胃粘膜癌前病变中幽门螺杆菌与c-met原癌基因蛋白表达关系的研究

为研究Hp感染后胃粘膜细胞中c-met原癌基因蛋白表达的情况,了解Hp在胃癌发生过程中的作用,对110例经病理证实为慢性胃炎的病人用免疫组化方法检测了胃粘膜细胞中e-met原癌基因蛋白表达情况。结果表明,在浅表性胃炎、萎缩性胃炎、肠化生及异型增生中,e-met原癌基因蛋白的表达率分别为22.2％、44.1％、67.5％和61.9％。过表达率分别为5.5％、26.4％、37.8％和38.1％。Hp感染后c-met原癌基因蛋白表达率较末感染者高,分别为63％及32％,在萎缩,肠化生及异型增生等癌前病变中Hp感染者与未感染者表达率分别为58.9％及29.7％(P<0.005)。本研究结果显示,随着病变的进展,c-met原癌基因的表达随之增加,从而说明Hp感染对c-met原癌基因蛋白表达有一定的影响,Hp启动了胃癌发展的早期阶段,也可能推进胃癌的发展过程。

幽门螺杆菌感染者胃粘膜癌前病变与c-met原癌基因蛋白表达的关系

目的研究幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染后胃粘膜癌前病变中ｃ－ｍｅｔ原癌基因蛋白表达的情况，了解Ｈｐ在胃癌发生过程中的作用。方法１１０例经病理证实为慢性胃炎的病人用免疫组织化学方法检测胃粘膜细胞中ｃ－ｍｅｔ原癌基因蛋白表达。结果在浅表性胃炎、萎缩性胃炎、肠化生及异型增生中，ｃ－ｍｅｔ原癌基因蛋白的表达率分别为２２．２％、４４．１％、６７．５％、６１．９％。过量表达率分别为５．５％、２６．４％、３７．８％、３８．１％。Ｈｐ感染者ｃ－ｍｅｔ原癌基因蛋白表达率明显较未感染者高，分别为６３％及３２％。在萎缩、肠化生及异型增生等癌前病变中，Ｈｐ感染者与未感染者表达率分别为６８．９％及３０．５％（Ｐ＜０．０５）。结论随着病变的进展，ｃ－ｍｅｔ原癌基因的表达随之增加，Ｈｐ感染对ｃ－ｍｅｔ原癌基因蛋白表达有一定的影响。

喉癌中原癌基因c-met蛋白的表达

目的:研究原癌基因c-met蛋白在人类喉癌组织中的表达,探讨c-met的蛋白表达与喉癌的临床病理特征之间的关系。方法:应用免疫组化SABC法检测80例人类喉癌组织标本及60例声带小结、息肉中c-met的蛋白表达,并行统计学分析。结果:原癌基因c-met蛋白在声带小结、息肉中的表达率为10％,在喉癌组织中的表达率为65％;c-met蛋白的表达与喉癌的临床分期、病理学分级、淋巴结转移均显著相关(P<0．01)。结论:原癌基因c-met蛋白在喉癌组织中高表达且与喉癌淋巴结转移、病理学分期、组织分级密切相关。

成纤维细胞生长因子对烫伤大鼠原癌基因和抑癌基因蛋白的影响

目的 :观察外用碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)对大鼠深 度烫伤创面愈合过程中增殖细胞核抗原 (PCNA)、p5 3、原癌基因 c m yc和 caspase 3的影响 ,初步认识增殖与凋亡活动对创面愈合的作用。方法 :74只 Wistar大鼠随机分为正常对照、单纯烫伤和 b FGF治疗 3组。利用大鼠 30 %总体表面积深 度烫伤模型 ,于伤后 3、6小时及 1、3、7和 14日采取创面皮肤标本 ,采用免疫组织化学染色技术检测创伤组织真皮内成纤维细胞 PCNA、p5 3、c m yc和 caspase 3蛋白的表达变化情况。结果 :烫伤大鼠创面中成纤维细胞的增殖与凋亡活动与 p5 3、c myc蛋白表达有一定的关系 ;局部外用 b FGF对成纤维细胞的增殖等活动产生影响。结论

甲状腺乳头状癌并BRAF^(V600E)突变及原癌基因重排蛋白表达与其侵袭性的关系

目的探讨BRAFV600E突变及原癌基因重排(RET)蛋白表达并存与甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭性的关系。方法收集50例PTC患者术后病理,分别用RT-PCR检测BRAFV600E突变,免疫组织化学SP法检测RET表达情况。分析BRAFV600E突变合并RET表达组(n=24)和BRAFV600E单突变或RET单表达组(n=19)的临床及病理特征。结果 BRAFV600E突变率、RET表达率分别为76%(38/50)、56%(28/50),存在BRAFV600E突变合并RET表达者占48%(24/50)。与BRAFV600E突变合并RET表达组比较,BRAFV600E单突变或RET单表达组肿瘤组织分化程度差,且甲状腺癌评分系统评分较高(P=0.011,P=0.022)。结论 BRAFV600E突变并存RET表达时提示PTC肿瘤组织分化差、更易出现实体亚型等侵袭性较高的病理亚型,有可能增加肿瘤相关死亡风险。

全脑暂时性缺血诱导c-fos原癌基因蛋白(FOS)在大鼠脑内的表达

用免疫组化(ABC)方法,普查了血管阻塞后全脑暂时性缺血刺激所诱导的c-fos原癌基因蛋白(FOS)在大鼠全脑各部的表达,观察了其分布、时间发展过程和变化。脑缺血再循环后15分钟至72小时内,在脑的各级水平的多数核团和结构出现不同程度的FOS表达。在不同的部位和功能区,FOS表达出现的时间、达到高峰时间和消退时间不同,表达的细胞多少和强度也不相同。在各脑室的室管膜细胞、触液神经元和下丘脑(特别是视上核和室旁核)最先出现,并呈现一过性的FOS快速表达。海马的FOS表达在2h后出现、主要局限在齿状回、下托和CA_4、CA_3区。在边缘系统和嗅脑的扣带皮质、梨状皮质、杏仁、隔核和内侧缰核、嗅球外颗粒层和僧帽层以及前嗅核呈现高水平的持久表达。缺血后2～48h内,新皮质Ⅱ—Ⅵ层诱导出广泛的高水平表达。丘脑、基底核、中脑的FOS表达则出现较晚且分布稀疏。FOS在脑干的表达因不同核团而异。本文结果提示:全脑暂时性缺血刺激后,脑内不同部位、不同核团和功能区激活FOS表达的机制不同,其功能意义也可能有所不同。

肝癌介入治疗前后原癌基因Pokemon、甲胎蛋白异质体、甲胎蛋白、脱γ-羧基凝血酶原联合检测的临床价值

目的研究原癌基因Pokemon、甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)、脱γ-羧基凝血酶原(DCP)在原发性肝癌(HCC)病人介入治疗前后表达量变化及其与治疗效果之间的关系。方法纳入30例HCC病人,均行肝动脉化疗栓塞(TACE),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测治疗前后血清中Pokemon、AFP、AFP-L3、DCP的表达量,分析四者TACE前后表达量变化与治疗效果之间的关系,并对TACE治疗后复发者与未复发者Pokemon、AFP、AFP-L3、DCP的表达量变化进行探讨。结果(1)TACE治疗有效组Pokemon、AFP、AFP-L3、DCP的表达量分别为(50.09±4.91)μg·L^(-1)、(322.67±64.53)μg·L^(-1)、(10.26±1.08)μg·L^(-1)、(42.66±9.43)AU·L^(-1),低于治疗前Pokemon、AFP、AFP-L3、DCP的表达量(103.10±7.65)μg·L^(-1)、(807.36±113.55)μg·L^(-1)、(27.42±3.00)μg·L^(-1)、(93.39±4.70)AU·L^(-1);t=6.741、7.740、7.534、4.985;P=0.000、0.000、0.000、0.001。治疗无效组Pokemon、AFP、AFP-L3、DCP的表达量分别为(87.71±5.73)μg·L^(-1)、(503.20±132.01)μg·L^(-1)、(20.31±2.66)μg·L^(-1)、(73.11±8.36)AU·L^(-1),与治疗前四者的表达量相比(93.47±1.92)μg·L^(-1)、(610.55±101.69)μg·L^(-1)、(21.18±1.97)μg·L^(-1)、(75.01±7.29)AU·L^(-1),差异无统计学意义(t=1.801、1.280、0.626、0.764;P=0.146、0.270、0.565、0.488)。(2)按治疗后3个月是否复发将有效组分为复发者和未复发者,复发者Pokemon、AFP、AFP-L3、DCP的表达量分别为(114.63±16.28)μg·L^(-1)、(763.50±140.22)μg·L^(-1)、(18.58±2.09)μg·L^(-1)、(87.93±8.57)AU·L^(-1),与TACE治疗后1个月(复发前)Pokemon、AFP、AFP-L3、DCP的表达量[(65.90±8.25)μg·L^(-1)、(400.60±99.11)μg·L^(-1)、(9.17±1.27)μg·L^(-1)、(35.93±4.10)AU·L^(-1)]相比,差异有统计学意义(t=2.598、6.247、5.762、6.122;P=0.029、0.000、0.000、0.000)。结论 TACE治疗有效者Pokemon、AFP、AFP-L3、DCP的表达量明显下降,复发者四种标志物的表达量再次升高,提示四者对监测HCC的治疗效果及预测肿瘤的复发有一定的参考价值,但需进一步研究证实。

Ⅰ型胶原蛋白基因在反流性食管炎、Barrett食管及食管腺癌中的表达

目的探讨反流性食管炎、Barrett食管及食管腺癌黏膜组织中Ⅰ型胶原蛋白(COL1A1)基因mRNA的表达水平及意义。方法经胃镜取材,采用荧光定量PCR方法检测反流性食管炎、Barrett食管、食管腺癌组织中COL1A1基因mRNA的表达水平。结果 COL1A1mRNA在正常组和反流性食管炎阴性组食管黏膜中呈低表达(0.154±0.119,0.152±0.105),在Barrett食管与食管腺癌食管黏膜中呈明显的高表达(0.396±0.170,0.726±0.561)。并且在从正常→反流性食管炎→Barrett食管→食管腺癌的发生、发展过程中,COL1A1mRNA的表达呈现渐进性增强,并与病期有关。结论 COL1A1基因的异常表达与反流性食管炎、Barrett食管和食管腺癌的发生、发展密切相关;COL1A1mRNA的表达水平可用作监测Barrett食管和食管腺癌早期发生及干预治疗效果的有用指标。

宫颈癌患者癌组织c-Met mRNA与NF-κB mRNA表达的关系及其对预后的影响

目的分析肝细胞生长因子受体原癌基因c-Met mRNA与核因子-κB(NF-κB)mRNA在宫颈癌发病中的关系及对宫颈癌患者预后的影响。方法选取本院宫颈癌患者89例作为癌变组,宫颈癌前病变患者89例作为癌前病变组,因子宫肌瘤行全子宫切除患者89例作为正常宫颈组。采用RT-PCR检测3组宫颈组织中c-Met、NF-κB mRNA相对表达量。采用Spearman/Pearson分析c-Met mRNA与NF-κB mRNA在宫颈癌发病中的关系。采用Kaplan-Meier曲线分析不同c-Met mRNA、NF-κB mRNA表达水平患者的3年生存率。结果宫颈组织中c-Met、NF-κB mRNA相对表达量,癌变组>癌前病变组>正常宫颈组(P<0.05)。癌前病变组、癌变组c-Met mRNA与NF-κB mRNA呈正相关(P<0.001)。c-Met高表达与NF-κB mRNA高表达在宫颈癌发病中呈正向交互作用(P<0.05)。c-Met、NF-κB mRNA与宫颈癌临床分期、淋巴结转移、脉管浸润呈正相关,与分化程度呈负相关(P<0.05)。癌变组c-Met、NF-κB mRNA高表达患者3年生存率低于低表达患者(P<0.05)。结论c-Met mRNA与NF-κB mRNA高表达在宫颈癌发病中呈正向交互作用,与临床分期、淋巴结转移、脉管浸润呈正相关,且宫颈癌患者3年生存率显著降低。

肝细胞生长因子对肺癌细胞运动和侵袭的影响及原癌基因C-met的表达

肝细胞生长因子（ＨＧＦ）可调节许多细胞的运动和生长，检测了ＨＧＦ对５种人类非小细胞肺癌细胞运动和侵袭的作用，有３种细胞的运动和侵袭力在ＨＧＦ刺激后增加。用ＲＮＡ印迹检测ＨＧＦ受体——原癌基因Ｃ－ｍｅｔ产物，可证实这几种细胞均有Ｃ－ｍｅｔｍＲＮＡ存在。细胞蛋白印迹检测进一步证实了ＨＧＦ受体的存在。这些结果表明ＨＧＦ可能在人类非小细胞肺癌的侵袭和转移方面扮演重要角色。

原癌基因蛋白质C-erbB-2在乳腺良恶性病变中表达的意义

目的 :检测原癌基因蛋白质 C- erb B- 2在乳腺良恶性病变中的表达及意义。方法 :对 1 1 1例乳腺良恶性病变的石蜡切片标本进行免疫组织化学染色。结果 :乳腺良恶性病变中乳腺导管内乳头状瘤病的 C- erb B- 2阳性率为 31 .3% ,与乳腺纤维腺病和纤维腺瘤比较差异有显著性 ( P<0 .0 1 ) ,乳腺癌 C- erb B- 2的阳性率为 74.3% ,与良性病变比较差异有显著性 ( P<0 .0 1 ) ;乳腺癌 C- erb B- 2表达与肿瘤大小和组织学分级呈正比 ( P<0 .0 5 ) ,与激素受体 ( ER、PR)水平及 5年生存期呈反比( P<0 .0 5 ) ,与淋巴结是否转移无关。结论 :C- erb B- 2表达的乳腺导管内乳头状瘤病容易癌变 ,C- erb B- 2过度表达的乳腺癌组织分化差、生存期短、预后不好。C- erb B-

原癌基因C-met在子宫内膜癌中的表达的探讨

目的 :本研究通过对子宫内膜腺癌及正常内膜组织中原癌基因C -met表达状况的检测探讨 :正常内膜与内膜癌组织中C -met表达及内膜癌中C -met的表达与临床分期、组织学分级、肌层浸润、年龄、淋巴浸润的关系。研究方法 :采用免疫组化SP法对 5 5例子宫内膜腺癌及 30例正常内膜组织中C -met表达状况进行检测。采用组织化学记分 (H值 )。H值≥ 70为阳性表达。统计处理采用两样本均数t检验 ,多个样本均数间两两比较用q检验 ,偏态分布用秩和检验。结果 :正常子宫内膜中 ,腺上皮有C -met表达 ,主要定位于细胞膜上 ,在细胞浆内也有表达 ,其表达的阳性及强度均较低。C -met在增生期内膜的表达明显强于分泌期宫内膜的表达 ,两者之间有统计学意义 ,P <0 0 5。内膜癌C -met较正常子宫内膜有明显强的表达 ,两者之间有统计学意义 ,P <0 0 5。宫内膜癌中C -met表达随组织学分级和手术 -病理分期的增加而增强 ,P <0 0 5 ;而与年龄、肌层浸润、淋巴浸润无关。结论 :C -met对正常内膜细胞的增生、分化起重要的调节作用 ,同时C -met在宫内膜癌中的表达明显增高 ,推测对肿瘤的发展、预后有关。C

癌基因蛋白P^(21)、P^(185)、EGFR及LN、IV型胶原在骨肉瘤中的表达

目的探讨癌基因蛋白ｐ２１、ｐ１８５、ＥＧＦＲ及ＬＮ、ＩＶ型胶原在人骨肉瘤组织中表达的意义。方法应用免疫组化ＡＢＣ法，检测４０例常规石蜡包埋的骨肉瘤组织中ｐ２１、ｐ１８５和ＥＧＦＲ的表达，同时还检测了ＬＮ、ＩＶ型胶原在骨肉瘤组织中的含量。结果ｐ２１、ｐ１８５和ＥＧＦＲ在骨肉瘤组织中的阳性表达率分别为２６３％（１０／３８），６５８％（２５／３８），５００（１９／３８），同时观察到ＬＮ和ＩＶ型胶原在骨肉瘤组织中往往是缺如的。结论骨肉瘤组织中存在着多种癌基因的异常，它们与骨肉瘤的发生发展密切相关，同时细胞外基质的破坏在骨肉瘤的侵袭与转移中起着重要的作用。

海人藻酸注射大鼠纹状体边缘区后c-fos原癌基因蛋白在脑内的表达

为研究纹状体边缘区与脑内其他和学习记忆等功能有关结构间的关系，将海人藻酸注射于大鼠纹状体边缘区，观察c-fos原癌基因蛋白（FOS）在脑内的表达。海人藻酸注射4h后，脑内有少量FOS表达．海人藻酸注射6h后，脑内FOS表达增至最高峰．在嗅脑、基底前脑、海马、杏仁核，大脑皮质以及丘脑的中线核和网状核中有大量密集的FOS表达。另外，在纹状体、Meynert基底核、脚内核、丘脑底核、黑质外侧都及其背外侧区可见较多FOS表达．在视前区、丘脑下部外侧区、外侧缰核和中脑中央灰质等部位可见少量FOS表达。海人藻酸注射纹状体边缘区后18～24h，上述各部位的阳住表达逐渐减少，齿状回的表达消失．海人藻酸注射后48h，脑内各部位的FOS阳性反应均消失。本研究结果提示：纹状体边缘区和脑内与学习记忆功能有关的结构间有密切的功能联系，但边缘区在脑学习记忆功能中的地位以及与脑中其他学习记忆有关结构间的关系尚待进一步研究．

原癌基因HER2/neu表达产物p185蛋白免疫原性研究

用表达ｐ１８５蛋白ＨＥＲ２／ｎｅｕ转基因３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞裂解物免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，经３次免疫后，免疫小鼠脾细胞对表达ｐ１８５蛋白的３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞呈现较强的增殖反应（平均刺激指数分别为ＳＩ＝３．１５±１．８８），而对未转染ＨＥＲ２／ｎｅｕ基因的３Ｔ３细胞的应答较弱（ＳＩ＝１．１４±０．９７）。并检测到１号免疫鼠脾细胞对３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞有特异杀伤作用。免疫鼠血清中出现高水平的抗ｐ１８５抗体（ＯＤ均值＝１．０２±０．１６），较正常对照组（ＯＤ均值＝０．３６±０．１０）有显著差异（Ｐ＜０．００１），表明ＨＥＲ２／ｎｅｕ表达产物ｐ１８５蛋白具有免疫原性，用于免疫小鼠可诱导出对ｐ１８５蛋白的特异免疫应答反应。

原癌基因蛋白C-MYC和C-FOS在良性胆道狭窄瘢痕组织中的表达及相关性研究

目的观察原癌基因c-myc,c-fos蛋白在良性胆道狭窄瘢痕组织中的表达和分布,探讨其与良性胆道狭窄形成的相关性。方法应用免疫组化SP法,检测c-myc,c-fos蛋白在20例肝外胆管瘢痕组织、12例肝内胆管瘢痕组织和10例正常胆管组织中的表达和分布。对其阳性表达结果进行比较分析。结果在肝外胆管瘢痕组织和肝内胆管瘢痕组织的成纤维细胞、胆管上皮细胞及血管内皮细胞中c-myc,c-fos呈强阳性表达,而正常胆管组织中无表达。肝外、肝内胆管瘢痕组织中c-myc,c-fos的表达与正常胆管组织差异有显著性意义(P<0.01),肝外与肝内胆管瘢痕组织中c-myc,c-fos的表达差异无显著性意义(P>0.05)。在肝外胆管瘢痕组中c-myc与c-fos蛋白两者的表达成正相关(r=0.75,P<0.05)。在肝内胆管瘢痕组中c-myc与c-fos蛋白两者的表达亦成正相关(r=0.68,P<0.05)。结论肝外、肝内胆管瘢痕组织中c-myc和c-fos癌基因受激活,可能参与了成纤维细胞的分化增殖、胶原合成与降解以及对细胞因子的调控,并导致瘢痕增生。原癌基因c-myc,c-fos与良性胆道狭窄瘢痕形成密切相关,两者具有协同性。

c-met原癌基因的表达及其与人肝细胞癌转移关系的研究

以β-actin为内标，用逆转录—多聚酶链反应（RT－PCR）技术，研究c－metmRNA在32例肝癌组织、26例癌旁肝组织中的表达。结果表明，32例肝癌组织、26例癌旁肝组织中均有c-met基因表达（表达率100％），但肝癌c－met基因的表达值显著高于癌旁肝组织（46.75％±13．03％对2531％±11，03％，P＜0．001）。32例肝癌中c－met基因过度表达者有14例，统计分析发现c-met基因过度表达与肝细胞癌的分化程度及肝内转移有关。结果提示c－met基因在人肝细胞癌中高表达，并可能与肝癌的侵袭转移有关。

雌激素对小鼠骨中原癌基因c-myc蛋白的影响

为初步探讨雌激素对骨的作用机制 ,以体外培养的小鼠胚胎长骨作为模型 ,通过免疫组织化学方法检测雌酚酮对骺板静止区、增殖区和肥大区 c- myc蛋白表达的影响。结果显示 ,培养介质中雌酚酮浓度为10 - 9mol/ L 时 ,增殖区 c- m yc蛋白阳性细胞面积与对照组相比显著增加 ;浓度为 10 - 8mol/ L 时 ,除增殖区外 ,静止区阳性细胞面积也显著增加 ;当浓度增至 10 - 7mol/ L 时 ,3个区阳性细胞面积均显著增加。提示雌激素可通过促进长骨 c-

β-纤维蛋白原-455G/A基因多态性与胆囊癌的相关性研究

目的通过检测胆囊癌患者β-纤维蛋白原(Fgβ)-455G/A基因,探讨Fgβ-455G/A基因多态性与胆囊癌的相关性。方法采集50例胆囊癌患者(胆囊癌组)和50例胆囊结石伴慢性胆囊炎患者(胆囊炎组)的静脉血,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法对Fgβ-455进行基因分型。结果Fgβ-455基因GA杂合型和AA纯合子在胆囊癌中的频率显著高于胆囊炎组,显著增加胆囊癌发生的危险性,OR值(95%CI)分别为2.526(1.052~6.068)和4.306(1.177~15.749)。结论Fgβ-455G/A位点G/A单个碱基的改变可能在胆囊癌的发病中起着重要的作用。