龙柴降血方对原发性血小板增多症患者凝血功能及血小板活化蛋白的影响

目的观察龙柴降血方对原发性血小板增多症(ET)患者凝血功能及血小板活化蛋白的影响。方法选取2020年1月—2021年10月中国中医科学院西苑医院收治的ET患者22例,给予龙柴降血方治疗4个月,观察治疗前后血栓弹力图指标[凝血时间(R)、凝血速率(K)、纤维蛋白功能(Angle)、血栓最大振幅(MA)、血栓最大振幅时间(TMA)、即时振幅(A)、30 min振幅(A30)、从血样开始检测到曲线分叉所需时间(SP)、血凝块溶解时间(CLT)]、高凝状态发生率和积分变化。选取其中15例ET患者,采用平行反应监测(PRM)技术检测患者治疗前后血小板活化蛋白[血小板膜糖蛋白Ibα(GPIbα)、糖蛋白VI(GPVI)、选择素-P(SELP)]表达水平,分析比较血小板聚集改善患者和血小板聚集增强患者上述各蛋白表达水平的差异;取5例健康者和10例ET患者治疗前后血清,采用Western blot法检测血清GPIbα表达情况;分析15例ET患者MA与血清GPIbα表达水平的相关性。结果与治疗前比较,龙柴降血方治疗后MA、CLT、高凝状态发生率、高凝状态积分和血清GPIbα、GPVI表达水平均明显降低(P均<0.05),血清SELP表达水平无明显变化(P>0.05)。治疗后血小板聚集改善患者血清GPIbα表达水平明显低于血小板聚集增强患者(P<0.05),GPVI表达水平无明显变化(P>0.05)。与健康人相比,10例ET患者治疗前血清GPIbα相对表达量明显增高(P<0.05);10例ET患者治疗后血清GPIbα相对表达量较治疗前明显降低(P<0.05)。龙柴降血方治疗后MA下降与GPIbα表达下调呈正相关(r=0.6986,P<0.05)。结论龙柴降血方能够抑制ET患者血小板聚集,改善高凝状态,其机制可能与抑制GPIbα蛋白介导的血小板活化信号通路有关。

Effect of the Principle of Activating Blood Circulation to Break Stasis on GMP-140 and D_2 Dimer in Patients with Acute Cerebral Infarction

Objective: To explore the clinical efficacy of the principle of activating blood circulation to break stasis (ABCBS) and its influence on platelet membranous protein particle (GMP-140) and D 2 dimer (D-dimer) before and after treatment. Methods: Eighty-eight patients with blood stasis syndrome (BSS) of acute cerebral infarction (ACI) were randomly divided into two groups, both of which were treated with conventional treatment, i.e. with western medicine (WM), with Salvia injection added through intravenously dripping.One of the two groups was used as the control and the other group as the treated group who had ABCBS herbs orally taken in addition. The duration of treatment course for both groups was 3 weeks. Results: There were changes in both groups over clinical symptoms, nerve function deficit scoring and GMP-140, D-dimer, but the treated group showed significantly better than that of the control group, ( P <0.05). Conclusion: ABCBS principle could serve as an important auxiliary treating method for BSS of ACI, as it can effectively alter the blood of ACI patients which was viscous, condense, coagulant and aggregating.

丹参饮对高脂血症模型大鼠血小板生理特性和功能的影响机制

目的基于血小板膜糖蛋白4(CD36)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路探讨丹参饮对高脂血症模型大鼠血小板生理特性和功能的影响机制。方法通过喂养高脂饮食复制高脂血症模型大鼠,将其随机分为模型组、辛伐他汀组(0.004 g/kg)和丹参饮高、低剂量组(3.6、0.9 g/kg),另设空白组(喂养基础饲料),每组10只。各给药组大鼠每天灌胃相应药物,其余组灌胃等体积生理盐水,连续4周。末次给药后,检测大鼠血脂生化指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]含量,全血黏度、血浆黏度和血浆中纤维蛋白原(FIB)含量,血小板相关参数[血小板计数(PLT)、血小板分布宽度(PDW)和血小板平均体积(MPV)],血小板生理特性和功能相关因子[血管性血友病因子(vWF)、纤维连接蛋白(Fn)、磷脂酶A2(PLA2)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、血栓素A2(TXA2)、前列腺素(PGI2)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、β-血小板球蛋白(β-TG)]水平,血小板聚集率(最大聚集率、60 s聚集率、180 s聚集率)和纤溶系统相关因子[组织型纤溶酶原活化剂(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)]水平,血小板中CD36/PI3K/Akt信号通路相关蛋白[CD36、黏着斑激酶(FAK)、磷脂酰肌醇4-磷酸5-激酶(PIP5K)、PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)、p-Akt1/2/3]表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠血浆中TC、TG、LDL-C含量,全血黏度、血浆黏度、血浆中FIB含量,血浆中PLT、MPV、vWF、Fn、PLA2、TXB2、TXA2、cGMP、β-TG水平,血小板最大聚集率、60 s聚集率,血浆中PAI-1水平,CD36、FAK、PIP5K、PI3K、p-Akt、p-Akt1/2/3蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);HDL-C含量和6-keto-PGF1α、PGI2、t-PA水平均显著降低(P<0.05)。经丹参饮干预后,上述大部分指标均显著逆转(P<0.05)。结论丹参饮可改善高脂血症模型大鼠血小板生理特性和功能,其作用机制可能与下调CD36/PI3K/Akt信号通路活性、降低血小板活化程度有关。

温性活血化瘀中药及其活性成分抗血小板聚集的作用机制

在临床上血瘀与心血管疾病存在高度相关性,活血化瘀中药具有活血通经、散瘀行脉的功效,在防治血瘀和血栓方面发挥着重要作用。血瘀的致病机制较为复杂,与凝血系统的功能和血液流变学异常等有关,其中血小板聚集是最主要的致病因素之一,故抗血小板聚集是防治血瘀的主要途径之一。活血化瘀中药抗血小板聚集的主要作用机制包括抑制花生四烯酸代谢途径,保持血栓素A2(TXA2)和前列环素(PGI2)在机体内的动态平衡;抑制血小板内的亚细胞器释放血管性血友病因子(vWF)、血小板因子、P-选择素和纤维蛋白原等内容物;抑制血小板膜蛋白上的受体与相应化合物结合;影响核苷酸系统,提高血小板内cAMP和cGMP的水平或者抑制其水解等。通过参阅文献并分析,发现在具抗血小板聚集功效的37味活血化瘀中药中,温性中药所占比重最大。针对温性活血化瘀中药抗血小板聚集机制的研究主要集中于花生四烯酸代谢途径和抑制血小板内容物释放,其中三七、月季花、阿魏、鸡血藤、川芎等具有多靶点的特点。有部分研究者对活血化瘀中药的活性成分进行了修饰,得到了一系列活性更高的衍生物,如阿魏、川芎等。温性活血化瘀类中药具有副作用小、药性温和、作用靶点多等特点,且效果较佳。本文对其进行综述,以期为后续的临床应用和深入研究提供参考。

平均血小板体积/血小板计数、血小板α颗粒膜糖蛋白对经皮冠状动脉介入治疗即刻血流分级及预后的预测价值

目的 探讨平均血小板体积(MPV)/血小板计数(PC)、血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62P)预测经皮冠状动脉介入治疗(PCI)即刻血流分级及预后的价值。方法 选取2018年5月至2020年2月河南省直属机关第一门诊部收治的41例PCI即刻心肌梗死溶栓治疗临床试验(TIMI)血流分级0~Ⅱ级病人(观察组)及41例PCI即刻TIMI血流分级Ⅲ级病人(对照组),比较两组及是否发生主要心血管不良事件(MACE)病人的MPV/PC、CD62P指标水平。以logistic回归方程进行多因素分析,采用受试者操作特征曲线(ROC)分析各指标对预测评估PCI即刻血流分级、预后的效能。结果 观察组MPV/PC 0.05±0.02、CD62P(52.26±14.47)%高于对照组的0.04±0.01、(38.87±12.76)%(P<0.05)。MPV/PC、CD62P仍是PCI即刻血流分级的独立相关危险因素(P<0.05);预测PCI即刻血流分级的ROC曲线下面积(AUC):MPV/PC为0.78,CD62P为0.81,MPV/PC+CD62P为0.86(P<0.05);MACE病人MPV/PC 0.06±0.02、CD62P(60.19±15.02)%高于无MACE者的0.05±0.01、(41.75±11.27)%(P<0.05);预测MACE的AUC:MPV/PC为0.76,CD62P为0.80,MPV/PC+CD62P为0.84(P<0.05)。结论 MPV/PC、CD62P均与PCI即刻TIMI血流分级有关,并能相互影响,两者联合具有较高的血流分级、MACE预测价值,有望成为预测PCI病人即刻血流分级和MACE的新方案。

脑梗塞患者血小板膜糖蛋白CD_(41)、CD_(62P)、CD_(63)的监测

用流式细胞术，以单克隆抗体为分子探针，测定了不同病程脑梗塞患者周围血中血小板膜糖蛋白（ＧＭＰ）ＣＤ４１、ＣＤ６２Ｐ和ＣＤ６３的阳性表达率，并与健康人作对照。结果显示病人组３种ＧＭＰ的表达率均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１～０．００１）；腔隙梗塞与大面积梗塞两亚组之间３种ＧＭＰ表达率无显著差异；脑梗塞亚急性期和恢复期检测者，其血小板活化程度较急性期检测者为低（ＣＤ４１、ＣＤ６２ＰＰ＜０．０５，ＣＤ６３Ｐ＜０．０１），但与对照组比仍然保持在一个相当高的活化水平上（Ｐ＜０．０５～０．０１）。

血府逐瘀口服液对冠心病血瘀证患者血液流变学的影响及其与人类血小板抗原3基因多态性的相关性

目的:观察血府逐瘀口服液对冠心病血瘀证患者血液流变学的影响,分析其与血小板膜糖蛋白Ⅱb(glycoproteinⅡb,GPⅡb)人类血小板抗原3(human platelet antigen-3,HPA-3)基因多态性的相关性。方法:筛选符合入选标准的32例冠心病血瘀证患者,进行血瘀证计分并检测血液流变学,采用TaqMan探针技术检测GPⅡb HPA-3基因多态性,血府逐瘀口服液治疗4周后复查血液流变学并进行血瘀证计分。结果:血府逐瘀口服液治疗后冠心病血瘀证患者血液流变学得到改善,含有至少一个突变型基因C的患者治疗前后血液黏度、红细胞变形指数及血瘀证计分与AA型患者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血府逐瘀口服液能减轻冠心病血瘀证患者的血瘀症状,改善冠心病血瘀证患者的血液流变性,这种改善作用与GPⅡb HPA-3基因多态表型有相关性。

血小板活化与冠状动脉粥样硬化性心脏病和血瘀证的关系

血小板膜糖蛋白在血小板黏附、聚集和释放反应中起关键作用,是血小板活化的特异性分子标志物。研究证实血小板膜糖蛋白,特别是CD62P、CD63和PAC-1的活性检测可较为灵敏且特异地反映冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的发生发展过程,且随着病情程度的加重上述糖蛋白的表达也相应增强。血瘀证是临床最常见证候之一,研究证实多种疾病的血瘀证患者存在血小板活化现象,而不同病种之间的血小板活化表达量则无明显差异。活化血小板膜糖蛋白测定不仅可以对冠心病,特别是急性心肌梗死的早期诊断、病程进展判断等起辅助作用,还可作为血瘀证的微观辨证指标之一。

CD62p、CD41/CD61、血管性假血友病因子在急性肺血栓栓塞症中的应用价值

目的探讨急性肺血栓栓塞症(PTE)患者溶栓治疗前后血小板活化及内皮功能的变化及临床意义。方法采用全血流式细胞术测定36例急性PTE患者和20例健康对照者血小板膜糖蛋白CD62p、CD41/CD61,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血浆血管性假血友病因子(vWF),并比较PTE患者溶栓治疗前后各项指标的变化。结果PTE患者CD62p、CD41/CD61、vWF分别为(12.07±6.54)%、(18.3±12.2)%、(194.1±22.3)%,显著高于对照组(P<0.01);治疗1周后各项指标较前明显下降,分别为(4.48±3.30)%、(6.6±4.0)%(、116.3±28.0)%(均P<0.01)。结论急性PTE患者存在血小板活性增强和内皮功能异常,这些变化与PTE的病理过程有关。

海带多糖对血管损伤大鼠血小板活性的影响

目的观察海带多糖L01对血管内皮损伤老龄动物血小板活性的影响,探讨其抗血栓的作用机制。方法将老龄大鼠分为4组,分别为正常组、模型组和海带多糖L01高、低剂量组。采用注射肾上腺素法制备血管内皮损伤大鼠模型,比较过滤前后血小板计数测定大鼠血小板粘附性,火棉胶玻片法观察血小板粘附聚集活性,酶联免疫吸附双抗体夹心(EUSA)法测定血浆血管性假血友病因子(vonWillebrandFactor,vWF)和血小板α。颗粒膜糖蛋白140(GMP-140)水平。结果与模型组比较,海带多糖L01高剂量组(100mg/kg)和低剂量组(10mg/kg)均能降低血管内皮损伤老龄大鼠血小板粘附率和表面粘附聚集活性,降低血浆vWF和GMP-140水平。结论海带多糖抗血栓作用与其降低血浆vWF和GMP-140水平、抑制血小板粘附聚集有关。

益气活血片对脑梗塞大鼠血小板膜粘附分子表达的影响

[目的]研究益气活血片(主要由当归、益母草、川芎、黄芪等中药组成)对脑梗塞大鼠模型全血血小板膜粘附分子表达的影响。[方法]应用流式细胞仪检测脑梗塞大鼠模型全血血小板膜CD41(糖蛋白Ⅱb—Ⅲa受体的亚基)和CD62P(P—选择素)的表达,并与正常组相对照。[结果]脑梗塞大鼠模型血小板膜粘附分子的表达较正常组为高(P<0.01).而益气活血片能明显降低其表达(P<0.01)。[结论]血小板膜粘附分子表达增高是脑梗塞的重要病理特征之一,益气活血片可能通过降低血小板膜粘附分子的表达,从而抑制血小板活化。

冠心病患者血小板膜糖蛋白CD63,CD62p和TSD的表达

目的研究冠心病患者血小板膜糖蛋白的表达。方法采用流式细胞术(FCM) ,对113例冠心病患者及37例健康人血小板膜糖蛋白(MGP)CD63 ,CD62P和凝血酶敏感蛋白(TSD)进行了检测。结果患者组CD63,CD62P和TDS3种MGP的阳性表达率分别为 :(5.3±4.0) % ,(5.8±3.3)%和(4.7±3.7)% ,均显著高于正常对照组 ,分别为 :(1.0±0.6) % ,(1.4±0.5)%和(1.6±0.6)%(P<0.01)。结论用FCM检测活化血小板 ,结果准确 ,特异性和灵敏度高 ,可反映单个或亚群血小板质膜上活化抗原的变化 ,对血栓性疾病的诊断及治疗具有重要的意义。

急性心肌梗死和稳定型心绞痛血小板GPⅡb、GPⅢa动态变化的比较研究

目的：观察急性心肌梗死（ＡＭＩ）和稳定型心绞痛（ＳＡＰ）血液中血小板表面糖蛋白ＧＰⅡｂ和ＧＰⅢａ的动态变化，探讨急性心肌缺血前、后血小板的活性。方法：６１例住院的心病患者，其中ＡＭＩ３２例，ＳＡＰ２９例，采用竞争性酶联免疫方法比较ＡＭＩ及ＳＡＰ患者发病后２４ｈ，第２天、第３天、１财２周时血中血汀反ＧＰⅡｂ和ＧＰⅢａ的含量动态变化，并进行统计学分析。

急性脑梗死患者活化血小板的检测及临床价值

目的通过检测急性脑梗死患者血小板膜糖蛋白(CD62p)及血小板激活复合物(PAC-1),探讨脑梗死患者血小板活化的临床意义。方法采用流式细胞仪测定45例急性脑梗死患者在发病48 h、6～8 d、3周时及35名正常对照者的血浆CD62p及PAC-1阳性百分率。结果脑梗死患者48 h内血浆CD62p(25.1%±7.4%)和PAC-1(65.2%±9.9%)阳性率明显高于正常对照组(4.0%±1.3%;8.2%±2.2%)(P<0.01)。此后至3周逐渐下降,但仍高于正常对照组(P<0.01)。结论急性脑梗死患者血小板处于高度活化状态,监测血小板活化程度对病情轻重的预测及指导临床用药有重要价值。

汉族人血小板膜糖蛋白Ⅲa PLA基因多态性与冠心病血瘀证的相关性

目的:观察血小板膜糖蛋白Ⅲa(glycoproteinⅢa,GPⅢa)PLA1/PLA2基因多态性和北京、河北地区汉族人中各基因型的分布频率,分析该基因多态性与冠心病、冠心病血瘀证易感性的相关性。方法:采用病例对照设计,筛选符合入选标准的110例冠心病血瘀证患者和102例冠心病非血瘀证患者为研究对象,另收集39例健康志愿者作为对照人群。所有入选病例均进行中医辨证分型,提取全血DNA,采用TaqMan探针技术检测PLA1/PLA2基因多态性。结果:TaqMan探针检测图谱表明,健康对照组、冠心病血瘀证组和冠心病非血瘀证组rs5918多态位点分型皆为纯合子TT型,即PLA1/PLA2型,而PLA1/PLA1(TC)型和PLA2/PLA2(CC)型缺如,未再进一步作统计学分析。结论:GPⅢaPLA1/PLA2多态位点不是汉族人冠心病和冠心病血瘀证的危险因素,相关的易感基因可能存在于其他多态位点中。

血小板活化因子拮抗剂WEB2170对烫伤大鼠肠粘膜微循环的影响

目的：进一步探讨血小板活化因子（ＰＡＦ）在烧伤后肠粘膜屏障损害中的作用机制。方法：在大鼠３０％Ⅲ度烫伤模型上，观察ＰＡＦ拮抗剂ＷＥＢ２１７０对烧伤后肠粘膜血流量、肠粘膜内ｐＨ（ｐＨｉ）和肠组织含水量的影响。结果：烫伤后肠粘膜血流量和ｐＨｉ较对照组显著降低，而肠组织含水量显著增多。应用ＰＡＦ拮抗剂ＷＥＢ２１７０治疗能有效改善烫伤后肠粘膜血流量，提高肠粘膜ｐＨｉ，并有效降低肠组织含水量，从而明显减轻肠粘膜病理损害。结论：ＰＡＦ是导致烧伤后肠粘膜微循环障碍的重要因素之一。

替罗非班在急性心肌梗死患者急诊冠状动脉介入治疗无复流中的应用

目的评价冠状动脉内应用血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂盐酸替罗非班,对急性心肌梗死患者梗死相关动脉行直接PCI后无复流现象的效果及对血小板活化功能的影响。方法选择330例急性心肌梗死患者直接行PCI出现无复流者48例,根据其用药情况分为硝酸甘油组(24例)和替罗非班组(24例)。两组均行冠状动脉造影,分别于术前和术后24 h检测血小板GPⅠb、GPⅡb/Ⅲa、GPⅢa。结果与用药前比较,两组术后均能改善冠状动脉血流,硝酸甘油组患者TIMI血流为(1.61±0.38)级vs(1.85±0.42)级(P<0.05),替罗非班组患者TIMI血流为(1.59±0.40)级vs(2.15±0.65)级(P<0.01)。替罗非班组患者术后24 h血小板GPⅠb、GPⅡh/Ⅲa、GPⅢa较术前明显降低(P<0.01)。结论冠状动脉内应用GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂替罗非班较安全。能更有效改善TIMI血流,并能在一定程度上抑制血小板活化。

房颤患者血小板膜糖蛋白Ⅱ_b/Ⅲ_a受体的变化及意义

目的 :探讨心房纤颤患者血小板膜糖蛋白 (GP)Ⅱb/Ⅲa 受体的变化及其临床意义。方法 :采用全血法流式细胞术(FCM )对 2 2例房颤患者静脉血中GPⅡb/Ⅲa 的含量进行检测 ,并与 2 6例窦性心律者对照。结果 :房颤患者血小板膜GPⅡb/Ⅲa 显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;房颤患者中的持续房颤组高于阵发房颤组 (P <0 .0 1)。结论 :房颤引起血小板激活 ,激活程度可能与房颤持续时间有关。房颤患者处于血栓前状态。检测GPⅡb/Ⅲa 对评估房颤患者的栓塞危险性及指导抗凝、减少栓塞有重要意义。

小剂量阿司匹林对老年冠心病患者血小板活化功能的影响

目的探讨长期口服小剂量阿司匹林对老年冠心病患者血小板活化功能的影响。方法116例冠心病患者随机分为ASA50组、ASA100组及对照组,运用流式细胞仪(FCM),准确测定各组经体外二磷酸腺苷(ADP)及花生四烯酸(AA)共同活化的血小板膜表面糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa、CD62P)的阳性表达率,观察并分析比较老年人血小板膜表面糖蛋白的阳性表达率的变化。结果(1)血小板膜表面糖蛋白GPⅡb/Ⅲa的阳性表达率在ASA50及ASA100组分别为(64.40±15.71)%,(57.22±15.82)%,两种剂量阿司匹林均较对照组(75.8±15.71)%明显降低(P<0.05)。CD62P(P-Selectin)的阳性表达率分别为(68.01±9.57)%,(60.44±9.30)%,阿司匹林组与对照组(78.59±6.38)%比较明显降低(P<0.05)。(2)ASA50组与ASA100组两组间比较,PAC-1的阳性表达率为(64.40±15.71)%与(57.22±15.82)%,两组间差异无统计学意义(P>0.05);CD62P的阳性表达率为(68.01±9.57)%与(60.44±9.30)%,两组间差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论小剂量阿司匹林可有效抑制血小板活化功能,每日服用50mg和100mg阿司匹林对血小板活化功能的抑制无显著差异,双相激活血小板可以客观反映体内阿司匹林对血小板活化功能的影响。

肺栓塞与血小板活化标志物

目的探讨肺栓塞与血小板活化的关系,以发现更加简便、可靠的检测血小板活化的方法。方法用酶联免疫吸附法测定血浆中可溶性P-选择素(PS);流式细胞术检测血小板膜上活化标记物P-选择素(CD62p)。结果PTE患者血小板膜上P-选择素及血浆中可溶性P-选择素均明显高于高危人群及正常对照组(P<0.01);高危人群血小板膜上P-选择素及血浆中可溶性P-选择素高于正常对照组;栓塞面积越大血小板膜上P-选择素及血浆中可溶性P-选择素越高,血小板的活化程度越高;说明血小板活化在肺栓塞的发病中起重要作用。结论PTE时,血浆P-选择素水平明显增高,参与了PTE的发生、发展。通过早期监测高危人群血浆P-选择素,对于预防肺栓塞有一定帮助。P-选择素可以作血栓性疾病的导向诊断和治疗提供崭新的途径。P-选择素简单、易测,上述两种方法均可作为常规检查的指标。