柚皮苷对乳鼠成骨细胞增殖及c-fos、c-jun表达的影响

目的研究柚皮苷(naringin)对体外培养的小鼠成骨细胞增殖及c-fos和c-jun表达的影响。方法取第1代BALB/c小鼠颅盖骨成骨细胞,将柚皮苷以0.1、1、10μmol·L-1 3种浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,MTT法观察各组对成骨细胞的增殖作用并绘制细胞生长曲线,用PNPP法测定成骨细胞内碱性磷酸酶(alkaliphos-phatase,ALP)活性,RT-PCR法检测成骨细胞c-fos和c-jun的转录水平。结果细胞生长曲线显示各组成骨细胞数量均随时间延长而增加,中、高浓度的柚皮苷能提高成骨细胞的ALP活性,促进c-fos mRNA表达(P<0.01),对成骨细胞c-jun mRNA表达增强作用不明显(P>0.05)。结论低浓度柚皮苷(0.1μmol·L-1)对骨更新作用不明显,而中、高浓度的柚皮苷(1、10μmol·L-1)能通过上调c-fos mRNA表达,促进成骨细胞的生成功能,增强骨更新。柚皮苷不是通过促进c-jun表达来促进成骨细胞增殖与分化的。

姜黄素对沙土鼠脑缺血/再灌注损伤的海马CA1区细胞凋亡和即早基因c-fos、c-jun、NF-κB表达变化的关系

目的探讨姜黄素对沙土鼠海马CA1区缺血/再灌注损伤的影响及与即早基因c-fos、c-jun、NF-κB在海马CA1区表达的关系及意义。方法采用沙土鼠双侧颈总动脉阻断缺血/再灌注损伤模型。动物随机分为假手术组(SH)、脑缺血/再灌注组(I/R)、姜黄素组(CU)、溶剂对照组(SC);每组据再灌注时间点的不同又分多个亚组,每组6只动物。在预定时间点行开阔法行为学检查、TUNEL法海马CA1区凋亡细胞检测,免疫组织化学ABC法测定c-fos、c-jun、NF-κB蛋白在海马CA1区的动态变化。结果姜黄素可显著减少沙土鼠探索活动及海马CA1区凋亡锥体细胞数量(P<0.01)、诱导Fos蛋白及抑制Jun和NF-KB蛋白的表达(P<0.01)。结论姜黄素具有脑保护作用,调控即早基因c-fos、c-jun和NF-κB的表达可能是作用机制之一。

癌基因c-fos和c-jun在肝细胞型肝癌中的表达及临床意义

目的 :研究癌基因 c- fos和 c- jun在肝细胞型肝癌中的表达及临床意义。方法 :采用免疫组化技术检测 1 0例正常肝组织、2 3例癌旁异型增生肝组织和 31例肝细胞型肝癌组织的癌基因 c- fos和 c- jun表达 ,并对两者相关性进行分析。结果 :在正常组织中 c- fos和 c- jun弱表达或不表达 ;在癌旁异型增生肝组织中 c- fos和 c- jun的阳性例数分别为 1 5 ( 65 .2 % )和 1 4( 60 .9% ) ,染色强度与正常肝组织相比差异有显著性 ( P<0 .0 5 ) ;在肝细胞型肝癌中 c- fos和 c- jun阳性例数分别为1 7( 5 4 .8% )和 1 6( 5 1 .9% )。c- fos和 c- jun表达水平与癌组织分化程度有关 ( P<0 .0 5 ) ,而且二种癌基因在肝细胞型肝癌中表达的协同性较强。结论 :c- fos和 c- jun癌基因的异常表达可能在肝细胞型肝癌的发生发展中起重要作用 ;c- fos和 c- jun表达水平与肝细胞型肝癌的分化程度有关 。

草果知母汤在阻断PTZ点燃癫痫模型中对大鼠脑内c-fos、c-junmRNA表达的影响

目的 :探讨草果知母汤抗痫作用的分子生物学机制。方法 :选用SD大鼠以戊四唑 (PTZ)诱导产生癫痫动物模型 ,应用分子原位杂交技术观察草果知母汤对PTZ点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达的影响。结果 :PTZ点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达明显增强 ,草果知母汤能明显阻断其表达 ,并显示出良好的抗痫作用。结论 :草果知母汤的抗痫作用机制可能与降低脑内c fos、c jun基因表达水平有关。

haFGF和nm-haFGF过表达对乳腺肿瘤细胞增殖及c-fos、c-jun mRNA表达的影响

目的研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non-mitogenetic human acidic fibroblast growth factor,nm-haF-GF)和人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)对恶性肿瘤细胞的增殖作用及其与对c-fos、c-jun mRNA表达的影响,探讨nm-haFGF在治疗神经系统疾病和心血管疾病等方面的临床应用安全性。方法构建细胞内真核表达载体pIRES/haF-GF、pIRES/nm-haFGF,分泌型真核表达载体pSectag/haFGF、pSectag/nm-haFGF。转染乳腺癌细胞MCF-7,Western blot鉴定细胞内及上清中aFGF的表达。用流式细胞技术分析细胞周期(G0/G1,S期,G2/M)。用半定量RT-PCR检测立早基因c-fos、c-jun mRNA的表达。结果nm-haFGF和haFGF在MCF-7细胞中能够过量表达。转染nm-haFGF组的S期和G2/M细胞比率与对照组差异无显著性,而转染haFGF组差异有显著性。转染haFGF后,c-fos、c-jun mRNA的表达明显升高,转染nm-aFGF后却与未转染组无差别。结论与haFGF相比,nm-haFGF消除了促肿瘤细胞增殖活性,基本不会诱导细胞c-fos、c-jun原癌基因的转录与表达。

SOCS3基因转染对肺腺癌细胞株A549原癌基因c-fos、c-jun mRNA表达及细胞增殖的影响

目的 探讨SOCS3基因对人肺腺癌细胞株A5 49中c fos、c junmRNA表达及细胞增殖的影响。方法 以脂质体为载体将pEFSOCS3和pSV2neo共转染至人肺腺癌细胞株A5 49,RT PCR和免疫细胞化学法测定转染前后细胞中SOCS3mRNA和蛋白表达 ;半定量RT PCR测定转染前后细胞中c fos、c junmRNA水平表达变化 ;3H TdR掺入法检测基因转染前后细胞增殖情况。结果 RT PCR和免疫细胞化学证实转染后细胞中有SOCS3稳定表达 ;半定量RT PCR证实转染后细胞中c fos、c junmRNA水平显著降低 (P <0 .0 1) ;且转染组细胞 3H TdR掺入量显著降低 (P <0 .0 1)。结论 SOCS3蛋白可能通过负性调控STAT3介导的信号通路降低c fos、c jun的表达 ,从而抑制肺癌细胞增殖。

学习记忆过程中即刻早期基因c-fos、c-jun在纹状体边缘区的表达

目的研究大鼠在学习记忆过程中即刻早期基因c-fos、c-jun在纹状体边缘区内的表达。方法将动物首先在Y-宫中进行学习记忆训练,然后应用免疫细胞化学方法检测c-Fos、c-Jun蛋白在纹状体边缘区内的表达。结果大鼠经迷宫训练1h后,纹状体边缘区内即有c-Fos、c-Jun蛋白的明显表达,尤其c-Jun在边缘区的表达较纹状体其他部位为集中。迷宫训练组动物纹状体边缘区内c-Fos、c-Jun蛋白的表达数量明显高于假训练组或对照组(P<0.01)。此外,在马、扣带回等处也有c-Fos、c-Jun蛋白的阳性表达。结论大鼠进行Y-迷宫厌暗学习时,纹状状边缘区内的即刻早期因c-fos、c-jun参与学习记忆的信号转导过程。

癌基因c-fos和c-jun产物在胆囊癌中的表达

目的 探讨癌基因c fos、c jun产物在胆囊癌中的表达及其意义。 方法 采用免疫组织化学SABC法观察c fos、c jun蛋白在 10例正常胆囊组织、16例慢性胆囊炎和胆囊良性肿瘤 2 8例恶性肿瘤中的表达。结果 c fos、c jun蛋白在胆囊癌中的阳性表达率均显著高于胆囊良性肿瘤、慢性胆囊炎和正常胆囊组织 (P <0 .0 1) ,但c fos、c jun蛋白的表达强度与胆囊癌的TNM分期、组织学类型及癌组织分化程度无关 (P >0 .0 5 )。结论 癌基因c fos、c jun在胆囊癌的发生中可能起协同作用。

缺氧适应对缺血低氧脑c-fos和c-jun基因表达的影响

目的:测定脑缺血低氧后不同时间c-fos和c-jun基因表达。方法:分组:对照组(A);缺氧预处理组(B);缺血低氧组(IH组);B+IH组。采用链霉素亲生物素—过氧化酶免疫组化技术。结果:缺血低氧后30minc-fos和c-jun基因阳性细胞呈低密度分布,在3%～20%之间,1hc-fos基因表达高峰,阳性细胞呈高密度分布,皮层和海马分别为61.3%和56.8%,3hc-fos基因表达下降,12h基本消失。c-jun基因的表达高峰在3h;缺氧适应使缺血低氧脑增加的c-fos基因的阳性细胞数减少,而使缺血低氧脑增加的c-jun基因的阳性细胞进一步增加。结论:缺血低氧可诱发中枢神经系统c-fos、c-jun基因表达,且有时间依赖性;缺氧适应可抑制缺血低氧脑c-fos基因的表达,增强缺血低氧脑c-jun基因的表达。

青阳参对点燃癫痫大鼠脑内c-fos、c-jun基因表达的影响

目的 :探讨青阳参抗痫作用的分子生物学机制。方法 :大鼠杏仁核快速点燃癫痫模型 ,应用免疫组化技术观察青阳参对点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达的影响。 结果 :杏仁核点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达明显增强 ,青阳参能明显阻断其表达 ,阳性细胞数量明显减少。结论 :青阳参的抗痫作用机制可能与降低脑内c fos、c jun基因表达有关。

镉对大鼠肝细胞原癌基因c-fos、c-jun表达的影响

应用 Northern斑点杂交方法研究氯化镉对大鼠肝细胞原癌基因 c- fos、c- jun表达的影响。结果表明 ,5、10和 2 0 μmol/ kg氯化镉腹腔一次注射后 ,大鼠肝细胞 c- fos、c- jun m RNA较对照组明显增多。结果提示 ,氯化镉可以引起大鼠在体肝细胞原癌基因 c- fos、c-

急性应激诱导即时反应基因c-fos和c-jun的表达 Ⅰ:c-fos和c-jun表达的时效性

目的研究下丘脑和海马内c-fos和c-jun蛋白的表达与应激反应之间的时效关系。方法采用特异性抗体的原位免疫细胞化学方法，对游泳应激后不同时间点的大鼠下丘脑和海马内fos和jun蛋白阳性神经元的分布进行观察，用图像分析技术对大鼠下丘脑室旁核（PVN）、视上核（SON）和海马齿状回（DG）内的fos和jun阳性细胞的相对切面面积比和平均目标灰度进行分析。结果游泳应激结束后3h，室旁核和视上校及齿状区内可见密集深染的c-fos和c-jun阳性细胞，室旁核小细胞部，背内侧核等区域亦有疏密不一的阳性胞体。图像分析结果发现，游泳应激结束后3～8h内下丘脑PVN和SON及海马DG内fos和jun阳性胞体的相对切面面积比明显高于正常大鼠（P＜0.01），而平均目标灰度则显著降低（P＜0.01）。结论应激可以诱导下丘脑和海马等相关脑区c-fos和c-jun的表达，并且具有很强的时效关系。

醒脑静对戊四氮慢性点燃大鼠癫痫模型脑内c-fos、c-jun蛋白表达的影响

目的:探讨醒脑静抗痫作用可能的分子生物学机制。方法:将健康雄性SD大鼠50只随即分成正常组、模型组、醒脑静组、苯巴比妥组及中西药合用组5组,每组各10只,通过免疫组化方法观察分析醒脑静对戊四氮点燃癫痫大鼠脑组织中c-fosc、-jun蛋白表达的影响。结果:模型组大鼠脑组织中有大量c-fos、c-jun阳性细胞数。醒脑静组脑内阳性细胞数明显较模型组减少(P<0.01),与苯巴比妥组比较,差别无统计学意义(P>0.05)。中西药合用组脑内阳性细胞数较醒脑静及苯巴比妥单用组更少(P<0.01)。结论:醒脑静的抗痫作用可能与其阻断脑内c-fosc、-jun蛋白的表达有关。

氯化甲基汞对大鼠脑c-fos和c-jun基因表达的影响

为了研究即刻早期基因c fos、c jun在氯化甲基汞 (MMC)神经毒性机制中的作用 ,本研究应用免疫组织化学方法对皮下注射甲基汞 5 .0mg/kg及 0 1mg/kg的大鼠脑区FOS、JUN表达水平进行观察 ,对照组注射生理盐水 .结果表明 ,急性暴露 3h后 ,暴露组大鼠脑FOS、JUN蛋白表达均高于对照组 ,从而表明即刻早期基因 (IEG)

新生鼠缺氧缺血再灌注后海马c-Fos,c-Jun的表达与神经保护

目的 :探讨新生鼠缺氧缺血再灌注后c fos,c jun表达与神经元损伤后存活的关系 .方法 :7日龄SD鼠 ,经弹性管穿线阻断右颈总动脉 3h ,予低氧 1h ;制备成缺氧缺血脑损伤 (HIBD)模型 .后施以不同时期的再灌注 ,彩色多普勒监测血流 .用免疫组织化学的方法 ,观察c fos,c jun在仔鼠HIBD后不同再灌注时间点海马的表达变化 .Thionin染色观察神经元的凋亡 .结果 :HIBD组右侧海马c fos,c jun 6h达高峰 ,2 4h稍降 ,4 8h又升高 ,7d后显著降低但仍明显高于对照组 (P <0 .0 1) .对照组c fos,c jun有极少数表达 .Thion in染色发现 :CA1区锥体细胞在HIBD再灌注 2 4h后神经元有明显凋亡 (P <0 0 1) ,但 7d后细胞凋亡无统计学意义(P >0 0 5 ) ,CA3,DG区神经元也保持形态上的完好 .对照组海马各区仅极少数神经元凋亡 .结论 :c Fos,c

胍丁胺抑制福尔马林诱导的脊髓PKCγ,pCREB,c-Fos和c-Jun表达上调

目的研究福尔马林致炎性疼痛脊髓蛋白激酶Cγ(PKCγ),磷酸化的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(pCREB),即刻早期基因c-fos和c-jun表达的变化及胍丁胺对其的影响。方法♂SD大鼠,180～220g,随机分为:①生理盐水组;②福尔马林组;③胍丁胺(160mg·kg-1,ip)组。足底注射5%福尔马林50μl后10、20、120min取L4,5脊髓,通过免疫组化和免疫印迹研究,检测胍丁胺对炎性疼痛脊髓PKCγ、pCREB、c-Fos和c-Jun蛋白表达变化的影响。结果大鼠单侧足底注射5%福尔马林10min后,引起双侧脊髓膜结合PKCγ表达量升高;足底注射20min后,双侧脊髓pCREB表达量升高;足底注射2h后,注射侧脊髓背角c-Fos和c-Jun蛋白表达量升高,注射对侧脊髓c-Fos和c-Jun蛋白表达量没有改变。胍丁胺明显抑制福尔马林所引起的膜结合PKCγ、pCREB、c-Fos和c-Jun蛋白表达量的升高(P<0.01)。结论炎性疼痛引起脊髓膜结合PKCγ、pCREB、c-Fos和c-Jun蛋白表达上调可能参与疼痛及痛觉过敏的产生。胍丁胺的镇痛机制可能与抑制PKCγ、pCREB、c-Fos和c-Jun等痛觉相关的信号转导分子的表达有关。

体外冲击波诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞转化过程中c-fos、c-jun的表达

应用低能冲击波作用于对数生长期的骨髓间充质干细胞(hMSCs),通过改良的钙—钴染色法、茜素红染色法及检测钙结节,应用图文分析系统,通过hMSCs向成骨细胞转化程度来确定最佳冲击波作用强度,并采用RT-PCR检测c-fos和c-jun基因表达量的变化。结果显示,8.5kV电压、体外冲击120次为最佳作用强度,成骨作用明显优于对照组(P(0.01);c-fos和c-jun基因表达量较对照组明显增加,冲击作用后45min达到高峰。认为低能冲击波在适宜强度下可诱导hMSCs向成骨细胞转化,c-fos和c-jun基因表达增加。

缺碘低硒区与缺碘富硒区胎儿大脑皮层原癌基因c-fos,c-jun产物表达对比研究

目的 研究微量元素 Se与胎脑神经元原癌基因 c- fos,c- jun蛋白表达之间的关系。方法 在陕西缺碘低硒区 (宜君县 )缺碘富硒区 (紫阳县 )及对照组 (临潼县 ) 3地共解剖水囊引产胎儿胎脑 2 0例 ,通过免疫组化法检测胎脑大脑皮层神经元原癌基在 c- fos,c- jun蛋白产物的表达 ,并采集其脐血进行微量元素检测。结果 补碘近 2 0年后 ,3地碘水平已无明显差异 ,而 Se水平 3地则有显著差异 ,以紫阳为最高 ,宜君为最低 ;C- Fos,C- Jun蛋白表达以紫阳较强 ,宜君最弱。结论 Se的水平可影响胎脑大脑皮层神经元 C- Fos,C- Jun蛋白的表达 。

万拉法新对强迫游泳大鼠下丘脑和海马c-fos及c-jun蛋白表达的下调作用

目的 探索新一代抗抑郁药万拉法新对大鼠下丘脑和海马内ｃｆｏｓ 和ｃｊｕｎ 蛋白表达的影响。方法 采用特异性抗体的原位免疫细胞化学方法，在强迫游泳大鼠抑郁模型上，观察万拉法新慢性给药（ 腹腔内注射每日１ 次，连续７ 次）对大鼠游泳不动时间和下丘脑及海马核团ｃｆｏｓ 和ｃｊｕｎ 表达的影响；用图像分析技术对大鼠下丘脑室旁核（ Ｐ Ｖ Ｎ） 、视上核（ Ｓ Ｏ Ｎ） 和海马齿状回（ Ｄ Ｇ） 内的ｆｏｓ 和ｊｕｎ 阳性细胞的相对切面面积比和平均目标灰度进行分析。结果 强迫游泳可使大鼠下丘脑和海马内多个核团的ｃｆｏｓ 和ｃｊｕｎ 蛋白表达水平增加，而万拉法新明显缩短了强迫游泳大鼠的不动时间。图像分析结果提示，万拉法新使强迫游泳大鼠下丘脑 Ｐ Ｖ Ｎ 和 Ｓ Ｏ Ｎ 及海马 Ｄ Ｇ 内ｆｏｓ 和ｊｕｎ 阳性细胞相对切面面积比明显降低（ Ｐ＜００５） ，而平均目标灰度显著增加（ Ｐ＜ ００１） 。结论 下丘脑 Ｐ Ｖ Ｎ、 Ｓ Ｏ Ｎ 和海马 Ｄ Ｇ 可能是介导抗抑郁药抑制大鼠绝望行为的重要中枢核团，ｆｏｓ 和ｊｕｎ 蛋白可能是抗抑郁药发挥受体后作用的传导物质。

雌激素上调小鼠长骨c-fos和c-jun表达水平

目的 考察雌酚酮对骨组织c fos和c jun表达的影响 ,为研究雌激素对骨的作用机制积累资料。方法 用体外培养胎鼠长骨考察了雌酚酮对骨生长的作用 ,并采用免疫组织化学方法测定了其对骺板静止区、增殖区和肥大区c fos和c jun蛋白质表达的影响。结果 雌酚酮在体外能促进长骨生长 ,并在 10 -9mol·L-1～ 10 -7mol·L-1浓度范围内以剂量依赖的方式上调 3个区c fos和c jun蛋白质表达水平。结论 提示雌酚酮可能通过上调c fos和c jun在软骨细胞的表达而促进含有AP 1结合位点的、与骨生长发育有关的基因转录和表达 。