益气血法调节GDF9、c-IAP1/2、JNK1/2、TNFR1/2表达对超排卵大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的观察益气血法经后增殖方含药血清基于p38 MAPK/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路调节生长分化因子9(GDF9)、细胞凋亡抑制蛋白1/2(c-IAP1/2)、c-Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)、肿瘤坏死因子受体1/2(TNFR1/2)表达对控制性超排卵大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法取12只雌性大鼠,随机分为控制性超排卵+中药组(6只大鼠给予经后增殖方4.5 g/kg灌胃)和控制性超排卵组(6只大鼠给予等体积生理盐水灌胃),后续经腹腔注射醋酸曲普瑞林、孕马血清促性腺激素、HCG后,取2组大鼠腹主动脉血制备含药血清和空白血清。另取15只雌性大鼠,经腹腔注射醋酸曲普瑞林、孕马血清促性腺激素、HCG后,收集卵巢颗粒细胞,分别与空白血清(空白血清组)、含药血清(含药血清组)、含药血清+GDF9抗体(含药血清+GDF9抗体组)在体外共同培养。TUNEL检测卵巢颗粒细胞凋亡率,qRT-PCR法检测卵巢颗粒细胞中p38 MAPK、NF-κB、GDF9、c-IAP1、c-IAP2、JNK1、JNK2、TNFR1、TNFR2 mRNA表达情况,Western blot法检测卵巢颗粒细胞中GDF9蛋白表达情况。结果含药血清组和含药血清+GDF9抗体组细胞凋亡率均明显低于空白血清组(P均<0.05),且含药血清组明显低于含药血清+GDF9抗体组(P<0.05)。含药血清组p38 MAPK、NF-κB mRNA相对表达量均明显低于空白血清组(P均<0.05)。含药血清组和含药血清+GDF9抗体组c-IAP1、c-IAP2、GDF9 mRNA相对表达量和GDF9蛋白相对表达量均明显高于空白血清组(P均<0.05),且含药血清组均明显高于含药血清+GDF9抗体组(P均<0.05);含药血清组和含药血清+GDF9抗体组JNK1、JNK2、TNFR1、TNFR2 mRNA相对表达量均明显低于空白血清组(P均<0.05),且含药血清组均明显低于含药血清+GDF9抗体组(P均<0.05)。结论益气血法经后增殖方可通过调控p38 MAPK/NF-κB信号通路,上调控制性超排卵大鼠卵巢颗粒细胞中GDF9、c-IAP1、c-IAP2的表达,下调JNK1、JNK2、TNFR1、TNFR2的表达,抑制卵巢颗粒细胞凋亡。

凋亡抑制因子c-IAP1和促凋亡因子Smac在儿童急性白血病患者骨髓中的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制蛋白c-IAP1和促凋亡蛋白Smac在儿童急性白血病(AL)患者中的表达情况,分析二者之间的关系及临床意义。方法 AL患儿72例,其中初诊组32例,缓解组30例,复发组10例;另取同期12例非恶性血液病患儿作为对照组。应用免疫组织化学过氧化物酶标记链霉卵白素染色法分别检测患儿骨髓中c-IAP1、Smac蛋白表达情况;对其中45例患儿采用半定量反转录聚合酶链反应检测其骨髓单个核细胞中c-IAP1、Smac mRNA表达水平。结果 c-IAP1、Smac蛋白在初诊组AL患儿骨髓中表达水平均高于缓解组和对照组(H=19.345、16.621,P<0.008);复发组AL患儿c-IAP1、Smac蛋白表达水平高于对照组(H=8.324、8.324,P<0.008)。c-IAP1、Smac mRNA在初诊组AL患儿骨髓中表达水平均高于缓解组和对照组(H=7.973、5.942,P<0.017)。初诊组AL患儿骨髓中c-IAP1、Smac蛋白和mRNA水平在急性淋巴细胞白血病和急性髓细胞白血病间比较差异无统计学意义(t=-0.482、0.818,P>0.05)。初诊组AL患儿骨髓中c-IAP1、Smac蛋白及mRNA水平呈正相关(r=0.541、0.668,P<0.01)。结论c-IAP1、Smac蛋白参与了儿童AL的发生和发展,并且二者相互影响,但在初诊患儿中二者表达水平与白血病临床类型可能无关。

c-IAP1和c-IAP2及Survivin在肝细胞性肝癌中的表达

目的 :探讨原发性肝细胞性肝癌 (HCC)中凋亡抑制蛋白c IAP1,c IAP2和Survivin的表达及其意义。方法 :采用免疫组织化学技术 (S P法 )和图像分析技术检测 38例原发性肝细胞性肝癌、18例癌旁肝硬化组织和 10例正常肝组织中c IAP1,c IAP2和Survivin表达 ,并结合临床病理特征进行分析。结果 :c IAP1和c IAP2在HCC中的表达率分别为 84 2 %和 10 0 % ;在癌旁肝硬化组织中的表达率均为 10 0 % ;c IAP1和c IAP2在HCC和癌旁肝硬化组织中表达强度与其在正常肝组织中的表达强度的差异无显著性 (P >0 0 5 )。Survivin在 73 7% (2 8/38)的HCC中表达 ,在正常肝组织中的表达率为 7 9% ;且在HCC中的表达强度和表达率均高于正常肝组织 (P <0 0 5 )。c IAP1,c IAP2和Survivin在高分化、中分化和低分化肝细胞肝癌中的表达强度的差异均无显著性 (P >0 0 5 )。c IAP1,c IAP2和Survivin在有血管内癌栓形成的HCC中的表达强度高于无血管内癌栓形成的HCC中的表达强度 (P <0 0 5 )。c IAP2在肝细胞性肝癌、癌旁肝硬化组织和正常肝组织中表达强度分别高于c IAP1(P <0 0 5 ) ;而cIAP1高于Survivin(P <0 0 5 )。结论 :Survivin在HCC中的表达率和表达强度增加 ;c IAP2在肝细胞性肝癌中的表达强度最高 ;c IAP1,c IAP2和Survivin?

凋亡抑制蛋白c-IAP1在喉癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的检测c-IAP1在喉癌中的表达,并探讨其与喉癌细胞凋亡的关系及其在喉癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学方法检测40例喉癌组织和8例癌旁正常喉黏膜组织c-IAP1的表达。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的X-dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测喉癌细胞凋亡率。结果喉癌组织c-IAP1蛋白表达阳性率与癌旁正常喉黏膜组织比较有显著差异(P<0.01)。c-IAP1蛋白表达阳性率与患者年龄(P=0.297)、性别(P=0.906)、吸烟史(P=0.303)无明显关系。病理分级为Ⅰ级的喉癌组织中c-IAP1蛋白表达阳性率与病理分级为Ⅱ、Ⅲ级的喉癌组织比较,差异无显著意义,P>0.05;肿瘤临床T分期为Ⅰ-Ⅱ期喉癌组织中c-IAP1蛋白表达阳性率与临床T分期为3-4期喉癌组织比较,差异无显著意义P>0.05。c-IAP1蛋白表达+组、c-IAP1蛋白表达++组和c-IAP1蛋白表达+++组AI值比较,有极显著差异性(F=30.715,P<0.01)。结论c-IAP1的表达可能与喉癌的发生发展密切相关,其表达抑制了喉癌细胞凋亡。

c-IAP1和bax蛋白在甲状腺癌中的表达与细胞凋亡

目的探讨甲状腺癌中c-IAP1和bax蛋白的表达及其与细胞凋亡的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测甲状腺肿瘤细胞中c-IAP1和bax蛋白的表达,用TUNEL法测定肿瘤细胞凋亡指数(AI)。结果20例甲状腺腺瘤中c-IAP1和bax阳性表达率分别为25.0%、60.0%,AI为0.33±0.21;47例甲状腺癌中c-IAP1和bax阳性表达率分别为87.2%、89.3%,AI为0.91±0.37。c-IAP1、bax和AI在腺瘤和癌组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。在甲状腺癌中,c-IAP1阳性组AI低于阴性组,bax阳性组AI高于阴性组。结论c-IAP1和bax可能与甲状腺癌的发生发展密切相关;c-IAP1高表达抑制了甲状腺癌细胞凋亡,bax高表达促进了甲状腺癌细胞凋亡。

雷公藤甲素促进TNF转基因小鼠破骨前体细胞凋亡及c-IAP1/2降解的研究

目的:用雷公藤甲素(Triptolide,TPL)诱导破骨前体细胞(Osteoclast precursor cells,OCPs)凋亡,评价凋亡抑制蛋白1/2 (cellular inhibitors of apoptosis proteins 1/2,c-IAP1/2)在OCPs凋亡中的参与性。方法:从具有人类类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)临床症状的肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)转基因RA小鼠骨髓中分离、诱导OCPs,分为OCPs组、RANKL/OCPs组、TNF/OCPs组、TPL/RANKL/OCPs组和TPL/TNF/OCPs组。TPL作用于核因子受体激活因子(Receptor activator of nuclear factor,RANKL)或TNF诱导的OCPs,用流式细胞法检测早期细胞凋亡,用Western blot法检测cIAP1/2表达,以及用Luminescence法检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3/7 (Aspartate specific cysteine protease 3/7,Caspase3/7)表达。结果:与OCPs组比较,RANKL/OCPs组和TNF/OCPs组中凋亡细胞、Caspase3/7水平显著增加(P <0.05),RANKL/OCPs组中c-IAP1/2蛋白水平显著升高(P <0.05)。与RANKL/OCPs组比较,TPL/RANKL/OCPs组凋亡细胞数、Caspase3/7水平显著升高,c-IAP1/2蛋白水平显著降低(P <0.05)。与TNF/OCPs组比较,TPL/TNF/OCPs组凋亡细胞、Caspase3/7水平显著增加、c-IAP1/2蛋白水平显著降低(P <0.05)。与TPL/RANKL/OCPs组比较,TPL/TNF/OCPs组凋亡细胞显著增加,Caspase3/7水平显著降低,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:TPL在OCPs分化过程中可诱导OCPs发生早期凋亡,而c-IAP1/2参与其中,本研究为RA治疗靶点提供实验资料。

c-IAP1、c-IAP2和Beclin-1在胃癌组织中的研究进展

胃癌是严重威胁人类健康的一种常见的恶性肿瘤,迄今为止,其病因和发病机制尚完全明确。众多研究表明,它的发生和发展是多因素、多步骤的复杂过程。逃避细胞死亡是恶性肿瘤发生的一种重要机制,也是当前肿瘤治疗过程中的关键阻力。

凋亡调控因子c-IAP1,c-IAP2和Caspase-3在大肠肿瘤中的表达及意义

目的:探讨凋亡调控因子c-IAP1,c-IAP2和Caspase-3在大肠肿瘤中的表达,了解其在大肠肿瘤的发生发展中的作用。方法:收集我院2002年至2004年手术后经病理证实并有完整随访资料的大肠腺癌标本45例,同时收集外伤后手术切除的正常大肠组织为正常对照,采用免疫组化SP法和半定量积分法分别检测c-IAP1,c-IAP2和Caspase-3在大肠腺癌、大肠腺瘤及正常大肠黏膜中的表达。结果:c-IAP1,c-IAP2和Caspase-3的阳性表达率在正常大肠黏膜组与大肠腺瘤组、正常大肠黏膜组与大肠腺癌组、大肠腺瘤组与大肠腺癌组之间均有显著性差异(P<0.05)。c-IAP1与Caspase-3在大肠腺癌中的表达呈负相关(r=-0.321,P<0.05)。c-IAP2和Caspase-3在大肠腺癌中表达无相关性,(P>0.05,r=-0.164)。c-IAP1和c-IAP2在大肠腺癌中的表达无相关性。(P>0.05,r=0.066)。结论:凋亡受阻在大肠肿瘤形成过程中起着一定的作用;c-IAP1,c-IAP2可能参与了大肠腺瘤和腺癌的发生和发展,并在一定程度上反映大肠腺癌的恶性程度;凋亡抑制蛋白c-IAP1,c-IAP2的表达与患者的性别、年龄、5年生存率、肿瘤部位、组织学类型、有无淋巴结转移及Dukes分期等因素无关。

c-IAP1和caspase3在大肠腺癌中的表达及临床意义

研究c-IAP1和caspase3在大肠腺癌组织、腺瘤及正常大肠黏膜中的表达情况。探讨两种蛋白在大肠肿瘤发生、发展、浸润及转移中的作用及相互关系,为大肠癌的临床治疗和判断预后提供参考依据。

胃腺癌组织中c-IAP1蛋白和mRNA的表达及临床意义

目的探讨c-IAP1蛋白和mRNA在胃腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法、Western blot和qRTPCR技术检测50例胃腺癌组织和40例癌旁正常胃黏膜组织中c-IAP1蛋白和mRNA的表达,分析其在胃腺癌发生、发展中的作用及与临床病理特征的关系。结果 c-IAP1蛋白和mRNA在胃腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常胃黏膜组织(P均<0.05)。胃腺癌组织中c-IAP1蛋白和mRNA的表达与组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移、浸润深度均相关(P<0.05),与患者性别、年龄无关(P<0.05)。结论 c-IAP1在胃腺癌组织中表达升高,抑制了胃腺癌细胞的凋亡,促进了胃腺癌的发生、发展,有可能为胃腺癌的临床靶向治疗提供新的理论依据。

肾细胞癌中c-IAP1的表达和细胞凋亡的研究

目的 探讨凋亡抑制蛋白(c IAP1)在肾细胞癌中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法 应用免疫组织化学技术和末端脱氧核苷酸转移酶介导的X dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测2 8例肾细胞癌中c IAP1的表达与细胞凋亡。结果 2 8例肾细胞癌c IAP1阳性率为5 7.1% ,9例正常肾组织c IAP1阳性率为11.1% ,差别有显著意义(P <0 .0 5 )。c IAP1表达与AI呈负相关(n =16,r= -0 .86) (P <0 .0 1)。结论 c IAP1引起的凋亡抑制与肾细胞癌的发生和发展关系密切,为靶向c IAP1的抗肾细胞癌治疗提供了理论依据。

Caspase-3和c-IAP1在胃癌组织中的表达及意义

探讨胃癌组织中Caspase-3和c-IAP1的表达水平及意义。通过蛋白印迹Western blot和实时荧光定量PCR技术检测50例胃癌组织和40例正常胃黏膜组织中Caspase-3和c-IAP1的蛋白和基因mRNA的表达水平。结果与正常胃黏膜组织相比,胃癌组织中Caspase-3蛋白和mRNA的表达水平显著降低(P<0.05),Caspase-3蛋白和mRNA的低表达与胃癌的组织分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与性别、年龄及浸润深度无关(P>0.05);与正常胃黏膜组织相比,胃癌组织中c-IAP1蛋白和mRNA的表达水平显著升高(P<0.05),c-IAP1蛋白和mRNA的高表达与胃癌的组织分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移及浸润深度有关(P<0.05)),而与性别、年龄无关(P>0.05)。Caspase-3和c-IAP1在胃癌中的异常表达均与胃癌的发生、发展有关。

Caspase-9和c-IAP1在胃腺癌组织中的表达及相关性研究

目的通过检测Caspase-9蛋白和c-IAP1蛋白在胃腺癌组织中的表达,探讨二者与胃癌发生、发展的关系及二者相关性。方法选取50例胃腺癌组织作为实验组,40例正常胃黏膜组织作为对照组,采用免疫组化SP法检测Caspase-9和c-IAP1的蛋白表达情况。结果Caspase-9蛋白在胃腺癌组织中的表达显著低于正常胃黏膜组织(P<0.05);Caspase-9蛋白的阳性表达与胃腺癌的组织分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移均明显相关(P<0.05),而与性别、年龄、浸润深度无关(P>0.05)。c-IAP1蛋白在胃腺癌组织中的表达显著高于正常胃黏膜组织(P<0.05);c-IAP1蛋白的阳性表达与胃腺癌的组织分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移、浸润深度均明显相关(P<0.05),而与性别、年龄无关(P>0.05)。两者在胃腺癌组织中的表达呈负相关(rs=-0.578,P<0.05)。结论Caspase-9和c-IAP1在胃腺癌组织中的表达呈负相关,其异常表达参与了胃腺癌的发生、发展。

c-IAP1和Caspase-3在喉癌及癌旁组织中的表达及临床意义

目的检测凋亡抑制蛋白c-IAP1及天冬氨酸特异性蛋白酶Caspase-3在喉癌及癌旁正常上皮组织中的表达及两种蛋白之间的相关性,从而进一步探讨两种蛋白在喉癌发生发展中的作用及临床意义。方法将60例喉癌组织和60例癌旁组织的石蜡组织切片进行免疫组织化学(IHC)染色,检测c-IAP1及Caspase-3蛋白的表达水平。结果c-IAP1蛋白在喉癌组织中的阳性表达率高于癌旁正常上皮组织(P<0.05)。Caspase-3蛋白在喉癌组织中的阳性表达率低于癌旁正常上皮组织(P<0.05)。喉癌组织中c-IAP1、Caspase-3蛋白的阳性表达率与吸烟、饮酒、分化程度、淋巴结转移及TNM分期相关(P<0.05),而与年龄、性别、临床分型等均无相关性(P>0.05)。结论c-IAP1蛋白在喉癌组织中的表达升高,Caspase-3蛋白在喉癌组织中的表达降低。在喉癌组织中c-IAP1与Caspase-3蛋白的表达呈负相关(r=-0.517,P<0.001)。上述两种蛋白的异常表达与吸烟、饮酒、分化程度、淋巴结转移及TNM分期相关,而与年龄、性别、临床分型等均无关。进一步推测c-IAP1、Caspase-3蛋白可能在喉癌的发生和发展过程中发挥了一定的作用。

c-IAP1在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:检测凋亡相关基因在宫颈癌中的表达,探讨维吾尔族宫颈癌的发病机制及与临床病理指标的关系。方法:采用实时荧光定量PCR及免疫组化对45例宫颈癌及21例正常宫颈组织中c-IAP1进行检测,并分析其表达水平与相应临床病理指标的关系。结果:凋亡抑制基因c-IAP1在宫颈癌中表达上调,c-IAP1mRNA在宫颈癌中的表达量是正常宫颈组织c-IAP1mRNA表达量的3.39倍。与正常宫颈相比,宫颈癌组织中c-IAP1mRNA在不同临床分期、有无淋巴结、肿瘤直径、肌层浸润均呈现高表达,呈显著正相关(P<0.05),与病理分化程度无关。在蛋白水平,c-IAP1在宫颈癌的不同临床分期、有无淋巴结、肿瘤直径、临床分期、肌层浸润及病理分级中的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:宫颈癌组织中c-IAP1的高表达可能在宫颈癌抗凋亡机制中起着重要作用,这对宫颈癌的易感性预测、早期诊断、疾病监测及其分子靶向治疗的开展也具有重要的指导意义。

新疆维吾尔族宫颈癌组织中Bcl-2、Bcl-xl和c-IAP1的检测及临床意义

[目的]通过比较维吾尔族宫颈癌与宫颈非病变组织中Bcl-2、Bcl-xl、c-IAP1表达的差异,了解维吾尔族宫颈癌与凋亡基因的关系及意义。[方法]采用含20 000条Oligo DNA的人类全基因组寡核苷酸芯片,对5例维吾尔族宫颈癌与宫颈非病变组织成组检测差异表达基因,通过MAS分析得到两组间凋亡相关的差异表达基因:Bcl-2、Bcl-xl、c-IAP1,并采用RT-PCR及免疫组化验证芯片检测其m RNA和蛋白的表达。[结果]与宫颈非病变组织相比,维吾尔族宫颈癌患者中凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-xl和c-IAP1 m RNA和蛋白表达均上调。[结论]基因芯片筛选出的肿瘤差异基因,对于研究新疆宫颈癌发生的分子机制及宫颈癌的临床早期诊疗具有重要意义,有利于宫颈癌的易感性预测、早期诊断及疾病监测。维吾尔族宫颈癌的发生与细胞增殖、凋亡的动态平衡密切相关,IAP家族和Bcl-2家族抗凋亡基因在维吾尔族宫颈癌组织中高表达可能在宫颈癌抗凋亡机制中起着重要作用。

凋亡抑制蛋白c-IAP1和Caspase-3在喉癌中表达的研究

喉癌是耳鼻咽喉外科常见的肿瘤之一,其逐年增加的发病率和死亡率严重威胁着患者的健康,其中以鳞状细胞癌(约90%)为主,其次是腺癌。凋亡抑制蛋白c-IAP1和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的表达与喉癌的发展变化关系密切。本文将凋亡抑制蛋白c-IAP1和Caspase-3在喉癌中的表达作用进行了系统综述。

甲异靛联合imatinib对CML K562细胞的促凋亡作用

目的研究甲异靛联合imatinib促进K562细胞凋亡的作用。方法K562细胞经imatinib或/和甲异靛处理48h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡相关指标(线粒体跨膜电位和AnnexinV/PI)的改变,ELISA方法检测caspase3活性改变,Westernblot检测凋亡相关蛋白(cytC,cIAP1,procaspase3和PARP)的改变。结果与单用组相比,20μmol/L甲异靛与0.3μmol/Limatinib联合应用后,线粒体跨膜电位下降细胞比例明显升高,cytC释放入胞浆,caspase3酶原形式procaspase3减少,caspase3活性升高,其底物PARP被降解,AnnexinV水平升高。结论甲异靛与imatinib合用可协同促进K562细胞凋亡。