表皮生长因子和甲硫氨酸脑啡肽诱导人白细胞c-fos基因表达的研究

由健康人外周血分离淋巴细胞及溶血处理后的全白细胞,以外源性表皮生长因子和甲硫氨酸脑啡肽培育后取细胞悬液制成滴片和滴膜,用生物素标记的c-fos cDNA探针进行原位杂交和斑点印迹杂交.结果显示表皮生长因子和甲硫氨酸脑啡肽两组c-fos原癌基因的表达均较对照组增强(P<0.05).

+Gz重复暴露对大鼠脑组织c-fos、c-jun和神经生长因子基因表达的影响

为了解 +Gz重复暴露后大鼠脑组织 c- fos、c- jun和神经生长因子 (NGF)基因表达的变化 ,探讨它们在 +Gz所致脑损伤中的作用和意义 ,用半定量反转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测方法检测 +Gz重复暴露后大鼠脑组织 c- fos、c- jun和 NGF m RNA表达水平。结果 c- fos和 c- jun在 +Gz重复暴露后 30 m in m RNA表达明显升高 ,6 h和 2 4h降至正常 ;NGF在 30 min和 6 h表达均明显升高 ,2 4h恢复正常。表明 +Gz重复暴露可诱导大鼠脑组织 c- fos、c- jun和 NGF m RNA的表达 ,提示它们的表达增加可能在

丹参对转化生长因子β_1刺激的NIH/3T3细胞表达Ⅰ型胶原和c-fos mRNA的影响

目的:观察丹参对TGFβ_1刺激的NIH/3T3成纤维细胞功能的影响。方法:将丹参灌胃给正常大鼠,分离含药血清,温育TGFβ_1刺激的成纤维细胞。RT-PCR法检测Ⅰ型胶原和c-fos的基因表达。结果:经TGFβ_1刺激后,细胞Ⅰ型胶原和c-fos的mRNA表达明显增加,丹参含药血清可分别抑制由TGFβ_1引起的细胞Ⅰ型胶原和c-fos的mRNA表达的增加,结论:丹参可能通过抑制c-fos的基因表达进而抑制Ⅰ型胶原的基因表达。

神经生长因子对视网膜缺血再灌注损伤中凋亡相关基因c-fos/c-jun表达的影响

目的探讨神经生长因子（NGF）对视网膜缺血再灌注损伤中凋亡相关基因c—fos／c—jun表达的影响。方法将28只Wistar大鼠随机分为正常组、缺血组和治疗组，后两组又按照不同再灌注时间分为再灌注后1、6、12、24、48、72h6个时间段。建立视网膜缺血再灌注损伤动物模型，以NGF或平衡盐溶液玻璃体腔注射，通过免疫组织化学法检测各组视网膜组织中c-fos／c-jun基因的表达变化。结果缺血组视网膜再灌注后1h可发现有c—fos／c-jun蛋白的表达，12h达到高峰，24h表达明显下降。治疗组变化规律与缺血组相似，但表达量明显减弱，再灌注1～24h各时段差异有统计学意义（P〈0．05）。结论视网膜缺血再灌注损伤时c—fos／c-jun基因在视网膜神经节细胞层（RGCL）与内核层表达增高；NGF可以抑制视网膜缺血再灌注损伤时c—fos／c-jun基因在视网膜的表达。

碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞生长与c-fos表达的影响

以重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (rb- b FGF)刺激体外培养的大鼠成骨细胞 ,发现 :经过 1～ 2 d的刺激 ,成骨细胞产生很长的突起 ,细胞数量和活力较对照均有显著升高 ;经 rb- b FGF 1h的刺激后 ,c- fos基因的表达即明显高于对照 ,刺激 1～ 2 d后 c- fos基因的表达也明显高于对照。这表明 b FGF可促进大鼠成骨细胞增殖 ,提高c- fos基因的表达量。 c- fos表达量的提高 。

雷公藤多苷对胶原诱导性关节炎大鼠组织中血管内皮生长因子及血管内皮生长因子受体2mRNA表达水平的影响

目的雷公藤多苷联合其他药物治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的临床疗效已得到肯定,但其作用机制尚待进一步研究。文章探讨雷公藤多苷对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠关节肿胀和滑膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growthfactor receptor-2,VEGFR2)mRNA表达水平的影响。方法使用造模成功大鼠30只,并随机分为模型组、雷公藤多苷组,另设正常组。每隔1周计算其关节炎指数和关节肿胀度,并采用实时荧光定量PCR法检测大鼠滑膜组织中VEGF、VEGFR2mRNA的表达水平。结果经雷公藤多苷治疗后的模型大鼠的关节炎指数和关节肿胀度均显著下降(P<0.05),VEGFmRNA的表达低于模型组(P<0.05),VEGFR2 mRNA与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论雷公藤多苷能够改善CIA大鼠的关节肿胀情况,降低VEGF及VEGFR2的表达,为类风湿关节炎患者的临床治疗提供实验依据。

血管内皮生长因子对脊髓神经组织保护作用及c-fos基因的影响

目的探讨血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)对脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和c-fos基因的影响及保护机制。方法将85只同龄Wistar大鼠,采用Allens的weightdropping(WD)法挫伤大鼠T11节段脊髓,于术后0,15min,1,2,4,8,12,24h经蛛网膜下腔导管各注入VEGF溶液15μL(含VEGF20μg),并与生理盐水组和正常对照组作对照。采用原位末端标记法(TUNEL法)检测脊髓损伤前后发生凋亡的脊髓神经元。采用免疫组化和原位杂交方法检测脊髓损伤前后c-fos基因的变化。结果正常组脊髓前角中未发现凋亡细胞,生理盐水组于伤后2h始出现凋亡神经元。VEGF组与生理盐水组相比较,凋亡神经元明显减少(P<0.01,t=24.25)。c-fos基因表达在正常脊髓组织中呈弱阳性,在生理盐水组中表达明显增加,VEGF组c-fos基因表达比生理盐水组明显减少(P<0.01,t=12.03)。结论脊髓损伤后脊髓神经元凋亡增多和c-fos基因表达显著增多,VEGF能抑制脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和c-fos基因表达,从而保护损伤的神经组织。

神经生长因子对脊髓损伤后脊髓组织c-fos蛋白表达的影响

为探讨神经生长因子（ＮＧＦ）对脊髓损伤后脊髓组织ｃ－ｆｏｓ基因表达的影响。Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成三组：正常对照组、生理盐水组、ＮＧＦ组；用ＡｌｅｎＷＤ法以１０ｇ×２．５ｃｍ致伤力损伤Ｔ８脊髓。ＮＧＦ组经蛛网膜下腔导管分别于术后即刻、１０、３０分、１、２、３、４小时注入ＮＧＦ溶液２０μｌ（含ＮＧＦ６０μｇ），生理盐水组经导管于同时间内注入等量的生理盐水。用免疫组化法检测ｃ－ｆｏｓ蛋白在脊髓组织中的表达。结果示生理盐水组在术后１５分ｃ－ｆｏｓ蛋白表达开始增多，术后２小时表达达高峰；ＮＧＦ组能抑制脊髓损伤后ｃ－ｆｏｓ蛋白的表达。结论：ＮＧＦ通过抑制损伤后ｃ－ｆｏｓ基因表达，从而保护了神经元并抑制继发性损害的发生，这可能是ＮＧＦ保护脊髓损伤作用机理之一。

四环素诱导性人肝细胞生长因子真核表达载体的构建与鉴定

目的构建四环素诱导性人肝细胞生长因子(HGF)真核表达载体。方法运用基因重组技术,将人HGFcDNA全长序列,定向克隆于四环素诱导性真核表达载体pBI-L多克隆位点MluI和SalI之间,限制性内切酶酶切和测序鉴定。结果重组pBI-L-HGF真核表达载体经限制性内切酶酶切,与理论值相符;测序结果与GenBank比对,序列正确。结论本实验成功构建人HGF四环素诱导性真核表达载体pBI-L-HGF,为今后临床开展HGF基因治疗提供了一种安全可调控的基因治疗策略。

神经生长因子对小鼠视网膜光损伤后c-fos、c-jun表达的影响

目的进一步提高黄斑变性疾病的治疗效果。方法将54只BALB/C小鼠随机分为光照组24只、神经生长因子(NGF)组24只和对照组6只;前两组在自制光照箱中连续光照3 h制作光损伤模型,NGF组制模成功后即刻腹腔注射NGF 20μl(含NGF 2μg),光照组腹腔注射等量生理盐水,对照组不作任何处理。NGF组和光照组分别于制模后6 h、12 h、36 h和7 d各处死大鼠6只。光镜下观察各组小鼠视网膜组织结构的改变。应用免疫组织化学法检测各组小鼠视网膜组织凋亡相关基因c-fos、c-jun蛋白的表达。结果对照组视网膜组织结构层次清楚,外核层排列规则,光照组光照后出现视网膜细胞绒毛肿胀、断裂,线粒体肿胀,感光细胞及细胞核破坏,损伤主要发生在光感受器细胞层;对照组视网膜组织c-fos、c-jun几乎不表达,NGF组及光照组c-fos、c-jun表达均明显升高,但NGF组明显低于光照组(P<0.01)。结论 NGF对视网膜光照有保护作用,其机制可能为抑制c-fos、c-jun的表达,减少视网膜细胞凋亡。

降钙素基因相关肽和神经生长因子对短暂性脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-fos mRNA及蛋白表达的影响

目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(NGF)对短暂性脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-fosmRNA及蛋白表达的影响。方法:在脑缺血后再灌注模型上,应用原位杂交和免疫组织化学结合显微图像分析方法检测c-fosmRNA及蛋白表达。结果:缺血组大鼠纹皮质较假手术组c-fosmRNA和蛋白表达非常显著增加;CGRP组和NGF组c-fosmRNA和蛋白表达分别显著弱于缺血组;CGRP和NGF合用组c-fosmRNA和蛋白表达非常明显弱于缺血组、CGRP组和NGF组。结论:CGRP和NGF分别抑制脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-fosmRNA及蛋白表达,联合应用则能显著抑制脑缺血后再灌注大鼠纹皮质cfosmRNA及蛋白表达,二者对保护缺血神经元可能有协同作用。

转化生长因子β对肝星状细胞c-fos基因表达的调节

目的了解转化生长因子β(TGF)对肝星状细胞c-fos基因表达的影响。方法在培养的肝星状细胞系中加入不同浓度的TGF(终浓度0.2、1、5ng/ml),于8、24、48、72h四个时间点分别收集细胞,提取肝星状细胞总RNA;用逆转录定量PCR方法测定c-fos基因的表达水平。结果TGF不同浓度组肝星状细胞c-fos基因表达水平在8、24、48、72h四个时间点均显著高于对照组;随剂量加大,c-fos基因表达水平逐渐升高;3组间也有显著差异。结论转化生长因子β对肝星状细胞c-fos基因表达有明显的上调作用。

表皮生长因子对大鼠血淋巴细胞c-fos基因表达的效应

本研究的目的是探讨表皮生长因子（ＥＧＦ）对大鼠血淋巴细胞转化率和ｃ－ｆｏｓ基因表达的效应。结果表明：大鼠血淋巴细胞呈免疫反应性（ＥＧＦＲ－ＩＲ），胞质内可见到ＥＧＦｍＲＮＡ信号；ＥＧＦ孵育可显著提高大鼠血淋巴细胞的转化率和ｃ－ｆｏｓ基因表达水平，与对照组相比较，Ｐ＜０．００１，而与植物血凝素（ＰＨＡ）孵育组无显著性差异，Ｐ＞０．０５。结果提示：大鼠血淋巴细胞的ＥＧＦ有自分泌效应；ＥＧＦ对大鼠血淋细胞具有丝裂原的作用；ＥＧＦ的促有丝分裂信息可能是通过“第三信使”——Ｆｏｓ途径影响淋巴细胞的表型。

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠牵张性脊髓损伤后c-fos基因表达的影响

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growthfactor,bFGF)对牵张性脊髓损伤后c-fos基因表达的影响.方法用特制的脊柱撑开器放置在大鼠脊髓T12～L3椎体横突上纵向牵张,同时皮层体感诱发电位监测,建立大鼠牵张性脊髓损伤模型.用免疫组织化学染色法观察c-fos基因的表达,并用计算机图像分析系统进行定量分析.结果脊髓损伤后神经元C-FOS蛋白D值较正常组显著增加,表达高峰出现在损伤后2 h,而bFGF治疗组在各时相点均低于对照组(P＜0.05,P＜0.01).结论碱性成纤维细胞生长因子能显著抑制脊髓损伤后c-fos基因的表达,这可能是bFGF保护神经元并减轻脊髓损伤的机制之一.

血管内皮细胞生长因子和c-Fos在单基因遗传自然发病型糖尿病小鼠颌下腺中的表达

目的:观察血管内皮细胞生长因子和c-Fos蛋白在db/db自发性糖尿病小鼠颌下腺的表达,及其与糖尿病病程和颌下腺形态学改变的关系。方法:实验于2004-05在承德医学院中心实验室和承德医学院附属医院病理科完成。取3,4,6,8,10月龄db/db(单基因遗传自然发病型)糖尿病小鼠颌下腺(实验组)及相应月龄的db/+m正常小鼠颌下腺(对照组),采用SP免疫组化染色,观察颌下腺血管内皮细胞生长因子、c-Fos阳性表达的变化。结果:①颌下腺血管内皮细胞生长因子阳性细胞数目:实验组3,4,6,8,10月龄高于相应对照组[(11.8±3.35),(17.4±2.61),(20.6±1.92),(26.8±4.85),(28.0±4.22)个/视野;(6.6±0.89),(11.8±1.64),(16.2±3.27),(16.4±3.97),(17.6±1.82)个/视野,P<0.05,0.01],且呈逐渐增加趋势。②颌下腺c-Fos阳性细胞数目:实验组3,4,6月龄低于相应对照组[(6.4±0.65),(7.8±0.84),(7.9±0.65)个/视野;(12.2±0.84),(11.4±0.55),(10.8±0.84)个/视野,P<0.01]。③糖尿病病程的延长,实验组下颌下腺的实质细胞有明显形态学改变,其中腺泡萎缩明显,细胞排列紊乱。结论:①血管内皮细胞生长因子表达在db/db糖尿病小鼠颌下腺中随病程延长表达增加,与糖尿病病程呈正相关。②db/db糖尿病状态下颌下腺实质发生萎缩性形态学变化,颌下腺细胞表达c-Fos蛋白明显降低,可能与其密切相关。

碱性成纤维细胞生长因子对豚鼠透镜诱导性近视眼巩膜细胞凋亡的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对豚鼠透镜诱导近视眼(lens inducedmyopia,LIM)后极部巩膜细胞凋亡的影响及其在抑制近视形成中的作用机制。方法将4周龄的清洁级健康花色豚鼠随机分为正常对照组(双眼均不处理)、LIM 组、LIM+PBS 组、LIM+bFGF 低剂量(100 ng)组、LIM+bFGF 中剂量(500 ng)组和LIM+bFGF 高剂量(1000 ng)组,每组15只。除正常对照组外,其余各组右眼(实验眼)配戴-10 D 透镜7 d 后,将相应浓度的 bFGF 或 PBS 注入豚鼠玻璃体腔,3 d 后再次注射,配戴透镜15 d 后,取后极部巩膜组织,用电镜、终末脱氧核糖核苷酸转移酶介导原位缺口末端标记法(TUNEL)及流式细胞术检测巩膜的凋亡细胞,应用 Ki-67免疫组织化学染色检测巩膜细胞增殖的情况。结果与正常对照组比较,LIM 组处理眼有明显近视形成[(3.57±0.78)D]和巩膜细胞的凋亡[凋亡率为(11.28±0.04)%],差异有统计学意义(P<0.05);与 LIM+PBS 组比较,LIM+bFGF 低剂量组、LIM+bFGF 中剂量组和 LIM+bFGF 高剂量组处理眼近视被抑制,凋亡率明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着 bFGF 剂量加大,bFGF 抑制近视的作用增强。结论 bFGF 能通过降低后极部巩膜细胞凋亡率有效抑制豚鼠 LIM 的形成。

热痹康汤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子的影响

目的:观察清热解毒抗风湿方药——热痹康汤对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:将60只清洁级雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,甲氨蝶呤组,热痹康汤低、中、高剂量组,每组10只。除空白对照组外,其余各组大鼠采用弗氏不完全佐剂联合牛Ⅱ型胶原蛋白诱导CIA大鼠模型。造模成功后开始给药,模型对照组给予生理盐水灌胃,热痹康汤低、中、高剂量组分别给予热痹康汤提取物低、中、高剂量灌胃,甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤灌胃,空白对照组大鼠自由饮水和进食。观察不同剂量热痹康汤对CIA大鼠的关节肿胀指数及其滑膜VEGF的影响。结果:热痹康汤各剂量组及甲氨蝶呤组大鼠的关节肿胀指数均低于模型对照组(P<0.01),其中中剂量热痹康汤作用与甲氨蝶呤相当(P>0.05),高剂量热痹康汤作用优于甲氨蝶呤(P<0.01);热痹康汤各剂量组及甲氨蝶呤组大鼠滑膜的VEGF水平均低于模型对照组(P<0.05),其中高剂量热痹康汤作用优于甲氨蝶呤(P<0.05),中、低剂量热痹康汤作用与甲氨蝶呤相当(P>0.05)。结论:热痹康汤治疗类风湿关节炎的机制是通过抑制滑膜VEGF的产生而实现的。

+G_Z重复暴露对大鼠脑组织c-fos、c-jun和神经生长因子基因表达的影响

目的：为了解＋ ＧＺ 重复暴露后大鼠脑组织ｃｆｏｓ、ｃｊｕｎ 和神经生长因子（ＮＧＦ） 基因表达的变化，探讨它们在＋ ＧＺ 所致脑损伤中的作用和意义。方法：用半定量反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） 检测方法检测＋ ＧＺ 重复暴露后大鼠脑组织ｃｆｏｓ、ｃｊｕｎ 和ＮＧＦ ｍ ＲＮＡ 表达水平。结果：ｃｆｏｓ 和ｃｊｕｎ 在＋ ＧＺ 重复暴露后３０ ｍｉｎ ｍ ＲＮＡ 表达明显升高，６ｈ 和２４ｈ 降至正常；ＮＧＦ 在３０ ｍｉｎ 和６ ｈ 表达均明显升高，２４ ｈ 恢复正常。结论：表明＋ ＧＺ 重复暴露可诱导大鼠脑组织ｃｆｏｓ、ｃｊｕｎ 和ＮＧＦ ｍ ＲＮＡ 的表达，提示它们的表达增加可能在＋ ＧＺ 所致脑损伤中起病理或保护作用。

碱性成纤维细胞生长因子对鼻咽癌上皮样细胞株蛋白激酶B和c-fos的影响

目的 通过改变碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)作用的时间 ,研究bFGF调节鼻咽癌上皮样细胞系 (carcinomaepithelioidcelllines Ⅰ ,CNE Ⅰ )鼻咽癌细胞生长过程与磷脂酰肌醇 3 激酶 /蛋白激酶B (phosphatidylinositol3 kinase/proteinkinaseB ,PI 3 K/PKB)信号转导途径的关系。方法 采用3 2 P掺入法检测细胞质和细胞膜PKB活性。采用WesternBlot检测AP 1转录因子组成成员c fos的蛋白表达水平。结果 当采用外源性bFGF(5 0ng/ml)以不同时间作用于CNE Ⅰ细胞时 ,可提高细胞质和细胞膜PKB活性 ,而PI 3 K特异性抑制剂渥曼青霉素(Wortmannin)预处理 1h后再施加bFGF ,可显著降低细胞质和细胞膜PKB活性。统计学分析 (单因素方差分析 )表明Wortmannin预处理组和未做预处理组之间差异存在显著性 (P <0 0 5 )。当外源性bFGF(5 0ng/ml)以不同时间作用于CNE Ⅰ细胞时 ,c fos表达增加 ,在 30min时达到高峰 ,用Wortmannin(10 0nmol/L)预处理 1h后施加bFGF ,c fos表达与未做预处理组相比有所减少 ,在 30min时间点降低 2 0 % ,在 4 5min时间点降低 35 %。结论 PI3 K、PKB介导bFGF对CNE Ⅰ鼻咽癌细胞的信号转导 ,PKB位于PI3 K下游 ;bFGF通过PI 3 K/PKB通路诱导CNE Ⅰ鼻咽癌细胞c fos表达?

表皮生长因子对肝星状细胞c-fos基因表达的影响

目的了解表皮生长因子(EGF)对肝星状细胞c-fos基因表达的影响。方法在培养的肝星状细胞系中加入不同浓度的EGF(终浓度20ng/ml、100ng/ml、500ng/ml),于8h、24h、48h、72h四个时间点分别收集细胞,提取肝星状细胞总RNA;用逆转录定量PCR方法测定c-fos基因的表达水平。结果EGF三组HSC-T6细胞c-fos基因表达水平在8h、24h、48h、72h四个时间点均显著高于对照组;随剂量加大,HSC-T6细胞c-fos基因表达水平逐渐升高,三组间也有显著差异。结论表皮生长因子对肝星状细胞c-fos基因表达有明显的上调作用。