c9t11-和t10c12-共轭亚油酸抗癌和影响脂质代谢的异同

共轭亚油酸(CLA)是一组位置和构象异构体的总称,异构体c9t11-CLA和t10c12-CLA或二者的协同作用赋予了CLA的许多生理功能,比如抗癌、降低体脂含量、预防糖尿病的发生、降低血脂抑制动脉粥样硬化等;异构体c9t11-CLA和t10c12-CLA在结构及来源上存在一定差别——由于双键位置的不同,t10c12-CLA异构体比c9t11-CLA异构体更容易氧化;而在生理功能上二者也有差异——c9t11-CLA异构体的主要作用是抗癌,而t10c12-CLA则是降低体脂、血脂等,大量单一异构体的体外实验研究表明二者在抗癌及脂肪代谢的调节上作用机制也不尽相同。

气相色谱分析法测定酸奶和奶油中c9,t11-共轭亚油酸的含量

【目的）建立用程序升温气相色谱法测定奶制品中 eg,iii-共轭亚油酸含量的方法。〔方法〕首先建立本实验方法的气相色谱分析条件;采用内标法,将样品提取、甲酯化后,进行气相色谱分析;同时对实验方法的回收率、精密度也进行了分析。[结果）能够将甲酯化亚油酸和cg,ill-共轭亚油酸很好地分离;内标物十七烷酸甲酯与其它脂肪酸甲酯能够完全分离,并不受样品中其它组分的影响;cg,iii-共轭亚油酸的含量分别为:帕玛拉特天然酸奶饮品 10.78仰尹g,万家主原味酸奶（搅拌型）5刀3mgig,奶油 22.54ndg脂肪。实验方法的回收率为 84.74％,RSD=3.73％;精密度 M二2、58％。〔结论〕所建立的实验条件准确可靠,这对于分析奶及奶制品来源的6,ill-CIA共轭亚油酸含量具有指导意义。

顺9,反11-共轭亚油酸对奶牛乳腺上皮细胞氧化应激损伤的影响研究

试验旨在研究顺9,反11-共轭亚油酸(c9,t11-CLA)对H_(2)O_(2)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)氧化损伤的保护作用。将分离纯化后的BMECs用不同的H_(2)O_(2)浓度和作用时间培养,以建立细胞氧化损伤模型;再在培养基中添加不同浓度(0、200、400、600、800μmol/L)的c9,t11-CLA培养BMECs 24 h,以确定c9,t11-CLA适宜的添加浓度;通过前期结果选用浓度为600μmol/L的H_(2)O_(2)和100μmol/L的c9,t11-CLA进行后续试验。试验设置3个组,分别为对照组、H_(2)O_(2)组、c9,t11-CLA+H_(2)O_(2)组,每组6个重复。对照组只用DMEM/F12基础培养基;H_(2)O_(2)组在基础培养基处理24 h后,再用600μmol/L H_(2)O_(2)培养细胞8 h;c9,t11-CLA+H_(2)O_(2)组在基础培养基中添加100μmol/L c9,t11-CLA处理24 h后,再用600μmol/L H_(2)O_(2)培养细胞8 h。试验对细胞内的丙二醛(MDA)活性、总抗氧化活性(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性等指标进行检测,并用RT-PCR法测定细胞的SOD、CAT和GSH-Px的mRNA表达量。结果表明:与对照组相比,H_(2)O_(2)组的T-AOC活力(P<0.05)及SOD、CAT、GSH-Px活性(P<0.01)均下降,MDA含量上升(P<0.05),抗氧化酶SOD、CAT和GSHPx的mRNA表达量下降(P<0.05)。与H_(2)O_(2)组相比,c9,t11-CLA+H_(2)O_(2)组BMECs的SOD、CAT和GSHPx活性(P<0.05)及其基因的mRNA表达量(P<0.05)均有提高,MDA含量降低(P<0.05)。由此可见,c9,t11-CLA可以提高H_(2)O_(2)诱导的奶牛乳腺上皮细胞的抗氧化能力,为奶牛乳腺抗氧化剂的选择提供数据支撑。

市售牛奶中c9,t11-共轭亚油酸测定的气相色谱法研究

目的：用气相色谱内标法检测部分市售牛奶中c9，t11-共轭亚油酸含量（CLA），分析季节因素对牛奶中e9，t11-共轭亚油酸含量的影响。方法：采用气相色谱内标法，内标物为C17：00甲酯，程序升温，将样品提取、甲酯化后，测定并比较夏季和非夏季牛奶样品中c9，t11-共轭亚油酸的含量。结果：实验方法的回收率为83．67％，RSD=3．45％；精密度为RSD=2．09％。夏季和非夏季牛奶样品中c9，t11-共轭亚油酸含量均值范围分别为0～14．9me,／g脂肪和0～7．3mg／g脂肪。夏季牛奶样品中c9，t11-共轭亚油酸含量显著高于非夏季牛奶样品（P〈0．05）。结论：所建立的实验条件准确可靠，季节变化对牛奶样品中c9，t11-共轭亚油酸含量有显著影响。本研究对在国内开展共轭亚油酸强化乳制品的研究具有指导意义。

提高酸乳中c9,t11-共轭亚油酸含量的研究

本研究利用乳酸菌发酵法,添加合适的底物,在形成酸乳的同时提高乳中c9,t11-共轭亚油酸,c9,t11-CLA的含量,筛选菌株的最佳配比条件,研究影响CLA含量的因素,发现奶中影响酶促反应和菌株生长的营养成分均可以影响乳酸菌发酵中CLA的产生。应用气相色谱检测出乳酸菌培养液中CLA的其它异构体。

c9,t11-共轭亚油酸氧化稳定性的研究

目的:研究75%c9,t11-共轭亚油酸(c9,t11-CLA)在不同条件下的氧化稳定性,并在同等条件下与亚油酸(LA)进行比较,探讨影响75%c9,t11-CLA氧化稳定性的因素。方法:测定75%c9,t11-CLA和LA在暴露于空气、充氮保护、加入0.02%没食子酸丙酯、色拉油中及0.02%Ca2+存在条件下的过氧化值,同时进行气相色谱分析,观察5个不同时间75%c9,t11-CLA和LA含量的变化。结果:当75%c9,t11-CLA和LA在暴露于空气、充氮保护、加入0.02%没食子酸丙酯、色拉油中及0.02%Ca2+存在的条件下,75%c9,t11-CLA在不同处理条件下的氧化稳定性顺序为:0.02%没食子酸丙酯组>充氮保护组>色拉油组>暴露于空气组>0.02%Ca2+组(P<0.05)。75%c9,t11-CLA的氧化速度快于亚油酸(LA)的氧化速度(P<0.05)。结论:0.02%没食子酸丙酯可明显提高c9,t11-CLA的氧化稳定性。增强c9,t11-CLA的稳定性已成为保护c9,t11-CLA有效生物活性的至关重要的因素。

有机介质中包衣菌体催化合成c9,t11-共轭亚油酸

以3种脂肪醇(正辛醇、月桂醇和肉豆蔻醇)为原料,合成得到3种谷氨酸二烷基酯核糖醇(2C8GE、2C12GE和2C14GE),比较了不同谷氨酸二烷基酯核糖醇及其浓度和所用溶剂种类,以及缓冲液pH、包衣时间、温度和干燥方式对包衣Lactobacillus helveticus L7菌体酶活的影响。确定了制备包衣菌体的条件为:表面活性剂为谷氨酸双十二烷基酯核糖醇(2C12GE),将其配制成质量分数为1.0%的丙酮溶液;菌体用pH 5.8的磷酸盐缓冲液重悬;在4℃下处理4h经冷冻干燥而成包衣菌体。亚油酸经包衣菌体催化18h后,其转化率为95.3%,c9,t11-共轭亚油酸的产量为1906 mg/L。包衣菌体在有机溶剂中重复使用5次仍然具有较高的催化活性。在以亚油酸为底物时,包衣菌体中亚油酸异构酶的米氏常数(Km)为35.7 mmol/L,最大反应速度(Vmax)为5.6 mmol/h。经包衣处理后,菌体中亚油酸异构酶和底物的亲和力有所降低。

顺9,反11-共轭亚油酸对奶牛乳腺上皮细胞炎症因子的影响

比较不同浓度顺9,反11-共轭亚油酸(c9,t11-CLA)的抗炎作用。以奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)为模型,添加确定对细胞增殖无影响的浓度梯度的c9,t11-CLA,检测炎症因子TNF-α(肿瘤坏死因子-α)、IL-6(白细胞介素-6)、IL-8(白细胞介素-8)、IL-10(白细胞介素-10)含量及TNF-α、IL-6、IL-8的mRNA表达量的影响。与对照组相比,添加200μmol/L c9,t11-CLA显著降低BMECs中IL-8和TNF-α含量以及mRNA表达量(P<0.05),添加100μmol/L c9,t11-CLA显著增加TNF-α含量和IL-8的mRNA表达量(P<0.05)。试验结果表明,200μmol/L c9,t11-CLA对BMECs中促炎因子有抑制作用,可为后续c9,t11-CLA的抗炎机制研究奠定数据基础。

顺9,反11-共轭亚油酸对离体培养猪肝细胞和结肠粘膜上皮细胞的影响

本试验旨在探讨顺9,反11-共轭亚油酸对离体培养猪肝细胞、结肠粘膜上皮细胞增殖、PGE2分泌和PPAR-γ基因表达的影响。试验分5个处理,对照组为DMEM/F12培养液,其他处理分别在对照组的基础上添加100μmol/L亚油酸、25、50、100μmol/L顺9,反11-共轭亚油酸;每个处理设6个重复(PPAR-γmRNA定量测定4个重复)。细胞用血清培养24h后处理,继续培养72h。检测上清PGE2分泌、细胞增殖和细胞PPAR-γmRNA拷贝数。结果表明培养液中添加顺9,反11-共轭亚油酸对肝细胞增殖和PGE2分泌都有促进作用(P<0.05),但对PPAR-γ基因表达没有影响;培养液中添加顺9,反11-共轭亚油酸对结肠粘膜上皮细胞增殖影响不显著(P>0.05),对PGE2分泌有显著的促进作用(P<0.05),25μmol/L顺9,反11-共轭亚油酸组PPAR-γmRNA拷贝数显著高于对照组(P<0.05),100μmol/L顺9,反11-共轭亚油酸组极显著高于对照组(P<0.01)。可见,在离体培养条件下,顺9,反11-共轭亚油酸对猪肝细胞和结肠粘膜上皮细胞PGE2分泌都有促进作用,只对结肠粘膜上皮细胞PPAR-γ基因表达有促进作用,这显示顺9,反11-共轭亚油酸对PPAR-γ基因表达的调控可能具有细胞类型的特异性。

用体外培养方法研究添加鱼油对瘤胃中共轭亚油酸尤其是t-11C18:1和t-10C18:1脂肪酸的影响

试验旨在研究添加鱼油对瘤胃中共轭亚油酸特别是反-11 C18∶1和反-10 C18∶1脂肪酸产生的影响。瘤胃液采集自山羊,采集瘤胃液用酸性缓冲液稀释,体外培养底物为牧草及含有豆油的精料,试验底物添加不同量的鱼油:①对照组,不添加鱼油;②LFO组,添加50 mg鱼油;③HFO组,添加100 mg鱼油。在体外39℃培养24 h,并于不同时间点采样分析培养体系中各脂肪酸的含量。试验结果表明,培养早期鱼油对脂肪酸的生成有抑制现象,但培养24h后,鱼油显著增加了c-9,t-11 CLA的含量,同时鱼油会抑制t-10,c-12 CLA的产生并显示出剂量效应。发酵后16和24 h鱼油能显著增加t-11 C18∶1的含量(P<0.05),降低t-10 C18∶1浓度(P<0.01)。在发酵后8、16、24 h,鱼油显著增加油酸的含量(P<0.01),在所有检测时间点硬脂酸的含量均降低(P<0.001)。体外培养16 h后,鱼油能显著增加体系中t-11 C18∶1,c-9,t-11 CLA的含量(P<0.05),但也会引起t-10 C18∶1和t-10,c-12 CLA的含量变化(P<0.05)。总之,试验结果表明添加鱼油会显著增加c-9,t-11CLA和t-11 C18∶1的产生并抑制t-10 C18∶1和t-10,c-12 CLA的产生。

体外瘤胃发酵法研究添加鱼油对共轭亚油酸产生,尤其是t-11C18:1和t-10C18:1脂肪酸产量的影响

作者旨在研究鱼油添加对瘤胃内CLA的产生种类及t-11C18∶1和t-10C18∶1累积情况的影响。瘤胃液采集自山羊,用酸性缓冲液稀释,培养底物为添加豆油和不同量鱼油(0、50和100mg,对照组、LFO和HFO组)的干草和精料。在体外39℃厌氧培养24h,通过色谱法分析不同时间点的脂肪酸成分。尽管在早期培养时间点有抑制作用,但培养24h后添加鱼油显著增加了c-9,t-11CLA的含量。同时,在培养16和24h后,鱼油对t-10,c-12CLA的抑制有剂量效应。鱼油在培养16和24h后能显著增加t-11C18∶1成分(P<0.05),极显著降低t-10C18∶1成分(P<0.01),并导致在培养8、16和24h后使油酸的含量显著增加(P<0.01),并在不同培养时间点降低硬脂酸的比例(P<0.001)。培养16h后,鱼油能显著(P<0.05)增加t-11C18∶1和c-9,t-11CLA的量,但会显著降低(P<0.05)t-10C18∶1和t-10,c-12CLA的量。总之,研究结果表明,添加鱼油会显著增加瘤胃液中c-9,t-11CLA和t-11C18∶1的产量,降低t-10C18∶1he t-10,c-12CLA的量。

t10,c12-共轭亚油酸的生理效应及作用机制研究进展

t10,c12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)是CLA的一种同分异构体,在天然CLA中的含量仅次于c9,t11-CLA,主要来源于反刍动物食品。它是一种功能性营养成分,具有减少脂肪沉积、调节糖代谢、抗癌以及调节免疫等作用,在药物和食品等研究领域具有很广阔的应用前景。文中综述了近年来关于t10,c12-CLA的生理效应及作用机制的研究进展,为其在生产上的应用和进一步开发研究提供信息资料。

共轭亚油酸诱导人乳腺癌细胞(MCF-7)凋亡的作用

目的 为了研究共轭亚油酸单体 (c9,t11 CLA)对人乳腺癌细胞 (MCF 7)凋亡的影响。方法 采用细胞生长曲线 ,凋亡细胞的荧光显微镜和电镜观察、流式细胞光度术的检测以及p5 3蛋白表达的方法 ,观察了用不同浓度c9,t11 CLA(2 5、5 0、10 0和 2 0 0 μmol L)诱导MCF 7细胞凋亡作用。结果 c9,t11 CLA可明显抑制MCF 7细胞生长 ,8天的抑制率分别为 -6 0 %、4 5 2 %、99 0 %和 99 4 %。通过荧光显微镜和电镜技术观察到了发生凋亡的MCF 7细胞 ;用流式细胞光度术也检测到c9,t11 CLA可诱导MCF 7细胞产生凋亡 ,并随着c9,t11 CLA浓度的增加 ,细胞凋亡率逐渐增加 ;而p5 3蛋白表达则随着c9,t11 CLA浓度的增加呈现逐渐降低的趋势。结论 c9,t11 CLA可诱导MCF 7细胞产生凋亡 ,这可能是c9,t11 CLA抑制肿瘤细胞生长的机制之一。

共轭亚油酸(CLA)异构体抗肿瘤作用机理研究进展

共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)是一组亚油酸的异构体,是反刍动物食品中的天然成分,其主要作用成分是c9,t11-CLA异构体。研究表明此类脂肪酸对各种恶性肿瘤有较强的抑制作用。关于CLA的抗肿瘤机理目前国内外研究较多,发现其抗肿瘤作用机理是多方面的。本文就CLA对肿瘤细胞转移特性的影响,抑制癌细胞增殖,抑制致癌因子的活性等方面做综述。

纯牛奶中18碳TFA及9c,11t-CLA含量的测定研究

为了精确测量出纯牛奶中18碳TFA及9c,11t-CLA的含量,本实验通过毛细管气相色谱法,并采用内标法,对纯牛奶进行了检测,结果显示,纯牛奶中18碳脂肪酸的质量百分比约为35·43%,18碳TFA的质量百分比约为2·27%,而其中C18:1-11t的质量百分比达到1·28%,占所有18碳TFA的一半以上,约为56·36%,同时,牛奶中C18:2-9c,11t的质量百分比只为0·11%,其含量远少于TFA。

大豆油对瘤胃培养液中共轭亚油酸及氢化中间产物累积规律的影响

试验采用批次培养法研究了体外条件下添加大豆油对山羊瘤胃培养液中共轭亚油酸及氢化中间产物累积规律的影响,大豆油的添加量为0和100 mg/瓶。结果表明大豆油组cis-9,trans-11 CLA含量始终显著高于对照组(P<0.05),且在培养8 h时含量达到最高,为6.05 mg/g干物质;大豆油组trans-10,cis-12 CLA含量显著高于对照组(P<0.05),其含量随培养时间的延长而逐渐升高;在培养16 h时,大豆油组总共轭亚油酸含量达到最大,为11.61 mg/g干物质;大豆油组的trans-10C18∶1和trans-11C18∶1含量显著高于对照组(P<0.05),在培养过程中,二者含量始终增加。大豆油组总反式C18∶1脂肪酸含量随着培养时间的延长而逐渐增加,而总顺式C18∶1脂肪酸含量随着培养时间的延长而逐渐下降。

共轭亚油酸对正常动物细胞和人体肿瘤细胞间通讯功能的影响

为探讨c9,t11-共轭亚油酸 (CLA)的抑癌作用可能机制 ,在促癌物 (TPA)存在下 ,对正常细胞(CHL)以及人体肿瘤细胞 (SGC 790 1细胞和MCF 7细胞 )的细胞间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响 ,采用划痕标记染料示踪技术 (SLDT) ;c9,t11 CLA剂量为 2 5 (mol L ,5 0 (mol L ,10 0 (mol L和 2 0 0 (mol L ,阴性对照为乙醇。结果显示 ,c9,t11 CLA可明显地提高TPA对CHL细胞的GJIC的抑制效应 ,当c9,t11 CLA浓度为 2 0 0 (mol L作用 48h时 ,细胞间隙通讯功能基本上与阴性对照组相近 ;当用c9,t11 CLA作用SGC 790 1细胞和MCF 7细胞2 4h和 48h时 ,可见 (2 4h 10 0 μmol L的MCF 7细胞 ) 2 4h 2 0 0 μmol L和 48h 10 0、2 0 0 μmol L剂量组的肿瘤细胞有一定的细胞间隙通讯功能。提示c9,t11 CLA可提高SGC 790 1细胞和MCF 7细胞的GJIC的功能 。

过瘤胃保护共轭亚油酸对妊娠后期及泌乳早期奶牛乳成分、乳产量、血液代谢和肝脏基因表达的影响

共轭亚油酸（CLA）是一类含有共轭双键的十八碳二烯酸所有异构体的统称。本试验旨在研究日粮中添加CLA是否会影响泌乳早期奶牛的乳成分及相关代谢参数。选取饲喂CLA的初产奶牛（试验组）和未饲喂CLA的初产奶牛（处理组）各5头。2周预饲期间CLA的添加量为7.5g/d（50%顺-9,反-11CLA和50%反-10,顺-12 CLA）。试验期（1~28 d）CLA的添加量为20 g/d。试验中奶牛CLA的摄入量仅为添加量的61.5%,试验组奶牛乳脂中出现添加的CLA,处理组奶牛乳脂中顺-9,反-11 CLA和反-10,顺-12CLA的含量高于对照组,且处理组奶牛乳脂中饱和脂肪酸的含量有所降低,单不饱和脂肪酸和反式脂肪酸的含量升高。添加顺-9,-反11 CLA和反-10,顺-12 CLA对乳产量、乳成分及血液代谢指标无显著影响;添加CLA不会影响过氧化物酶体受体蛋白PPARα、PPARγ的表达,但可抑制固醇调节蛋白和肝脏组织中肿瘤坏死因子α的表达。试验结果表明,产犊后1周饲喂顺-9,反-11 CLA和反-10,顺-12CLA不会影响血液代谢指标和乳成分;添加CLA会改变乳中脂肪酸的成分（尤其是外源脂肪酸异构体的含量升高）,乳脂中高含量的长链脂肪酸说明泌乳早期添加CLA不会引起脂肪肝的发生。

相同亚油酸水平日粮对绵羊瘤胃液和血液脂肪酸组成的影响

为提高反刍动物产品中CLA含量寻找植物油的有效添加模式,研究以植物油调控的相同亚油酸水平日粮对绵羊瘤胃液脂肪酸动态变化和血浆脂肪酸组成的影响。选取4只雄性、健康安装有永久性瘤胃瘘管的成年绵羊(东北半细毛羊×陶赛特羊),体重(40±1 kg),采用4×4拉丁方试验设计,研究不添加油脂组(CK组)、添加4%花生油(PO组)、2.84%玉米油(CO组)和2.86%大豆油(SO组)的加油组对瘤胃液脂肪酸动态变化和血浆脂肪酸组成的影响,经测得3个加油组亚油酸水平一致。结果表明,3个加油组显著提高了瘤胃液中C16:0、C18:0、C18:1、t11C18:1、C18:2和CLA浓度(P<0.05),PO组C18:0和C18:1的浓度显著高于CO和SO组(P<0.05),但各加油组间CLA和t11C18:1浓度差异不显著(P>0.05),并且均使不饱和脂肪酸的比例提高1倍;添加植物油后血浆中C16:0、C18:0和t11C18:1的含量显著提高(P<0.05),不饱和脂肪酸在总脂肪酸中的比例未发生变化。反刍动物日粮中添加富含亚油酸水平一致的不同植物油,在提高CLA或其前体物t11C18:1浓度方面的作用效果是一致的。