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杆状病毒Ac78 C末端保守区域的功能初步分析
被引量:
1
1
作者
李赛男
杨凯
+1 位作者
刘文华
赵海洲
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期748-756,共9页
杆状病毒模式种苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)的orf78(即Ac78)是最近被发现的杆状病毒核心基因,在杆状病毒的生活周期中具有重要功能.氨基酸序列分析表明,Ac78的C末...
杆状病毒模式种苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)的orf78(即Ac78)是最近被发现的杆状病毒核心基因,在杆状病毒的生活周期中具有重要功能.氨基酸序列分析表明,Ac78的C末端105~108位氨基酸区域在GroupINPVs旁系同源物中高度保守.为研究该保守区域在Ac78功能中的作用,利用Bac—to-Bac杆状病毒表达载体系统成功构建了缺失该保守区域,并且携带绿色荧光蛋白基因和多角体蛋白基因的Ac78截短补回型重组病毒(vAe78:del105.108).荧光显微镜分析和病毒生长曲线测定结果表明,在vAc78:del105.108转染的Sf9细胞中,感染性的芽生型病毒粒子(buddedvirion,BV)产生量与Ac78全长补回型重组病毒(vAc78:HA)基本一致;电镜观察发现,在vAc78:del105.108转染的细胞中,呈现与vAc78:HA的现象一致的典型的杆状病毒感染特征,多粒包埋型病毒粒子(multiple nucleocapsid—enveloped occlusion-derived virion,M—ODV)以及包埋有M-ODV的包涵体均能正常形成;免疫荧光实验表明,在vAc78:del105.108感染的Sf9细胞中,从病毒感染细胞24h时开始,Ac78专一定位于感染细胞的内核膜附近,与vAc78:HA的现象一致.上述结果表明,Ac78的C末端105-108位氨基酸保守区域对于BV和M—ODV的有效产生以及Ac78的亚细胞定位非必需.
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关键词
苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒
C末端保守区域
芽生型病毒粒子
多粒包埋型病毒粒子
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职称材料
甜菜夜蛾核多角体病毒VP39蛋白在苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒中的功能研究
被引量:
1
2
作者
李赛男
吕怡娜
+3 位作者
姜焕焕
黄麟淇
区炳明
刘文华
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期1440-1449,共10页
【目的】构建表达甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodoptera exigua multiple nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)VP39蛋白的vp39假型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica MNPV,AcMNPV),明确SeMNPV VP39是否能取代AcMNPV VP39在AcMNPV...
【目的】构建表达甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodoptera exigua multiple nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)VP39蛋白的vp39假型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica MNPV,AcMNPV),明确SeMNPV VP39是否能取代AcMNPV VP39在AcMNPV中行使功能,为深入探究杆状病毒的核衣壳装配机理打下理论基础。【方法】利用Bac-to-Bac杆状病毒表达载体系统在AcMNPV vp39缺失型重组bacmid(bAcvp39KO)的基础上构建携带SeMNPV vp39基因、绿色荧光蛋白基因(Enhanced green fluorescence protein,egfp)和多角体蛋白基因(Polyhedrin,polh)的重组病毒(vAcSevp39:FLAG)。利用Western blotting检测分析SeMNPV vp39在vAcSevp39:FLAG转染的草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)IPLB-Sf21-AE clonal isolate 9(Sf9)细胞中的表达情况,通过荧光显微镜观察vAcSevp39:FLAG在Sf9中的感染和扩散情况,采用病毒滴度测定并绘制病毒生长曲线检测vAcSevp39:FLAG的感染性芽生型病毒粒子产量,并以电子显微镜观察vAcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中的形态发生情况。【结果】Western blotting检测结果表明,SeMNPV VP39能在vAcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中获得表达;荧光显微镜观察和病毒生长曲线测定结果表明,在vAcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中无感染性的芽生型病毒粒子产生,与AcMNPV vp39缺失型重组病毒(vAcvp39KO)的现象一致;电子显微镜观察发现,与vAcvp39KO不同的是,在vAcSevp39:FLAG转染的细胞中虽然未产生核衣壳,但在感染细胞的核中存在大量空的透明长管状衣壳结构,表明SeMNPV VP39能挽救vAcvp39KO的衣壳结构装配,但在AcMNPV中不具备装配核衣壳的能力。【结论】SeMNPV VP39在AcMNPV中虽能形成衣壳结构,但不能有效装配核衣壳,导致无芽生型病毒粒子和包埋型病毒粒子产生。
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关键词
苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒
vp39
甜菜夜蛾核多角体病毒
芽生型病毒粒子
核衣壳装配
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职称材料
宿主细胞泛素系统与病毒相互作用的研究
被引量:
2
3
作者
姜少平
李京京
《湖北师范学院学报(自然科学版)》
2007年第3期46-49,共4页
真核细胞中,泛素系统执行对大多数短周期寿命蛋白的选择性降解,且已发现由泛素介导的对蛋白的降解调控在细胞的多种生命过程中起重要作用。病毒侵染宿主细胞后,细胞的泛素系统与一些重要的病毒蛋白相互作用,参与调节病毒的生活周期,如...
真核细胞中,泛素系统执行对大多数短周期寿命蛋白的选择性降解,且已发现由泛素介导的对蛋白的降解调控在细胞的多种生命过程中起重要作用。病毒侵染宿主细胞后,细胞的泛素系统与一些重要的病毒蛋白相互作用,参与调节病毒的生活周期,如病毒迁移,核酸复制,免疫逃避,出芽等过程。
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关键词
泛素系统
蛋白降解
病毒蛋白
出芽
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职称材料
宿主细胞泛素系统与病毒相互作用的研究
4
作者
李京京
余泽华
《华中师范大学研究生学报》
2005年第1期126-130,共5页
真核细胞中,泛素系统执行对大多数短周期寿命蛋白的选择性降解,且已发现由泛素介导的对蛋白的降解调控在细胞的多种生命过程中起重要作用。病毒侵染宿主细胞后,细胞的泛素系统与一些重要的病毒蛋白相互作用,参与调节病毒的生活周期,如...
真核细胞中,泛素系统执行对大多数短周期寿命蛋白的选择性降解,且已发现由泛素介导的对蛋白的降解调控在细胞的多种生命过程中起重要作用。病毒侵染宿主细胞后,细胞的泛素系统与一些重要的病毒蛋白相互作用,参与调节病毒的生活周期,如病毒迁移,核酸复制,免疫逃避,出芽等过程。
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关键词
泛素系统
蛋白降解
病毒蛋白
出芽
原文传递
杆状病毒病毒粒子结构与口服感染和系统感染的关系
被引量:
1
5
作者
侯典海
王曼丽
+2 位作者
邓菲
王华林
胡志红
《生命科学》
CSCD
2015年第3期406-416,共11页
杆状病毒在其生命周期中形成了两种不同的病毒类型:出芽型病毒粒子(budded virus,BV)和包埋型病毒粒子(occlusion derived virus,ODV),其中ODV负责口服感染,而BV负责系统感染。它们又分别应用于不同的生物技术领域,如BV可用于杆状病毒...
杆状病毒在其生命周期中形成了两种不同的病毒类型:出芽型病毒粒子(budded virus,BV)和包埋型病毒粒子(occlusion derived virus,ODV),其中ODV负责口服感染,而BV负责系统感染。它们又分别应用于不同的生物技术领域,如BV可用于杆状病毒表达载体,而富含ODV的多角体主要用于生物防治。近年来蛋白质组学的研究进展对BV和ODV的产生机理有了新的认识,现主要总结这方面的研究结果。
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关键词
杆状病毒
出芽型病毒粒子
包埋型病毒粒子
口服感染
系统感染
原文传递
题名
杆状病毒Ac78 C末端保守区域的功能初步分析
被引量:
1
1
作者
李赛男
杨凯
刘文华
赵海洲
机构
肇庆学院生命科学学院
中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期748-756,共9页
基金
广东省自然科学基金资助项目(No.2014A030313664)~~
文摘
杆状病毒模式种苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)的orf78(即Ac78)是最近被发现的杆状病毒核心基因,在杆状病毒的生活周期中具有重要功能.氨基酸序列分析表明,Ac78的C末端105~108位氨基酸区域在GroupINPVs旁系同源物中高度保守.为研究该保守区域在Ac78功能中的作用,利用Bac—to-Bac杆状病毒表达载体系统成功构建了缺失该保守区域,并且携带绿色荧光蛋白基因和多角体蛋白基因的Ac78截短补回型重组病毒(vAe78:del105.108).荧光显微镜分析和病毒生长曲线测定结果表明,在vAc78:del105.108转染的Sf9细胞中,感染性的芽生型病毒粒子(buddedvirion,BV)产生量与Ac78全长补回型重组病毒(vAc78:HA)基本一致;电镜观察发现,在vAc78:del105.108转染的细胞中,呈现与vAc78:HA的现象一致的典型的杆状病毒感染特征,多粒包埋型病毒粒子(multiple nucleocapsid—enveloped occlusion-derived virion,M—ODV)以及包埋有M-ODV的包涵体均能正常形成;免疫荧光实验表明,在vAc78:del105.108感染的Sf9细胞中,从病毒感染细胞24h时开始,Ac78专一定位于感染细胞的内核膜附近,与vAc78:HA的现象一致.上述结果表明,Ac78的C末端105-108位氨基酸保守区域对于BV和M—ODV的有效产生以及Ac78的亚细胞定位非必需.
关键词
苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒
C末端保守区域
芽生型病毒粒子
多粒包埋型病毒粒子
Keywords
Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV)
conserved C-terminal region
budded
virion
(
bv
)
multiple nucleocapsid-enveloped occlusion-derived
virion
(M-ODV)
分类号
S476.13 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
下载PDF
职称材料
题名
甜菜夜蛾核多角体病毒VP39蛋白在苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒中的功能研究
被引量:
1
2
作者
李赛男
吕怡娜
姜焕焕
黄麟淇
区炳明
刘文华
机构
肇庆学院生命科学学院微生物资源开发与利用实验室
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期1440-1449,共10页
基金
国家自然科学基金项目(31501705)
广东省自然科学基金项目(2014A030313664)
广东高校省级重点平台和重大科研项目(2018KTSCX248)。
文摘
【目的】构建表达甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodoptera exigua multiple nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)VP39蛋白的vp39假型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica MNPV,AcMNPV),明确SeMNPV VP39是否能取代AcMNPV VP39在AcMNPV中行使功能,为深入探究杆状病毒的核衣壳装配机理打下理论基础。【方法】利用Bac-to-Bac杆状病毒表达载体系统在AcMNPV vp39缺失型重组bacmid(bAcvp39KO)的基础上构建携带SeMNPV vp39基因、绿色荧光蛋白基因(Enhanced green fluorescence protein,egfp)和多角体蛋白基因(Polyhedrin,polh)的重组病毒(vAcSevp39:FLAG)。利用Western blotting检测分析SeMNPV vp39在vAcSevp39:FLAG转染的草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)IPLB-Sf21-AE clonal isolate 9(Sf9)细胞中的表达情况,通过荧光显微镜观察vAcSevp39:FLAG在Sf9中的感染和扩散情况,采用病毒滴度测定并绘制病毒生长曲线检测vAcSevp39:FLAG的感染性芽生型病毒粒子产量,并以电子显微镜观察vAcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中的形态发生情况。【结果】Western blotting检测结果表明,SeMNPV VP39能在vAcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中获得表达;荧光显微镜观察和病毒生长曲线测定结果表明,在vAcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中无感染性的芽生型病毒粒子产生,与AcMNPV vp39缺失型重组病毒(vAcvp39KO)的现象一致;电子显微镜观察发现,与vAcvp39KO不同的是,在vAcSevp39:FLAG转染的细胞中虽然未产生核衣壳,但在感染细胞的核中存在大量空的透明长管状衣壳结构,表明SeMNPV VP39能挽救vAcvp39KO的衣壳结构装配,但在AcMNPV中不具备装配核衣壳的能力。【结论】SeMNPV VP39在AcMNPV中虽能形成衣壳结构,但不能有效装配核衣壳,导致无芽生型病毒粒子和包埋型病毒粒子产生。
关键词
苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒
vp39
甜菜夜蛾核多角体病毒
芽生型病毒粒子
核衣壳装配
Keywords
Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus(AcMNPV)
vp39
Spodoptera exigua MNPV(SeMNPV)
budded
virion
(
bv
)
nucleocapsid assembly
分类号
S476.13 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
下载PDF
职称材料
题名
宿主细胞泛素系统与病毒相互作用的研究
被引量:
2
3
作者
姜少平
李京京
机构
湖北师范学院生物系
出处
《湖北师范学院学报(自然科学版)》
2007年第3期46-49,共4页
文摘
真核细胞中,泛素系统执行对大多数短周期寿命蛋白的选择性降解,且已发现由泛素介导的对蛋白的降解调控在细胞的多种生命过程中起重要作用。病毒侵染宿主细胞后,细胞的泛素系统与一些重要的病毒蛋白相互作用,参与调节病毒的生活周期,如病毒迁移,核酸复制,免疫逃避,出芽等过程。
关键词
泛素系统
蛋白降解
病毒蛋白
出芽
Keywords
ubiquitin proteasome pathway(UPP)
degradation
virion
protein
budding
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
宿主细胞泛素系统与病毒相互作用的研究
4
作者
李京京
余泽华
机构
华中师范大学生命科学学院
出处
《华中师范大学研究生学报》
2005年第1期126-130,共5页
文摘
真核细胞中,泛素系统执行对大多数短周期寿命蛋白的选择性降解,且已发现由泛素介导的对蛋白的降解调控在细胞的多种生命过程中起重要作用。病毒侵染宿主细胞后,细胞的泛素系统与一些重要的病毒蛋白相互作用,参与调节病毒的生活周期,如病毒迁移,核酸复制,免疫逃避,出芽等过程。
关键词
泛素系统
蛋白降解
病毒蛋白
出芽
Keywords
Ubiquitin proteasome pathway (UPP)
degradation
virion
protein
budding
分类号
Q939.4 [生物学—微生物学]
原文传递
题名
杆状病毒病毒粒子结构与口服感染和系统感染的关系
被引量:
1
5
作者
侯典海
王曼丽
邓菲
王华林
胡志红
机构
中国科学院武汉病毒研究所
出处
《生命科学》
CSCD
2015年第3期406-416,共11页
基金
国家自然科学基金项目(30630002
31321001
+2 种基金
31400142)
中国科学院战略性先导科技专项(B类)(XDB11030400)
国家重点基础研究发展计划("973"项目)(30060002)
文摘
杆状病毒在其生命周期中形成了两种不同的病毒类型:出芽型病毒粒子(budded virus,BV)和包埋型病毒粒子(occlusion derived virus,ODV),其中ODV负责口服感染,而BV负责系统感染。它们又分别应用于不同的生物技术领域,如BV可用于杆状病毒表达载体,而富含ODV的多角体主要用于生物防治。近年来蛋白质组学的研究进展对BV和ODV的产生机理有了新的认识,现主要总结这方面的研究结果。
关键词
杆状病毒
出芽型病毒粒子
包埋型病毒粒子
口服感染
系统感染
Keywords
baculovirus
budded
virus(
bv
)
occlusion derived virus(ODV)
oral infection
systematic infection
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
杆状病毒Ac78 C末端保守区域的功能初步分析
李赛男
杨凯
刘文华
赵海洲
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
下载PDF
职称材料
2
甜菜夜蛾核多角体病毒VP39蛋白在苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒中的功能研究
李赛男
吕怡娜
姜焕焕
黄麟淇
区炳明
刘文华
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
下载PDF
职称材料
3
宿主细胞泛素系统与病毒相互作用的研究
姜少平
李京京
《湖北师范学院学报(自然科学版)》
2007
2
下载PDF
职称材料
4
宿主细胞泛素系统与病毒相互作用的研究
李京京
余泽华
《华中师范大学研究生学报》
2005
0
原文传递
5
杆状病毒病毒粒子结构与口服感染和系统感染的关系
侯典海
王曼丽
邓菲
王华林
胡志红
《生命科学》
CSCD
2015
1
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