水牛初乳中免疫因子和生长因子质量浓度的研究

研究水牛初乳中免疫球蛋白IgG，IgA和类胰岛素样生长因子（IGF—I）质量浓度的变化特点。用ELISA方法检测水牛分娩后7d内初乳样品的IgG，IgA和IGF—I质量浓度，同时检测3种成分在水牛常乳中的质量浓度。结果表明：分娩后3h的水牛初乳IgG，IgA和IGF—I质量浓度最高，分别为78．22g／L，8．83g／L和1099．78μg/L，常乳中的质量浓度分别为1．87g／L，0．71g／L＆358．30μg/L。IgG在泌乳的第1天内下降91．18％，IGF—I下降57．02％，IgA在头2d内下降85．84％，之后缓慢下降接近常乳。因此，水牛泌乳最初的1～2d内初乳含有丰富的IgG,IgA和IGF-I．具有很高的开发利用价值.

水牛初乳和常乳主要组分的动态变化

试验旨在研究水牛初乳和常乳主要组分的动态变化规律。采用乳品分析仪对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中乳脂、乳糖、乳蛋白、总固形物(TS)和非脂固形物(SNF)等含量进行测定,用SDS-PAGE对乳蛋白各组分进行分离,并利用凝胶成像系统进行扫描定量。结果表明,初乳中乳糖含量随泌乳天数的增加逐渐升高;乳蛋白、总固形物(TS)和非脂固形物(SNF)含量呈下降趋势;初乳中乳脂含量变化不规则,出现小幅波动;蛋白质各组分中乳铁蛋白(LF)、血清白蛋白(SA)、免疫球蛋白(Igs)含量第1天最高,以后开始下降;酪蛋白(CN)在乳蛋白百分比含量中占优势,随着泌乳天数的增加逐渐升高;β-乳球蛋白(β-LG)第1天含量低,第5和7天达到最高值;α-乳白蛋白(α-LA)第1天最低,第2天急剧上升,以后变化平稳。常乳中大部分组分含量比较稳定,有时有波动,但各天数之间差异不显著。研究结果显示,水牛乳中大部分组分的含量在初乳中变化较大,初乳的营养价值高于常乳。

水牛初乳和常乳中锌、铁、铜含量的动态变化

采用火焰原子吸收分光光度法对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中Zn、Fe、Cu等三种微量元素含量进行测定。结果表明,在第1、2d的初乳中Zn含量显著高于其余几天的初乳和常乳(P<0.05),第3d开始Zn含量接近常乳,在3d至90d之间稍有波动,但差异不显著(P>0.05)。Fe和Cu含量随泌乳进行逐渐降低,其在初乳中的含量均高于常乳,常乳之间差异不显著(P>0.05)。其中第1d初乳中Fe含量显著高于第7d(P<0.05),而与其余几天初乳相比差异不显著(P>0.05),第1、2d初乳中Fe含量均显著或极显著高于常乳(P<0.05);第1d初乳中Cu含量显著高于第3、5d的初乳(P<0.05),与第2、7d相比差异不显著(P>0.05),第1、2d初乳中Cu含量极显著高于常乳(P<0.01)。研究显示水牛初乳中Zn、Fe、Cu等三种微量元素的含量大都高于常乳,反映了乳腺在初乳期矿物质的分泌特点。

双抗体夹心酶联免疫法测定水牛初乳中的IgG

为快速、准确地测定水牛初乳中IgG活性质量浓度,建立了双抗体夹心酶联免疫分析法(ELISA)。结果表明,IgG活性质量浓度的对数值与吸光值存在很好的线性关系,其标准曲线方程式为γ=-0.2907x2+2.0819x+0.8689,相关系数R2=0.9937,线性范围在7.8～1000ng/mL,平均回收率在84.40%～96.71%之间,灵敏度高、重现性好,可用于水牛初乳及其制品中IgG活性质量浓度的检测。

水牛初乳粉对免疫低下小鼠免疫功能的影响

用不同浓度的水牛初乳粉溶液灌胃免疫低下的小鼠,20 d后测定免疫指标。发现水牛初乳对免疫低下小鼠脾脏和胸腺具有保护作用,可以明显提高T淋巴细胞和白细胞数,提高血液中免疫球蛋白数量。结果表明,水牛初乳能提高机体的免疫能力,且对环磷酰胺所造成的免疫低下具有缓解作用。

水牛初乳和常乳中五种酶活性的动态变化

对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中AMS、γ-GT、NAGase、ALP以及LP的活性进行测定。结果表明,初乳中5种酶的活性大多显著或极显著高于常乳(P<0.05或P<0.01),而常乳之间差异均不显著(P>0.05)。初乳中AMS活性第1、2、3天差异不显著(P>0.05),第1、2天极显著高于第5、7天(P<0.01)。γ-GT活性第1天显著高于第7天(P<0.05),但与第2、3、5天相比差异不显著(P>0.05)。NAGase活性第1、2天极显著高于第3、5、7天(P<0.01)。ALP活性第1、2、3、5天之间差异不显著(P>0.05),但第1天极显著高于第7天(P<0.01)。LP活性第1、2天之间差异显著(P<0.05),且均极显著高于第3、5、7天(P<0.01)。

基于16S rDNA高通量测序分析水牛初乳与常乳中细菌多样性

目的:利用16S rDNA高通量测序研究广西水牛研究所种畜厂三品杂水牛初乳与常乳的细菌多样性。方法:提取当天采集的生水牛乳样本的细菌总DNA,PCR扩增其16S rDNA,利用纯化后的扩增片段构建其菌群的16S rDNA文库,采用Miseq PE300平台进行高通量测序以及BLAST比对。结果:初乳组样本共得到19个门,292个属和437个种。而常乳两组样本共得到7个门,203个细菌属和330个细菌种,初乳组的细菌多样性高于常乳组。初乳组中的优势菌属为金黄杆菌属(Chryseobacterium)、不动杆菌属(Acinetobacter)、假单胞菌属(Pseusomonas),而常乳组中的优势菌则为金黄杆菌属(Chryseobacterium)、乳球菌属(Lactococcus)、肠球菌属(Enterococcus)。样本层级聚类显示:初乳组与常乳组组间群落差异不显著。PCA与PLS-DA分析表明:两组样本组间菌群结构差异显著。结论:三品杂水牛初乳与常乳均呈现较丰富的多样性,常乳组中细菌多样性显著高于初乳组。

水牛初乳粉减轻糖尿病大鼠氧化应激的作用

目的:观察水牛初乳粉对Ⅰ型糖尿病大鼠血清抗氧化水平及脏器指数的影响。方法:采用腹腔注射65mg/kgbw链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型,大鼠随机分为正常组、糖尿病模型组、药物组和水牛初乳组,正常组和糖尿病模型组灌胃灭菌水,药物组和水牛初乳组分别灌胃盐酸二甲双胍和水牛初乳粉溶液,定期检测血糖,第31天采血,用比浊法检测血清抗氧化指标,并称取各脏器质量,计算脏器指数。结果:水牛初乳能够降低糖尿病初期大鼠的血糖(P<0.01和P<0.05),显著提高大鼠血清SOD活力(P<0.01),显著降低血清NO含量(P<0.05),使胰脏和肺脏指数显著减小(P<0.01和P<0.05)。结论:水牛初乳粉能够控制Ⅰ型糖尿病初期大鼠的血糖值,增强机体的抗氧化能力,减轻氧化应激程度,并保护胰腺和肺脏。

奶牛与水牛初乳中乳寡糖组分比较研究

乳寡糖是由乳汁中含量丰富的固体物质组成.研究结果表明,乳寡糖有提高免疫、益生元及抗感染等作用,已发现与婴儿肠道发育、神经智力发育等多方面关系密切.水牛奶是除牛奶外的第二大奶源,国际上公认其为营养含量高、口感好的优质乳制品,但目前针对水牛乳寡糖的研究多以美洲水牛为研究对象,尚无中国水牛的相关研究.本研究利用固相萃取对已脱脂和除去蛋白质的广西水牛初乳乳汁样品进行纯化,并采用苯胺(aniline,Bn)衍生化试剂对其进行衍生化处理,通过UPLC-ESI-Q-TOF-MS液相质谱进行优化后,对水牛初乳中的寡糖组分进行测定并与牛乳进行了对比,最终测得奶牛初乳中19种及水牛初乳中的9种乳寡糖组分,并对二者的种类及含量进行比较,发现在两种初乳的乳寡糖中,中性糖二糖m/z385.15和中性糖三糖m/z 547.21以及酸性糖m/z 635.23均为其主要寡糖成分,与其他乳寡糖相比含量相对较高.总体而言水牛初乳中的中性寡糖占比比奶牛初乳高,二者中性糖占乳寡糖总量的比例分别为88.88%和63.16%.

水牛初乳粉对新生仔猪肠道黏膜和肝脏IGF-I及IGF-IR基因表达的影响

水牛初乳富含免疫球蛋白和生长因子等活性物质,对新生哺乳动物具有良好的营养作用。选用新生仔猪为试验对象,分别饲喂水牛初乳粉(SCR组)、水牛常乳粉(SC组)、葡萄糖盐水(PY组),并以0日龄新生仔猪作为对照(XD组)。研究水牛初乳粉对新生仔猪肠道粘膜及肝脏IGF-I、IGF-IR表达量的影响。结果表明,水牛初乳粉使新生仔猪在最初发育的3d内,肠道粘膜和肝脏中IGF-I基因表达量大幅度增加,IGF-I mRNA/β-actin比值高于XD组且P<0.01;通过IGF-IR基因表达的研究发现,水牛初乳粉能增加肠粘膜中IGF-IR的表达量,但增幅小于IGF-I表达量;在肝脏中,水牛初乳粉使IGF-IR基因表达量略有降低,但与其它两个试验组相比,降低值最小,PY组次之,SC组降低值最大。水牛初乳能显著促进新生仔猪肠道和肝脏IGF-I基因表达,而对IGF-IR基因表达的影响表现为肠粘膜中表达量增加,脏脏中表达量降低。

德宏奶水牛初乳和常乳中五种常量元素含量的动态变化

为了积累德宏奶水牛初乳和常乳中五种常量元素的基础数据,本试验对德宏水牛第1、2、3、5、7天的初乳及第15、30、60、90天的常乳进行测定。结果显示,初乳中钠、镁和磷的含量随泌乳天数的增加呈下降趋势,初乳略高于常乳,常乳中含量在一定范围内变化,差异不显著。钾在初乳中含量略微上升,初乳略高于常乳,常乳中钾含量变化差异不显著。钙含量在初乳中呈上升趋势,初乳中钙含量低于常乳,常乳中钙含量变化差异不显著。

基于蛋白组学技术分析水牛初乳及常乳乳清蛋白中免疫性差异蛋白质组

利用串联质谱标签(Tandem Mass Tag,TMT)标记定量蛋白质组学技术对水牛初乳和常乳乳清蛋白进行蛋白质组分析,筛选得到具有相关免疫功能的差异蛋白质49种。对这些免疫性差异蛋白进行生物信息学分析发现,其主要参与的生物过程为免疫系统过程、防御反应、应激反应;主要参与的细胞组分为胞外区域、血液微粒;主要参与的分子功能为结合受体;主要参与的代谢通路为补体和凝血级联、产生IgA的肠道免疫、造血细胞系和NF kB信号通路等免疫和炎症相关通路。通过蛋白质互作网络分析,找到一些具有高连接度的免疫蛋白因子。本研究为开发增强免疫活性的高端水牛乳制品提供了一定参考。