酰胺与水杨酸对香椿芽采后贮藏品质的影响

为了延长香椿芽的储藏期、提高采后香椿的品质,以香椿芽为原材料,借助香椿内源性激素水杨酸以及吡嗪酰胺作为切入点,分别用100μmol/L吡嗪酰胺处理香椿芽样品20 min、50μmol/L水杨酸处理样品10 min以及100μmol/L吡嗪酰胺处理20 min后用50μmol/L水杨酸处理10 min。贮藏期间观察香椿芽在第1、3、5、7天的形貌变化,并测定可溶性固形物含量、失重率、可溶性蛋白含量、花青素含量、总黄酮含量、叶绿素含量、丙二醛及亚硝酸盐含量。结合实验现象及数据表明,水杨酸和吡嗪酰胺都具有一定的保鲜效果,采用100μmol/L吡嗪酰胺和50μmol/L水杨酸复合保鲜剂对香椿芽的保鲜效果最好,能保持较好的形貌特征,同时能有效抑制采后香椿芽贮藏期间丙二醛和亚硝酸盐含量的上升。研究可为香椿的保鲜及香椿产业的发展提供一定参考。

温度和蕾期去雄及去柱头处理对茄子单性结实性的影响

以6个茄子单性结实自交系为试材,研究了自然低温和蕾期去雄及去柱头处理对其单性结实性的影响.试验结果表明,供试材料的单性结实性属于温度敏感型,在低温下表达.诱导单性结实基因表达的温度在7～15℃之间,在此温度范围内,其坐果率为88.9%～100%.蕾期人工去雄和去柱头不影响单性结实果实的正常生长发育,蕾期去柱头可用于茄子单性结实性的快速准确鉴定.

切割子叶对黄瓜子叶离体培养及去顶苗直接成花的影响

黄瓜离体子叶培养时，整片子叶培养形成花芽的百分率明显高于切除部分子叶的花芽形成的百分率。切除黄瓜幼苗１／２子叶明显促进黄瓜幼苗去顶芽后直接形成花芽的百分率。纵向切除１／２子叶不利于直接花芽的形成。

不同遮阴处理对香草兰光合作用及花芽分化的影响

为探讨适宜香草兰生长发育的遮阴度,试验设50%、75%和90%这3种不同遮阴度的遮阴网处理,测定各处理条件下植株叶片的叶绿素相对含量和叶绿素荧光等光合参数,并跟踪统计各处理条件下的花芽分化率。结果表明:较低遮阴度不利于香草兰叶绿素形成;在一定范围内,表观量子效率(AQY)、实际光化学效率(ФPSⅡ)和天线转化效率(Fv′/Fm′)随遮阴度增加而增加;净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、光饱和点(LSP)、暗呼吸速率(Rd)、PSII的潜在活性(Fv/Fo)、最大光化学效率(Fv/Fm)、表观光合电子传递速率(ETR)和光化学淬灭系数(qP)都随遮阴度增加呈先增加后降低的趋势;75%遮阴度下花芽分化率最高,达到54.98%。可见,香草兰适宜在遮阴度为75%的栽培条件下生长,生产中可参考应用。

低温预处理与植物生长调节剂对结缕草愈伤组织诱导的影响

以结缕草Zoysia japanica的茎尖、茎基、根尖为外植体材料,研究了低温预处理、不同激素配比对结缕草诱导愈伤的影响,结果表明:10℃低温预处理3次(即累积30d)为最佳低温预处理时间;经过3次处理后,3种外植体的愈伤诱导率都明显提高,其中茎基最好,愈伤诱导率达94%,较对照提高了38%,芽分化率为74.47%;以此为基础,在配方为MS+2,4-D(2mg/L)+6-BA(0.1mg/L)的培养基上,3种外植体均获得最高的愈伤诱导率,其中茎基最好,为94%;外植体材料中最佳为茎基,出愈容易,且出愈率高。

木薯单芽扦插快繁技术研究

通过对比试验,研究不同茎段部位,不同药剂类型、处理浓度和浸泡时间等25种处理组合对木薯单芽扦插生根的影响。结果表明,0.05 g/L GGR处理1.5 h、0.5 g/L TDZ处理30 min、0.1 g/L ABT处理30 min等3种药剂处理组合,采用茎段中部材料获得了较好的效果。

萌动种子低温处理对萝卜花芽分化及植株生长的影响

以冬性品种‘一点红’和春性品种‘短叶13’为材料,取其萌动种子在5℃和10℃条件下分别处理10～40 d,研究低温对萝卜花芽分化和植株生长的影响.结果表明,低温处理明显促进了萝卜花芽分化和现蕾、抽薹及开花,处理温度越低、时间越长,这种促进作用越明显.‘短叶13’品种在5～10℃下只要处理10 d,就能明显促进花芽分化;‘一点红’则需要在5～10℃下处理20 d以上.另一方面,低温处理也明显抑制了植株的生长,低温处理时间越长,对株高、叶片数和叶片大小的抑制作用越明显.

磁场处理对绿豆芽鲜重和芽长的影响

以绿豆为试验材料,研究不同磁场强度和切割速度对绿豆芽鲜重和芽长的影响。结果表明,磁场处理对绿豆芽的生长有显著促进作用,在磁场强度1.2T、切割速度0.7m/s时促进作用最明显;但这种促进作用并不随磁场强度及切割速度的增加而增加,当磁场强度超过1.2T,切割速度超过0.7m/s时,磁场对绿豆芽的鲜重和芽长的促进作用随磁场强度和切割速度的增加而降低。利用磁场处理可以促进绿豆芽生长,是一项操作简便、促进增产的有效方法,

不同截砧处理对橡胶树籽苗芽接苗生长的影响

为筛选出省时省力的高效打顶促芽方法,提高橡胶树籽苗芽接苗的生产效率,以秋季芽接、次年春季打顶抹芽的籽苗芽接带杆苗为研究对象,比较8种截砧处理方法对其生长的影响。结果表明:在第1对真叶腋芽下方剪断砧木茎杆的截砧方法可减少用工量(7min/100株),工效是常规抹芽(212min/100株)的30多倍;抽芽加快,处理后20d内抽芽结束;提高抽芽率(达96%)和苗木出圃率(为94%),且苗木长势与常规留叶抠芽打顶法的相当。其余处理都不如常规留叶抠芽打顶法。采用该法对批量带杆大苗进行打顶促芽生产性试验效果良好,可在生产上推广应用。

激素配比对草莓叶片不定芽分化的影响

以"晶瑶"草莓叶片为外植体,研究了不同激素配比、AgNO3浓度和暗培养对草莓叶片不定芽分化的影响。结果表明:当培养基为MS+噻二唑苯基脲(TDZ)1.0mg/L+吲哚丁酸(IBA)0.4mg/L+AgNO32.0mg/L时,不定芽再生率高达70.3%,每个外植体平均再生芽数为4.2个;AgNO3可以有效抑制"晶瑶"草莓叶片玻璃化和褐变;暗培养处理促进"晶瑶"草莓叶片的不定芽诱导,最佳暗培养时间为14d。

剥鳞和化学药剂处理对甜樱桃花芽休眠及酚类物质的影响

以7年生甜樱桃‘红灯’和‘早红宝石’为试材，分析了自然休眠期间剥鳞和化学药剂处理对酚类物质含量及对休眠解除的影响。结果发现，休眠花芽中的酚类物质主要分布于鳞片中，剥鳞后，花芽中酚类物质含量锐减。自然休眠的不同时期剥鳞对打破休眠的效果不同，前期效果较为明显，中期处于休眠的最深时期，剥鳞不能打破休眠，后期剥鳞也能打破休眠促进萌发。不同化学药剂在休眠的不同时期对酚类物质含量的影响不同：自然休眠前期，KNO3和硫脲减缓了酚类物质的积累速度，相反H2O2加速了酚类物质的积累；中期上述3种化学药剂对酚类物质含量的影响与早期相似；后期KNO3处理降低了酚类物质含量，硫脲使酚类物质含量略有增加，而H2O2使之显著增加。在打破休眠方面，KNO3可提前2～3d打破休眠，硫脲没有明显效果，H2O2反而抑制休眠的解除。

金银忍冬种子变温催芽处理的研究

[目的]提高金银忍冬种子的发芽率。[方法]设置高温15-25℃、中温5-15℃、低温1-5℃3种温度,对金银忍冬种子采用2段或3段变温处理进行催芽。[结果]金银忍冬种子在两段变温处理中,高温—中温处理的种子最早发芽,发芽势最强,发芽率最高,开始发芽时间是第16天,发芽势25%,发芽率83%;在3段变温处理中,高温—中温—高温处理的种子最早发芽,发芽势最强,发芽率最高,开始发芽时间是第13天,发芽势39%,发芽率86%。变温处理缩短了金银忍冬种子的催芽时间,提高了种子发芽率。[结论]生产中应适当考虑采用高温—中温和高温—中温—高温2种变温处理对金银忍冬种子进行催芽。

B_9对香椿生长发育和芽萌发的影响

以不同浓度 B9溶液喷施香椿苗木 2～ 3次 ,2 5 0 0 mg· L- 1B9作用最显著 ,可使植株低矮粗壮 ,顶梢下第一复叶变长 ,增加叶片叶绿素含量 ,提高光合速率和比叶重。处理后的落叶苗木移入日光温室中 ,可明显减少休眠芽萌发所需的有效积温 ,从而利于提早上市。 B9处理后单株新芽数量。

温度对郁金香休眠鳞茎碳水化合物代谢及芽体发育的影响

以郁金香品种‘Golden Apeldoorn’和‘Red Impression’周径8~10cm的鳞茎为试材,研究了常温（10~18℃）、5℃、0℃和-12℃不同温度处理0、4、8、12、13周对郁金香鳞茎混合样的水分、可溶性糖、淀粉含量的影响,并在实体显微镜下观察相应温度的芽体发育,探讨温度处理对碳水化合物代谢和芽体发育的影响。结果表明：各温度处理鳞茎的总含水量和淀粉含量随处理时间的延长而降低,可溶性糖含量增加,各温度处理下的淀粉和可溶性糖含量变化呈显著或极显著负相关（‘Golden Apeldoorn’-12℃处理除外）;由各温度处理下中心芽高度/鳞茎高度比值可知,2个品种的中心芽均在8~12周生长最快,其中0℃和5℃处理下中心芽发育最快。‘Golden Apeldoorn’0℃处理13周后的出芽率最高,达到92%,‘Red Impression’5℃处理13周后的出芽率最高,达到72%,二者明显高于其它温度处理,分别是2个品种切花促成栽培的最佳鳞茎处理温度。

不同破眠处理对油桃休眠芽H_2O_2含量及相关酶活性的影响

为进一步探讨H2O2代谢与果树芽自然休眠解除的关系,检测了人工破眠过程中‘曙光’油桃芽内H2O2含量和过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性的影响。选用的人工破眠处理分别为50℃高温(HT)处理、单氰胺(HC)处理和TDZ(TDZ)处理。结果表明,50℃高温和单氰胺效果相似,都能显著打破芽深休眠,并且抑制芽内CAT活性,引起H2O2含量增加,但2个处理对POD活性的影响都不大。TDZ打破深休眠的效果较差,对芽内H2O2含量、CAT活性、POD活性均未表现出显著影响。CAT活性抑制和H2O2积累可能是50℃高温和单氰胺打破自然休眠作用机制的重要组成部分。