基于c-Jun氨基端激酶/应激活化蛋白激酶信号通路探讨丹皮酚抑制结肠癌HCT116细胞生长的机制研究

目的基于c-Jun氨基端激酶(JNK)/应激活化蛋白激酶(SAPK)信号通路探讨丹皮酚(PEON)抑制结肠癌HCT116细胞生长的机制。方法将结肠癌细胞株HCT116分为对照组和低、中、高剂量实验组。对照组仅给予不加任何药物的常规培养基进行培养;低、中、高剂量实验组分别给予含0.4,0.8和1.6 mmol·L^(-1)PEON的常规培养基进行培养。用噻唑蓝法检测HCT116细胞增殖能力的变化,用Hoechst33342/PI荧光染色法检测HCT116细胞的凋亡情况,用蛋白质印记法检测JNK、磷酸化JNK(p-JNK)和磷酸化细胞外信号传导激酶(p-ERK)蛋白的表达情况。结果低、高剂量实验组和对照组细胞的增殖抑制率分别为(36.69±1.33)%,(79.04±1.75)%和(17.21±1.19)%,凋亡率分别为(32.18±1.63)%,(58.56±2.23)%和(3.11±0.52)%,JNK相对表达量分别为0.72±0.03,0.35±0.02和1.01±0.04,p-JNK相对表达量分别为0.76±0.04,0.43±0.03和0.99±0.04,p-ERK相对表达量分别为0.58±0.04,0.27±0.03和1.03±0.03,低、高剂量实验组的上述指标与对照组相比,差异均有统计意义(均P<0.05)。结论PEON具有抑制结肠癌HCT116生长的作用,其机制可能是抑制JNK/SAPK信号通路,致使其下游基因蛋白表达下调。

促分裂原活化的蛋白激酶信号通路与能量代谢的关系

能量代谢每时每刻都伴随着物质代谢在生命体内发生。生物通过利用物质代谢产生的高能磷酸化合物以维持各项生命功能的运转,不同状态下的细胞通过利用各种物质通过不同的通路进行不同的代谢方式。促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)通路作为生命体里广泛存在的一类信号蛋白,影响着细胞、生物体的生命活动。MAPK通路在能量代谢的各个环节起着非常重要的作用。通过研究MAPK通路中的胞外信号调节激酶(ERK)通路、Jun激酶(JNK)通路、P38通路均与能量代谢有关的蛋白、靶点、关键酶、转运体,与三大营养物质能量代谢相结合,从而为能量代谢相关的细胞功能进一步研究铺垫,并为今后治疗肿瘤性疾病、感染性疾病、代谢性疾病等提供新思路。

砷通过c-Jun氨基端激酶及蛋白激酶B信号传导通路对mdig基因表达的影响

mdig基因（mineraldust-inducedgene）亦称为mina-53及核蛋白52,2005年首先从煤矿工人的肺巨噬细胞中分离[1-3].在肺癌、乳腺癌、结肠癌、食道癌、胃癌、肝细胞癌、淋巴瘤及肾细胞癌等恶性肿瘤高表达,是一种潜在的新的致癌基因[4].砷（As）或砷化物是广为人知的致癌物[5],但砷致癌的机制尚不清.现有资料提示三氯化砷可通过激活促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）[6]、转录激活因子AP-1[7]、p53[8]及核因子-κB[9]等信号通路而发挥致癌作用.二氧化硅粒子及烟草烟雾可诱导人支气管上皮细胞中mdig基因高表达,但砷化物与mdig基因表达的关系目前尚不清.本研究探讨三氯化砷与mdig基因表达的关系、职业性及环境性三氯化砷暴露致癌的发病机制.

蛋白磷酸酶2A抑制剂对胰腺癌细胞丝裂原活化蛋白激酶信号通路的激活作用及对细胞生长的影响

中药斑蝥中的有效成分斑蝥素（CAN）及其衍生物对多种肿瘤细胞具有抑制作用[1-2]，我们发现斑蝥素可抑制胰腺癌细胞的生长和转移[1]。斑蝥素是蛋白磷酸酶2A（PP2A）的选择性抑制剂，PP2A可使细胞信号通路中的多种激酶去磷酸化而失活，这些激酶包括与细胞生长密切相关的丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）：细胞外信号调节激酶（ERK）、c-jun氨基端激酶（JNK）和p38等。

肿瘤坏死因子α诱导人髓核细胞凋亡的作用途径

背景:在与细胞凋亡有关的众多因素中,肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)超家族成员发挥了重要的作用。但TNF是通过何种途径诱导椎间盘髓核细胞凋亡的机制尚未阐明。目的:探讨TNF-α激活后,丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信号转导通路中P38MAPK和应激活化蛋白激酶/c-Jun氨基末端激酶(stress-activated protein kinase/c-Jun NH2-terminal kinase,JNK/SAPK)两条途径对人髓核细胞凋亡的作用。方法:体外培养人髓核细胞,将细胞随机分成4组:TNF-α刺激组,P38MAPK阻断组,P-JNK/SAPK阻断组和对照组。采用TUNEL法检测髓核细胞凋亡情况,免疫荧光法检测P-P38MAPK和P-JNK/SAPK的表达及定位;Western Blot法检测P38MAPK,JNK/SAPK及其磷酸化形式的表达。结果与结论:TUNEL法检测凋亡结果中,TNF-α刺激组较其他各组的凋亡细胞密度大(P<0.01);免疫荧光结果显示TNF-α刺激组P-P38MAPK和JNK/SAPK在细胞质和细胞核的表达高于各阻断组和对照组(P<0.01);Western Blot结果显示P38MAPK,P-JNK/SAPK在各组髓核细胞内均有表达,但无活化形式,TNF-α刺激组可见P-P38MAPK,P-JNK/SAPK表达,但相应阻断组无表达。结果表明,外源性TNF-α可通过P38MAPK和P-JNK/SAPK途径导致人髓核细胞凋亡。

JNK信号转导通路在肾脏疾病中的研究进展

肾脏纤维化是导致终末期肾功能衰竭的主要病理基础，几乎所有慢性肾脏疾病的最终结局均为肾脏纤维化。在肾脏纤维化进程中，多种信号转导通路参与其中，如c-Jun氨基末端激酶／应激活化蛋白激酶（C—Jun N—terminal kinase/stress- activated protein kinase, JNK/SAPK） 信号通路、TGF-β／Smad信号通路、Wnt／β-catenin、Jagged／Notch、表皮生长因子受体信号通路和酪氨酸蛋白激酶／信号转导及转录激活因子信号通路等。

基于MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1通路探讨三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型的影响

目的:通过研究三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠促分裂原激活的蛋白激酶的激酶1(MEKK1)/应激激活的蛋白激酶/细胞外信号调节的蛋白激酶(SAPK/Erk激酶,SEK1)/c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)/激活蛋白-1(AP-1)通路的影响,探讨三七总皂苷抑制肿瘤的可能机制。方法:建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型,将48只造模成功的小鼠随机分为三七总皂苷低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg^-1)和模型组,每组12只,三七总皂苷各剂量组腹腔注射剂量为10 mL·kg^-1,模型组给予相同剂量的生理盐水,连续给药28 d。给药结束后分离肿瘤组织、称质量、切片、匀浆等,采用脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色检测肿瘤细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤组织MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1蛋白表达。结果:与模型组比较,三七总皂苷中、高剂量组的肿瘤质量明显下降(P<0.05);肿瘤细胞凋亡数量随三七总皂苷剂量的升高明显升高(P<0.05);三七总皂苷中、高剂量组肿瘤组织中MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型具有抑制作用,其作用机制可能与激活MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1信号通路有关。