c-Met抑制剂对人鼻咽癌细胞株CNE-1的生长抑制作用

目的:探讨c-Met抑制剂PHA-665752对人鼻咽癌细胞的生长抑制作用,为c-Met抑制剂在鼻咽癌中的应用提供实验依据。方法:Western blot法检测鼻咽癌细胞经HGF和(或)PHA-665752处理前后CNE-1细胞中相关信号分子的磷酸化状态变化。MTT法检测肝细胞生长因子(HGF)的促鼻咽癌细胞CNE-1的增殖作用。同时检测PHA-665752对CNE-1细胞的生长抑制作用。流式分析PHA-665752对鼻咽癌细胞CNE-1凋亡的影响。结果 :HGF可促进CNE-1细胞的增殖。而PHA-665752抑制了CNE-1细胞的增殖,并增强细胞凋亡。PHA-665752抑制c-Met磷酸化,同时降低下游信号分子Akt、Erk1/2和STAT3的磷酸化。结论:PHA-665752显著抑制鼻咽癌细胞CNE-1增殖,诱导细胞凋亡,其机制与调节下游MAPK、PI3K和STAT通路有关。

c-MET抑制剂联合EGFR-TKI对耐药肺癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制

目的观察c-MET抑制剂SU11274联合表皮生长因子-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)吉非替尼或埃罗替尼对人肺癌细胞株PC9/R(PC9细胞的获得性吉非替尼EGFR-TKI耐药株)增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法培养人肺癌细胞株PC9/R,将PC9/R细胞分为对照组(C组)、SU11274组(S组)、吉非替尼组(G组)、埃罗替尼组(E组)、吉非替尼联合SU11274组(GS组)、埃罗替尼联合SU11274组(ES组)。S组、G组、E组、GS组、ES组分别加入SU11274 5μmol/L、吉非替尼1μmol/L、埃罗替尼1μmol/L、吉非替尼1μmol/L+SU11274 5μmol/L、埃罗替尼1μmol/L+SU11274 5μmol/L,C组不加药物。于给药72 h后采用MTT法检测细胞增殖活力,流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况。采用Western blotting法检测各组细胞中的p-EGFR、p-AKT、p-STAT3蛋白。结果GS组、ES组细胞存活率分别低于G组、E组(P均<0.05),联合组细胞存活率均低于S组(P均<0.05),G组、E组、GS组、ES组细胞存活率均低于C组(P均<0.05)。GS组、ES组早期细胞凋亡比例分别高于G组、E组(P均<0.05),联合组早期细胞凋亡比例均高于S组(P均<0.05),GS、ES、S组早期细胞凋亡比例均高于C组(P均<0.05)。GS组、ES组p-EGFR、p-AKT、p-STAT蛋白相对表达量分别低于G组、E组(P均<0.05),联合组p-EGFR、p-AKT、p-STAT蛋白相对表达量均低于S组(P均<0.05),G组、E组、GS组、ES组蛋白相对表达量均低于C组(P均<0.05)。结论 SU11274联合吉非替尼或埃罗替尼可抑制EGFR-TKI耐药的肺癌细胞增殖并促进其凋亡,作用机制可能与抑制EGFR信号通路功能有关。

c-Met抑制剂对胰腺癌细胞系增殖迁移能力的影响

目的探讨c-Met抑制剂sull274对胰腺癌细胞系增殖迁移能力的影响。方法取人胰腺癌细胞系KP-3进行细胞培养,分为对照组(采用0.1%终浓度的DMSO处理)和干预组(分别用DMEM中sull274终浓度为0μmol/L、20μmol/L、60μmol/L和100μmol/L进行处理)。比较组间KP-3细胞的增殖率及相对迁移能力差异。结果sull274对胰腺癌细胞系KP-3增殖有抑制作用,随着干预时间延长,其抑制作用越明显;且随着浓度的增加,其抑制作用也明显加强(P<0.05)。sull274对胰腺癌细胞系KP-3迁移距离有抑制作用,随着干预时间延长,细胞迁移距离逐渐缩短;且随着浓度的增加,细胞迁移距离逐渐缩短(P<0.05)。结论c-Met抑制剂可抑制体外胰腺癌细胞系的增殖和迁移能力,因此可能抑制胰腺癌的发生和进展,可能为将来开发新的胰腺癌靶向药物提供依据。

c-Met抑制剂LWK-126在人工胃肠液中的稳定性研究

目的研究LWK-126在人工模拟胃肠液中的稳定性,为其代谢稳定性研究提供基础。方法采用RPHPLC法测定LWK-126在人工胃肠液放置0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0 h后的含量,计算其降解剩余百分含量。结果LWK-126质量浓度在0.25~12μg·mL^-1(r=0.9992,n=7)与峰面积成良好线性关系,在37℃空白人工胃肠液(不加酶)及人工胃肠液中的降解剩余百分率均大于93.51%。结论LWK-126在模拟人体胃肠道环境的溶液中较稳定,不会发生明显降解,不易受胃蛋白酶和胰蛋白酶的影响。

几种小分子c-Met抑制剂类抗肿瘤药物概述

癌症现已成为社会家庭的严重负担,特别是对患者本身带来的精神以及生理上的痛苦是巨大的。由于小分子c-Met抑制剂类抗肿瘤药物具有耐受性好、对抗肿瘤的发生和转移的特点,使其迅速成为目前抗肿瘤药物研究的热点。这类药物中的c-Met抑制剂作用于c-Met受体,达到抑制c-Met结合域磷酸化,阻止酪氨酸激酶活化从而抑制下游信号传导产生抗肿瘤作用。本文主要就各种小分子c-Met抑制剂类抗肿瘤药物的研究概况进行阐述。

C-MET抑制剂的研究进展

C-MET是由C-MET原癌基因编码的蛋白质,它参与了多种肿瘤的形成、转移和侵袭。C-MET抑制剂是一种非常具有挑战性的新型抗肿瘤药物,它是针对C-MET信号通路治疗肿瘤的研发产物,且基于此靶点的上市药品并不多见,。我们通过集C-MET抑制剂近年在国内的研究进展,综述其在国内的设计开发理念及活性筛选成果,探讨其在国内的未来前景。

c-Met抑制剂联合氟尿嘧啶对结直肠癌细胞SW620增殖及凋亡的影响

目的探讨结直肠癌的治疗方法。方法培养人结直肠癌细胞SW620,将其分为C组、F组、S组、FS组,F组、S组、FS组分别加入5-FU、SU11274、5-FU+SU11274,C组不加药物。观察各组细胞的存活与凋亡状况,测定各组细胞内MMP、Notch1及Hes1蛋白的表达。结果 FS组细胞存活率最低(q=13.98~32.30,P<0.05),凋亡率最高(q=5.3~75.22,P<0.05);FS组MMP、Hes1及Notch1蛋白相对表达量均低于其他各组(q=4.20~20.09,P<0.05)。结论 c-Met抑制剂与5-FU联合使用能更好地抑制SW620增殖,促其凋亡,其可能的机制为作用于Notchl信号途径。

气相顶空法检测c-met抑制剂中异戊醇的残留

目的:用气相顶空外标法检测药物中的异戊醇残留。方法:将样品溶于N,N-二甲基咪唑啉酮,顶空90℃保持30 min,采用毛细管气相色谱柱HP-INNOWax(30 m×250μm×0.25μm);FID检测器;载气为氮气;流速3 mL/min;检测器温度250℃;进样口温度200℃;分流比5/1;程序升温:起始温度40℃,保持3 min,再以5℃/min温至90℃,保持5 min,最后以20℃/min升温至230℃,保持5 min。结果:异戊醇的线性范围为1.05~67.04μg/mL(R^2=0.998 2),定量限:1.05μg/mL,回收率为95.79%~98.78%,精密度1.0%,溶液稳定性符合设计要求。结论:所建立的气相顶空法灵敏准确、精密稳定,适合对药品中异戊醇的检测研究。

新型4-苯氧基吡啶类c-Met激酶抑制剂的合成和抗肿瘤活性研究

为了发现新型高活性c-Met激酶抑制剂,以2-氨基-4-氯吡啶为原料,经醚化、酰化、烷基化、还原和酰化等多步反应,制备了6种未见文献报道的4-苯氧基吡啶类化合物,化合物结构经红外光谱、核磁共振氢谱和质谱确证.生物活性测试结果显示,6种化合物对MKN-45、A549、H460和HT-294种肿瘤细胞株具有很好的抗增殖活性,两种化合物对c-Met激酶具有很好的抑制活性.其中化合物7b抑制MKN-45、A549、H460和HT-29细胞株的IC 50值分别为1.89、5.14、0.74、0.60μmol/L.该化合物在1000 nmol/L和200 nmol/L的浓度下对c-Met激酶的抑制率分别为96.2%和82.8%,显示出了优异的抗肿瘤活性.

HGF/c-MET抑制剂在晚期胃癌中的应用和最新研究进展

晚期胃癌(advanced gastric cancer,AGC)包括局部不可切除胃癌(gastric cancer,GC)、转移性GC和术后复发性GC,由于患者诊断延迟且AGC尚缺乏有效治疗方法,因此患者中位生存期仅为6~12个月。目前AGC的主要治疗目标是改善患者症状和延长序贯化疗患者的生存期。虽然全身治疗对AGC的治疗效果逐渐显现,但患者预后远未达到预期。此外,靶向治疗及新型免疫治疗存在耐药发生率高、毒副作用大、患者经济负担重等缺点。因此,寻找新的治疗靶标并研发抗肿瘤药物是一个亟待解决的关键问题。据报道,肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)/细胞间质上皮转换因子(cellular-mesenchymal epithelial transition factor,c-MET)通路异常激活在GC进展和多线耐药的发生中起到关键作用,可能是GC有潜力的治疗靶点。近年来,一些靶向HGF/c-MET的小分子酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)在GC的治疗中观察到较好的临床效果。同时,新型HGF/c-MET抑制剂(如单克隆抗体、双特异性抗体和抗体偶联药物等)在临床前研究中均表现出较好的抗肿瘤活性,但均处于临床研究的不同阶段,其疗效和安全性仍有待进一步证实。本文阐述HGF/c-MET抑制剂在AGC治疗中的最新研究进展,并讨论HGF/c-MET抑制剂在GC治疗中产生耐药的主要原因及应对策略,旨在为AGC的治疗提供更好的指导并为未来研究提供参考。

以c-Met为肿瘤治疗靶点的受体酪氨酸激酶抑制剂的研究进展

受体酪氨酸激酶c-Met在细胞的增殖、代谢以及肿瘤的产生、转移、血管生成中扮演着重要角色,c-Met成为抗肿瘤治疗的重要靶点。HGF/c-Met信号通路与VEGFR等其他通路的相互作用(cross-talk)影响了抗肿瘤药物的作用效果,产生耐药性,因此,多激酶靶点联合用药成为新的抗肿瘤治疗手段。本文介绍了c-Met信号通路与多种膜受体间的相互作用以及由这种相互作用引起的对激酶抑制剂的耐药性,并综述了单靶点和多靶点的小分子c-Met抑制剂的研究进展。

新型含2-氨基-4-苯基噻唑结构的c-Met抑制剂设计合成及抗肿瘤活性研究

基于克唑替尼的结构特征,设计、合成了两个系列未见文献报道的新型2-氨基-4-苯基噻唑类衍生物.采用噻唑蓝(MTT)法测试了目标化合物对A549、HT29、Hela、Karpas299的细胞增殖抑制活性.结果显示,部分化合物具有较好的肿瘤细胞抑制活性,其中N-(3-(2-氨基噻唑-4-基)苯基)-3-氯苯甲酰胺(3d)对HT29细胞的活性最好,IC50值为4.42μmol/L.采用Western blot考察目标化合物3d在HT29细胞中MET信号通路中相关蛋白表达的影响.另外,利用分子对接方法,对目标化合物进行了初步的构效关系讨论.

c-Met抑制剂联合5氟尿嘧啶对人结肠癌SW620裸鼠移植瘤的抑制作用研究

[目的]研究c-Met抑制剂PHA665752联合5氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对人结肠癌细胞SW620生长的抑制作用及机制。[方法]选取48只4周龄的雄性裸鼠皮下接种人结肠癌细胞SW620,建立裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组(2.5%二甲亚砜稀释液隔日用药)、5-Fu组(40mg/kg 5-Fu每隔3日给药)、PHA组(25mg/kg PHA665752隔日给药)、5-Fu+PHA组(40mg/kg 5-Fu每隔3日给药+25mg/kg PHA665752隔日给药)各12只。免疫组织化学SP法检测瘤体组织内的E-cadherin和Ki-67蛋白表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况。[结果]治疗结束时,5-Fu组、PHA组、5-Fu+PHA组3组裸鼠的体重和瘤体体积均明显低于对照组(P<0.05),且5-Fu+PHA组裸鼠的瘤体体积显著低于5-Fu组、PHA组(P<0.05)。5-Fu组、PHA组、5-Fu+PHA组3组裸鼠的E-cadherin蛋白OD值显著高于对照组(P<0.05);5-Fu+PHA组裸鼠的E-cadherin蛋白OD值显著高于5-Fu组、PHA组(P<0.05);5-Fu组、PHA组、5-Fu+PHA组3组裸鼠的Ki-67蛋白OD值显著低于对照组(P<0.05);5-Fu+PHA组裸鼠的Ki-67蛋白OD值显著低于5-Fu组、PHA组(P<0.05);5-Fu组、PHA组、5-Fu+PHA组3组裸鼠的凋亡指数(apoptotic index,AI)显著高于对照组(P<0.05);5-Fu+PHA组裸鼠的AI值显著高于5-Fu组、PHA组(P<0.05)。[结论]c-Met抑制剂PHA665752联合5-Fu对人结肠癌细胞SW620生长的抑制有协同作用,其机制可能与上调E-cadherin、下调Ki-67表达有关。

基于分子对接的小分子c-Met抑制剂结构特征及其研究进展

受体酪氨酸激酶c-Met是抗肿瘤治疗的一个重要靶点,c-Met/HGF通路在肿瘤的发生、发展、转移及血管再生中发挥重要作用。综述c-Met及与配体HGF的复合物结构特征、c-Met/HGF通路的生物学作用以及靶向c-Met抗肿瘤小分子抑制剂的研究进展。

新型2-吲哚酮类c-Met激酶抑制剂的设计、合成及活性研究

目的设计合成新型2-吲哚酮类c-Met激酶抑制剂。方法以c-Met激酶抑制剂SU11274为先导化合物,利用生物电子等排原理设计出系列2-吲哚酮类衍生物。以2-吲哚酮为起始原料,先后经历与氯磺酸的氯磺酰化、与3的磺酰胺化、与6a^6h,7a^7h和4a^4b的缩合反应制得目标产物10a^10r,并测定它们对c-Met激酶和MCF-7细胞增殖的抑制活性。结果与结论成功合成了设计的18个2-吲哚酮类化合物,产物结构经1H NMR和ESI-MS确证。部分化合物显示出一定的c-Met激酶和MCF-7细胞增殖抑制活性。对目标产物进行了初步构效关系分析,为该类化合物进一步的结构优化奠定了基础。

新型6,7-二甲氧基-4-(2-氟苯氧基)喹啉类c-Met抑制剂的设计、合成及生物活性研究

基于卡博替尼(cabozantinib)和foretinib的化学结构,通过改变中间链,设计合成了一系列含有哌嗪酰胺的6,7-二甲氧基-4-(2-氟苯氧基)喹啉类c-Met抑制剂。这些化合物未见文献报道,其结构通过MS和NMR确证。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法和MTT法测定了目标化合物对c-Met的抑制活性和对人结肠癌细胞(HT-29)、人肺癌细胞(H460)、人非小细胞肺癌细胞(A549)和人胃癌细胞(MKN-45)的细胞毒性。结果表明,4-(4-氯苯基)-N-[4-[(6,7-二甲氧基-4-喹啉)氧基]-3-氟苯基]哌嗪-1-甲酰胺(1b)、4-(3-氯苯基)-N-[4-[(6,7-二甲氧基-4-喹啉)氧基]-3-氟苯基]哌嗪-1-甲酰胺(1h)和4-(2-氯苯基)-N-[4-[(6,7-二甲氧基-4-喹啉)氧基]-3-氟苯基]哌嗪-1-甲酰胺(1j)对HT-29、H460、A549和MKN-45细胞的抑制活性明显优于对照药卡博替尼。其中,化合物1h和1j对c-Met具有较强的抑制活性,其IC50值分别为0.007 2和0.009 8 μmol/L。

新型吡啶类c-Met激酶抑制剂的设计、合成及抗肿瘤活性

以BMS-777607和E7050为先导化合物,设计并合成了11个新型的吡啶类c-Met激酶抑制剂(9a^9f和10a^10e),其结构经1H NMR和MS(ESI)表征。采用MTT法测定了9a^9f和10a^10e对人胃癌细胞株(NCIN87和GTL-16)的体外抗肿瘤细胞增殖活性。结果表明:9a,9d和10a对GTL-16的抑制活性较好,其IC_(50)分别为0.60μmol·L^(-1),1.36μmol·L^(-1)和0.93μmol·L^(-1),优于BMS-777607(2.50μmol·L^(-1))。

小分子c-Met激酶抑制剂的研究与应用

c-Met是异二聚体受体酪氨酸激酶(RTKs)亚族的原型成员,并且是肝细胞生长因子(HGF)的受体。HGF与其受体c-Met的结合启动了许多的细胞信号传导,HGF/c-Met信号失调与许多恶性肿瘤的生长有着密切的关系。因此,cMet激酶已成为癌症药物开发的新希望。该综述旨在总结近年来小分子c-Met激酶抑制剂药物化学开发的进展,作为潜在的抗癌药物,肯定会有助于未来研究人员在发现小分子c-Met激酶抑制剂方面的发展。

小分子c-Met激酶抑制剂Foretinib的合成

Foretinib是处于临床研究阶段的小分子c-Met激酶抑制剂,而现有的合成路线普遍存在总收率较低的问题。本文以4'-羟基-3'-甲氧基苯乙酮(2)作为起始原料,经醚化、硝化、亲核取代、缩合、还原环合、氯代、醚化、还原和酰化反应制得目标化合物Foretinib(1),总收率为26.06%,纯度为99.40%。Foretinib及反应中间体的结构经1H NMR和MS(ESI)确征。上述合成路线反应条件温和,操作简便且收率高,适合工业化生产。

HGF/c-Met在肝细胞癌中作用的研究进展

肝细胞癌是世界上最具破坏力的癌症之一,其主要治疗方式为手术治疗,但大部分患者确诊时已失去手术机会,仅部分患者可行手术治疗,且术后的转移率及复发率较高,近期相关研究发现,肝细胞生长因子(HGF)/间充质-上皮转换受体(c-Met)轴的异常激活与HCC的转移潜力及预后不良相关,为肝细胞癌的靶向治疗提供新方向。目前针对HGF/c-Met信号传导途径的有效治疗药物仍处于研究重点,现就HGF/c-Met通路在肝细胞癌中的研究进展进行综述。