一株高产己酸乙酯酵母菌株的筛选、鉴定及发酵条件优化

己酸乙酯是浓香型白酒的重要风味物质,提高浓香型基酒中己酸乙酯含量有助于提高其优质酒率。通过传统筛选方法从不同酒曲中筛选出1株高产己酸乙酯酵母,采用形态观察、生理生化分析和分子生物学对其进行鉴定,并通过单因素试验优化发酵条件。从源于不同酒曲的79株酵母中确定了1株高产己酸乙酯酵母,命名为Y9,并鉴定为Hyphopichia burtonii。酵母Y9具有优良的NaCl、葡萄糖、乙醇和己酸乙酯耐受性以及宽广的pH适应性,能够较好地适应浓香型白酒酿造环境。在糖度为14°Brix、初始pH 5.0、诱导温度22℃且静置发酵、乙醇体积分数8%、己酸体积分数0.04%、发酵时间60 h时,酵母Y9所产己酸乙酯质量浓度达到15.0 mg/L。该研究为产香酵母Y9更好地应用于白酒发酵提供了理论基础。

伯顿毕赤酵母菌对混合奶酪成熟期间蛋白质降解的影响

本文在两组黑豆乳-牛乳混合奶酪成熟期间,每隔5d测定蛋白质降解情况,研究添加伯顿毕赤酵母菌作为后熟菌对混合奶酪成熟期间蛋白质降解情况的影响。研究结果表明:添加了伯顿毕赤酵母菌的试验组混合奶酪在成熟期间,p H 4.6可溶性氮、12%TCA可溶性氮、游离氨基酸含量均呈逐渐上升的趋势,且其含量较对照组高;SDS-PAGE电泳图显示试验组混合奶酪的蛋白质降解程度较对照组高,且αs-酪蛋白和β-酪蛋白的降解强度较κ-酪蛋白大。

百药煎不同菌种发酵品特征性成分差异比较及潜在分子作用机制探讨

目的分析探讨黑曲霉Aspergillus niger(BYJ.H-1)、米根霉Rhizopus oryzae(BYJ.G-1)及蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus(HMB2)、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium(HMB5)、伯顿丝孢毕赤酵母菌Burton Pichia pastoris(HMY1)、克鲁维酵母菌Kluyveromyces(HMY2)4菌混合菌种3种优势菌种/群发酵的百药煎特征性成分差异及百药煎发挥“润肺化痰、止血止泻、解热生津”功效的潜在分子生物机制,为百药煎饮片的生产和临床应用提供参考。方法以百药煎中没食子酸(gallic acid,GA)、表没食子儿茶素(epigallocatechin,EGC)、2,4,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖(2,4,6-tri-O-galloyl-β-D-glucose,TGβG)、2,4,6-三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖(2,4,6-tri-O-galloyl-α-D-glucose,TGαG)4种特征性成分的HPLC峰面积为指标,通过主成分降维(principal component analysis,PCA)结合聚类分析法(cluster analysis,CA)对比不同菌种发酵品的差异;在中医药理论基础上采用网络药理学预测百药煎治疗呼吸道疾病(respiratory disease,RD)、水液代谢失调(water metabolism imbalance,WI)和消化道出血(alimentary tract hemorrhage,AH)的分子生物学机制。结果3种优势菌种/群发酵品在聚类结果中存在交叉现象,群集的聚类趋势无规律且与菌种类别无关联;百药煎中的没食子酸、EGC、没食子酸甲酯(methyl gallate,MG)、没食子酸乙酯(ethyl gallate,EG)和表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)5种活性成分与RD/WI/AH间存在99个共有靶点,经过蛋白互作和网络拓扑分析后得到98个核心靶点,主要包括蛋白激酶B1(protein kinase B 1,AKT1)、信号传导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、丝裂原活化蛋白激酶1/3(mitogen-activated protein kinase 1/3,MAPK1/3)等,基因本体(gene ontology,GO)分析结果显示这些靶点主要涉及激酶活性、连接酶结合和受体蛋白结合等分子生物功能,京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析结果显示有154条信号通路与百药煎治疗RD/WI/AH有关,主要涉及到病毒感染、癌变、细胞因子调节等信号通路。结论3种优势菌种/群发酵百药煎外在性状及内在成分无显著差异,百药煎的功效应用是多成分、多靶点、多途径协同作用的结果,研究为百药煎饮片的生产、质量控制和临床应用提供了参考。

伯顿毕赤酵母菌在酸性及胆盐环境的抗逆性研究

目的探究伯顿毕赤酵母菌在酸性及胆盐环境下的益生特性,为研制益生菌制剂提供理论依据。方法采用稀释平板计数法,在pH 1.0、1.5、2.0、2.5、3.0和胆盐浓度0.1%、0.2%、0.3%、0.4%的PDA液体培养基以及人工胃液作用0、2、4h,人工肠液作用0、2、4、6、8、10h环境下,分别测定伯顿毕赤酵母菌的活菌数。结果耐酸实验中,各酸性实验组活菌数与对照组比较均下降明显(P<0.01),酸度越高,活菌数越少;耐胆盐实验中,胆盐浓度越高,活菌含量越少,其中0.2%、0.3%和0.4%的胆盐浓度与对照组比较活菌数下降明显(P<0.01);人工胃液实验中,经过pH 1.5人工胃液处理4h,菌株存活率达42.78%,而经过pH 2.5和3.5的人工胃液处理4h,存活率分别为138.17%和182.90%;人工肠液实验中,随着处理时间的延长,活菌数也增加,且不同时间段的活菌数差异有统计学意义(P<0.05)。结论伯顿毕赤酵母菌能够在极高的酸性和较高的胆盐环境以及人工胃肠液环境中存活和定植,符合制备益生菌制剂的条件。