三七总皂甙对凝血酶诱导VSMCs增殖及pp60c-src活性的影响

目的探讨三七总皂甙(total spaonins of panax notoginseng,tPNS)对凝血酶诱导大鼠血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖作用及与pp60c-src活性的关系。方法采用4-10代的VSMCs的单细胞悬液用于实验。通过MTS法测定VSMCs细胞增殖率。用免疫沉淀测定pp60c-src的活性。结果①0.5U/mL和1.0U/mL2种浓度的凝血酶(Thrombin,TH)促VSMCs增殖相对于对照组,在各时间段均有明显促增殖作用(P<0.05)。增殖曲线呈双峰样改变(峰值在1h和24h);②不同浓度(300.0～600.0μg/mL)的tPNS在24h时对凝血酶刺激VSMCs都有明显抑制作用(P<0.05),且各浓度之间差异有显著性意义(P<0.05)。③相对凝血酶组,tPNS(450.0μg/mL)有效地降低了凝血酶诱导VSMCs增殖的1、24h峰值(P<0.05)。④凝血酶刺激组pp60c-src活性在1h(P<0.01)明显增加,并且6、12、24、48、72h也有增加。用tPNS干预凝血酶诱导VSMCs增殖组,与凝血酶组比较,pp60c-src活性在1h(P<0.01)高峰明显被抑制,并且6、12、24、48、72h也有减少。结论①凝血酶促VSMCs的增殖在时间上呈双峰样改变。②不同浓度的tPNS对凝血酶诱导VSMCs增殖均有抑制作用。③tPNS能抑制凝血酶早期快速及后期促VSMCs增殖作用。④tPNS对凝血酶诱导VSMCs增殖有明显抑制作用,部分机制与其降低pp60c-src活性有关。

有氧运动干预自发性高血压模型大鼠主动脉血管内皮细胞c-Src mRNA表达和c-Src的活性

背景:原癌基因c-Src在调节高血压等心血管系统疾病中起着重要的作用,目前尚未看到有关运动干预影响主动脉血管内皮细胞c-Src的表达和活来调节高血压的研究。目的:观察有氧运动对自发性高血压大鼠主动脉血管内皮细胞c-Src m RNA表达和c-Src活性的影响。方法:8只雄性Wistar大鼠作为正常对照组,16只自发性高血压大鼠随机分为自发性高血压组8只,自发性高血压运动组8只。自发性高血压运动组每天进行90 min无负重有氧游泳运动,6 d/周,共8周;正常对照组和自发性高血压组大鼠不做游泳运动。每周测定大鼠血压1次,8周后,测定各组大鼠主动脉血管内皮细胞c-Src m RNA表达和c-Src活性。结果与结论:与自发性高血压组相比,自发性高血压运动组血压明显降低,主动脉血管内皮细胞c-Src m RNA表达和c-Src活性明显升高。与正常对照组相比,自发性高血压运动组大鼠主动脉血管内皮细胞c-Src活性和c-Src m RNA表达高于正常对照组和自发性高血压组(P<0.01)。结果提示有氧运动可以促进自发性高血压大鼠主动脉血管内皮细胞c-Src活性和c-Src m RNA表达的增加。

pp60c-src在凝血酶诱血管平滑肌细胞增生中的作用

目的探讨凝血酶参与血管平滑肌细胞(VSMCs)异常增生的时相关系,及pp60c-src在其增生信号传递过程中的作用。方法本实验采用培养大鼠胸主动脉3-10代的VSMCs的单细胞悬液用于实验。用MTS法测凝血酶促VSMCs细胞增殖率。用免疫沉淀测定pp60c-src的活性。结果①0.5(umol/ml)和1.0(umol/ml)两种浓度的凝血酶促VSMCs增殖相对于对照组,在各时间段均有明显促增殖作用,且二者作用程度相似,呈双峰样改变,增殖峰在1h(P<0.05)和24h(P<0.05)。②凝血酶刺激组pp60c-src活性在1h(P<0.05)及12h(P<0.05)均明显上升。相对凝血酶组,PP1有效的降低了凝血酶诱导VSMCs1h峰值(P<0.05)及24h的峰值(P<0.05)。结论①凝血酶促VSMCs的增殖在时间上呈双峰样改变,提示凝血酶不仅有早期快速促VSMCs的增殖作用,而且有后期促VSMCs的增殖作用。②由于pp60c-src活性第二高峰(12h)在凝血酶促VSMCs第二增殖峰值(24h)之前,提示pp60c-src活性后期的增加参与了凝血酶促VSMCs后期增殖。