基于肌醇需求激酶1α/c-Jun氨基末端激酶信号通路探讨胆宁片干预非酒精性脂肪性肝病的作用及机制

目的基于肌醇需求激酶1α/c-Jun氨基末端激酶(IRE1α/JNK)信号通路,探讨胆宁片对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠的作用及机制。方法将32只SD大鼠随机分为正常饮食组(A组,等体积生理盐水,8只)和高脂饮食组(24只);高脂饮食组大鼠喂养10周复制NAFLD模型成功后,再随机分为模型组(B组,等体积生理盐水)、多烯磷脂酰胆碱组[C组,142.5 mg/(kg·d)]和胆宁片组[D组,562.5 mg/(kg·d)],各8只。各组小鼠均灌胃相应药物干预6周。测定大鼠的体质量、血糖(GLU);采用苏木精-伊红染色(HE)法观察大鼠肝组织病理形态变化,采用油红染色法观察肝组织脂质沉积;检测血清胰岛素(INS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、游离脂肪酸(NEFA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;采用免疫印迹(Western blot)法检测肝组织IRE1α、JNK1、磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS1)的蛋白表达水平。结果与B组比较,D组大鼠血糖和TC,TG,LDL-C,NEFA,ALT,AST水平均显著降低(P<0.01),血清INS和HDL-C水平显著升高(P<0.01);脂肪变性程度及细胞肿胀明显减轻,脂滴空泡体积缩小,数量减少;肝脏IRE1α,JNK1,p-IRS1蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。结论胆宁片可能通过下调IRE1α/JNK信号通路,减轻肝脏脂肪变性,从而改善NAFLD。

青藤碱在JNK/c-Jun信号通路中对LPS诱导的肺上皮细胞凋亡和自噬的影响

目的:探究青藤碱(SIN)通过JNK/c-Jun信号通路对LPS诱导的肺上皮细胞凋亡和自噬的影响。方法:培养肺上皮细胞MLE-12,通过CCK-8检测SIN的毒性。流式细胞术检测细胞凋亡,免疫荧光检测自噬体形成数量,Western blot检测细胞中凋亡、自噬以及JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达水平。结果:LPS造模后,细胞凋亡率和自噬体数量升高,Cleaved caspase-3、Bax和Beclin-1蛋白水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p-JNK/JNK和p-c-Jun/c-Jun均升高(P<0.05);Bcl-2、P62蛋白水平均降低(P<0.05)。SIN处理可明显改善LPS对细胞凋亡和自噬的影响,以及对JNK/c-Jun信号通路的调控(P<0.05)。细胞自噬抑制剂3-MA或JNK激动剂ANISO处理均可部分逆转SIN对LPS诱导的肺上皮细胞的保护作用(P<0.05)。结论:SIN可通过调控JNK/c-Jun信号通路相关蛋白提高细胞自噬,保护被LPS损伤的肺上皮细胞。

c-Jun氨基端激酶信号通路调控急性呼吸窘迫综合征中重要炎症介质表达机制的研究进展

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是一种临床常见的危重症,其核心问题在于过度的炎症反应。c-Jun氨基端激酶(JNK)是促分裂原活化的蛋白质激酶(MAPK)家族最重要的成员之一,在调控细胞增殖、分化、凋亡、自噬及炎症等多个重要功能中发挥作用。JNK信号通路被过度激活时,会导致炎症反应的持续激活和炎症因子的过度生成,从而对机体造成严重损害。因此,明确JNK通过哪些信号通路参与炎症反应,对于控制ARDS的炎症进程和调节机体的免疫反应平衡具有重要意义。

恩格列净通过c-Jun氨基末端激酶信号通路改善2型糖尿病性骨质疏松症的机制研究

目的探讨恩格列净通过c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路改善2型糖尿病性骨质疏松症(T2DOP)的机制。方法将大鼠随机分为假手术组(sham组)、T2DOP组、EM组(予恩格列净干预)和EM+Anisomycin组(予EM+JNK激活剂Anisomycin干预),每组各10只。收集4组大鼠体重、血糖、血酸水平、骨代谢指标及股骨生物力学特征。采用Micro-CT测定股骨显微结构;HE染色检测股骨组织病理学变化;蛋白质印迹法(Western blot)检测骨组织中氨基末端激酶1(JNK1)、磷酸化JNK1(p-JNK1)、c-Jun、磷酸化c-Jun(p-c-Jun)蛋白表达水平并分组进行比较。结果T2DOP组大鼠体重明显低于sham组,空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均明显高于sham组;EM组大鼠体重明显高于T2DOP组,FPG、TG、TC及LDL-C水平均明显低于T2DOP组,TG、TC及LDL-C水平均明显高于sham组;EM+Anisomycin组大鼠体重明显低于EM组,FPG、TG、TC及LDL-C水平均明显高于EM组(P<0.05)。T2DOP组大鼠血清骨特异性转录因子(CBF-α1)、Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PⅠNP)、骨钙素(OC)及Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTXⅠ)水平、股骨最大负荷、断裂挠度、弹性模量、骨小梁骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)均明显低于sham组,骨小梁间隔(Tb.Sp)高于sham组;EM组大鼠血清CBF-α1、PⅠNP、OC及CTX-1水平、股骨最大负荷、断裂挠度、弹性模量、BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th均明显高于T2DOP组,Tb.Sp低于T2DOP组;EM组大鼠血清CBF-α1、PⅠNP及OC水平、股骨最大负荷、断裂挠度、弹性模量、BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th均明显低于sham组,CTX-1水平及Tb.Sp均高于sham组;EM+Anisomycin组大鼠血清CBF-α1、PⅠNP、OC及CTX-1水平、股骨最大负荷、断裂挠度、弹性模量、BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th均明显低于EM组,Tb.Sp高于EM组(P<0.05)。T2DOP组大鼠股骨组织中JNK1、p-JNK1、c-Jun、p-c-Jun蛋白表达水平均明显高于sham组;EM组大鼠股骨组织中JNK1、p-JNK1、c-Jun、p-c-Jun蛋白表达水平均明显低于T2DOP组;EM+Anisomycin组大鼠股骨组织中JNK1、p-JNK1、c-Jun、p-c-Jun蛋白表达水平均明显高于EM组(P<0.05)。结论恩格列净可改善T2DOP大鼠骨代谢量失衡和骨微结构,其作用机制可能和抑制JNK/c-Jun信号通路激活有关。

JNK/c-Jun信号通路在肾脏疾病发生发展中的调控作用

JNK是MAPK超家族成员之一,c-Jun是JNK的主要下游因子,是一种受JNK调控的即早基因。JNK和c-Jun是创伤、应激、细胞凋亡相关的调节因子,参与调控多种疾病的发生发展过程。近年来,研究发现,JNK/c-Jun信号通路在IgA肾病、抗GBM肾小球肾炎、肾纤维化、急性肾损伤等多种肾脏疾病中表现为异常活化,调控着相关肾脏疾病的发生和发展过程。本文就JNK/c-Jun信号通路在肾脏疾病发生发展过程中的调控作用作简要综述。JNK is one of the members of the MAPK superfamily, and c-Jun is the main downstream factor of JNK, which is an early gene regulated by JNK. JNK and c-Jun are regulators related to trauma, stress and apoptosis, and are involved in regulating the occurrence and development of a variety of diseases. In recent years, studies have found that the JNK/c-Jun signaling pathway is abnormally activated in a variety of kidney diseases, such as IgA nephropathy, anti-GBM glomerulonephritis, renal fibrosis, and acute kidney injury, which regulates the occurrence and development of related kidney diseases. This article briefly reviews the regulatory role of JNK/c-Jun signaling pathway in the occurrence and development of kidney diseases.

草果知母汤在阻断PTZ点燃癫痫模型中对大鼠脑内c-fos、c-junmRNA表达的影响

目的 :探讨草果知母汤抗痫作用的分子生物学机制。方法 :选用SD大鼠以戊四唑 (PTZ)诱导产生癫痫动物模型 ,应用分子原位杂交技术观察草果知母汤对PTZ点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达的影响。结果 :PTZ点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达明显增强 ,草果知母汤能明显阻断其表达 ,并显示出良好的抗痫作用。结论 :草果知母汤的抗痫作用机制可能与降低脑内c fos、c jun基因表达水平有关。

氯化甲基汞对大鼠脑c-fos和c-jun基因表达的影响

为了研究即刻早期基因c fos、c jun在氯化甲基汞 (MMC)神经毒性机制中的作用 ,本研究应用免疫组织化学方法对皮下注射甲基汞 5 .0mg/kg及 0 1mg/kg的大鼠脑区FOS、JUN表达水平进行观察 ,对照组注射生理盐水 .结果表明 ,急性暴露 3h后 ,暴露组大鼠脑FOS、JUN蛋白表达均高于对照组 ,从而表明即刻早期基因 (IEG)

青阳参对点燃癫痫大鼠脑内c-fos、c-jun基因表达的影响

目的 :探讨青阳参抗痫作用的分子生物学机制。方法 :大鼠杏仁核快速点燃癫痫模型 ,应用免疫组化技术观察青阳参对点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达的影响。 结果 :杏仁核点燃癫痫大鼠脑内c fos、c jun基因表达明显增强 ,青阳参能明显阻断其表达 ,阳性细胞数量明显减少。结论 :青阳参的抗痫作用机制可能与降低脑内c fos、c jun基因表达有关。

甲基汞对大鼠脑即刻早期基因c-jun mRNA表达影响

为了探讨甲基汞神经毒性早期预报指标和信息传递分子机制 ,本文应用RT PCR方法研究了不同浓度甲基汞暴露不同时间后 ,大鼠脑中即刻早期基因c junmRNA表达变化 (对照组为 0 9%生理盐水、暴露组浓度分别为 0 0 5、0 5、5mg·kg-1 ;取样时间分别为 2 0、6 0、2 4 0、1 4 4 0min) .结果表明大鼠脑c junmRNA表达优先于汞的蓄积 ,大鼠脑c junmRNA表达变化对于甲基汞神经毒性具有早期预报作用 ,即刻早期基因c

氯化甲基汞对大鼠海马c-jun蛋白表达的影响

为了探讨氯化甲基汞(MMC)对大鼠海马损伤的分子机制,应用免疫组织化学方法观察了氯化甲基汞对大鼠海马JUN蛋白表达的影响(对照组为0.9%生理盐水、暴露组浓度分别为0.05,0.5,5mg/kg;取样时间分别为20,60,240,1440min).结果发现,暴露组大鼠海马JUN蛋白表达均高于对照组,氯化甲基汞对大鼠海马JUN蛋白表达与其浓度之间有一定的剂量反应关系,表明即刻早期基因(c-jun)参与了氯化甲基汞对海马损害的毒性过程.

铅对小鼠海马c-jun表达及学习记忆功能影响

目的 观察铅对小鼠学习记忆功能及海马区c jun表达的影响。 方法 5～ 6周龄小白鼠交配后 ,通过饮水饲以不同浓度醋酸铅 2 4,4 8,9 6mmol/L。小鼠子代自胚胎期始即暴露于醋酸铅。幼鼠出生后 ,先通过哺乳接触铅 ,断乳后则自行饮用与母鼠饮用浓度相同的含铅水。 6周后用跳台学习试验测试小鼠学习记忆能力 ;最后处死小鼠 ,用RT PCR法观察各组小鼠海马区c junmRNA的表达状况。 结果 3个染铅组小鼠跳台学习成绩显著低于对照组 (P <0 0 1 ) ;3个染铅组小鼠c junmRNA水平均明显降低 ,并具有剂量效应关系。 结论 c jun基因表达水平的下降可能是铅致小鼠学习记忆功能损害的分子机制之一。

c-Jun基因启动子区多态性位点rs4646999与肠癌预后的相关性

目的探讨c-Jun基因启动子多态性位点rs4646999与肠癌预后的相关性。方法采用Taq-Man探针法检测436例肠癌患者rs4646999-673C>T的基因型,通过Kaplan-Meier法和Cox回归分析其生存曲线;采用免疫印迹分析多态性位点不同基因型的c-Jun蛋白表达水平。结果单因素分析表明携带TT基因型患者累积生存率显著高于CT和CC基因型携带者,差异有统计学意义。多因素Cox回归分析显示分化程度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期和rs4646999位点基因型为预后因素,CT/CC基因型与肠癌较差的生存预后相关(P<0.05)。蛋白表达分析发现CC基因型癌组织c-Jun蛋白表达升高,而TT基因型则相反。结论 c-Jun基因启动子区域多态性位点rs4646999与肠癌生存预后相关,其作用机制可能是增强c-Jun蛋白表达导致肠癌发生发展。

小型猪特异性麻醉颉颃剂对XFM麻醉下大鼠海马c-jun基因mRNA转录的影响

本试验旨在研究小型猪特异性麻醉颉颃剂对小型猪特异性麻醉剂(XFM)麻醉下大鼠海马脑区c-jun基因mRNA转录的影响,藉以探究其催醒机制。90只成年SD大鼠被随机分成XFM麻醉组、XFM麻醉+生理盐水组、XFM麻醉+小型猪特异性麻醉颉颃剂组,每组分为5个不同采样时间点的亚组。采用实时荧光定量PCR技术检测样品中c-jun基因mRNA转录量。结果显示,XFM麻醉诱导大鼠海马脑区c-jun基因mRNA转录,各时间点海马脑区c-jun基因mRNA转录与0min比较显著升高(P<0.01),XFM麻醉大鼠腹腔注射生理盐水后各时间点海马脑区c-jun基因mRNA转录与XFM对照组间无显著差异(P>0.05),注射小型猪特异性麻醉颉颃剂后抑制了XFM诱导大鼠海马c-jun基因mRNA的转录,与XFM对照组比较差异显著(P<0.01或P<0.05)。结果表明,小型猪特异性麻醉颉颃剂抑制了XFM麻醉诱导大鼠海马脑区c-jun基因mRNA的转录,这可能与小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒机制相关。

体外培养脊髓神经元损伤后c-Jun蛋白表达

目的 建立一个模拟脊髓全横断损伤后脊髓组分———原代培养的脊髓神经元损伤的模型。探讨中枢神经损伤后损伤应答基因c jun的表达及变化。 方法 取Wistar大鼠 (孕 14d)脊髓 ,培养 10～ 12d后 ,采用所设计的标准模板 ,直视下进行损伤。观察损伤前、后不同时间神经元的形态及即刻早期基因c jun的表达及变化。 结果 脊髓神经元损伤 10min后胞核即有c Jun标记 ,损伤 2h后最多 ,而且阳性神经元的密度与划痕之间的距离呈明显的反比关系。 结论 受机械损伤的神经元中 ,c Jun表达阳性意味着此即刻早期基因产物已进入细胞核内起着“第三信使”的作用。

c-jun基因与肠粘膜增殖变化

研究了解肠粘膜的增殖与粘膜上皮c jun表达改变和感染、生长激素对肠粘膜增殖的影响。采用盲肠结扎穿孔 (cecalliga tionandpuncture ,CLP)和经颈静脉插管微量输液泵输注建立腹腔感染及静脉营养大鼠动物模型 ,分为正常对照组、TPN组、感染加TPN组和生长激素加TPN组。对照组为正常摄食大鼠 ,后 3组经颈静脉插管微量输液泵给予静脉营养。生长激素组在TPN同时每天给予生长激素 1U/kg。检测小肠粘膜厚度、隐窝深度和绒毛高度以及小肠粘膜c junmRNA表达和肠粘膜上皮细胞增殖率变化。结果显示 ,TPN后小肠粘膜厚度、隐窝深度和绒毛高度呈萎缩趋势 ,肠上皮细胞增殖率下降 ,感染可加重这种改变。与之相对应 :肠粘膜c jun基因表达下降。生长激素可减轻TPN大鼠小肠粘膜萎缩改变 ,并促进肠上皮细胞增殖和肠粘膜c jun基因表达。提示肠粘膜c jun的表达变化与肠粘膜增殖变化相对应 ,c

甲基汞诱导大鼠大脑皮层c-JUN蛋白表达

应用免疫组织化学方法研究了甲基汞对大鼠大脑皮层c-JUN蛋白表达的影响.结果表明,各暴露组极显著诱导大鼠大脑皮层c-JUN蛋白表达,在0.05mg/kg MMC暴露20min时汞在脑中的蓄积量与对照组相比没有显著性差异,平均值均为0.0044mg/kg,而此时大鼠大脑皮层c-JUN蛋白表达与对照组相比有显著差异,甲基汞对大鼠大脑皮层c-JUN蛋白表达与其浓度之间有一定的剂量-效应关系;即刻早期基因(c-jun)参与了甲基汞对大脑皮层损害的毒性过程,大鼠大脑皮层c-JUN蛋白表达可以作为甲基汞神经毒性的早期预报指标.

+Gz重复暴露对大鼠脑组织c-fos、c-jun和神经生长因子基因表达的影响

为了解 +Gz重复暴露后大鼠脑组织 c- fos、c- jun和神经生长因子 (NGF)基因表达的变化 ,探讨它们在 +Gz所致脑损伤中的作用和意义 ,用半定量反转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测方法检测 +Gz重复暴露后大鼠脑组织 c- fos、c- jun和 NGF m RNA表达水平。结果 c- fos和 c- jun在 +Gz重复暴露后 30 m in m RNA表达明显升高 ,6 h和 2 4h降至正常 ;NGF在 30 min和 6 h表达均明显升高 ,2 4h恢复正常。表明 +Gz重复暴露可诱导大鼠脑组织 c- fos、c- jun和 NGF m RNA的表达 ,提示它们的表达增加可能在

丙泊酚咪达唑仑对心肌缺血再灌注损伤c-jun基因表达的影响

目的:观察丙泊酚、咪达唑仑在心肌缺血再灌注损伤时c jun基因表达的影响,从基因表达水平探讨它们对心肌保护作用的机制。方法:健康SD大鼠36只,每组12只。在心肌缺血15min后分别给生理盐水(A组)、丙泊酚(B组)、咪达唑仑(C组)再灌注,时相为Ⅰ0min、Ⅱ15min、Ⅲ30min、Ⅳ60min、Ⅴ120min、Ⅵ240min,各时相取2只大鼠,多聚甲醛灌注固定后取缺血心肌标本作石蜡切片,免疫组化方法检测c jun基因表达,显微镜下计数阳性细胞,拍片。结果:各组Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ时相与Ⅰ时相相比c jun基因表达明显增强(P<0.05);A组Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ时相c jun基因表达均比B、C组增强(P<0.05),统计学有显著性意义。结论:丙泊酚、咪达唑仑对缺血再灌注损伤有一定的保护作用,为心肌缺血再灌注损伤时安全可用的麻醉药,其作用与缺血再灌注时间有关,即在30～120min内对缺血再灌注心肌有明显保护作用,这对临床选择合理时间窗用药有一定的指导意义。

胰岛素对局灶脑缺血c-jun基因表达的影响

目的观察不同剂量胰岛素对高血压大鼠局灶缺血脑组织ｃｊｕｎ基因表达的影响。方法以肾血管性高血压大鼠（ＲＨＲ）复制大脑中动脉闭塞（ＭＣＡＯ）模型，采用原位杂交技术检测不同剂量胰岛素组和对照组ＭＣＡＯ后３ｈ脑组织ｃｊｕｎ基因的表达。结果与对照组相比，在缺血侧广泛的大脑皮层，低剂量胰岛素组ｃｊｕｎｍＲＡＮ有统计学意义的增加（Ｐ＜００５），而较高剂量胰岛素组ｃｊｕｎｍＲＮＡ增加更为显著（Ｐ＜００１）。结论胰岛素促进缺血脑组织ｃｊｕｎ基因表达可能是其神经保护作用机制之一，而且这种作用呈剂量依赖性。

增生性瘢痕形成和成熟过程中c-fos、c-jun和碱性成纤维细胞生长因子基因表达的变化

目的 :探讨c -fos,c -jun和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)及其受体 (bFGFR2 )在不同形成时期的增生性瘢痕中的基因表达变化规律。方法 :提取 16例不同发生时期的增生性瘢痕和 8例正常皮肤的总RNA后 ,分离mRNA ,用RT -PCR方法检测这 4种基因在不同组织中的表达。结果 :在正常皮肤中 ,c -fos,c -jun ,bFGF和bFGFR基因表达较低 ,而在生长活跃的增殖期的瘢痕中 ,这 4种基因表达水平与正常皮肤相比显著升高 (P <0 .0 5 ) ;在成熟期的瘢痕组织中 ,虽然bFGF基因仍保持高水平表达 ,但c -fos ,c -jun和bFGFR2基因的表达量都明显低于增殖期的瘢痕。结论 :c-fos,c -jun和bFGF及其受体基因表达增强可能是增生性瘢痕形成的机制之一 ,而bFGFR及其下游信使分子基因表达降低 。