针灸对急性带状疱疹患者血液c-FLIP表达的影响

目的:观察针灸对急性带状疱疹患者血液c-FLIP表达的影响,初步探讨其治疗带状疱疹的机制。方法:选择急性带状疱疹患者25例,随机分为药物治疗组(P组,n=13)和针灸治疗组(A组,n=12),选择12例正常人作为对照。P组采用抗病毒、营养神经和镇痛药物治疗,A组在相同药物治疗基础上加针灸治疗。比较两组患者治疗前、治疗后7 d VAS评分和皮疹愈合时间;Western-blot法检测c-FLIP表达,比较正常对照组与急性带状疱疹患者及两组患者治疗前、后血液c-FLIP表达情况。结果:两组患者治疗后VAS评分较治疗前均明显减少(P<0.01),治疗后组间VAS评分比较差异无统计学意义,A组皮疹愈合时间短于P组(P<0.01);急性带状疱疹患者c-FLIP表达比正常人表达明显降低(P<0.01),A组治疗后较治疗前表达升高(P<0.01),P组治疗前、后表达无明显变化。结论:针灸可以调节急性带状疱疹患者血液c-FLIP表达,促进皮疹愈合。这可能是针灸治疗带状疱疹的细胞免疫机制之一。

c-FLIPmRNA在大肠癌细胞中的表达及其与Fas抗原表达的相关性

目的 :探讨 c FL IP(细胞型 Fas相关死亡区域蛋白样白介素 - 1β转换酶抑制蛋白 ) m RNA在大肠癌细胞中的表达及其与 Fas抗原 (CD95 )表达的相关性。方法 :应用 RT- PCR方法检测 3株人大肠癌细胞株中 c- FL IP m RNA的表达 ,采用间接免疫荧光标记流式细胞术检测大肠癌细胞 Fas抗原表达。结果 :SW1116及 SW6 2 0细胞株 c- FL IP m RNA表达阳性并相对高水平表达 Fas抗原 ,而 L o Vo细胞株 c- FL IP m RNA表达阴性并低水平表达 Fas抗原。结论 :在大肠癌细胞中 ,c- FL IP m RNA的表达趋势与 Fas抗原一致 ,提示 c- FL IP可能在抑制 Fas抗原诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。

凋亡相关基因Bax、FasL、c-FLIP在浆液性卵巢癌中的表达

目的:探讨凋亡相关基因Bax、Fas L、c-FLIP在浆液性卵巢癌中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学SP法及实时定量PCR法检测卵巢浆液性囊腺瘤(16例)、交界性浆液性囊腺瘤(25例)、浆液性囊腺癌(48例)组织中Bax、Fas L、c-FLIP蛋白及mRNA的表达情况。结果:Bax、Fas L、c-FLIP在卵巢浆液性囊腺瘤组织的细胞浆中未见明显的棕黄色颗粒沉着,而在交界性浆液性囊腺瘤、浆液性囊腺癌组织的细胞浆中可见明显的棕黄色颗粒沉着,其中以浆液性囊腺癌阳性表达最高。与卵巢浆液性囊腺瘤组相比,交界性浆液性囊腺瘤、浆液性囊腺癌中Bax、Fas L、c-FLIP mRNA表达显著增高(P<0.05)。结论:Bax、Fas L、c-FLIP凋亡相关基因在卵巢癌中蛋白及mRNA的表达呈一致升高趋势,可能通过调控凋亡相关途径共同参与了卵巢癌的发生发展过程,为临床上卵巢癌防治提供新靶点。

白血病c-FLIP mRNA表达的初步研究

目的:探讨c-FLIP mRNA在白血病中的表达及其意义。方法:应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测37例白血病骨髓单个核细胞c-FLIP mRNA的表达。包括急性白血病(AL)27例,其中初治21例及复发和完全缓解(CR)后AL各3例、慢性粒细胞性白血病(CML)5例、慢性中性粒细胞性白血病(CNL)1例和慢性淋巴细胞性白血病(CLL)4例。结果:在初治和复发AL、初治CML、CNL、CLL中c-FLIP mRNA均呈异常增高表达,初治AL中c-FLIP mRNA的表达与复发AL比较差异无统计学意义(P>0.05),其FAB各亚型之间的表达差异亦无统计学意义(P>0.05)。初治AL与CLLc-FLIP mRNA的表达显著高于初治CML(P<0.001),但初治AL与初治CLL比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组和CR后AL均为阴性表达。c-FLIP mRNA的表达与初治AL患者年龄、性别、初诊白细胞数、LDH以及核型、免疫表型无关。初治未达CR的AL患者其c-FLIP mRNA表达高于CR者,但并无统计学意义(P>0.05)。结论:白血病c-FLIP mRNA的表达异常增高。c-FLIP mRNA能反映白血病细胞的凋亡抑制情况,并与白血病的类型、疾病状态、临床疗效和预后密切相关。

c-FLIP/BCL-2/Ki-67在膀胱移行细胞癌中的表达与临床病理学特征及对预后影响的研究

目的研究膀胱癌中c-FLIP、BCL-2、Ki-67的表达与肿瘤分期、分级和生长方式以及病人预后的关系,从而为膀胱移行细胞癌侵袭性和预后的判断提供科学理论依据。方法收集56例临床资料完整石蜡包埋的肿瘤标本,用免疫组化SABC法测定c-FLIP、BCL-2和Ki-67的表达,采用SPSS12.0软件包分析其表达与肿瘤组织学性状的关系以及对病人预后的影响。结果c-FLIP、BCL-2和Ki-67的阳性表达在56个病例中分别为:64%(36/56)、43%(24/56)和59%(33/56);c-FLIP和BCL-2的阳性表达在不同分期组间差异具有显著性(P=0.012,P=0.035),而在不同的分级和不同的生长方式组间二者的阳性表达差异无显著性(P>0.10);Ki-67的阳性表达在不同的分级和分期组间差异均有显著性(P=0.048,P=0.020);单因素生存分析发现生长方式、分期、c-FLIP、Bcl-2、Ki-67对生存影响具有显著性意义(P<0.05),多因素生存分析发现c-FLIP、生长方式和分期对生存影响具有显著性意义。结论c-FLIP对评价膀胱癌的侵袭性和对预后的影响是一个重要的独立因素,Bcl-2、Ki-67对评价膀胱癌的侵袭性和预后也有一定的意义。检测膀胱移行细胞癌组织中的c-FLIP、Bcl-2和Ki-67的表达可作为估计病情发展判断患者预后的重要指标。

c-FLIP:外源性细胞凋亡途径的调控器

细胞型Fas相关死亡区域蛋白样白介素-1!转换酶抑制蛋白(FADD-likeinterleukin-1-"convertingenzymeinhibitoryprotein,c-FLIP),是一类含有死亡效应结构域(thedeatheffectordomain,DED)的天然存在的caspase抑制蛋白,在病毒、真核生物、哺乳动物等物种中广泛存在.近年发现,c-FLIP参与了细胞凋亡的调控,其过量表达能抑制Fas、TRAIL-R等死亡受体介导的细胞凋亡.随着对c-FLIP作用机理及其分子调节机制的深入研究,发现c-FLIP具有多种生物学功能,并与多种疾病的发生、发展相关.

c-FLIP在恶性血液病中的表达及其临床相关性研究

目的探讨c-FLIP基因在血液肿瘤中的表达以及临床意义。方法以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测22例血液肿瘤骨髓中的c-FLIP m RNA表达,Western-Blot蛋白质印迹(WB)方法检测其c-FLIP蛋白的表达。病例包括急性白血病(AL)12例(其中初治11例及反复复发1例)、完全缓解(CR)后AL 2例、慢性粒细胞性白血病(CML)2例、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)2例、多发性骨髓瘤(MM)2例和骨髓增生异常综合征-难治性贫血伴原始细胞增多2型(MDS-RAEB-2)2例。结果初治和复发AL,初治CML、CLL、MDS-RAEB-2、MM患者c-FLIP m RNA和蛋白均表达异常增高。初治AL c-FLIP m RNA及43 k D蛋白的表达显著高于慢性白血病(CL)(P<0.05)。MDS-RAEB-2、MM与ALc-FLIP m RNA的表达差异均无统计学差异(P>0.05),但MDS 55 KD、43KD蛋白表达明显低于AL(P<0.05),而MM无明显差异。对照组m RNA及其蛋白均阴性表达,CR后AL m RNA阴性表达,但其蛋白均有表达,低表达于AL,尤其43 k D明显低于AL(P<0.05)。c-FLIP表达在初治AL患者与其年龄、性别、初诊白细胞数、LDH以及核型、免疫表型无关。AL患者c-FLIP m RNA及其蛋白表达与初治疗效无明显相关性(P>0.05)。结论血液肿瘤患者c-FLIP m RNA及其蛋白表达异常增高,能够反映出恶性血液病患者骨髓造血细胞的凋亡抑制情况,与恶性血液病的类型、疾病的状态以及病程中的临床疗效、预后等都密切相关。

miR-150靶向调控c-FLIP对结肠癌HT-29细胞自噬影响的实验研究

目的探讨上调结肠癌细胞miR-150表达对自噬的影响以及可能调控机制。方法体外培养HT-29细胞,转染miR-150 mimics或细胞型Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白(c-FLIP)基因,分为空白对照组、阴性对照组、miR-150 mimics组和miR-150 mimics+c-FLIP组,实时荧光定量PCR(q PCR)鉴定转染效果。q PCR检测各组miR-150和cFLIP mRNA表达;Western blotting检测各组自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ)、Beclin 1以及c-FLIP蛋白表达。采用细胞免疫荧光染色观察各组细胞自噬的情况。采用双荧光素酶报告实验验证miR-150与c-FLIP的靶向关系。结果 miR-150 mimics组和miR-150 mimics+c-FLIP组miR-150表达水平分别为2. 25±0. 13和2. 19±0. 16,均高于空白对照组的1. 00±0. 09和阴性对照组的1. 02±0. 13,差异有统计学意义(P<0. 05)。miR-150 mimics组c-FLIP mRNA和蛋白表达水平明显低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0. 05);而miR-150 mimics+c-FLIP组c-FLIP mRNA和蛋白表达水平均高于空白对照组、阴性对照组和miR-150 mimics组,差异有统计学意义(P<0. 05)。miR-150 mimics组细胞Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白表达量明显高于空白对照组和阴性对照组;miR-150 mimics+c-FLIP组细胞Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白表达量低于空白对照组、阴性对照组和miR-150 mimics组。miR-150 mimics组自噬细胞阳性率为(52. 92±6. 63)%,高于空白对照组的(33. 54±5. 40)%和阴性对照组的(31. 05±4. 97)%,差异有统计学意义(P<0. 05);miR-150 mimics+c-FLIP组自噬细胞阳性率为(22. 50±4. 38)%,低于空白对照组、阴性对照组、miR-150 mimics组。双荧光素酶报告基因实验证实c-FLIP是miR-150的下游靶基因。结论上调miR-150表达可通过负性调控c-FLIP提高结肠癌细胞HT-29的自噬活性。

c-FLIP及Caspase-8表达在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨凋亡相关蛋白c-FLIP和Caspase-8在人乳腺癌组织中的表达及相关性,分析其与乳腺癌转移复发的关系。方法应用免疫组织化学法检测80例乳腺癌组织和相应的癌旁组织中c-FLIP和Caspase-8的表达情况。结果 80例乳腺癌组织中c-FLIP表达的阳性率显著高于相应的癌旁组织(P<0.05),c-FLIP的表达与TNM分期、组织学分级、腋窝淋巴结转移、术后复发及C-erbB-2表达密切相关(P<0.05);Caspase-8表达的阳性率显著低于相应的癌旁组织(P<0.05),Caspase-8的表达与组织学分级、肿瘤大小密切相关(P<0.05)。c-FLIP表达和Caspase-8表达有显著负相关性(γ=-0.380,P=0.001)。结论 c-FLIP的高表达及Caspase-8表达缺失可能在乳腺癌发生发展中起重要作用。

T-bet和c-FLIP双基因共表达质粒的构建及生物学活性检测

目的构建携带T-bet和c-FLIP双基因的真核表达载体及检测其生物学活性。方法采用RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞的总RNA中扩增出T-bet和c-FLIPcDNA,利用pIRES和pEGFP-C1,构建T-bet和c-FLIP双基因真核表达载体pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP。采用非脂质体的脂质型介导载体将pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP转染至外周血淋巴细胞,观察T-bet和c-FLIP在外周血淋巴细胞中的表达,并检测其诱导淋巴细胞的抗凋亡作用及Th1/Th2细胞偏移。结果成功构建pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP质粒,运用非脂质体的脂质型介导载体将该质粒转染淋巴细胞,其转染率为34.6%。流式细胞仪分析未经pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP预处理的淋巴细胞在CH-11作用24h后,细胞的凋亡率分别为(50.12±8.02)%;经pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP预处理1d的淋巴细胞,其细胞凋亡率分别下降到(5.73±0.37)%;双基因表达的淋巴细胞的Th1型细胞因子IFN-γ表达水平明显高于空载体表达的淋巴细胞及未经处理的淋巴细胞组(P<0.01),且Th2型细胞因子IL-4表达水平较空载体表达的淋巴细胞及未经处理的淋巴细胞低(P<0.01),差异有统计学意义。结论转染T-bet和c-FLIP共表达基因后的T淋巴细胞可产生抗凋亡作用及向Th1细胞分化。

载c-FLIP反义寡核苷酸聚乳酸聚羟乙酸纳米粒的制备及特性评价

目的研究c-FLIP反义寡核苷酸(c-FLIPantisenseoligodeoxynucleotide,c-FLIP ASODN)的聚乳酸聚羟乙酸(PL-GA)纳米粒的制备工艺,并通过实验对纳米粒子进行评价。方法通过二次超声乳化和溶剂挥发技术将PLGA用于基因导入的载体制备,并评价载c FLIP ASODN的PLGA纳米粒的特性,包括粒子形态、包封率和保护作用等。结果制备的纳米粒子外观呈规则的球形,其粒径尺寸平均为95.5nm,平均包封率为48%,载药量为(0.579±0.016)%,体外释放达15d,经过PLGA纳米粒的包裹,对c FLIP ASODN起到保护作用。结论纳米粒包裹的c FLIP ASODN制备工艺简便,粒子性状符合要求,并能有效保护反义寡核苷酸免于核酸酶的降解而延长其作用时间。

白藜芦醇通过c-FLIP蛋白影响乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长和侵袭

目的观察白藜芦醇(RES)抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231生长和侵袭的作用是否是通过抑制c-FLIP的表达来实现的。方法重组腺病毒载体Ad-c-FLIP的构建及鉴定、转染乳腺癌细胞,通过qRT-PCR、RT-PCR和Western印迹观察c-FLIP的表达情况;MTT比色法检测空白对照组;RES100μg/ml组;100μmol/L RES+Ad-GFP-c-FLIP组;Ad-GFP-c-FLIP组在24 h,48 h和72 h内对乳腺癌细胞增殖的影响;流式细胞仪和Transwell实验分别检测各组在作用48 h后乳腺癌细胞的凋亡和侵袭情况;Western印迹检测各组在作用48 h后caspase-3、-8、MMP-2、-9的表达情况。结果qRT-PCR、RT-PCR和Western印迹检测结果显示Ad-GFP-c-FLIP明显增强c-FLIP的表达,而与Ad-GFP-c-FLIP组比较RES+Ad-GFP-c-FLIP组明显抑制c-FLIP的表达;与Ad-GFP-c-FLIP组相比RES+Ad-GFP-c-FLIP组乳腺癌细胞的生长明显被抑制(P<0.05),并且随时间的延长抑制作用明显加大;与Ad-GFP-c-FLIP组相比RES+Ad-GFP-c-FLIP组乳腺癌细胞的侵袭能力明显被抑制,而乳腺癌细胞的凋亡明显增加(P<0.05);Western印迹检测结果显示,作用48 h后与Ad-GFP-c-FLIP组比较白藜芦醇+Ad-GFP-c-FLIP组MMP-2,-9表达被抑制,而caspase-3,-8表达被增强。结论 RES可以通过降低c-FLIP的表达来抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长和侵袭。

c-FLIP及突变p53蛋白表达与膀胱癌预后关系的研究

目的研究膀胱癌中细胞型Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白(c-FLIP)、突变p53蛋白的表达与膀胱癌预后的关系。方法采用免疫组织化学方法测定82例膀胱癌组织和10例正常膀胱黏膜中c-FLIP和突变p53蛋白的表达。膀胱癌患者中,男66例,女16例,年龄45～90岁。2002年TNM分期Ta～T129例、T2～T453例。WHO1973年病理分级G1级12例、G2级41例、G3级29例。结合临床资料分析其与膀胱癌分期、分级、复发的相关性。采用SPSS 13.0软件包分析其表达与肿瘤组织学性状的关系以及对患者预后的影响。结果82例膀胱癌组织中c-FLIP的阳性表达率为62.2%(51/82),其中Ta～T1肿瘤阳性表达率为37.9%,T2～T4肿瘤阳性表达率为75.5%;突变p53蛋白的阳性表达率为45.1%(37/82),其中Ta～T1肿瘤阳性表达率为24.1%,T2～T4肿瘤阳性表达率为56.6%。10例正常膀胱黏膜中c-FLIP和突变p53蛋白的表达均为阴性。c-FLIP与p53蛋白在不同的分期组间阳性表达差异均有统计学意义(P<0.05);生存分析发现c-FLIP与突变p53蛋白表达对生存具有明显影响(P<0.05)。结论c-FLIP与突变p53蛋白对评价膀胱癌的侵袭性和预后都是一个重要的独立因素。膀胱肿瘤组织中的c-FLIP及突变p53蛋白表达缺失提示患者预后较好。

c-FLIP在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨c-FLIP(细胞型Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白)在骨肉瘤组织中的表达情况,分析其表达与临床病理特征和预后的关系。方法:收集47例临床资料完整石蜡包埋的骨肉瘤肿瘤标本,25例骨软骨瘤标本,8例正常的骨组织标本,用免疫组化SP法和蛋白质印记法测定c-FLIP的表达水平,分析其表达与肿瘤组织学性状和预后的关系。结果:骨肉瘤标本中c-FLIP表达的阳性率是83%(39/47),而在骨软骨瘤标本中表达的阳性率是16%(4/25),两者比较P<0.01;结合临床资料分析,c-FLIP蛋白表达与患者年龄、发病次数、肿瘤体积、病理类型及有无转移无关(P>0.05),而与临床Ennecking分期有关(P<0.05)。结论:c-FLIP蛋白的过量表达在骨肉瘤的发生发展中可能起重要的作用。

c-FLIP和NF-κB p65在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨凋亡相关蛋白c-FLIP和NF-κB p65在人乳腺癌的表达及相关性,分析其与乳腺癌转移复发的关系。方法:应用免疫组织化学法检测80例乳腺癌组织和相应的癌旁组织中c-FLIP和NF-κBp65的表达情况。结果:80例乳腺癌组织中c-FLIP及NF-κB p65表达的阳性率显著高于相应的癌旁组织(P<0.05),c-FLIP的表达与TNM分期、组织学分级、腋窝淋巴结转移、术后复发及C-erbB-2表达密切相关(P<0.05);NF-κB p65的表达组织学分级、肿瘤大小及腋窝淋巴结转移密切相关(P<0.05)。c-FLIP和NF-κB p65的表达有显著正相关性(γ=0.271,P=0.015)。结论:c-FLIP和NF-κB p65的高表达可能在乳腺癌的发生及进展中起着重要作用。

c-FLIP-L影响乳腺癌MDA-MB-231细胞对TRAIL致凋亡作用的敏感性

目的:观察c-FLIP-L对TRAIL诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其具体机制。方法:构建靶向c-FLIP-L的siRNA质粒,转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,RT-PCR、Weston blotting验证基因抑制效果。实验分空白对照组、TRAIL组、c-FLIP-L siRNA组和c-FLIP-L siRNA+TRAIL组共4组,MTT法检测各组MDA-MB-231细胞的增殖情况,流式细胞术检测MDA-MB-231细胞凋亡率,Transwell实验检测MDA-MB-231细胞侵袭能力,RT-PCR、Western blotting检测MDA-MB-231细胞中c-FLIP-L、caspase-3、caspase-8、MMP-2、MMP-9的表达。结果:靶向c-FLIP-L的siRNA质粒转染至乳腺癌细胞株可有效抑制c-FLIP-L mRNA[(37.12±3.02)vs(183.21±8.31),(174.65±10.06);P<0.05]及其蛋白的水平。c-FLIP-L siRNA和TRAIL联合处理MDA-MB-231细胞,与两者单独处理相比,细胞增殖抑制率显著升高[72 h时,(75.51±2.01)%vs(33.75±1.60)%,(34.31±2.01)%;均P<0.05],凋亡率显著升高[72 h时,(76.30±4.11)%vs(38.95±2.14)%,(29.28±1.66)%;均P<0.05],对细胞侵袭能力的抑制也显著增强。c-FLIP-L siRNA和TRAIL联合处理后,与两者单独处理相比,乳腺癌细胞中casepase-3、casepase-8的表达显著增强,而MMP-2、MMP-9的表达明显减弱。结论:抑制c-FLIP-L表达能够增强MDA-MB-231细胞对TRAIL的敏感性,从而提高诱导肿瘤细胞凋亡的能力,其机制可能与caspase-3、caspase-8的表达上调和MMP-2、MMP-9的表达下调有关。

MTT法检测C-FLIP反义寡核苷酸对BGC823细胞的抑制效果

目的探讨脂质体Lipofectamine2000介导下c-FLIP反义寡核苷酸对胃癌细胞系BGC823生长的抑制作用。方法RT-PCR和Western Blot方法检测c-FLIPL/S的mRNA和蛋白的表达变化;原位末端标记法、流式细胞术检测细胞凋亡;MTT法检测细胞抑制率。结果Western Blot可见c-FLIPL和c-FLIPS蛋白表达显著下降;反义寡核苷酸作用细胞36 h后,TUNEL检测可见明显阳性染色,流式细胞分析发现在G1峰前出现凋亡峰;MTT显示脂质体介导反义寡核苷酸可显著抑制BGC823细胞增殖。结论c-FLIPL、c-FLIPSmRNA和蛋白在Hela、BGC823细胞中表达。脂质体介导c-FLIP反义寡核苷酸转染BGC823细胞后抑制目的蛋白表达,抑制细胞生长、促进凋亡,其作用呈剂量依赖性。研究靶向c-FLIP的反义基因治疗药物可能为胃癌的临床治疗提供新的方法和思路。

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中TRAIL、c-FLIP等表达水平及临床意义

目的:分析类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL、c-FLIP、caspase-8等基因表达情况,探讨其在RA中的临床意义,为RA的临床诊治寻找更有效的途径和方法提供实验基础。方法:采用实时荧光定量PCR的方法检测外周血单个核细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL、c-FLIP、caspase-8 mRNA表达水平;采用蛋白免疫印迹法检测PBMC中TRAIL、c-FLIP、caspase-8蛋白表达水平。结果:各组RA患者PBMC的TRAIL、c-FLIP、caspase-8的mRNA表达水平:中活动组(M)中TRAIL的mRNA为(3.26±0.78),高于健康对照(N)(1.30±0.20,P=0.028)。低活动组(L)和高活动组(H)(1.56±0.37、1.83±0.26),略高于健康对照(N)(P=0.048、0.043);L、M、H组c-FLIP mRNA相对表达量分别为1.27±0.28,1.32±.34,1.93±0.40,均高于N组1.08±0.12(P分别为0.035、0.034、0.030),差异有统计学意义;caspase-8 mRNA L、M、H组中分别为(2.77±0.97)、(4.52±0.85)、(2.13±0.44),均高于N组(1.04±0.13,P=0.023,0.012,0.032)。RA患者PBMC中TRAIL、c-FLIP、caspase-8蛋白表达:M组TRAIL蛋白表达明显高于N组(P=0.013),H组稍高于N组(P=0.043),L组与N组无明显统计学差异(P=0.058),M组明显高于L、H组(P=0.011,0.021);c-FLIP蛋白表达中M组明显高于N组(P<0.01),而L、H组与N组无显著差异(P=0.062,0.053);L组表达与N组无显著差异(P>0.05),而M、H组caspase-8蛋白表达明显高于N组(P=0.003,0.001)。结论:在RA的不同活动期中,外周血单个核细胞TRAIL、c-FLIP和caspase-8等表达水平总体趋势增加,可为RA的临床诊治及后续研究提供实验参考。

PEDF和C-FLIP在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨大肠癌组织中pigment epithelium-derived factor(PEDF)和celluar FLICE-inhibitory protein(C-FLIP)的表达及其与大肠癌临床病理因素之间的关系以及其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测45例大肠癌及15例癌旁组织内PEDF和C-FLIP的表达情况。结果45例大肠癌中的PEDF和C-FLIP的表达率分别是:42%(19/45)和71%(32/45),15例癌旁正常组织中PEDF和C-FLIP的表达率分别为100%(15/15)和6.7%(1/15)。PEDF的表达与肿瘤的浸润深度、分化程度、淋巴结转移、远处转移及临床分期呈负相关。C-FLIP的表达与肿瘤的浸润深度,淋巴结转移,临床分期呈正相关。PEDF与C-FLIP表达呈负相关(P<0.05)。结论PEDF可抑制大肠癌的进展,C-FLIP在大肠癌的发生发展中起促进作用。联合检测PEDF和C-FLIP的表达水平,有助于判断病情,对患者的治疗及预后评估具有一定的临床价值。

c-FLIP反义寡核苷酸诱导胚胎型横纹肌肉瘤细胞凋亡的研究

目的探讨c-FLIP反义寡核苷酸(c-FLIPantisenseoligodeoxynucleotide,c-FLIP-ASODN)对c-FLIP的表达调控及诱导人胚胎型横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞凋亡的作用。方法以脂质体为载体,将c-FLIP-ASODN及对照序列分别转染RD细胞,分别通过WesternBlotting、RT-PCR方法检测ASODN对c-FLIP蛋白和mRNA表达量的调控,用流式细胞术测定ASODN干预前后RD细胞凋亡率的变化。结果与对照序列相比,Western印迹显示,转染了c-FLIP-ASODN的RD细胞其FLIPS和FLIPL的表达量分别下降为空白对照组的51%和57%;RT-PCR检测表明c-FLIP-ASODN能抑制c-FLIPmRNA的表达;诱导凋亡48h后,转染c-FLIP-ASODN的RD细胞凋亡率升高(29.3±6·3)%.结论c-FLIP-ASODN可有效转染RD细胞,下调c-FLIPmRNA表达,从而诱导RD细胞的凋亡,成为眼眶RD基因治疗的新靶向。