SD新生大鼠c-kit阳性心肌细胞的分离纯化

目的:建立新生SD大鼠c-kit阳性细胞分离纯化及传代的培养方法。方法:取出生24h之内新生SD大鼠心尖部组织,用PBS液洗去心尖部的血液,将其剪碎成lmm3以下的组织块培养,培养48h后,0.5%Trypsin-EDTA消化,用免疫磁珠分选c-kit阳性的心肌细胞,继续培养传代。用倒置显微镜观察c-kit阳性心肌细胞,用免疫细胞化学法检测心肌组织特异性cTnT及Desmin蛋白。结果:用心脏组织培养法成功得到了体外搏动的原代心肌细胞;用免疫磁珠分选了c-kit阳性心肌细胞,倒置显微镜下观察到c-kit阳性心肌细胞具有传代增殖的特性;同时,检测了c-kit阳性心肌细胞胞质cTnT及Desmin结合蛋白的阳性表达。结论:采用改良后的培养方法获得了c-kit阳性心肌细胞,该细胞具有心肌干细胞的蛋白表达特性,并具有一定的传代增殖能力。

c-kit^+细胞的来源、特征及其向心血管细胞的分化

c-kit^+细胞主要来源于骨髓和心脏,存在多种细胞亚群。目前研究表明,c-kit^+细胞是治疗心肌梗死的理想细胞,但其主要向心肌分化还是向血管内皮分化存在较大争议。因此,有必要重新认识c-kit^+细胞的分化潜能,且深入探讨发育不同阶段和局部微环境对于c-kit^+细胞分化的影响。这对于显著提高c-kit^+细胞移植修复梗死心肌的效率具有重要意义。