增敏化合物BSO对细胞微核率的影响

本文报道用微核胞质分裂阻断法研究BSO(丁胱亚磺亚酰胺,Buthione Sulfoximine)对细胞微核率的影响。研究结果表明BSO对正常人外周血淋巴细胞、BCa-P 37人乳腺癌细胞、中国仓鼠V79细胞和中国仓鼠CHO细胞在用药浓度0.1-2mmol/L情况下,微核发生率与未用药组无显著性差异,在^(60)COγ射线照射下,细胞的微核发生率与辐射剂量呈线性关系,当照射合并BSO时,微核发生率明显增加,表示BSO对细胞具有增加电离辐射的损伤作用。

Study on effect of BSO on esophageal cancer cell line TE-1

Objective: The aim of the study was to investigate the sensitizing effect of buthionine sulfoximine (BSO) and radiation on esophageal cancer cell line TE-1. Methods: Methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay was used to observe the inhibition of BSO and radiation on cell proliferation, and to investigate the sensitizing effect of BSO on esophageal cancer cell line TE-1. Flow cytometry (FCM) was used to observe the effect of BSO and radiation on cell apoptosis and cycle. Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot were used to observe the effect of BSO on manganese superoxide dismutase (MnSOD) mRNA and protein expression. Results: BSO could inhibit the proliferation of TE-1 esophageal cancer cells, and had significant dose- and time-dependent radiosensitizing effects on TE-1 esophageal cancer cells. After the combined effects of BSO and radiation on TE-1 cells, the rate of apoptosis and G2/M phase proportion increased significantly, and MnSOD mRNA and protein expression decreased. Conclusion: BSO may reduce MnSOD mRNA and protein expression by affecting TE-1 cell cycle, thus inhibiting and inducing the apoptosis of esophageal cancer cells and enhancing the killing effect of the radiation on esophageal cancer cells.

细胞谷胱甘肽含量与放射增敏研究

谷胱甘肽（ＧＳＨ）是一种内源性放射防护物质，在正常状况下大部分以还原型存在于细胞和组织中。本研究结果表明，通过外源性化学修饰剂丁胱亚磺酰亚胺（ＢＳＯ），可有效地抑制细胞内ＧＳＨ的生物合成，从而使内源性ＧＳＨ含量下降，在１ｍｍｏｌ／ＬＢＳＯ作用后２４ｈ，可使原有的ＧＳＨ含量从４．６７６８４×１０－１２ｍｍｏｌ／ｃｅｌｌ下降至０．０５０９２×１０－１２ｍｍｏｌ／ｃｅｌｌ，为对照组的１．００％。ＢＳＯ的抑制作用与其浓度和作用时间长短有关：０．１ｍｍｏｌ／ＬＢＳＯ作用２ｈ后，ＧＳＨ含量为２．６３４４８×１０－１２ｍｍｏｌ／ｃｅｌｌ，而在作用４８ｈ后，ＧＳＨ含量为０．０９２７７×１０－１２ｍｍｏｌ／ｃｅｌｌ。即ＢＳＯ在０．１ｍｍｏｌ／Ｌ浓度时，作用４８ｈ后细胞内ＧＳＨ下降为对照组的１．９８％。细胞在ＧＳＨ含量降低的情况下，进行电离辐射，通过对细胞放射增敏比（ＳＥＲ）的观察表明，ＧＳＨ下降时ＳＥＲ值增大，说明减少ＧＳＨ的含量，可增加细胞对射线的敏感性。这对放射生物学和临床放射肿瘤学的理论与实践均有一定意义。

谷胱甘肽对顺铂所致肾小管上皮细胞毒性的保护作用

[目的 ]探讨谷胱甘肽 (GSH)对顺铂所致不同性别大鼠肾小管上皮细胞毒性的影响。[方法 ]从不同性别的大鼠分离的肾小管上皮细胞接种于 96孔培养板 ,培养 2 4h后加入一系列浓度的顺铂 ,或在加入顺铂前 16和 4h ,分别加入GSH合成抑制剂BSO和GSH合成前体物半胱氨酸 ,再培养 2 4h后用MTT方法检测细胞存活率。[结果 ]顺铂对雌雄大鼠肾小管上皮细胞具有形状相似的剂量 -反应关系曲线 ,半数抑制浓度 (IC50 )分别为 0 .178mmol/L和 0 .182mmol/L ;BSO能使 2组IC50 均降低为 0 .0 0 1mmol/L ,可使剂量 -反应曲线左移 ,而半胱氨酸则可使 2组IC50 均升高 ,均大于 5mmol/L ,使剂量 -反应曲线下沉。[结论 ]顺铂对雌雄大鼠肾小管上皮细胞同样具有明显的毒性 ;BSO和半胱氨酸可分别增强和降低顺铂的毒性 ,间接证明细胞内GSH对顺铂所致大鼠肾小管上皮细胞毒性有保护作用 ,且与性别无关。

增敏化合物丁胱亚磺酰亚胺对离体细胞的毒性作用

本文报道国内首次合成的新增敏化合物——丁胱亚磺酰亚胺(buthioine sulfoxi-mine,简称BSO)对离体中国仓鼠V79-379A细胞在各种不同条件下的细胞毒性作用。实验结果表明:BSO在离体实验条件下对细胞的毒性作用较小;当它与双功能性的辐射增敏剂RSU-1069合用时,可明显地增加RSU-1069的细胞毒性作用,这在肿瘤放射治疗与化学药物治疗中有重要的意义。

顺铂对大鼠肝细胞毒性及谷胱甘肽的保护作用

目的 探讨顺铂对原代培养的大鼠肝细胞的毒性及谷胱甘肽对其影响。方法 从大鼠的肝脏分离培养肝实质细胞接种于 96孔培养板 ,培养 3h后加入一系列浓度的顺铂 ,或在加入顺铂前 16和 4h ,分别加入谷胱甘肽(glutathione ,GSH)合成抑制剂DL -buthionine - (S ,R) -sulfoximine(BSO)和GSH的前体物半胱氨酸 ,继续培养 ,分别在 8,2 4和 4 8h 3个时间点用噻唑蓝 (MTT)方法检测细胞存活率。结果 顺铂对大鼠肝细胞有明显的毒性 ,在不同的时间点有各自的剂量 -反应关系 ,顺铂对大鼠肝细胞在 8,2 4和 4 8h 3个时间点半数抑制浓度 (IC50 )分别为 1 13,0 2 1和 0 15mmol/L ;BSO能使 3组IC50 均降低 ,分别为 0 0 17,0 0 11和 0 0 13mmol/L ,而半胱氨酸则可使 3组IC50均升高 ,均大于 5mmol/L。结论 顺铂对大鼠肝细胞具有明显的毒性作用 ,且呈时间和剂量依赖关系 ;BSO可增强顺铂的肝细胞毒性 ,而半胱氨酸对顺铂引起的肝细胞毒性有保护作用 ,提示细胞内GSH对顺铂所致肝细胞毒性有保护作用。

丁胱亚磺酰亚胺对Acc-2移植瘤放射增敏的实验研究

目的在体内研究放射增敏剂丁胱亚磺酰亚胺（ｂｕｔｈｉｏｎｉｎｅｓｕｌｆｏｘｉｍｉｎｅ，ＢＳＯ）对Ａｃｃ－２移植瘤的放射增敏作用。方法以Ａｃｃ－２移植瘤为模型，实验设对照组、ＢＳＯ组、单放组和ＢＳＯ＋放射组。ＢＳＯ药物剂量为５ｍｍｏｌ／ｋｇ，放射剂量为１０Ｇｙ。结果各组与对照组比较，ＢＳＯ组抑瘤率为８．５％、单放组为１２．６％，ＢＳＯ＋放射组为４５．３７％。结论ＢＳＯ对Ａｃｃ－２移植瘤有放射增敏作用。

鸡谷胱甘肽水平与球虫免疫的相关性研究

采用化学方法选择性降低雏鸡的谷胱甘肽(简写为 GSH)水平,感染鸡球虫后,观察 GSH 在抗球虫免疫方面的怍用。试验结果表明,雏鸡 IgG 水平不因感染鸡球虫而升高。感染球虫的鸡只,在使用 BSO、DEM 处理后,血浆中 GSH 含量的动态变化与血液 T 淋巴细胞百分率间相关极显著。IgG 抗体与球虫免疫关系不大,而细胞免疫在抗鸡球虫感染中起主导作用.证实了谷胱甘肽能提高机体的细胞免疫力。

高效液相色谱法测定丁磺氨酸及其胶囊的含量

目的:建立丁磺氨酸(BSO)及其胶囊的含量测定方法。方法:以2，4二硝基氟苯为柱前衍生化试剂，反相高效液相色谱法，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈0.05 mol·L-1醋酸钠(15∶85，pH6.3)为流动相，检测波长为360 nm。结果:测定胶囊的平均回收率为99.7%(RSD=0.41%，n=5)。结论:本实验建立的HPLC可用于测定BSO及其胶囊的含量。

增敏化合物丁胱亚磺酰亚胺对Acc-2细胞的药物毒性

目的研究新型增敏化合物丁俄亚磺筑亚胶（buthioninesulfoximine，BSO）对ACC-2细胞药物毒性。方法采用克隆形成法研究在有氧状态和手氧状态下，BSO对ACC-2细胞的药物毒性，在实验中BSO的药物剂量分别是200、100、50、40、20μmol／L。结果在有氧和乏氧状态下，BSO对Acc-2细胞的半数抑制剂量分别为12μmol／L和80μmol／L。结论BSO的药物毒性较小，BSO在乏氧状态对Acc-2细胞的药物毒性强于有氧状态下对Acc-2细胞的药物毒性，

丁胱亚磺酰亚胺对A cc 2细胞的放射增敏效应研究

目的 研究新型放射增敏剂丁胱亚磺酰亚胺（ｂｕｔｈｉｏｎｅ ｓｕｌｆｏｘｉｍ ｉｎ， Ｂ Ｓ Ｏ）对 Ａｃｃ２ 细胞的放射增敏效应。方法 采用克隆形成法，首先观察了 Ｂ Ｓ Ｏ 在乏氧状态和有氧状态下对 Ａｃｃ２ 细胞的药物毒性，然后研究了 Ｂ Ｓ Ｏ 在乏氧和有氧状态下对 Ａｃｃ２ 细胞的放射增敏效应。结果 Ｂ Ｓ Ｏ 在乏氧状态和有氧状态时，其半数抑制剂量分别为８０μｍ ｏｌ／ Ｌ、１２０μｍ ｏｌ／ Ｌ。当 Ｂ Ｓ Ｏ 在 Ｉ Ｄ２０、 Ｉ Ｄ１０ 的药物剂量时，在乏氧状态下，其 Ｓ Ｅ Ｒ 值分别为１５２１ 和１２６３，在有氧状态下其 Ｓ Ｅ Ｒ 值分别为１２９６ 和１１５３。结论 Ｂ Ｓ Ｏ 对 Ａｃｃ２ 细胞有放射增敏作用， Ｂ Ｓ Ｏ 在乏氧状态下的增敏效应比有氧状态下的放射增敏效应强。

顺铂诱导的人肺腺癌多药耐药细胞株辐射敏感性的体外研究

对顺铂(Cisplatin,CDDP)诱导的人肺腺癌多药耐药单克隆细胞株SPC-A-1／CDDP-4及其亲代 SPC-A-1细胞体外的辐射敏感性进行研究。分别在有氧和乏氧条件下检测SPC-A-1／CDDP-4细胞和 SPC-A-1细胞内谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的含量,对SPC-A-1／CDDP-4细胞和SPC-A-1细胞体外的辐射敏感性进行研究,观察GSH生物合成抑制剂丁胱亚磺酰亚胺(Buthionine sulfoximine,BSO)对 SPC-A-1／CDDP-4细胞和SPC-A-1细胞的辐射增敏作用。实验结果表明:单克隆细胞株SPC-A-1／CDDP-4 不仅对化疗药:CDDP、阿霉素(Adriamycin,ADM)、甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)和长春新硷(Vincristine, VCR)具有多药耐药性,而且对137Csγ射线也具有一定的交叉耐受性;这可能与SPC-A-1/CDDP-4细胞的 GSH含量无论是在有氧或乏氧条件下,均高于亲代的SPC-A-1细胞有关;BSO在有氧和乏氧条件下对 SPC-A-1／CDDP-4细胞和SPC-A-1细胞均有辐射增敏作用,但是乏氧条件下的辐射增敏作用大于有氧,对 SPC-A-1／CDDP-14细胞的辐射增敏作用大于对SPC-A-1细胞的辐射增敏作用。

谷胱甘肽和丁硫堇对镉胁迫下辣椒幼苗生理特性的影响

为探究谷胱甘肽(GSH)在辣椒响应镉胁迫过程中的生理作用,在镉胁迫下测定了GSH和GSH合成抑制剂丁硫堇对辣椒叶部和根部各项生理指标的影响。结果表明,100μmol/L的镉离子对辣椒幼苗的生长有严重的抑制作用,在镉胁迫下喷施10 mmol/L的GSH可以增加辣椒幼苗的根长、株高以及地下部和地上部鲜重,与单独的镉处理相比增幅分别为22.01%、6.59%、39.11%和26.47%;叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量分别增加了82.65%、51.33%和32.19%;根部和叶部的镉含量分别增加了11.26%和33.26%;超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、抗坏血酸过氧化物酶、过氧化物酶、单脱氢抗坏血酸还原酶、脱氢抗坏血酸还原酶、谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽过氧化物酶在根部的活性分别提高49.63%、68.15%、51.60%、59.72%、56.78%、17.48%、59.53%和23.27%,在叶部分别提高14.22%、28.11%、64.86%、40.47%、28.02%、14.30%、28.60%和47.46%;GSH循环系统还原态/氧化态比例在叶部和根部分别提高了93.78%和40.32%,进而降低了超氧阴离子产生速率和H2O2含量;添加GSH合成抑制剂丁硫堇则会逆转上述作用。结果说明,GSH可有效缓解镉胁迫对辣椒造成的生理损害,进而提高辣椒抵抗重金属胁迫的能力。