脂肪干细胞对绝经后骨质疏松大鼠c-Fos、c-Jun表达的影响

目的研究脂肪干细胞移植对绝经后骨质疏松模型大鼠c-Fos、c-Jun表达的影响。方法将3月龄雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组:假手术组、骨质疏松模型组与脂肪干细胞移植组。假手术组仅摘除大鼠卵巢周围的脂肪组织,骨质疏松组、脂肪干细胞移植组摘除大鼠双侧卵巢组织。造模成功后,脂肪干细胞组给予2×10^7个脂肪干细胞尾静脉注射,假手术组和骨质疏松组给予等量生理盐水尾静脉注射,每周1次。8周后,检测各组大鼠骨密度、骨形态、骨代谢指标及c-Fos、c-Jun表达。结果与假手术组比较,骨质疏松组大鼠右侧股骨中骨保护素(OPG)的表达量及血清中骨碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)、总I型胶原氨基端延长肽(PINP)的含量均明显降低(P<0.05),右侧股骨中破骨细胞分化因子(RANKL)的表达量及血清中抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRAP-5b)的含量明显增加(P<0.05);与骨质疏松组比较,脂肪干细胞组大鼠右侧股骨中OPG的表达量及血清中BALP、BGP、PINP的含量均明显增加(P<0.05),右侧股骨中RANKL的表达量及血清中TRAP-5b的含量明显降低(P<0.05);与假手术组比较,骨质疏松组大鼠右侧股骨中c-Fos、c-Jun的表达量明显降低(P<0.05);与骨质疏松组比较,脂肪干细胞组大鼠右侧股骨中c-Fos、c-Jun的表达量明显增加(P<0.05)。结论脂肪干细胞移植能够改善绝经后骨质疏松大鼠的骨代谢并增加c-Fos、c-Jun的表达。

柚皮苷对乳鼠成骨细胞增殖及c-fos、c-jun表达的影响

目的研究柚皮苷(naringin)对体外培养的小鼠成骨细胞增殖及c-fos和c-jun表达的影响。方法取第1代BALB/c小鼠颅盖骨成骨细胞,将柚皮苷以0.1、1、10μmol·L-1 3种浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,MTT法观察各组对成骨细胞的增殖作用并绘制细胞生长曲线,用PNPP法测定成骨细胞内碱性磷酸酶(alkaliphos-phatase,ALP)活性,RT-PCR法检测成骨细胞c-fos和c-jun的转录水平。结果细胞生长曲线显示各组成骨细胞数量均随时间延长而增加,中、高浓度的柚皮苷能提高成骨细胞的ALP活性,促进c-fos mRNA表达(P<0.01),对成骨细胞c-jun mRNA表达增强作用不明显(P>0.05)。结论低浓度柚皮苷(0.1μmol·L-1)对骨更新作用不明显,而中、高浓度的柚皮苷(1、10μmol·L-1)能通过上调c-fos mRNA表达,促进成骨细胞的生成功能,增强骨更新。柚皮苷不是通过促进c-jun表达来促进成骨细胞增殖与分化的。

姜黄素对沙土鼠脑缺血/再灌注损伤的海马CA1区细胞凋亡和即早基因c-fos、c-jun、NF-κB表达变化的关系

目的探讨姜黄素对沙土鼠海马CA1区缺血/再灌注损伤的影响及与即早基因c-fos、c-jun、NF-κB在海马CA1区表达的关系及意义。方法采用沙土鼠双侧颈总动脉阻断缺血/再灌注损伤模型。动物随机分为假手术组(SH)、脑缺血/再灌注组(I/R)、姜黄素组(CU)、溶剂对照组(SC);每组据再灌注时间点的不同又分多个亚组,每组6只动物。在预定时间点行开阔法行为学检查、TUNEL法海马CA1区凋亡细胞检测,免疫组织化学ABC法测定c-fos、c-jun、NF-κB蛋白在海马CA1区的动态变化。结果姜黄素可显著减少沙土鼠探索活动及海马CA1区凋亡锥体细胞数量(P<0.01)、诱导Fos蛋白及抑制Jun和NF-KB蛋白的表达(P<0.01)。结论姜黄素具有脑保护作用,调控即早基因c-fos、c-jun和NF-κB的表达可能是作用机制之一。

草果知母汤在阻断PTZ点燃癫痫模型中对大鼠脑内c-fos、c-junmRNA表达的影响

目的 :探讨草果知母汤抗痫作用的分子生物学机制。方法 :选用SD大鼠以戊四唑 (PTZ)诱导产生癫痫动物模型 ,应用分子原位杂交技术观察草果知母汤对PTZ点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达的影响。结果 :PTZ点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达明显增强 ,草果知母汤能明显阻断其表达 ,并显示出良好的抗痫作用。结论 :草果知母汤的抗痫作用机制可能与降低脑内c fos、c jun基因表达水平有关。

头风颗粒对偏头痛模型脑膜组织形态及中脑导水管周围灰质c-fos、c-jun基因表达的影响

目的:研究中药头风颗粒对偏头痛模型脑膜组织形态的影响及对中脑导水管周围灰质c-fos、c-jun蛋白表达及mRNA表达的影响。方法:将120只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、头风颗粒治疗组、头风颗粒预防组,除正常对照组外;其余三组大鼠注射硝酸甘油(GTN),建立实验性偏头痛模型。造模30min后,模型组灌胃蒸馏水,治疗组灌胃头风颗粒,预防组于造模前灌胃头风颗粒1周。造模4h后,采集中脑导水管周围灰质(PAG)标本,通过苏木素-伊红(HE)染色方法,镜下观察各组大鼠脑膜组织形态,每组中随机取18只大鼠,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法,检测c-fos、c-jun mRNA表达,其余12只大鼠行免疫组化SABC法,检测c-fos、c-jun蛋白表达的阳性细胞数及灰度值。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠脑膜有明显的毛细血管扩张、大量炎性细胞渗出等现象,头风颗粒治疗组和预防组上述现象减轻。与正常对照组相比,偏头痛模型组c-fos和c-jun mRNA表达增强、c-fos和c-jun阳性细胞数明显增多,差异有显著统计学意义(P<0.01);与偏头痛模型组比较,头风颗粒治疗组和头风颗粒预防组c-fos和c-jun mRNA表达明显减弱、c-fos和c-jun阳性细胞数明显减少,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:头风颗粒可以减轻硝酸甘油引起的神经性炎症、抑制c-fos、c-jun mRNA表达及蛋白表达,影响中脑导水管周围灰质(PAG)痛觉信息的调控,缓解偏头痛症状。

haFGF和nm-haFGF过表达对乳腺肿瘤细胞增殖及c-fos、c-jun mRNA表达的影响

目的研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non-mitogenetic human acidic fibroblast growth factor,nm-haF-GF)和人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)对恶性肿瘤细胞的增殖作用及其与对c-fos、c-jun mRNA表达的影响,探讨nm-haFGF在治疗神经系统疾病和心血管疾病等方面的临床应用安全性。方法构建细胞内真核表达载体pIRES/haF-GF、pIRES/nm-haFGF,分泌型真核表达载体pSectag/haFGF、pSectag/nm-haFGF。转染乳腺癌细胞MCF-7,Western blot鉴定细胞内及上清中aFGF的表达。用流式细胞技术分析细胞周期(G0/G1,S期,G2/M)。用半定量RT-PCR检测立早基因c-fos、c-jun mRNA的表达。结果nm-haFGF和haFGF在MCF-7细胞中能够过量表达。转染nm-haFGF组的S期和G2/M细胞比率与对照组差异无显著性,而转染haFGF组差异有显著性。转染haFGF后,c-fos、c-jun mRNA的表达明显升高,转染nm-aFGF后却与未转染组无差别。结论与haFGF相比,nm-haFGF消除了促肿瘤细胞增殖活性,基本不会诱导细胞c-fos、c-jun原癌基因的转录与表达。

SOCS3基因转染对肺腺癌细胞株A549原癌基因c-fos、c-jun mRNA表达及细胞增殖的影响

目的 探讨SOCS3基因对人肺腺癌细胞株A5 49中c fos、c junmRNA表达及细胞增殖的影响。方法 以脂质体为载体将pEFSOCS3和pSV2neo共转染至人肺腺癌细胞株A5 49,RT PCR和免疫细胞化学法测定转染前后细胞中SOCS3mRNA和蛋白表达 ;半定量RT PCR测定转染前后细胞中c fos、c junmRNA水平表达变化 ;3H TdR掺入法检测基因转染前后细胞增殖情况。结果 RT PCR和免疫细胞化学证实转染后细胞中有SOCS3稳定表达 ;半定量RT PCR证实转染后细胞中c fos、c junmRNA水平显著降低 (P <0 .0 1) ;且转染组细胞 3H TdR掺入量显著降低 (P <0 .0 1)。结论 SOCS3蛋白可能通过负性调控STAT3介导的信号通路降低c fos、c jun的表达 ,从而抑制肺癌细胞增殖。

学习记忆过程中即刻早期基因c-fos、c-jun在纹状体边缘区的表达

目的研究大鼠在学习记忆过程中即刻早期基因c-fos、c-jun在纹状体边缘区内的表达。方法将动物首先在Y-宫中进行学习记忆训练,然后应用免疫细胞化学方法检测c-Fos、c-Jun蛋白在纹状体边缘区内的表达。结果大鼠经迷宫训练1h后,纹状体边缘区内即有c-Fos、c-Jun蛋白的明显表达,尤其c-Jun在边缘区的表达较纹状体其他部位为集中。迷宫训练组动物纹状体边缘区内c-Fos、c-Jun蛋白的表达数量明显高于假训练组或对照组(P<0.01)。此外,在马、扣带回等处也有c-Fos、c-Jun蛋白的阳性表达。结论大鼠进行Y-迷宫厌暗学习时,纹状状边缘区内的即刻早期因c-fos、c-jun参与学习记忆的信号转导过程。

青阳参对点燃癫痫大鼠脑内c-fos、c-jun基因表达的影响

目的 :探讨青阳参抗痫作用的分子生物学机制。方法 :大鼠杏仁核快速点燃癫痫模型 ,应用免疫组化技术观察青阳参对点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达的影响。 结果 :杏仁核点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达明显增强 ,青阳参能明显阻断其表达 ,阳性细胞数量明显减少。结论 :青阳参的抗痫作用机制可能与降低脑内c fos、c jun基因表达有关。

镉对大鼠肝细胞原癌基因c-fos、c-jun表达的影响

应用 Northern斑点杂交方法研究氯化镉对大鼠肝细胞原癌基因 c- fos、c- jun表达的影响。结果表明 ,5、10和 2 0 μmol/ kg氯化镉腹腔一次注射后 ,大鼠肝细胞 c- fos、c- jun m RNA较对照组明显增多。结果提示 ,氯化镉可以引起大鼠在体肝细胞原癌基因 c- fos、c-

醒脑静对戊四氮慢性点燃大鼠癫痫模型脑内c-fos、c-jun蛋白表达的影响

目的:探讨醒脑静抗痫作用可能的分子生物学机制。方法:将健康雄性SD大鼠50只随即分成正常组、模型组、醒脑静组、苯巴比妥组及中西药合用组5组,每组各10只,通过免疫组化方法观察分析醒脑静对戊四氮点燃癫痫大鼠脑组织中c-fosc、-jun蛋白表达的影响。结果:模型组大鼠脑组织中有大量c-fos、c-jun阳性细胞数。醒脑静组脑内阳性细胞数明显较模型组减少(P<0.01),与苯巴比妥组比较,差别无统计学意义(P>0.05)。中西药合用组脑内阳性细胞数较醒脑静及苯巴比妥单用组更少(P<0.01)。结论:醒脑静的抗痫作用可能与其阻断脑内c-fosc、-jun蛋白的表达有关。

体外冲击波诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞转化过程中c-fos、c-jun的表达

应用低能冲击波作用于对数生长期的骨髓间充质干细胞(hMSCs),通过改良的钙—钴染色法、茜素红染色法及检测钙结节,应用图文分析系统,通过hMSCs向成骨细胞转化程度来确定最佳冲击波作用强度,并采用RT-PCR检测c-fos和c-jun基因表达量的变化。结果显示,8.5kV电压、体外冲击120次为最佳作用强度,成骨作用明显优于对照组(P(0.01);c-fos和c-jun基因表达量较对照组明显增加,冲击作用后45min达到高峰。认为低能冲击波在适宜强度下可诱导hMSCs向成骨细胞转化,c-fos和c-jun基因表达增加。

缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注后即早基因c-fos、c-jun表达的影响

目的观察缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注后即早基因c-fos、c-jun表达的影响。方法采用大鼠原位部分缺血再灌注模型,96只SD大鼠随机分为缺血再灌注组(IR),缺血预处理组(IPC),每组又分为8个亚组(n=6),于复灌后0、0.5、1、2、4、8、12和24h取材,应用RT-PCR法检测各组c-fos、c-junmRNA的表达,流式细胞仪检测Ki67和Sub-G1。结果与IR组相比,IPC组血清ALT、AST在复灌后的0.5￣8h组明显降低(P<0.05);Ki67在复灌后的0.5、1和2h明显升高,24h明显降低(P<0.05);Ap指数在复灌后的1h以上明显降低(P<0.05);IPC组c-fos和c-junmRNA的表达较IR组低,其中c-jun在0.5、1和2h组明显降低(P<0.05)。结论缺血预处理能有效地保护肝脏免受缺血再灌注造成的损伤,这种保护效应的机制可能与影响即早基因的转录有关。

宽叶缬草对大鼠局灶性脑缺血后C-Fos、C-Jun表达的影响

目的 :探讨宽叶缬草对大鼠局灶性脑缺血后大脑海马各区 C- Fos、C- Jun表达的影响。方法 :采用线栓法制作可复流大脑中动脉闭塞大鼠模型。 4 8只雄性 Wistar大鼠随机分为正常组 ,假手术组 ,大脑中动脉闭塞组 ,生理盐水组 ,宽叶缬草治疗组。大鼠大脑中动脉闭塞后 2 h,生理盐水组、宽叶缬草治疗组分别以生理盐水及宽叶缬草酊剂灌胃 ,每 8h一次 ;术后第 5天取脑组织分别行 C- Fos、C- Jun免疫组化检测。结果 :正常组大脑海马各区 C- Fos、C- Jun阳性细胞稀少 ;大脑中动脉闭塞后海马各区均可见大量 C- Fos、C- Jun阳性细胞 ;宽叶缬草治疗组 C- Fos、C- Jun阳性细胞数密度明显低于大脑中动脉闭塞组 (P <0 .0 5 )。结论 :宽叶缬草可能通过抑制 C- Fos、C- Jun的表达 ,减轻缺血后脑组织的病理学损害。

+Gz重复暴露对大鼠脑组织c-fos、c-jun和神经生长因子基因表达的影响

为了解 +Gz重复暴露后大鼠脑组织 c- fos、c- jun和神经生长因子 (NGF)基因表达的变化 ,探讨它们在 +Gz所致脑损伤中的作用和意义 ,用半定量反转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测方法检测 +Gz重复暴露后大鼠脑组织 c- fos、c- jun和 NGF m RNA表达水平。结果 c- fos和 c- jun在 +Gz重复暴露后 30 m in m RNA表达明显升高 ,6 h和 2 4h降至正常 ;NGF在 30 min和 6 h表达均明显升高 ,2 4h恢复正常。表明 +Gz重复暴露可诱导大鼠脑组织 c- fos、c- jun和 NGF m RNA的表达 ,提示它们的表达增加可能在

托吡酯对慢性癫痫大鼠海马区脑组织c-fos、c-jun表达的影响

目的探讨托吡酯(TPM)对慢性癫痫大鼠海马区脑组织c-fos、c-jun表达的影响及其治疗慢性癫痫的机制。方法 40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、TPM低剂量组以及TPM高剂量组。以海人酸建立大鼠慢性癫痫模型,除正常组外,模型组给予生理盐水2 ml/kg,TPM低、高剂量组分别给予TPM 20 mg/kg与50 mg/kg。4 w后,应用免疫组织化学方法对大鼠海马区脑组织内c-fos、c-jun表达进行检测。结果癫痫模型大鼠脑内c-fos、c-jun表达明显高于正常组,给予托吡酯高低剂量治疗后,c-fos、c-jun表达明显减少,以高剂量组更为明显(P<0.05)。结论托吡酯抗癫痫的作用机制可能与降低海马区脑组织内c-fos、c-jun表达有关。

黄蒲通窍胶囊对拟血管性痴呆大鼠神经细胞c-fos、c-jun蛋白表达的影响

目的探讨黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆(VD)大鼠脑组织c-fos和c-jun影响的机制。方法制作线栓法大脑中动脉栓塞所致血管性痴呆大鼠模型,观察各组大鼠脑组织c-fos和c-jun的变化。结果模型组大鼠脑组织中c-fos和c-jun有一定的表达,中药组、都可喜组血浆和脑组织中c-fos和c-jun表达明显增强,并有统计学意义(P<0.01)。结论黄蒲通窍胶囊一方面可能通过上调脑缺血后c-fos的表达,而起到脑保护的作用;另一方面可能通过增强c-fos的表达起到改善VD大鼠学习记忆障碍的作用。推测这可能是该方治疗血管性痴呆的机制。

益气活血补肾方对大鼠脑缺血损伤后c-Fos、c-Jun表达影响的实验研究

目的观察大鼠脑缺血再灌注损伤后中药益气活血补肾方对c-Fos、c-Jun蛋白表达的影响,探讨其早期治疗脑缺血性损伤的可能机制。方法 Wistar雄性大鼠随机分成正常组、模型组、益气活血补肾方治疗组(治疗组),采用大鼠右侧大脑中动脉阻塞及再灌注模型,免疫组化方法检测c-Fos、c-Jun表达情况。结果再灌注后3 d,治疗组c-Fos、c-Jun表达和模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。再灌注后7 d,三组c-Fos、c-Jun比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气活血补肾方可以下调c-Fos、c-Jun表达,从而对脑缺血产生保护作用。

局灶脑缺血后胰岛素对c-fos、c-jun基因表达的影响

目的 观察胰岛素对局灶缺血性脑组织 c- fos、c- jun基因表达的影响。方法 30只肾血管性高血压大鼠随机分 4组 ,在大脑中动脉闭塞 (MCAO)后即予胰岛素 (2 .1IU / kg,A组 )、葡萄糖和胰岛素 (2 .1IU / kg,B组 ;4.5 IU / kg,C组 )、生理盐水 (D组 ) ,采用原位杂交技术检测各组 MCAO后 3h脑组织 c- fos、c- jun基因的表达。结果 与其它组比较 ,A组血糖下降明显 (P<0 .0 1) ,MCAO后 1h、2 h、3h分别为 3.80± 0 .3mm ol/ L、3.6 8± 0 .3mm ol/L、3.6 9± 0 .3mm ol/ L。 c- fos m RNA被诱导出现于缺血侧皮层和尾壳核 ,C组 c- fos m RNA明显增加 (P<0 .0 1) ,皮层和尾壳核的灰度为 12 3.5 8± 8.72、141.0 8± 8.49;c- jun m RNA仅出现于缺血侧皮层 ,A、B、C组的 c- jun m RNA均增加明显 ,灰度分别为 171.82± 7.33、172 .5 6± 7.91、15 5 .0 9± 7.91,其中 C组的增加更为显著 (P<0 .0 1)。结论 胰岛素促进缺血脑组织 c- fos、c- jun基因表达可能是其神经保护作用机制之一。

农药对小鼠脑组织c-fos、c-jun mRNA表达的影响

[目的 ]氰戊菊酯是一种高效低毒的拟除虫菊酯类杀虫剂。因为它分解快 ,无残留 ,在国内外得到了广泛的应用。关于氰戊菊酯对动物脑组织基因表达的影响尚未见报道。为了进一步了解氰戊菊酯及氰戊菊酯做为组分的混配农药的神经毒理。本研究对氰戊菊酯和辛硫磷致小鼠脑组织c fos、c jun基因表达的影响进行了检测 ,探讨农药引起脑损害的分子机制 ,为阐明农药及混配农药的毒理提供实验依据。 [方法 ]昆明种雄性小鼠 ,体重 1 8～ 2 2g ,购自江苏省实验动物中心。 45只小鼠随机分为 1 5组。对照组腹腔注射吐温 - 80 ;氰戊菊酯组腹腔注射 0 1LD5 0 的氰戊菊酯 ;混配组腹腔注射 0 1LD5 0 辛硫磷 +0 1LD5 0 氰戊菊酯。注射容量均为 0 1ml/1 0g。染毒时间均在上午 9∶3 0～ 1 0∶0 0之间。分别在染毒后 5、1 0、1 5、3 0、60min ,4、2 4h快速断头处死小鼠 ,取出脑组织 ,提取总RNA ,用建立的反转录聚合酶链反应 (RT PCR)半定量检测方法检测小鼠脑组织c fos、c junmRNA表达水平。 [结果 ]对照组未检测到c fos、c jun基因表达 ;氰戊菊酯组两个基因都是从 5min开始表达 ,c jun基因持续到 1h ,c fos基因持续到 4h。均以 1 5min组表达最高 ;混配组两个基因都是从 5min开始表达 ,持续到 2 4h。以 1 5min组表达最高。 [?