秦皮乙素对BALB/c裸鼠体内胶质瘤生长的影响

【目的】探讨秦皮乙素(Esc)的体内抗胶质瘤活性,为秦皮乙素进一步研究开发为抗胶质瘤药物提供实验依据。【方法】采用C6细胞前肢腋下皮下注射BALB/c裸鼠种瘤构建荷瘤鼠模型;分为4组:模型组、50 mg/kg秦皮乙素组、100mg/kg秦皮乙素组和阳性对照组;采用瘤体积、相对肿瘤增殖率、瘤质量、肿瘤生长抑制率和体质量5个指标评价秦皮乙素的体内抑瘤效果;采用HE染色鉴定瘤体。【结果】与模型组相比,秦皮乙素可显著抑制雄性荷瘤鼠的瘤体积约10倍,瘤质量约8倍,对其体质量无显著影响,与阳性对照药尼莫司汀(ACNU)相似;对雌性荷瘤鼠瘤体的生长无显著抑制作用。【结论】秦皮乙素在雄性荷瘤鼠体内具有显著抗胶质瘤活性,为秦皮乙素进一步开发为抗胶质瘤药物提供了实验依据。

BALB/c裸鼠血管瘤模型的建立及普萘洛尔对其瘤体的抑制作用

目的建立BALB/c裸鼠血管瘤模型,探讨普萘洛尔对血管瘤裸鼠移植瘤瘤体生长的影响。方法手术切除血管瘤患儿血管瘤组织,经皮肤切口移植于40只BALB/c裸鼠建立血管瘤模型。移植后第45天将40只荷瘤小鼠随机分为5组:治疗组1,腹腔注射0.01%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组2,腹腔注射0.05%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组3,腹腔注射0.1%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组4,经口灌胃0.01%普萘洛尔溶液0.4 mL;对照组,腹腔注射无菌生理盐水0.4 mL;各组给药均为1次/d,持续1周。于干预前及干预后第7、14、21天测量各组瘤体体积和小鼠体质量并进行比较;干预第22天切取瘤体行HE染色观察对比病理变化。结果干预后第7、14、21天,治疗组1、2、3、4瘤体体积均较干预前小,且治疗组1、2、3较对照组瘤体体积小(P均<0.05)。干预后第14、21天,治疗组3较治疗组1、2瘤体体积小(P均<0.05),治疗组1较治疗组4瘤体体积小(P均<0.05)。HE染色后光镜下可见各治疗组血管瘤内皮细胞分散凌乱、界限不清,且普萘洛尔浓度越高,对内皮细胞增殖抑制作用越明显。干预后第7、14、21天,治疗组1、2、3及对照组两两相比,治疗组1与治疗组4相比,裸鼠体质量比较差异无统计学意义。结论成功建立BALB/c裸鼠血管瘤模型;普萘洛尔可抑制模型裸鼠瘤体生长,对裸鼠机体无明显损害,且腹腔注射较灌胃效果显著。

非小细胞肺癌病人源性NOD/SCID小鼠和BALB/c裸鼠移植瘤模型的建立及比较

目的:构建人非小细胞肺癌的NOD/SCID小鼠和BALB/c裸鼠移植瘤模型,并探讨移植瘤成瘤性与小鼠品系间的关系,为后续建立优良的动物模型奠定基础。方法:取手术切除获得的23例非小细胞肺癌组织,1 h内移植于NOD/SCID小鼠或BALB/c裸鼠皮下,观察移植瘤成瘤情况,测量移植瘤体积,绘制生长曲线图,计算成瘤率、成瘤潜伏时间和成瘤时间,分析并比较移植成瘤组和未成瘤组所对应患者的相关临床病理指标,并取移植成瘤组和所对应患者的组织标本进行病理学分析。结果:NOD/SCID小鼠皮下移植瘤模型成瘤率(55.6%),BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型(20%),两者间差异无统计学意义(P>0.05),但前者的成瘤潜伏时间和成瘤时间均短于后者(P<0.05)。患者相关临床病理指标中鳞癌、TNM分期和淋巴结转移情况与移植瘤成瘤建模无明显相关(P=0.109、0.153、0.077),NOD/SCID小鼠和BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型均能保持病人肺癌肿瘤组织的形态学特征。结论:成功构建了NOD/SCID小鼠和BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,NOD/SCID小鼠更适宜用于肺癌病人源性皮下移植瘤模型的建立,非小细胞肺癌移植瘤模型的建立为进行体外抗肿瘤药物的筛选提供了良好的研究工具。

应用MEC-1与HG3细胞株建立慢性淋巴细胞白血病BALB/c裸鼠皮下移植瘤的模型

目的：通过对免疫缺陷鼠（BALB/c）不同部位、不同密度接种人慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞,探索裸鼠皮下移植瘤模型建立的条件。方法：通过慢病毒系统建立稳定表达绿色荧光蛋白（GFP）的人CLL细胞（MEC-1-GFP与HG3-GFP细胞）。首先将MEC-1-GFP细胞（5×10^7/ml）分别接种于裸鼠的前肢腋下、腹部及后肢腋下,观察不同接种部位对CLL细胞成瘤率的影响;其次将同等密度的MEC-1-GFP、HG3-GFP细胞（5×10^7/ml）分别接种于裸鼠的前肢腋下部位,观察两种细胞的成瘤时间及成瘤率。再次以同样接种方法,将不同密度的MEC-1-GFP与HG3-GFP细胞（1×10^7/ml与5×10^7/ml）分别接种于裸鼠的前肢腋下,观察不同接种密度的细胞成瘤时间及成瘤率。观察5周后,通过眼球取血获得外周静脉血,经EDTA抗凝及溶血素处理后,用流式细胞术检测GFP阳性的CLL细胞;同时,将荷瘤鼠处死,剥离肿瘤组织并制备冰冻切片,进行组织病理学检查。结果：成功获得稳定表达标记蛋白GFP的MEC-1与HG3细胞株;接种后裸鼠的前肢腋下、腹部及后肢腋下都形成了皮下移植瘤,且前肢腋下更有利于移植瘤的形成;接种密度为5×10^7/ml的MEC-1-GFP和HG3-GFP细胞均可形成皮下移植瘤,且5周后的成瘤率均为80%;接种密度分别为1×10^7/ml与5×10^7/ml MEC-1-GFP与HG3-GFP细胞均可有效地形成皮下移植瘤。流式细胞术检测显示,2组荷瘤鼠外周血中均未见GFP阳性的MEC和HG3细胞,组织病理检查表明CLL细胞向腹腔转移。结论：利用CLL细胞株MEC-1-GFP和HG3-GFP建立了CLL裸鼠皮下移植瘤模型,为进一步研究CLL的发病机制提供了实验工具。

BALB/c裸鼠皮下接种人胃癌MGC-803细胞成瘤实验方法比较

目的 通过不同的接种方法,筛选出建立胃癌皮下移植瘤模型的最优方法,并以此为瘤源建立胃癌皮下移植瘤模型。方法 (1)体外培养人胃癌MGC-803细胞,PBS调节细胞浓度至1×10^(7)个/mL,按0.2mL/只接种于BALB/c裸鼠左侧腋下;(2)BALB/c裸鼠接种人胃癌MGC-803细胞成瘤后,生理盐水按比例加入瘤块组织进行研磨,按0.2mL/只将研磨液接种于BALB/c裸鼠左侧腋下;(3)将成瘤裸鼠的移植瘤剥离出,在载玻片上切成约2mm×2mm×2mm大小的瘤组织块,进行瘤转瘤接种。结果 成功筛选出建立胃癌皮下移植瘤模型的最优方法,将细胞成瘤裸鼠的瘤块进行瘤转瘤,直接植入皮下。结论本实验利用人胃癌MGC-803细胞,成功建立了BALB/c裸鼠腋下接种人胃癌MGC-803细胞成瘤实验方法,该模型为胃癌的进一步治疗及相关指标的检测提供了一个良好的技术平台。

食管鳞癌患者来源移植瘤模型:B-NDG小鼠与BALB/c裸鼠的比较

目的探讨不同品系的小鼠对于食管鳞癌患者来源的异种移植瘤(ESCC PDX)成瘤率的影响,为ESCC的临床个体化治疗建立更优势的临床前动物模型。方法收集22例ESCC患者手术切除的肿瘤组织,分别利用B-NDG(NSG)鼠和BALB/c裸鼠来建立ESCC PDX模型。通过观察移植瘤成瘤情况,测量移植瘤体积,绘制生长曲线图,计算成瘤率和成瘤时间,HE染色、免疫组化及基因组测序等实验,比较移植瘤组织与原患者肿瘤组织的一致性。结果22例标本的PDX模型移植结束,发现NSG小鼠ESCC肿瘤发生率(50%,11/22)高于BALB/c裸鼠(18.18%,4/22)(P=0.027)。NSG小鼠的平均肿瘤成瘤时间为75.95 d短于BALB/c小鼠的91.67 d,差异具有统计学意义(P<0.001)。在NSG小鼠和BALB/c小鼠异种移植模型中,肿瘤均能保持病人ESCC肿瘤组织的形态学特征。基因分析结果显示,与BALB/c裸鼠相比,NSG小鼠肿瘤与亲代患者肿瘤样本间的基因相似度更高(P<0.0001)。结论成功构建了NSG小鼠和BALB/c裸鼠ESCC皮下移植瘤模型,并发现NSG小鼠对于模型成功的建立更具有优势。

非小细胞肺癌病人源性NOD／SCID小鼠和BALB／c裸鼠移植瘤模型的建立及比较

目的构建人非小细胞肺癌的NOD／SCID小鼠和BALB／c裸鼠移植瘤模型，并探讨移植瘤成瘤性与小鼠品系间的关系，为后续建立优良的动物模型奠定基础。方法取手术切除获得的23例非小细胞肺癌组织，1h内移植于NOD／SCID小鼠或BALB／c裸鼠皮下，观察移植瘤成瘤情况，测量移植瘤体积，绘制生长曲线罔，计算成瘤率、成瘤潜伏时间和成瘤时间，分析并比较移植成瘤组和未成瘤组所对应患者的相关临床病理指标，并取移植成瘤组和所对应患者的组织标本进行病理学分析。结果NOD／SCID小鼠皮下移植瘤模型成瘤率（55．6％），BALB／c裸鼠皮下移植瘤模型（20％），两者间差异无统计学意义（P〉0．05），但前者的成瘤潜伏时间和成瘤时间均短于后者（P〈0．05）。患者相关临床病理指标中鳞癌、TNM分期和淋巴结转移情况与移植瘤成瘤建模无明显相关（P=-0．109、0．153、0.077），NOD／SCID小鼠和BALB／c裸鼠皮下移植瘤模型均能保持病人肺癌肿瘤组织的形态学特征。结论成功构建了NOD／SCID小鼠和BALB／c裸鼠皮下移植瘤模型，NOD／SCID小鼠更适宜用于肺癌病人源性皮下移植瘤模型的建立，非小细胞肺癌移植瘤模型的建立为进行体外抗肿瘤药物的筛选提供了良好的研究工具。

不同环境设施内BALB/C裸鼠两种繁育方式的生产性能初步比较

BALB/C裸鼠在不同环境设施内(SPF屏障系统和IVC独立通风系统)分别采取1♀(nu/+):1♂(nu/nu)和2♀(nu/+):1♂(nu/nu)繁育方式,观察记录雌鼠交配分娩间隔、胎数、平均产仔数、平均纯合仔鼠及纯合仔鼠离乳率等数据,分析不同环境设施内BALB/C裸鼠在2种繁育方式中的生产性能。结果显示,4组裸鼠的繁殖性能差异在各胎次内不显著(P>0.05),而2种环境中繁育方式为2♀(nu/+):1♂(nu/nu)组中纯合仔鼠离乳率均高于1♀(nu/+):1♂(nu/nu)组。SPF屏障系统和IVC独立通风系统均能保证BALB/C裸鼠的正常生产繁殖性能,2♀(nu/+):1♂(nu/nu)的繁育方式可提高纯合仔鼠离乳率。

青天葵总黄酮对人鼻咽癌CNE-2荷瘤裸鼠皮下肿瘤的抑制作用

目的:研究青天葵总黄酮(TFNF)对BALB/c裸鼠人鼻咽癌细胞皮下种植模型中TGF-β1/Erk/MAPK通路的调控作用。方法:BALB/c裸鼠皮下接种CNE-2细胞(1.0×107细胞/ml)建立鼻咽癌荷瘤模型,苏木精-伊红染色(HE)行病理判断,免疫组化法(IHC)观察细胞周期调节蛋白-67(Ki67)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。免疫印迹法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、细胞外调节蛋白激酶(Erk)、p-Erk、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、p-MAPK的蛋白表达水平。试剂盒法评估肾脏、肝脏、脾脏中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平。结果:与模型组比较,高剂量TFNF显著抑制荷瘤小鼠肿瘤体积与质量,显著降低Ki67(55.19%)、PCNA(46.65%)表达水平,提高肾脏、肝脏、脾脏中SOD水平至3.88、2.98、3.71U/mgprot,降低肾脏、肝脏、脾脏的MDA水平至2.19、1.05、2.85nmol/mgprot。TFNF可降低肿瘤组织中TGF-β1(47.36%)、p-Erk/Erk(81.13%)、p-MAPK/MAPK(19.80%)的蛋白表达水平。结论:TFNF可调控TGF-β1/Erk/MAPK通路抑制肿瘤生长,并减轻荷瘤裸鼠主要脏器的氧化损伤发生。

白介素-18对肝癌裸鼠皮下移植瘤浸润的CD4+T细胞子集的影响

目的探讨白介素-18(IL-18)影响肝癌裸鼠皮下移植瘤浸润的T细胞子集变化的机制。方法以HepG2细胞在裸鼠皮下接种,形成人肝癌皮下移植瘤的同时,以不同剂量IL-18分为4组治疗,4组分别腹腔注射IL-18 0.75,1.00,1.25,0(模型组)μg(0.1 mL)/只,治疗4周,另设正常对照组。观察肿瘤的生长速度和瘤体大小的变化。4周后处死取肿瘤组织和脾组织,免疫磁珠阴选组织中CD4+T细胞,流式细胞术检测各组肿瘤组织及脾组织中IL-17+/IFN-γ-CD4+T(Th17细胞)、IL-17-/IFN-γ+CD4+T(Th1)和IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞的变化。结果 HepG2细胞株建立了裸鼠肝癌皮下移植瘤模型,IL-18抑制人肝癌皮下移植瘤的形成及转移,治疗时间越长剂量越大,抑制效果越明显;与正常对照组比较,肿瘤组织中Th17和IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞浸润数目增加,Th1细胞降低,与脾组织中一致,与正常对照组比较有显著差异(P<0.05)。给IL-18后,随着剂量的增加,Th1细胞增加,IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞和Th17细胞浸润数目降低,给药组与模型组比较有显著差异(P<0.05或0.01)。结论 IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞数目在裸鼠移植瘤及其脾组织中增加,可能是在肿瘤环境中,促进其向Th17细胞分化;IL-18通过诱导IFN-γ的生成促进Th1细胞的生成,呈正反馈效应抑制肿瘤的增殖和转移。

3种方法构建BALB/c裸鼠BEL-7402人肝癌模型

【目的】以3种不同方法构建BALB/c裸鼠BEL-7402人肝癌模型,并观察BALB/c裸鼠肿瘤生长情况。【方法】将51只BALB/c裸鼠分为A、B、C 3组,每组17只。A组动物皮下注射0.2 m L BEL-7402人肝癌细胞,B组动物于肝脏原位注射0.05 mL BEL-7402人肝癌细胞与Matrigel Matrix的混合物,C组动物于肝脏原位接种BEL-7402人肝癌细胞瘤块组织。从接种后第2周至第5周,每周测定裸鼠体质量,且每组随机取3只动物解剖取肿瘤测量其大小和质量。第5周后,观察记录各组剩余动物(每组5只)的一般状态和存活天数。采用苏木素—伊红(HE)染色观察肿瘤组织病理学变化。【结果】A、B、C 3组实验动物成瘤率均为100%。5周后,A、B、C 3组剩余动物存活天数分别为(90.8±10.2)、(75.6±14.0)、(67.4±11.1) d。解剖所取肿瘤呈结节状,组织病理学检查可见肿瘤细胞呈一定方向排列,细胞呈梭形、多边形,异型明显,可见核分裂。【结论】本实验所采用的3种不同方法均能成功建立BALB/c裸鼠BEL-7402人肝癌模型。

XRCC2基因沉默联合辐射对结肠癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的探讨sh RNA介导的XRCC2基因沉默联合辐射对结肠癌细胞移植裸鼠肿瘤的疗效。方法将结肠癌T84细胞接种于BALB/c裸鼠建立肿瘤移植模型,分为control组、sh RNA-SC组和sh RNA-XRCC2组。裸鼠经X射线局部照射,检测放射治疗后肿瘤的体积和质量变化,并对肿瘤组织进行病理分析。结果 sh RNA-XRCC2组肿瘤生长速度较缓慢,从放射治疗的第12天开始至放射治疗继续到第28天,sh RNA-XRCC2组瘤体明显较control组减小,差异有统计学意义(P<0.01)。sh RNA-XRCC2组肿瘤质量明显轻于control组,二者比较差异有统计学意义(t=18.843,P<0.01)。sh RNA-XRCC2组裸鼠移植瘤的抑瘤率为56.25%,远远高于sh RNA-SC组(4.69%)。移植瘤组织的病理检查结果表明,sh RNA-XRCC2组肿瘤组织核异型不明显,少见核分裂相,多见坏死区。结论 XRCC2基因沉默联合辐射对裸鼠结肠癌移植瘤具有显著的抑瘤效果。

干扰CD151基因表达对裸鼠宣威肺腺癌XWLC-05细胞肺转移的影响

目的探讨RNA干扰抑制CD151基因表达对宣威肺腺癌XWLC-05细胞侵袭和迁移的影响及裸鼠肺转移的实验。方法构建能高效抑制CD151基因表达的3组重组干扰质粒,筛选出稳定转染干扰质粒的宣威肺腺癌XWLC-05细胞株。MTT、划痕实验、Transwell实验研究干扰CD151基因表达前后对细胞迁移和侵袭的影响。将构建的RNA干扰抑制CD151基因表达的稳转细胞XWLC-05-shRNA、XWLC-05-shNC、XWLC-05-Blank通过尾静脉注射入BALB/c裸鼠,30天后通过肉眼和HE染色后观察肺转移情况。结果划痕实验和Transwell实验表明RNA干扰抑制CD151基因表达可能抑制宣威肺腺癌XWLC-05细胞体外迁移和侵袭作用(P<0.05)。XWLC-05-shRNA、XWLC-05-shNC、XWLC-05-Blank各组裸鼠肺转移率及肺组织上的转移病灶数依次为75%(6/8)与(5.2±1.2)、100%(8/8)与(9.8±1.6)、87.5%(7/8)与(9.1±1.2)。XWLC-05-shNC与XWLC-05-Blank组比较差异无统计学意义(P=0.423),XWLC-05-shRNA与XWLC-05-shNC(P=0.000)和XWLC-05-Blank组比较差异有统计学意义(P=0.000)。结论 RNA干扰抑制CD151基因表达能抑制XWLC-05细胞的体外迁移和侵袭;能减少XWLC-05细胞裸鼠的肺转移。CD151可能成为抑制宣威肺癌侵袭和迁移的潜在治疗靶点之一。

三氯乙烯急性刺激对BALB/c裸鼠皮肤组织病理学和细胞超微结构的影响

目的通过整体动物试验,研究三氯乙烯(TCE)急性刺激对皮肤组织病理学和细胞超微结构的影响,探讨TCE所致皮肤损害的发生机制。方法用体积百分比为20%、40%、80%和100%的TCE涂抹BALB/c裸鼠皮肤4 h,并用橄榄油和蒸馏水作溶剂和空白对照,处理结束时用生理盐水除去残留受试物,1 h后肉眼观察局部皮肤反应,处死动物取染毒部位皮肤,制成切片,光学显微镜和透射电子显微镜(TEM)进行组织病理学和细胞超微结构的观察。结果视觉观察发现TCE涂抹BALB/c裸鼠可引起皮肤红斑和水肿,高剂量组还出现起疱和表皮坏死。组织病理学检查发现TCE处理组动物皮肤出现不同程度的角化过度、细胞间水肿和以中性粒细胞为主的炎性细胞浸润,高剂量组还出现角化不全、胞裂外排和棘层松解等改变;TEM观察显示TCE刺激的皮肤角质形成细胞(KC)胞膜皱缩,胞浆水肿,细胞器拥挤且结构异常,线粒体发生不同程度肿胀甚至空泡样变,核内染色质浓缩靠边聚集等改变。结论结果表明20%TCE对BALB/c裸鼠皮肤具有刺激作用,可引起皮肤组织病理学和细胞超微结构的改变。

莪术油对宫颈癌荷瘤裸鼠凝血功能及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响

目的：观察莪术油对宫颈癌荷瘤裸鼠凝血功能及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响。方法：选取SPF级Balb/c裸鼠60只,建立宫颈癌荷瘤裸鼠动物模型,眼球取血,用SYSMEXCA-7000全自动血凝仪检测各组裸鼠纤维蛋白原（Fib）和D-二聚体（D-dimer）的水平;免疫组化检测Bcl-2,Bax和Caspase-3蛋白表达情况。结果：莪术油中剂量组用量在16mg·kg-1即显示降低荷瘤裸鼠Fib和D-dimer的水平（P〈0.05）,莪术油高剂量组用量在32mg·kg-1时与模型组间差异具有显著性（P〈0.01）,且已经接近正常组;莪术油中剂量组和莪术油高剂量组可下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax的表达,激活Caspase-3,且优于模型组（P〈0.05或P〈0.01）。结论：莪术油用量在16mg·kg-1～32mg·kg-1可改善宫颈癌荷瘤裸鼠的血液高凝状态,发挥抗血栓形成作用,下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax的表达,减低Bcl-2/Bax比值,提升Caspase-3值。

液质联用法同时测定埃罗替尼及其活性代谢产物OSI-420在BALB/c裸鼠体内的浓度及其药代动力学研究(英文)

本试验建立了一种简单快速灵敏的液质联用方法, 用以同时测定裸鼠血浆内埃罗替尼及其活性代谢物OSI-420的浓度。采用液液萃取法从血浆中提取埃罗替尼, OSI-420和内标普萘洛, 用C18反相柱进行分离, 流动相为乙腈-5 mM甲酸铵 (35:65, v/v, pH = 3.0)。所有化合物均采用电喷雾电离源, 正离子方式检测。埃罗替尼和OSI-420的最低定量下限均为0.5 ng/mL。埃罗替尼的准确度在0.07%-8.00%范围内, OSI-420准确度在-2.83%-6.67%范围内; 埃罗替尼精密度在2.28%-15.12%范围内, OSI-420精密度在1.96%-11.50%范围内。此方法应用于BALB/c裸鼠口服12.5 mg/kg埃罗替尼的药代动力学研究中, 并用二室模型拟合埃罗替尼的药代动力学, 一室模型拟合OSI-420的药代动力学。代谢为OSI-420的埃罗替尼占埃罗替尼总量的10%, 比文献中的这一比值大一倍, 表明种属间埃罗替尼的代谢存在差异。

趋化因子fractalkine对裸鼠胰腺癌移植瘤生物学活性的影响

目的探讨趋化因子fractalkine(FKN)通过JAK2/STAT3信号通路对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤生物学活性的影响。方法培养人胰腺癌细胞株PANC-1,以慢病毒为载体构建FKN-siRNA,建立裸鼠胰腺癌皮下肿瘤模型,观察肿瘤生长情况。试验分为对照组、FKN-siRNA阴性组(即只含有病毒载体组)和FKN-siRNA组,采用Western blot法检测各组肿瘤中FKN、JAK2、p-JAK2、STAT3及p-STAT3蛋白的表达。RT-qPCR法检测各组中FKN、JAK2和STAT3 mRNA的表达。结果 FKN-siRNA组肿瘤平均体积和质量均低于对照组和FKNsiRNA阴性组(P均<0.05)。Western blot检测结果显示,与对照组和FKN-siRNA阴性组相比,FKN-siRNA组FKN、JAK2、p-JAK2及p-STAT3蛋白表达量下降(P均<0.05)。RT-qPCR法检测结果,FKN-siRNA组FKN、JAK2及STAT3 mRNA的相对表达量较对照组和FKN-siRNA阴性组下降(P均<0.05)。结论 FKN可能是通过调控JAK2/STAT3信号通路促进胰腺癌生长。

Rncat白内障小鼠、BALB/c系裸鼠和慢性束缚应激KM小鼠的高架十字迷宫行为比较

比较Rncat白内障小鼠、BALB/c系裸鼠和28天慢性束缚应激KM小鼠在高架十字迷宫的焦虑行为表现。通过28 d慢性束缚应激手段建立KM雌性小鼠焦虑模型,三种品系的雌性小鼠分为5组,Rncat白内障小鼠(组1),BALB/c系纯合子(nu/nu)裸鼠(组2)、BALB/c系纯合子(nu/+)裸鼠(组3),束缚应激小鼠(组4),空白组(组5),每组20只雌性小鼠。记录各组小鼠在高架迷宫实验中焦虑行为数据(进入开放臂次数、向下探究次数、封闭臂后腿直立次数和进入开放臂时间等)。Rncat先天性白内障小鼠(组1)、慢性束缚应激KM小鼠(组4)的入开臂次数、入开臂次数比例、入开臂时间和入开臂时间比例差异不显著,但与BALB/c系裸鼠(组2、3)、空白组(组5)小鼠相比,差异均有统计学意义(P<0.01)。此次实验中,Rncat先天性白内障小鼠、慢性束缚应激KM小鼠雌性小鼠焦虑行为表现最低。

纳秒脉冲电场治疗裸鼠皮下人恶性黑色素瘤模型的长期效应

为研究ns脉冲电场(nsPEF)对在体肿瘤的长期杀伤效应,以接种人恶性黑色素瘤A375细胞的BALB/c裸鼠为研究对象,采用电压幅值为4kV、脉冲宽度为200ns、重复频率为1Hz的ns脉冲电场进行治疗。肉眼观察结果表明,瘤体随时间推移而逐渐消褪直至消失,且皮肤恢复完好,原位瘤在平均2周时间内完全消失;瘤体生长抑制情况检测结果表明,与对照组相比,治疗组裸鼠肿瘤体积明显缩小(检验水准P<0.05),随着生存时间延长,对照组和治疗组肿瘤生长速度差别增大;荷瘤裸鼠的存活率-时间关系研究结果表明,ns脉冲电场治疗后26d时间内,对照组裸鼠全部死亡,而治疗组裸鼠存活率高达100%。实验结果表明ns脉冲电场能有效抑制肿瘤组织的生长,并可大大提高荷瘤BALB/c裸鼠的长期存活率。

裸鼠皮下人恶性黑色素瘤在纳秒脉冲电场下的凋亡机制

为研究ns脉冲电场(nsPEF)治疗在体肿瘤的生物电效应机制,以接种人黑色素瘤细胞A375的BALB/c裸鼠为研究对象,采用电压幅值为4kV、脉冲宽度为200ns、重复频率为1Hz的脉冲电场进行处理。用凝胶电泳法检测脉冲处理后的DNA Ladder分布情况表明,与对照组相比,处理组有明显阶梯状分布,即细胞发生凋亡。用TUNEL法检测肿瘤组织的凋亡情况表明,处理组表现出较高凋亡率(检验水准P<0.01)。用Western blot法和免疫组织化学方法检测脉冲处理后肿瘤组织中促凋亡蛋白Bax、凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达量情况,2者共同表明,与对照组相比,处理组Bax表达量显著升高(P<0.01),而Bcl-2表达量明显降低(P<0.01)。实验结果揭示nsPEF通过Bax、Bcl-2基因调控作用来诱导肿瘤凋亡。