卵巢癌细胞系C-JUN激活蛋白-1与P27^(kip1)表达的相关性

目的探讨C-JUN激活区结合蛋白-1(Jab1)与P27kip1在卵巢癌细胞株HO-8910中的表达变化及相互关系。方法用血清饥饿及饥饿后释放处理HO-8910细胞,分别用Western blot及核浆分离技术检测Jab1、P27kip1表达及亚细胞定位;用免疫沉淀方法检测Jab1与P27kip1的结合情况;脂质体介导法将Jab1基因转染HO-8910细胞,Westernblot及核浆分离检测P27kip1表达。结果血清饥饿导致HO-8910细胞生长周期停滞,P27kip1蛋白总量增加,且主要集中分布于胞核;Jab1蛋白总量减少,主要表达于核质;血清释放后两者呈现相反的表达变化,但是P27kip1主要集中分布在胞质;P27kip1与Jab1在HO-8910细胞中存在相互结合的情况。脂质体转染Jab1后,P27kip1表达下降且定位有明显的胞质改变。结论Jab1可能通过与P27kip1结合来介导P27kip1出核并影响其表达,从而参与调控HO-8910细胞的生长。

AP-1辅助激活因子JAB1的分子克隆及其与肝细胞生成素的相互作用

利用酵母双杂交方法 ,用肝细胞生成素 (HPO)作为诱饵蛋白在人胎肝cDNA文库中筛选到能与HPO相互作用的蛋白 :AP 1辅助激活因子JAB1.并用PCR方法从人胎肝cDNA文库中扩出JAB1全长cDNA ,进行GST JAB1原核融合蛋白表达与纯化 .蛋白质结合实验表明 。

JAB1蛋白在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的通过检测宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和宫颈癌旁正常组织中C-Jun结合蛋白激活域结合蛋白-1(JAB1)蛋白的表达,探讨其在宫颈癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学检测21例宫颈癌旁正常组织、42例宫颈上皮内瘤变和46例宫颈癌组织中JAB1的表达,并分析其与患者年龄宫颈癌分化程度、临床分期、淋巴转移等临床病理参数的关系。结果 JAB1在宫颈癌旁正常组织中表达占9.5%,在上皮内瘤变CINI、CINII、CINIII中的表达分别为20.0%、66.7%、88.2%,在宫颈鳞癌和腺癌中的表达分别为85.1%和78.9%。与宫颈癌旁正常组织相比,宫颈上皮内瘤变CINII、CINIII、鳞癌和腺癌组JAB1蛋白表达增多,差异有统计学意义(P<0.01);而与宫颈上皮瘤样病变CINI相比,CINIII和鳞癌表达显著增加,差异具有统计学意义(P<0.01),宫颈鳞癌和腺癌之间差异(P>0.05)。在鳞癌和腺癌共46例标本当中,JAB1蛋白的表达与年龄、肿瘤的分化程度以及临床分期无关(P>0.05),而与淋巴转移有关,其中在淋巴转移患者中的表达率为95.2%,在无淋巴转移患者中的表达率为72.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 JAB1可能参与了宫颈癌的发生发展,为临床开展宫颈癌的生物治疗提供实验依据。

安定-氯胺酮对严重烧伤小鼠腹腔巨噬细胞JAB1蛋白表达的影响

目的观察严重烧伤早期小鼠腹腔巨噬细胞c～Jun激活区结合蛋白1（JAB1）蛋白表达变化，探讨安定一氯胺酮对其表达变化的影响。方法将成年健康雄性昆明小鼠随机分为4组，即对照组、严重烧伤组、安定～氯胺酮组和严重烧伤后安定～氧胺酮处理组，以20％～30％体表总面积（TBsA）Ⅲ度烧伤作为严重烧伤模型，肌肉注射安定0．4mg／kg、氯胺酮10mg／kg给予麻醉。收集腹腔巨噬细胞提取总蛋白，运用Westernblotting方法检测各组小鼠腹腔巨噬细胞JAB1蛋白表达水平的变化。结果在严重烧伤后30min，小鼠腹腔巨噬细胞JAB1蛋白表达水平与对照组相比明显降低（P〈0．05），于6h时达到最低（P〈0．01），严重烧伤后12h逐渐恢复至正常水平。然而，严重烧伤后应用安定氯胺酮麻醉，小鼠腹腔巨噬细胞JAB1蛋白表达水平在各时相点变化差异无统计学意义。结论严重烧伤可引起小鼠腹腔巨噬细胞JAB1蛋白表达水平的早期下降，而严重烧伤后应用安定一氯胺酮麻醉能显著抑制JAB1蛋白表达水平下调。

Jab1蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的研究c-Jun激活区结合蛋白1(Jab1)在乳腺癌组织中的表达,探讨其在乳腺癌发生发展中的作用以及与p27^(kip1)的相关性。方法回顾性收集111例乳腺癌及癌旁组织标本,采用免疫组织化学En Vision二步法检测乳腺癌及相应癌旁组织中Jab1蛋白的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果本组乳腺癌组织中Jab1蛋白阳性表达率为92.8%(103/111),而癌旁组织中Jabl蛋白阳性表达率为10.8%(12/111),两者差异有统计学意义(P<0.05);Jab1蛋白表达与乳腺癌患者发病年龄、组织学类型、激素受体状态等无关(均P>0.05),而与肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期有关(均P<0.01);Jab1蛋白阳性表达与p27^(kip1)表达呈显著负相关(r=-0.528,P<0.01)。结论 Jab1蛋白的异常表达可能参与了乳腺癌的发生发展,检测Jab1蛋白有助于乳腺癌的临床诊断。

TRX1与JAB1在急性髓系白血病中的表达及其相关性

目的探讨硫氧还蛋白1(TRX1)和c-Jun激活区结合蛋白1(JAB1)在白血病各组中的表达,及TRX1水平在急性髓系白血病(AML)各组中的表达及其临床意义。方法应用RT-PCR及Western blot的方法对白血病患者TRX1和JAB1的表达进行检测,比较各组之间的差异;进一步分析AML患者其基因表达阳性率与外周血白细胞计数的关系,并采用ELISA方法检测以上血清样本的TRX1水平。结果在白血病患者中TRX1和JAB1基因和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),相关分析显示AML初发和复发病例中TRX1和JAB1表达相关程度高,而且高表达的TRX1和JAB1与外周血白细胞计数有关(P<0.05);ELISA检测外周血TRX1在AML的复发组高于初发组和对照组,初发组高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 TRX1和JAB1之间呈正向关联,与AML的发生及病情进展有密切关系。

JAB1在胆囊癌中的表达及临床病理意义

目的研究C-Jun激活域结合蛋白1(C-Jun activation domain binding protein 1,JAB1)在胆囊癌组织中的表达,探讨其临床病理意义。方法采用免疫组化方法检测JAB1在65例胆囊癌组织和15例慢性胆囊炎组织中的表达情况。结果胆囊癌组织中JAB1蛋白阳性率为60.0%,显著高于慢性胆囊炎组织(13.3%)(P<0.05)。结论 JAB1蛋白表达增高与胆囊癌发生、发展密切相关,检测JAB1蛋白有助于胆囊癌的早期诊断及判断患者预后。

P27^(kip1)、Jab1、Skp2的生物学功能及其与非霍奇金淋巴瘤发生、发展关系的研究进展

非霍奇金淋巴瘤(NHL)是具有高度异质性的淋巴造血系统的恶性疾病,近年来很多国家NHL的发病率有一定增高趋向。P27kip1是一种抑癌基因,参与细胞周期调控;c-Jun激活区结合蛋白1(Jab1)参与P27kip1蛋白的出核转运过程;S期激酶相关蛋白2(Skp2)能够特异性识别Thr-187磷酸化的P27kip1分子,介导P27kip1的多聚泛素化及随后的蛋白水解。Jab1、Skp2功能异常导致P27kip1水平下降、功能缺失,可能参与NHL的发生、发展。

微小RNA-329靶向三磷酸鸟苷酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白1抑制骨肉瘤细胞的增殖和侵袭

目的筛选骨肉瘤相关的微小RNA(miRNA,miR),研究其对骨肉瘤细胞的影响及其机制。方法生物信息学筛选GSE39058中骨肉瘤相关miRNA的表达差异,确定miR-329为研究目标。细胞计数试剂盒(CCK-8)分析miR-329对骨肉瘤143B细胞增殖能力的影响,Transwel比较miR-329对骨肉瘤143B细胞侵袭能力的影响。双荧光素酶报告基因实验观察miR-329对G3BP1的调控作用。蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-329转染前后G3BP1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)的表达水平。组间比较采用t检验。结果获得差异miRNA 90个,其中miR-329功能富集程度较高。聚合酶链反应(PCR)结果表明miR-329在各骨肉瘤细胞中的表达低于成骨细胞hFOB1.19(P<0.05)。CCK-8结果显示miR-329模拟物组143B细胞增殖率较对照组NC低(0.571±0.019比0.975±0.022,P<0.05),差异有统计学意义。Transwell分析发现转染miR-329模拟物组侵袭细胞数明显少于对照组[(28.83±4.55)个比(58.17±6.25)个,t=6.220,P<0.05],差异有统计学意义。双荧光素酶报告基因分析结果显示共转染G3BP1 mRNA3’端非编码区(3’UTR)wt和miR-329质粒的细胞荧光素酶相对活性较对照组显著降低(0.45±0.06比1.01±0.09,t=1.250,P<0.05),差异有统计学意义。Western blot结果表明转染miR-329 mimic后E-cadherin表达水平高于对照组(0.51±0.11比0.31±0.12,t=2.903,P<0.05),而Vimentin、N-cadherin表达量低于对照组(0.13±0.03比0.25±0.06,t=2.859,P<0.05;0.28±0.11比0.45±0.12,t=2.574,P<0.05),差异有统计学意义。结论miR-329通过靶向抑制G3BP1表达,抑制肿瘤细胞的上皮-间充质转化,从而抑制骨肉瘤143B细胞的体外增殖和侵袭。

人G3BP1真核表达载体的构建及其在食管癌细胞中的定位分析

目的:构建GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白1(G3BP1)的真核表达载体p EGFP-C3-G3BP1,并观察其在人食管癌EC109细胞中的表达及定位。方法:采用RT-PCR法从EC109细胞中扩增G3BP1 c DNA全长序列,用限制性内切酶HindⅢ和BamHⅠ双酶切PCR产物后克隆至pEGFP-C3载体,转化大肠杆菌DH5α后,挑取阳性克隆提取质粒,经双酶切及测序鉴定;将重组质粒用脂质体法转染EC109细胞,荧光定量RT-PCR和Western印迹检测G3BP1的表达,荧光显微镜观察G3BP1的定位。结果:目的基因G3BP1的序列完全正确,并在EC109细胞中获得表达,荧光显微镜观察显示G3BP1定位于细胞质。结论:构建了p EGFP-C3-G3BP1真核表达载体,并在EC109细胞中过表达,G3BP1蛋白定位于细胞质,形成应激颗粒(stress granules,SGs)。为进一步探讨G3BP1在食管癌细胞中的功能及其与SGs的相关性奠定了基础。

EB病毒编码潜伏膜蛋白1通过转录因子c-Jun和Ets1间信息交流调控鼻咽癌中基质金属蛋白酶9的表达

目的 探讨在EBV -LMP1作用下,基质金属蛋白酶9(MMP 9)启动子区相邻的AP 1( 5 33)和Ets( 5 4 0 )结合位点对其转录活化的影响,并确定LMP1可通过c -Jun和Ets1间信息交流(cross -talk)调控鼻咽癌细胞中MMP 9的表达。方法 应用定点突变技术,在野生型MMP- 9 -CAT质粒的基础上,建立MMP- 9启动子区相邻Ets( 5 4 0 )结合位点和AP- 1 (- 5 33)结合位点单独突变体和共同突变体;在四环素调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系L7中,比较LMP1对这些突变体报道基因活性的影响。通过针对c- Jun、Ets1的硫代反义寡核苷酸进行阻断,采用GelatinZymography观察c -Jun、Ets1及其cross- talk对LMP1介导的MMP 9表达的影响。结果 与野生型MMP -9 -CAT质粒比较,突变体的报道基因活性均降低(P <0 .0 1 ) ,以MMP- 9 -CATAP -1 ( 5 33) /Ets( 5 4 0 )mt降低最为显著;在c Jun和Ets1反义寡核苷酸单独或共同阻断后,LMP1介导的MMP -9活性均降低,以共同阻断的作用最为明显。结论 EBV -LMP1可以通过转录因子c -Jun和Ets1间cross talk调控鼻咽癌细胞中MMP 9的表达。

FOXO蛋白相关信号通路在卵巢癌发生发展中的作用研究进展

FOXO属于叉头框转录蛋白O亚家族,被认为是抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的肿瘤抑制因子。FOXO蛋白活性的变化可以影响卵巢癌的发生发展。调控FOXO的主要上游信号途径有磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B、丝裂原活化蛋白激酶、丝氨酸/苏氨酸激酶、I-κB激酶、c-Jun激活域结合蛋白1、硫氧化还原蛋白1等。上述信号通路通过调控FOXO蛋白活性在卵巢癌的发生发展过程中发挥了不同的作用。

结直肠癌中Jab1的表达及其预后意义

目的 探讨c-Jun激活区结合蛋白1（Jab1）在结直肠癌发生发展中的作用及其与结直肠癌临床病理特征的关系.方法 回顾性收集嘉兴市第一医院2007年1月至2008年12月行手术切除的80例结直肠癌组织标本,采用免疫组织化学EnVision二步法检测结直肠癌及其相应癌旁正常组织中Jab1的表达情况并分析其与临床病理特征的关系;提取6例新鲜结直肠癌手术标本的总蛋白并进行定量,通过蛋白质印迹检测结直肠癌组织与癌旁正常组织中Jab1的表达.结果 免疫组织化学及蛋白质印迹结果均显示,Jab1在结直肠癌组织中的表达显著高于在癌旁正常组织中的表达,结直肠癌组织中Jab1阳性表达率为96.3％ （77/80）,高表达者66例（82.5％）,低表达者14例（17.5％）;而癌旁组织中Jab1阳性表达率为8.8％ （7/80）,与结直肠癌组织之间差异有统计学意义（P ＜0.05）;Jab1阳性表达与肿瘤细胞分化程度、浸润深度、TNM分期和淋巴结转移情况有关（均P＜0.05）;Jab1阳性表达与增殖指标Ki-67表达呈显著正相关（r=0.548,P＜0.01）,与p27kip1表达呈显著负相关（r=-0.461,P＜0.01）.结论 Jab1异常表达可能参与了结直肠癌的发生发展并与p27kip1负相关.Jab1有望成为评价结直肠癌恶性程度和判断预后的重要参考指标.

P27、Th17、Treg、Jab1表达在卵巢子宫内膜异位囊肿中的临床意义

目的 研究P27、辅助性T细胞(Th17)、调节性T细胞(Treg)、c-Jun激活区结合蛋白1(Jab1)表达在卵巢子宫内膜异位囊肿中的临床意义,目的在于为临床诊治提供数据支持。方法 将2017年1月1日-2019年5月31日某院接受腹腔镜手术切除治疗的卵巢子宫内膜异位囊肿患者103例以及非卵巢子宫内膜囊肿的良性肿瘤患者96例分别作为观察组和对照组,检测并比较所有受试者卵巢组织的P27、Jab1蛋白表达情况以及外周血Th17、Treg水平。分析P27、Jab1蛋白表达情况和临床病理特征的关系,以及Jab1蛋白表达情况和术后复发、妊娠的关系。结果 观察组P27蛋白阳性率及外周血Treg分别为24.27%(25/103)、4.21±1.04%,均低于对照组的45.83%(44/96)、6.19±1.20%,而Jab1蛋白阳性率及外周血Th17分别为40.78%(42/103)、5.67±1.72%,均高于对照组的26.04%(25/96)、2.44±0.89%。临床分期为Ⅲ期~Ⅳ期卵巢子宫内膜异位囊肿患者的P27蛋白阳性率为12.73%(7/55),低于Ⅰ期~Ⅱ期的37.50%(18/48)。临床分期为Ⅲ期~Ⅳ期卵巢子宫内膜异位囊肿患者的Jab1阳性率为57.18%(32/55),高于Ⅰ~Ⅱ期的20.83%(10/48)。Jab1阳性卵巢子宫内膜异位囊肿患者复发率为19.05%(8/42),高于Jab1阴性患者的4.92%(3/61),且妊娠率为57.14%(24/42),低于Jab1阴性患者的77.05%(47/61)。结论 P27、Treg在卵巢子宫内膜异位囊肿中存在明显低表达,而Th17、Jab1呈明显高表达。此外P27、Jab1表达均和患者临床分期密切相关,且Jab1表达与患者术后复发及妊娠有关。