Bcl-2相关的永生基因4对胃癌干细胞自我更新能力的调控作用

目的:探讨Bcl-2相关的永生基因4(Bcl-2 associated athanogene 4,BAG4)在胃癌干细胞(gastric cancer stem cells,GCSCs)自我更新能力中的调控作用。方法:采用成球培养法分离/富集GCSCs,并对其生物学特征进行鉴定。采用慢病毒干扰技术构建沉默BAG4表达的MGC803胃癌细胞系,以平板克隆形成和成球实验分别检测沉默BAG4对胃癌细胞克隆形成和成球能力的影响。结果:成球培养法成功分离/富集出球细胞(sphere cell,SC)。与普通单层贴壁细胞相比,MGC803-SC高表达干性相关基因Sox2、Oct4和Bmi1,具有更强的克隆形成能力(198±17 vs.92±11,P<0.001),诱导分化后干性标志物CD44表达下降,在体外具有更强的侵袭能力(185±18 vs.84±11,P<0.01)。上述实验结果证实MGC803-SC具有GCSCs特性。BAG4在GCSCs中的表达水平明显高于普通贴壁胃癌细胞,沉默BAG4明显降低胃癌细胞的克隆形成和成球能力。结论:沉默BAG4基因能有效抑制GCSCs的自我更新能力,有望成为胃癌靶向治疗的新靶标。

肺癌侵袭力的影像学表现与c-erbB-2及bcl-2基因蛋白表达的关系

目的和方法：利用免疫组化技术ＬＳＡＢ法和计算机图像分析系统的结合，测定经手术病理证实之３７例肺鳞癌及４８例肺腺癌组织中ｃ－ｅｒｂＢ－２及ｂｃｌ－２基因蛋白的表达水平，分析其表达或共表达与反映肺癌侵袭力的影像征象的关系。结果：ｃ－ｅｒｂＢ－２及ｂｃｌ－２基因蛋白在两种不同类型肺癌组织中的阳性表达及表达定位有明显的差异，并且，ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白表达阳性的肺癌，肿块毛刺征的出现率明显高于表达阴性者；ｂｃｌ－２基因蛋白表达阳性的肺癌，肿块毛刺征及三级支气管受累的出现率明显高于表达阴性者（Ｐ＜００５）；当两种基因蛋白在肺鳞癌中共表达时，肿块毛刺征及肺门或纵隔淋巴结转移的出现率明显高于它们单独表达者（Ｐ＜００５）。结论：ｃ－ｅｒｂＢ－２及ｂｃｌ－２基因蛋白与反映肺癌侵袭力的某些影像征象之间可能存在密切的关系。

子宫内膜癌组织中PTEN、Bcl-2和C-erbB-2基因的研究现状

子宫内膜癌为妇科三大肿瘤之一,近年来其发病率呈上升趋势,但其发病机制仍不十分明了,有关基因改变致癌的研究日趋增多。许多研究表明PTEN、Bcl-2和C-erbB-2等癌基因或抑癌基因与子宫内膜癌的发生、发展及其生物学特性密切相关。本文就PTEN、Bcl-2和C-erbB-2基因与子宫内膜癌的关系做一综述。

Bcl-2、C-erbB-2基因与卵巢肿瘤的关系

目的 探讨bcl 2凋亡抑制基因、c erbB 2癌基因和细菌L型感染在卵巢肿瘤中的表达及其意义。方法 采用免疫组化和革兰染色方法 ,检测了 10 1例卵巢肿瘤中的bcl 2、c erbB 2基因的表达 ,以及细菌L型的检出率。结果 恶性肿瘤中Bcl 2、C erbB 2蛋白产物的表达率明显高于良性肿瘤 (P <0 0 1) ,Bcl 2、C erbB 2蛋白在卵巢恶性肿瘤中临床分期Ⅲ、Ⅳ期中的阳性表达率 ,明显高于Ⅰ、Ⅱ期 ,病理分级Ⅲ级的表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ级 (P <0 0 1)。细菌L型的检出率与腹腔淋巴结有转移、有腹水者比无转移及无腹水者差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,而细菌L型的检出率与肿瘤的类型、临床分期、病理分级差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 bcl 2、c erbB 2基因在卵巢肿瘤中有不同程度异常表达 ,两种基因的表达与肿瘤的临床分期及病理分级有明显相关性 (P <0 0 1)。L型感染极有可能导致基因的变异 ,因此L型感染可能成为诱发肿瘤形成的因素之一。bcl 2凋亡抑制基因、c erbB 2癌基因的过度表达和变异 ,以及细菌L型感染可能相互协同在卵巢肿瘤发生和发展过程中起重要作用。

mdr-1、c-erbB-2和bcl-2基因表达与乳腺癌耐药性的研究

目的 探讨 mdr- 1、c- erb B- 2和 bcl- 2作为乳腺癌耐药相关基因常规检测的可行性 ,并观察三种基因与肿瘤发展预后的关系 ,以期指导治疗。方法 应用 S- P法免疫组化技术对 43例疗前乳腺癌组织标本的常规切片进行检测。结果 (1 ) c- erb B- 2和 bcl- 2以中高度表达为主 ,mdr- 1则以低表达或无表达为主。 (2 )复发组与未复发组相比 ,mdr- 1表达有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ,c-erb B- 2和 bcl- 2则无显著性差异 (P>0 .0 5 )。 (3)复发病例中 c- erb B- 2以高表达为主 ,bcl- 2均为低表达或无表达。结论 三种基因可作为乳腺癌耐药相关基因而用于临床检测并可为术后治疗及判断预后提供依据。

人舌鳞癌Tca8113细胞株中c-erbB-2、bcl-2表达

目的探讨口腔癌肿瘤细胞中c-erbB-2、bcl-2基因的表达水平及其在肿瘤形成、发展过程中的作用.方法采用荧光定量RT-PCR实验技术检测人舌鳞癌Tca8113细胞株中c-erbB-2、bcl-2基因mRNA表达水平.结果分光光度计检测纯度A260/A280均在1.8～2.0,通过基因表达扩增曲线图与看家基因GAPDH校正,得出目的基因的相对含量高.结论 bcl-2与c-erbB-2基因的表达水平在人舌鳞癌Tca8113细胞株中显著升高,可能在肿瘤形成、发展过程中起到一定的作用.

去甲斑蝥素对人乳腺癌细胞系的凋亡诱导作用及bcl-2基因的表达(英文)

目的：探讨去甲斑蝥素抗肿瘤作用的分子机制。方法：用 10μ g/ml去甲斑蝥素处理体外培养的人乳腺癌细胞系 MCF-7。处理后，在不同时间点，采用普通光镜、电子显微镜观察去甲斑蝥素对乳腺癌细胞的诱导凋亡现象。利用流式细胞仪分析凋亡细胞百分比，用蛋白印迹杂交方法对凋亡抑制基因 bcl-2的表达情况进行检测。结果：经 10μ g/ml去甲斑蝥素处理 12 h后，可观察到 MCF-7细胞变形、出泡，从培养瓶底脱离。细胞染色和电子显微镜可观察到染色质浓聚、边集，且随着药物作用时间的延长，凋亡细胞百分比逐渐增加。与对照组相比，凋亡抑制基因 bcl-2的表达降低。结论 :诱导肿瘤细胞凋亡可能是去甲斑蝥素抗肿瘤作用的分子机制之一。

迷迭香精油诱导肝癌HepG2细胞凋亡后bcl-2和bax基因表达变化的研究

目的:探讨凋亡相关基因bcl-2和bax在迷迭香精油诱导肝癌HepG2细胞凋亡后表达的变化。方法:水蒸气蒸馏法提取迷迭备精油,GC-MS鉴定其成分。采用免疫组化法检测bcl-2蛋白和bax蛋白表达。结果:不同浓度的迷迭香精油处理细胞12、24、48 h后bcl-2蛋白的表达降低,bax蛋白的表达升高,与对照组比较均有显著性差异,并且均现时间和剂量依赖性。结论:迷迭香精油诱导肝癌HepG2细胞凋亡与凋亡调控基因bax表达增强,bcl-2表达减少有关。

胃粘膜癌变过程中幽门螺杆菌感染与p53,c-erbB-2基因表达的研究

目的探讨胃粘膜癌变过程中幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）感染与ｐ５３，ｃｅｒｂＢ２基因表达的关系．方法浅表性胃炎１６例，肠上皮化生２２例，异型增生１４例，早期胃癌１８例及进展期胃癌４０例作为研究对象．用ＷａｒｔｈｉｎＳｔａｒｙ银染色法检测Ｈｐ，用免疫组化Ｓｐ法检测ｐ５３和ｃｅｒｂＢ２的基因表达产物．结果Ｈｐ，ｐ５３，ｃｅｒｂＢ２在浅表性胃炎的检出率各为５００％，００％，００％；在肠上皮化生的检出率各为５９１％，２２７％，１３６％；在异型增生的检出率各为８５７％，６４３％，２８６％；在早期胃癌的检出率各为１６７％，３３３％，１１１％；在进展期胃癌的检出率各为５０％，５２５％，５５０％；在癌旁粘膜的Ｈｐ检出率为８６７％；在癌前病变中，Ｈｐ阳性组的ｐ５３，ｃｅｒｂＢ２表达率均高于Ｈｐ阴性组．结论Ｈｐ感染参与了胃癌前病变的发生与发展；Ｈｐ感染可引起野生型ｐ５３基因失活和ｃｅｒｂＢ２基因激活，从而导致胃粘膜的癌变．

胃粘膜异型增生形态与p53,Bcl-2和c-erbB-2表达的关系

目的了解胃粘膜异型增生形态与ｐ５３，ｂｃｌ２和ｃｅｒｂＢ２表达的关系．方法胃粘膜炎症性增生４５例，异型增生４４例和胃腺癌３０例，胃粘膜活检标本进行组织形态观察，并采用ＳＰ免疫组化法，观察ｐ５３，ｂｃｌ２和ｃｅｒｂＢ２基因表达．结果异型增生病灶，小者仅有单个腺管，多者达１０余个腺管，多数３个～５个腺管．异型腺管有不同程度的扩张，为圆形或不规则形，腺上皮细胞单层或复层排列．核大小不等，染色质粗，核形态不一，为圆形、椭圆形或不规则形，可见核仁或核分裂．异型增生的腺管与周围的腺管分界清，这种现象称之为胃粘膜腺管区域性异型增生．异型增生腺管ｐ５３，ｂｃｌ２和ｃｅｒｂＢ２基因蛋白表达分别为９１％，７２７％和３８６％．结论胃粘膜腺管区域性异型增生与胃腺癌关系密切．

乳腺癌组织中C-erbB-2、nm23基因的表达及其预后的关系

目的探讨乳腺癌组织中C-erbB-2基因和nm23基因的表达与预后的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测298例乳腺癌C-erbB-2、nm23基因表达情况并与乳腺癌病理类型、发病年龄、临床分期、腋淋巴结转移情况及5a生存率之间的关系进行分析。结果C-erbB-2基因阳性率36.24%(108/298),nm23基因阳性率为58.05%(173/298);C-erbB-2和nm23基因的表达与肿瘤病理类型、发病年龄、临床分期无明显相关性(P>0.05);C-erbB-2基因表达与腋淋巴结转移呈正相关,与5a生存率呈负相关,nm23基因的表达与腋淋巴结转移呈负相关,与5a生存率呈正相关(P<0.05);C-erbB-2基因表达与nm23基因表达两者之间明显负相关(P<0.05)。结论联合检测乳腺癌组织中C-erbB-2和nm23基因表达可能成为预测、评估乳腺癌患者临床预后的标记物。

PTEN基因诱导人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡及bcl-2蛋白表达下调

目的 探讨PTEN基因对人脑胶质瘤SHG 44细胞凋亡及凋亡相关基因bcl 2表达的影响 ,阐明PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的机理。方法 PTEN基因体外转染SHG 44细胞 ,筛选阳性细胞克隆 ,以原位杂交、免疫组化方法检测PTEN基因的表达情况采用透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况以免疫荧光法检测bcl 2基因的表达。结果 PTEN基因转染的SHG 44细胞有PTEN基因和蛋白的表达。透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞浆浓缩、核碎裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现 ;流式细胞仪示细胞周期从G1 期到S期发生抑制 ,并且在G1 期峰前出现一明显的凋亡峰 (1 2 .9% ) ;细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带 ;bcl 2的表达也显著下调。转染空载体和未转染的SHG 44细胞无明显的凋亡表现。结论 PTEN基因可诱导SHG 44细胞凋亡 ,并下调bcl 2蛋白的表达 。

六味地黄丸对OLETF大鼠胰腺凋亡相关基因bcl-2和Bax表达的影响

目的:探讨六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠胰腺组织凋亡相关基因bcl-2和Bax表达的影响。方法:OLETF大鼠(自发性2型糖尿病)40只,随机分为六味地黄丸治疗组和模型组,每组20只;另同系LETO大鼠(非糖尿病)10只作为正常对照组。六味地黄丸治疗组于大鼠8周龄起,用六味地黄丸按2.4 g.kg-1.d-1灌胃,余组用等量蒸馏水灌胃。每周记录大鼠体质量;采用口服葡萄糖耐量试验监测血糖;定期处死大鼠,分离胰腺并称重;采用逆转录-聚合酶链反应检测bcl-2和Bax在胰腺组织中的表达。结果:大鼠40周龄时,六味地黄丸治疗组bcl-2 mRNA的表达水平为(1.25±0.07),较模型组(1.01±0.16)明显增高(P<0.01);Bax mRNA的表达水平为(0.57±0.11),较模型组(1.18±0.28)有明显降低(P<0.01)。六味地黄丸治疗组的胰腺/体重比,较模型组增高,但差异无统计学意义。六味地黄丸治疗组的糖负荷能力明显高于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:六味地黄丸在转录水平可上调bcl-2 mRNA的表达,下调Bax mRNA的表达,可能具有抗细胞凋亡的作用。

肺鳞癌和肺腺癌c-erbB-2及bcl-2表达水平与其影像学表现相关性的初步探讨

目的:从基因水平探讨肺癌影像学表现的分子生物学基础。材料与方法:利用免疫组化技术和计算机图像分析系统,测定经手术病理证实之15例肺鳞癌及18例肺腺癌组织中癌基因 c-erbB-2及 bcl-2的表达水平,并分析其表达水平与影像学征象的相关性。结果:肺鳞癌的影像学征象中肿块的大小,边缘清楚率及肺门纵隔淋巴结肿大率与 c-erbB-2的表达水平呈负相关,与 bcl-2的表达水平呈正相关;而三级支气管受累率则与 c-erbB-2呈正相关,与 bcl-2呈负相关。肺腺癌肿块的大小、边缘光滑率与 c-erbB-2的表达水平呈负相关,其肺门和纵隔淋巴结肿大率、三级支气管受累率及胸膜凹陷率与 c-erbB-2呈正相关。结论:癌基因 c-erbB-2及 bcl-2的表达对决定肺鳞、腺癌的影像学表现具有重要的作用。

c-erbB-2、p53和Bcl-2蛋白表达在乳腺癌中的意义及其相关性的探讨

目的 探讨乳腺癌中ｃｅｒｂ Ｂ２、ｐ５３ 和Ｂｃｌ２ 蛋白表达与临床病理参数、预后和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ） 、雌激素受体（ＥＲ）、孕激素受体（ＰＲ）的关系。 方法 应用亲和素生物素复合物（ＡＢＣ） 法免疫组织化学技术对８７例福尔马林固定石蜡包埋的乳腺癌组织进行回顾性研究。 结果 （１）ｃｅｒｂ Ｂ２ 和ｐ５３ 这两种蛋白的超表达与淋巴结转移、病理分级、核分裂、生存期短、ＰＣＮＡ强阳性表达、ＥＲ、ＰＲ阴性表达等不良因素呈正相关趋势（ Ｐ＞ ０－０５） 。（２）Ｂｃｌ２ 的阳性表达与瘤细胞的分化、淋巴结无转移、生存期长，ＥＲ、ＰＲ 的阳性表达等良好因素相关联，而且Ｂｃｌ２的阳性表达常会“减弱”或“抵抗”原癌基因的不良因素。 结论 多种癌基因（ 包括ｃｅｒｂ Ｂ２、ｐ５３ 和Ｂｃｌ２）

胃癌组织p53、c-erbB-2、p21和nm23基因表达及其与预后的关系

目的:探讨胃癌组织p53、cerbB2、p21和nm23联合基因产物表达检测对胃癌诊断、治疗及预后判断的价值。方法:应用免疫组化技术对123例手术切除胃癌组织标本中p53、cerbB2、p21和nm23基因产物表达进行测定。结果:高分化胃癌组p53表达阳性率38.0%(27/71),cerbB2为59.2%(42/71),p21为39.4%(28/711),nm23为71.8%(51/71),低分化胃癌组4种基因表达阳性率分别为46.2%(24/52)、36.5%(19/52)、69.2%(24/52)和34.6%(18/52);在非胃癌组织(胃、十二指肠溃疡、胃息肉、重度不典型增生胃炎胃镜标本)未见cerbB2、p21、nm23基因表达。p53、cerbB2、p21的表达与胃癌的分化程度、肿瘤浸润深度、肿瘤转移程度呈正相关(r=0.53,r=0.67,r=0.48,P<0.05);nm23的表达与胃癌的分化程度、肿瘤浸润深度、肿瘤转移程度呈负相关(r=-0.36,P<0.05)。结论:胃癌组织p53、cerbB2、p21、nm23基因表达检测在胃良恶性肿瘤鉴别、非手术临床分期的判断及指导临床治疗等方面具有一定价值,多基因表达检测对胃癌预后判断明显优于单基因表达检测。

c-erbB-2基因在结直肠癌中的表达及其与预后的关系

目的：探讨 c- erbB- 2基因在结直肠癌中的表达及其对预后的影响。方法：利用免疫组化 LSAB法检测 173例结直肠癌组织中 c- erbB- 2基因表达状况，结合临床病理及长期随访资料进行分析。结果： c- erbB- 2基因主要为胞浆内及细胞膜表达，癌组织阳性率 52％。 c- erbB- 2基因表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及 Dukes′分期有关，而与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、大体类型及组织学类型无关。 c- erbB- 2阳性组术后局部复发率、远处转移率高于阴性组。 c- erbB- 2表达阴性组生存率最高，弱阳性组次之，强阳性组生存率最低。 Cox回归多因素分析提示 c- erbB- 2是死亡的危险因素，即表达水平越高，预后越差。结论： c- erbB- 2表达水平是结直肠癌高度恶性的生物学指标，可作为判断结直肠癌预后的独立因素。

黄芪对小鼠病毒性心肌炎细胞凋亡及bcl-2/bax基因转录的影响

目的 :探讨黄芪对实验性病毒性心肌炎细胞凋亡及 bcl- 2 / bax基因的影响。方法 :Balb/ c小鼠 2 4只腹腔感染柯萨奇病毒 B3(CVB3)后随机分成 2组 :黄芪治疗组 (每天腹腔注射黄芪注射液 1 0 g/ kg)及对照组 ,第 8天取心脏标本 ,进行病理学检查、细胞凋亡 TUNEL 法检测以及逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)分析 bcl- 2和 bax m RNA的表达水平。结果 :1黄芪治疗组病变积分明显低于对照组 (P <0 .0 1 ) ;2黄芪治疗组心肌细胞凋亡指数 (AI)明显低于对照组 (P <0 .0 1 ) ;3黄芪治疗组心肌组织 bcl- 2的 m RNA的相对表达量明显高于对照组 (P <0 .0 1 ) ,bax m RNA的相对表达量无明显改变 (P >0 .0 5 ) ,bcl- 2m RNA/ bax m RNA比值则明显增高 (P <0 .0 5 )。结论 :黄芪可通过上调病毒性心肌炎小鼠心肌组织 bcl- 2的基因转录 ,抑制细胞凋亡 。

多原发膀胱癌与单发膀胱癌中P53、Bcl-2、C-erbB-2、EGFR的表达及临床意义

目的:研究多原发膀胱癌与单发膀胱癌中P53、Bcl-2、C-erbB-2、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达情况,探讨其临床意义,为多原发膀胱癌的临床诊断、鉴别诊断及靶向治疗提供实验依据。方法:运用免疫组化方法检测多原发膀胱癌15例,单发膀胱癌15例(临床分期、病理分级与多原发膀胱癌相同),正常膀胱组织15例,3组共45例中P53、Bcl-2、C-erbB-2、EGFR的表达情况,比较其阳性表达率及表达程度的差异。结果:多原发膀胱癌及单发膀胱癌中P53、Bcl-2、C-erbB-2、EGFR的阳性表达均高于正常膀胱组织(P<0.05),多原发膀胱癌组织中P53、Bcl-2的阳性表达高于单发膀胱癌组织(P<0.05),而C-erbB-2、EGFR的阳性表达低于单发膀胱癌组织(P<0.001)。结论:多原发膀胱癌与单发膀胱癌组织中P53、Bcl-2、C-erbB-2、EGFR表达有差异;联合检测P53、Bcl-2、C-erbB-2、EGFR对于多原发膀胱癌的诊断及鉴别诊断具有一定临床价值,也为多原发膀胱癌的靶向治疗提供了可能。