血管生成素1通过ErbB1信号通路调节c-Abl介导大鼠慢性术后痛

目的:探讨血管生成素-1(Ang-1)、表皮生长因子受体(EGFR/ErbB1)和非受体酪氨酸激酶(c-Abl)在大鼠皮肤肌肉切口牵拉慢性术后痛模型中的作用及机制。方法:将60只大鼠分为对照组、假手术组和模型组,各20只,测定术后1、3、7、14、28d机械性刺激缩爪阈值;选取假手术组和模型组术后第7天进行转录组学测序,检测脊髄中Ang-1、ErbB1和c-Abl表达及定位。结果:和术前比,模型组机械性刺激缩爪阈值(MWT)呈时间依赖性下降;与对照组和假手术组比,模型组各时点MWT降低。模型组术后第7天Ang-1表达降低,ErbB1、c-Abl表达增加,KEGG信号通路分析发现ErbB信号通路,蛋白互作网络分析发现Ang-1、ErbB1和c-Abl存在关联。免疫荧光发现Ang-1与神经元标记物(NeuN)和小胶质细胞标记物(Iba1)共定位,ErbB1与NeuN、GFAP共定位,c-Abl与GFAP、Iba1共定位。结论:Ang-1、ErbB1和c-Abl参与了慢性术后痛(CPSP)的发生发展,Ang-1通过ErbB信号通路调节c-Abl在CPSP中发挥重要作用。

超高温陶瓷改性C/C复合材料抗氧化烧蚀性能研究进展

碳/碳(C/C)复合材料具有高强、轻质和耐温等优势,在航天领域取得广泛应用;但由于其抗氧化性能较差,难以满足高超声速飞行器长时飞行、大气层再入飞行和跨大气层飞行的服役环境。利用超高温陶瓷改性C/C复合材料(C/C-UHTC)可以显著提高C/C复合材料的抗氧化烧蚀性能,有望满足新一代飞行器长时间抗氧化、抗烧蚀及结构强度的要求。本文总结了C/C-UHTC复合材料烧蚀性能的常用测试方法,包括氧-乙炔烧蚀、等离子烧蚀、激光烧蚀和风洞烧蚀,简要介绍了各种烧蚀性能测试方法的特点。此外,对近年来Zr系和Hf系单组元、双组元和三组元C/C-UHTC复合材料的烧蚀性能及烧蚀机理进行详细阐述。

C/SiC复合材料的烧蚀机理试验研究

C/SiC复合材料具有优异的热力学性能,在临近空间领域具有较好的应用前景。针对C/SiC复合材料的烧蚀机理理论方法开展研究,建立了C/SiC复合材料主/被动氧化烧蚀分析方法,并在传统主动和被动氧化烧蚀的基础上,对于更高温度条件则采用一种升华分解烧蚀模型。通过设计典型状态电弧风洞试验,验证了主/被动氧化模型烧蚀、升华分解烧蚀模型的准确性,试验结果表明典型状态下C/SiC复合材料无因次质量烧蚀率与理论值吻合,有关研究及结果可以为C/SiC复合材料防热设计分析提供参考。

卵巢癌中C-kit、C-abl、PDGFRα的表达及意义

目的探讨酪氨酸激酶受体在卵巢癌中的表达及意义。方法应用免疫组化SP方法,检测20例正常卵巢组织和60例卵巢癌中酪氨酸激酶受体C-kit、C-abl和PDGFRα的表达。结果至少含一种酪氨酸激酶受体的阳性率为79%;C-kit、C-abl和PDGFRα在卵巢癌中阳性表达率分别为58.3%,70%,73.3%,其中C-kit和PDGFRα蛋白的阳性表达率较高,明显高于正常卵巢组织,差异有显著性(P<0.01)。C-abl在卵巢癌中表达高于正常卵巢组织,差异无显著性。结论C-kit和PDGFRα与卵巢癌的发生和发展密切相关,应用酪氨酸激酶抑制剂治疗有可能性。

乳腺癌中Abi1和c-Abl及WAVE 2的表达及其相互关系

目的研究乳腺癌组织中Abi1、c-Abl和WAVE2蛋白的表达及其相互关系。方法应用免疫组化SP法检测66例乳腺癌组织和24例正常乳腺组织中Abi1、c-Abl和WAVE2蛋白的表达情况。结果 1.正常乳腺组织与乳腺癌组织相比,Abi1和WAVE2蛋白表达有显著性差异(P<0.05),而c-Abl蛋白表达无显著性差异(P>0.05),但有定位的改变。2.Abi1强阳性率与乳腺癌的肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移及临床分期呈负相关性(P<0.05);与患者年龄无关(P>0.05)。c-Abl阳性率及WAVE2强阳性率均与乳腺癌的组织学分级、淋巴结转移及临床分期呈负相关性(P<0.05);与患者年龄及肿瘤大小无关(P>0.05)。3.Abi1蛋白表达与c-Abl和WAVE2蛋白表达呈正相关(P<0.05)。结论乳腺癌中Abi1低表达与预后不良有关。乳腺癌中Abi1蛋白表达的变化可影响c-Abl蛋白的定位和WAVE2蛋白的表达。推测Abi1在Abl/Abi1/WAVE2通路中具有至关重要的地位。

c-Abl蛋白酪氨酸激酶形成同源二聚体(英文)

cAbl是非受体酪氨酸激酶,它在细胞内被一些基因毒性的、氧化的及其它形式的压力所激活。目前研究证明:应用标记的cAbl发现其在细胞内可以相互形成同源二聚体,并且一分子cAbl的N末端区域与相应的另一分子的C末端相互作用形成二聚体。实验进一步表明:cAblSH3结构域结合到另一cAbl分子富含脯氨酸的C末端约958982氨基酸区域。如果去除cAbl富含脯氨酸的结构域,就会阻止二聚体的形成。这些结果首先证实了cAbl在细胞内可以相互形成同源二聚体,并暗示着二聚体的形成可能影响着cAbl活性的调节。

P73、c-Abl蛋白在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义

目的研究P73、c-Abl蛋白在卵巢肿瘤组织中的表达情况及相互关系,探讨其在卵巢肿瘤发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP法检测61例卵巢恶性肿瘤、28例卵巢交界性肿瘤和30例卵巢良性肿瘤组织中P73、c-Abl蛋白的表达情况。结果P73蛋白在卵巢良性、交界性、恶性肿瘤组织中的表达呈逐渐增高趋势;卵巢恶性肿瘤内P73蛋白的表达与组织分化有关,在低分化癌中有较高表达;卵巢癌患者中P73蛋白阴性表达者的生存期明显长于阳性表达者;c-Abl蛋白在卵巢良性、交界性、恶性肿瘤组织中的表达有显著差异(P<0.01),在卵巢癌中呈高表达;P73蛋白和c-Abl蛋白在卵巢癌中呈正相关性高表达(P<0.01)。结论p73基因以高表达方式参与卵巢癌的发生发展过程,卵巢癌中P73蛋白的高表达与c-Abl蛋白的高表达有关。P73蛋白的表达强度能够反映卵巢癌的恶性程度,可作为判断肿瘤生物学行为的参数和卵巢癌预后的指标。

酪氨酸激酶c-Abl与信号转导

c-Abl是一种非受体型酪氨酸激酶,在细胞核和细胞质中都有分布,通过调控多种信号通路的信号转导参与多种细胞活动。细胞核中的c-Abl在DNA损伤应激中被激活并参与调控细胞凋亡,细胞质中的c-Abl参与调控细胞增殖、细胞周期、黏附迁移和细胞凋亡等细胞活动。我们简要综述了c-Abl参与调控的信号通路。

姜黄素对K562细胞增殖的影响及其与P210^(bcr/abl)激活的Ras信号途径的关系

目的 研究姜黄素 (Cur)对慢性粒细胞白血病 (CML)细胞株K5 62增殖的影响 ,并且探讨这种影响与P2 10 bcr/abl及其激活的Ras信号途径的关系。方法 应用MTT法检测Cur对细胞增殖的影响 ,应用Westernblot的方法检测蛋白含量的变化。结果 Cur对P2 10 bcr/abl阳性的K5 62细胞抑制作用呈量效、时效关系 ,Cur 10mg·L-1作用 48h对K5 62细胞的抑制率高达 (81 9± 1 0 ) % ;相比之下 ,已知对P2 10 bcr/abl无影响的VP 16作为抗癌药对照 ,对K5 62细胞的抑制作用明显较弱。Cur和VP 16对K5 62细胞的不同作用提示Cur对K5 62细胞作用可能有特异性 ,而这个特异的作用靶点可能就是引起CML对多种化疗药物耐药的CML特征性的P2 10 bcr/abl蛋白。Westernblot的实验结果表明Cur使K5 62细胞P2 10 bcr/abl、MEK 1和c Jun蛋白含量明显减少 ,且呈量效关系 ,相比之下 ,VP 16对K5 62细胞P2 10 bcr/abl的蛋白含量无影响而仅轻微减少MEK 1和c Jun的蛋白含量 ,提示MEK 1和c Jun蛋白含量的减少是非特异性的 ,并且 ,在P2 10 bcr/abl阳性的K5 62细胞 ,Cur除了非特异性地抑制细胞中MEK 1及c Jun的表达外 ,Cur还可能通过特异性地抑制K5 62细胞的特异性靶点P2 10 bcr/abl的表达 ,从而下调其下游的Ras信号途径中的其它信号分子。

c-Abl抑制剂应用于治疗帕金森病的进展研究

帕金森病(PD)是与衰老相关的常见的神经退行性疾病。近年来,有关PD的动物模型研究和对来自PD患者的脑标本的分析发现多巴胺能神经元中非受体酪氨酸激酶Abelson(c-Abl)的水平和活性增加。c-Abl具有蛋白质底物磷酸化活性,可使α-突触核蛋白和E3泛素连接酶Parkin磷酸化。临床上用于治疗白血病的c-Abl激酶抑制剂,在PD的细胞和动物模型均中显示出神经保护作用,这为临床上使用c-Abl抑制剂治疗PD患者提供了良好的应用前景。文章就c-Abl及其与PD发生发展的病理生理过程的关系进行综述,并对目前c-Abl抑制剂的药理学和安全性相关的问题进行了讨论。c-Abl抑制剂是否能够真正用于临床治疗PD使更多患者受益,仍需要更严格控制、设计良好的试验做进一步的研究。

BCR-ABL与泛素E3连接酶c-CBL的相互作用在慢性髓系白血病靶向治疗中的作用及相关机制研究

目的:通过对BCR-ABL与泛素E3连接酶c-CBL的相互作用结构域的筛查,明确砷剂治疗慢性髓系白血病(CML)的结构基础。方法:根据BCR-ABL与c-CBL的结构信息,对二者的结合界面进行结构模拟与分析,基于此构建BCR-ABL的不同突变体[(△SH2(Src同源结构域2)、△TyrKC(酪氨酸激酶催化结构域)和△SH2/TyrKC(S/H))以及c-CBL的突变体△RF(环指结构域),转染293T及HeLa细胞,应用免疫共沉淀(Co-IP)]及免疫荧光(IF)共定位的方法筛查BCR-ABL与c-CBL的相互作用结构域。结果:Co-IP发现BCR-ABL的TyrKC结构域主要参与了与c-CBL的相互作用,SH2结构域也发挥一定的作用,但作用弱于TyrKC结构域;当两个结构域同时截短后,BCR-ABL与c-CBL几乎不发生相互作用;同时c-CBL的RF结构域在一定程度上影响了与BCR-ABL的相互作用。IF的结果与Co-IP相符,证明了结构模拟的准确性。结论:BCR-ABL的TyrKC和SH2结构域主要参与了与c-CBL的相互作用,而c-CBL的RF结构域参与了与BCR-ABL的相互作用。c-CBL与BCR-ABL的相互作用对BCR-ABL的稳定性发挥调控作用,对于深入理解砷剂靶向治疗CML分子机制提供了结构基础。

c-abl通过与雌激素受体β相互作用上调其转录活性

雌激素受体β(ERβ)在心血管疾病发生发展中起着重要的作用,但是其在心血管病中发挥作用的机制还不清楚.因此寻找与ERβ相互作用的共调节因子对阐明ERβ信号通路具有重要价值.应用GST沉淀、免疫共沉淀技术,发现ERβ可以与c-abl相互作用,并可被c-abl磷酸化.通过荧光素酶报告基因方法发现,c-abl可以上调ERβ转录激活的活性,并且上调作用可以被c-abl的抑制剂STI571抑制.上述结果提示c-abl是新的ERβ共刺激因子,为进一步研究ERβ通路在心血管疾病中发挥作用的机制打下基础.

子宫内膜癌c-abl基因的突变及临床意义

目的:研究c-abl基因在子宫内膜癌组织的突变情况及其临床意义,探讨其与子宫内膜癌的关系。方法:应用PCR技术及序列分析方法检测和分析正常子宫内膜11例(正常内膜组)、子宫内膜良性病变21例(良性病变组)、子宫内膜不典型增生16例(不典型增生组)、子宫内膜癌62例(子宫内膜癌组)中c-abl基因在外显子3(exon3)、外显子4区(exon4)的突变,及其与子宫内膜癌不同临床病理特征的关系。结果:①c-abl基因在exon3、exon4的突变总体上表现为点突变。子宫内膜癌组及不典型增生组的突变率(77.42%,56.25%)较正常内膜组及良性病变组高(0,14.29%),差异有高度统计学意义(P<0.01)。②子宫内膜癌组织中,突变率与病理类型无关,随肿瘤组织分化程度降低、临床分期增高及淋巴结转移而增高(P<0.05);③在子宫内膜癌组织中,c-abl基因在exon3、exon4区的点突变集中在3个位点,它们或单独或共同存在,影响c-abl蛋白的结构和功能。结论:c-abl基因在exon3、exon4区的突变与子宫内膜癌的发生发展有关。其突变率随着子宫内膜癌的分化、临床分期的进展和淋巴结转移而增高,该基因的突变可成为判断子宫内膜癌恶性程度的指标之一。

c-abl基因在卵巢恶性肿瘤中的突变及意义

目的研究c-abl基因在人卵巢肿瘤组织中的突变情况及其临床意义,探讨其在卵巢肿瘤的发生、发展过程中的作用。方法应用PCR技术及序列分析方法检测和分析88例正常卵巢、上皮性肿瘤组织中c-abl基因在外显子3、4区的突变。结果①c-abl基因在外显子3、4区的突变总体上表现为点突变。卵巢恶性肿瘤组织及交界性肿瘤的突变率较正常及良性肿瘤组高;②卵巢恶性上皮性肿瘤组织中,突变率与病理类型无关,随肿瘤组织分化、临床分期、淋巴结转移的进展而增高;③在卵巢恶性上皮性肿瘤组织中,c-abl基因在外显子3、4的点突变集中在5个位点,它们或单独或共同存在,影响该蛋白的结构和功能。结论c-abl基因在外显子3、4区的突变与卵巢上皮性癌的分化、临床分期和淋巴结的转移呈正相关,可成为判断该肿瘤恶性度的指标之一。

c-Abl与应激损伤调控

非受体酪氨酸激酶c-Abl广泛表达于人和哺乳动物等的细胞中并受到严格调控,通过蛋白之间相互作用、与DNA相互作用及其酪氨酸激酶活性在一系列的重要生命活动中发挥调节作用。在应激损伤反应如DNA损伤反应中,c-Abl的Ser465被ATM和DNA-PK磷酸化而激活,通过与Rad51、p53和p73等分子的相互作用参与DNA重组修复、细胞周期和细胞凋亡等的调控,不同信号途径之间的平衡决定细胞的生存和死亡。

联合应用bcr-abl融合基因反义寡核苷酸与c-myb基因反义寡核苷酸对K562细胞作用的研究

目的 :研究联合应用bcr abl融合基因硫代磷酸反义寡核苷酸 (Aspo)及c myb基因Aspo对K5 6 2细胞作用效果。 方法 :Aspo与K5 6 2细胞共培养后 ,台盼蓝拒染法计死活细胞数 ;甲基纤维素半固体培养法培养CFU K5 6 2 ;流式细胞仪测定细胞P2 10蛋白表达及细胞凋亡率 ;RT PCR半定量检测细胞bcr ablmRNA ;电镜观察凋亡细胞形态学改变。结果 :倒置显微镜下观察到联合应用两种Aspo时 ,浓度各为 5 μmol/L组K5 6 2细胞仍呈克隆状生长 ,作用 2 4h细胞P2 10蛋白表达明显受抑制 ,表达率 <2 % ;作用 12 0h细胞生长抑制率为 6 1.7% ,P2 10恢复为 2 5 .7% ,凋亡率为 2 2 .5 %。两种浓度各为 10 μmol/L组K5 6 2细胞生长疏散 ,作用 12 0h细胞生长抑制率达 92 .2 % ,P2 10仍未恢复 ,凋亡率为 6 4.3% ,电镜下见细胞呈典型凋亡形态学改变。当两种Aspo浓度各为 5 μmol/L及 10 μmol/L作用 48h时 ,K5 6 2细胞bcr ablmRNA较空白组下降 6 9.2 %～85 3%。结论 :联合应用bcr abl基因Aspo及c myb基因Aspo对K5 6 2细胞的抑制作用具有一定的协同性 ,可增强其抗白血病效果。

c-Abl基因在Ang Ⅱ诱导血管平滑肌细胞氧化应激中的作用

目的探讨c-Abl基因在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)氧化应激中的作用。方法构建c-Abl基因过表达和沉默的慢病毒载体,并利用慢病毒转染的方法构建c-Abl过表达和沉默的VSMCs。实验分6组:(1)对照组、(2)AngⅡ组、(3)STI571组、(4)lenti-control组、(5)lenti-cAbl-shRNA组、(6)lenti-cAbl组。(1)^(3)组为正常VSMCs,(3)组用STI571预处理,(4)^(6)组为分别利用lenti-control、lenti-cAbl-shRNA、lenti-cAbl转染VSMCs,对照组用生理盐水干预,其余实验组用AngⅡ(1×10-7 mol/L)干预30min,并用Western blot测定c-Abl和p-cAbl蛋白表达量;活性氧测定:对照组用生理盐水干预,其余实验组用AngⅡ(1×10-7 mol/L)干预36h,流式细胞仪分别检测其活性氧分子(ROS)、二氢罗丹明(DHR)、二氢乙啶(DHE)水平。结果 AngⅡ刺激后,与对照组比较,lenti-cAbl组的c-Abl和pcAbl蛋白表达最强,STI571组和lenti-cAbl-shRNA组p-cAbl蛋白表达最弱,而lenti-control组与AngⅡ组c-Abl和pcAbl蛋白水平无明显差异。AngⅡ干预36h后,VSMCs氧化应激产物(ROS、DHE、DHR)均增加,但lenti-cAbl组氧化应激水平最高,lenti-cAbl-shRNA组、STI571组的氧化应激水平较AngⅡ组有所降低。结论利用慢病毒载体构建过表达c-Abl基因的VSMCs细胞系获得成功;c-Abl基因表达的增加与AngⅡ刺激下VSMCs的氧化应激程度呈正相关。

c-Ets1对K562细胞BCR-ABL融合基因表达的影响

目的探讨转录因子c-Ets1对K562细胞BCR-ABL融合基因表达的影响。方法将c-Ets1基因转染K562细胞,RT-PCR检测转染后BCR-ABL融合基因mRNA的表达;Western blot检测转染后融合蛋白p210的表达;MTT法检测对细胞增殖的影响;生物信息学方法初步分析BCR-ABL启动子的功能。结果 RT-PCR检测表明,c-Ets1可以抑制BCR-ABL基因mRNA的表达;Western blot检测显示c-Ets1可以抑制p210蛋白的表达;转染c-Ets1后细胞的生长抑制率为(25.52±6.75)%;BCR-ABL启动子区存在c-Ets1的潜在作用靶点。结论 c-Ets1可以抑制K562细胞BCR-ABL基因及p210的表达,进而抑制细胞的增殖。

人Polo样激酶1基因的克隆表达及其影响c-Abl表达水平功能的初探

目的:克隆并在293细胞中表达人Polo样激酶1(Plk1)基因,探索Plk1对非受体型酪氨酸激酶c-Abl表达水平的影响。方法:利用PCR法扩增Plk1基因,分别定向克隆至pcDNA3-Flag及pCMV-Myc真核表达载体,将上述质粒分别转染293细胞进行瞬时表达,Western印迹检测Plk1蛋白的表达;将上述质粒分别与c-Abl表达质粒共转293细胞,检测带有不同标签的Flag-Plk1或Myc-Plk1对细胞中c-Abl激酶表达的影响。结果:构建了Flag-Plk1和Myc-Plk1真核表达质粒,其在293细胞中均可表达,蛋白的相对分子质量为68×103;与其共转的c-Abl激酶表达水平显著下调。结论:在293细胞中表达了Flag-Plk1和Myc-Plk1蛋白,且初步发现Plk1可以抑制c-Abl的表达。

c-Abl调控FHL2的转录活性

目的:研究c-Abl对FHL2转录活性的调控。方法:应用免疫共沉淀和免疫印迹验证c-Abl与FHL2的相互作用及c-Abl对FHL2的磷酸化作用,并用萤光素酶报告基因研究c-Abl对FHL2转录活性的调控。结果:c-Abl与FHL2结合并磷酸化FHL2,促进FHL2的转录活性,并与FHL2一起促进FHL2下游因子骨钙蛋白的基因启动子活性。结论:c-Abl能促进FHL2的转录活性。