竹节香附(Anemone Raddeana Regel)糖甙和多种天然多糖的cAMP-PDE抑制活性研究

本文建立cAMP-PDE活性检测的放射纸层析-液闪计数法,应用该法对八种多糖药物的cAMP-PDE抑制活性进行评价。结果发现:竹节香附提取物的脂溶性总皂甙分别以10,30,70,100μg浓度进行体外抑制兔脑cAMP-PDE,其抑制率相应为31.0％.36.0％,58.7%,61.1％;水溶性皂甙的抑制率相应为36.4％(10μg),38.6％(30μg),59.45％(50μg),50％(70μg),61.3％(100μg)。另外七种天然多糖对cAMP-PDE的抑制同样见到较好的效果,其中肝素、蘑菇浸膏、猴菇菌片、紫灵芝片和灵芝精液的抑制率均远大于阳性药物-氨茶碱(22.32％),唯云芝肝泰未见效果。

支气管哮喘患者外周血单核细胞内cAMP-PDE活力的观察

作者检测了22例支气管哮喘患者(其中外源性17例,内源性5例)外周血单核细胞内cAMP-PDE活力。结果示:(1)支气管哮喘患者cAMP-PDE活力显著增高,外源性哮喘与内源性哮喘相比酶活力改变无显著差异;(2)cAMP-PDE与血清IgE间无相关性:(3)酶活力改变与疾病严重程度有关。

猪呼吸道疾病综合征中性粒细胞cAMP-PDE和血浆cAMP、IL-6、TNF-α的变化及中药疗效研究

本试验通过观察呼吸道疾病综合征(PRDC)病猪中性粒细胞(PMN)环磷酸腺苷磷酸二酯酶(cAMP-PDE)活性和血浆cAMP、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的变化及自拟中药汤剂对其的影响与疗效,以期为呼吸道炎症的病理机制与中药防制积累资料。将PRDC病猪随机分组,治疗组灌服由芦根、黄芪、白芍、甘草组成的1g生药/mL中药,1.5mL/kg,每天2次,连续给药10d。停药后取全血检测各组外周血白细胞数量;并分离PMN,HPLC法检测cAMP-PDE活性;ELISA试剂盒测定血浆中cAMP、IL-6、TNF-α的含量。与健康对照组相比,患病组白细胞数量显著升高(P<0.05),cAMP-PDE活性和血浆TNF-α、IL-6含量均极显著升高(P<0.01);治疗组TNF-α含量显著升高(P<0.05)。与患病组相比,治疗组的白细胞数量、cAMP-PDE活性和血浆TNF-α含量均显著降低(P<0.05),IL-6极显著降低(P<0.01)。结果表明PRDC病猪存在外周血白细胞数量、PMN cAMP-PDE活性和血浆IL-6、TNF-α含量升高的异常变化,自拟中药汤剂能改善呼吸道病猪的临床症状,其作用机制与降低白细胞数量,抑制PMN cAMP-PDE活性和降低血浆IL-6、TNF-α含量相关。

复方中药和3′,5′环腺苷酸(cAMP)对小鼠艾氏腹水癌细胞的抑制效果与癌细胞内cAMP含量及cAMP-PDE活性变化关系

本工作用复方白蛇酒及外源性cAMP对小鼠艾氏腹水癌进行比较实验,通过实验观察到该复方制剂和外源性3’,5’-cAMP对小鼠艾氏腹水癌细胞的增殖均有显著的抑制作用,癌细胞增殖受到抑制的同时,癌细胞内3’,5’-cAMP含量显著提高;控制cAMP水平的3’,5’-cAMP磷酸二酯酶(PDE)活性受到抑制。该复方之所以能提高癌细胞内cAMP水平可能是由于细胞内3’,5’-cAMP-PDE.活性受到抑制所致。本工作进一步将该复方组分的两部份(六味中草药和蟾蜍酒)与原复方白蛇洒分别进行实验比较,观察到前两组癌细胞内3’,5’-cAMP水平和3’,5’-cAMP-PDE的活性均未看到显著变化,本工作可为中医临床用药和疗效机理提供一定的理论依据。

AD患者血清IgE与单个核细胞中cAMP-PDE活性关系的临床意义

Atopy是指一组过敏性哮喘、过敏性鼻炎及遗传过敏性皮炎(Atopic Dermatitis,AD)的疾病。已报道大多数AD患者血清IgE水平增高。实验证明,Atopy患者的B细胞体外自发性产生过量IgE,且与胞内环核苷酸磷酸二酯酶(cAMP-PDE)活力增高密切相关。本文观察了AD及其亚型患者血清总IgE及粉尘螨特异性IgE水平,并初步探讨了血清IgE与cAMP-PDE间的关系。

党参补气强心作用的实验研究

以不同浓度的党参提取液作用于大白鼠心肌细胞，结果表明ＰＤＥ活性受到不同程度的抑制，ｃＡＭＰ水解减少，含量增加。作用于兔血小板后，随药物浓度增加，ＣａＭ活性抑制率增大。

人参皂苷Rg1促智信号转导途径研究

目的探究人参皂苷Rg1(G-Rg1)促智信号转导途径,观察G-Rg1对环腺苷酸(cAMP)、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)和磷酸二酯酶(PDE)的影响。方法正常成年大鼠口服G-Rg120mg.kg-1,连续3d后,分别采用酶联免疫法和免疫组织化学法检测脑区cAMP和p-CREB水平的变化。体外给予G-Rg1后,检测海马匀浆液中PDE活性的变化。结果大鼠口服G-Rg1后,海马组织cAMP水平升高,海马和脑皮质p-CREB增强,G-Rg1降低海马PDE活性,抑制cAMP降解。结论G-Rg1能提高脑内cAMP、p-CREB水平,抑制PDE活性,表明G-Rg1可以通过激活cAMP-PKA-CREB信号通路发挥促智作用。

5味山姜属中药不同部位对胃溃疡寒证大鼠环核苷酸系统的影响

目的研究高良姜、大高良姜、红豆蔻、草豆蔻、益智仁5味山姜属中药不同部位对胃溃疡寒证大鼠AC、PDE、cAMP、cGMP含量的影响。方法分空白组,模型组,附子理中丸组,西咪替丁组,5味受试药物石油醚部位,乙酸乙酯部位,正丁醇部位,水部位的高低剂量组,使用ELISA法测定胃组织AC、PDE、cAMP、cGMP含量,计算cAMP/cGMP比值。结果与模型组比较,5味山姜属中药石油醚部位和乙酸乙酯部位高剂量组的胃组织AC、cAMP含量及cAMP/cGMP比值均升高(P<0.01或P<0.05);PDE含量均降低(P<0.01或P<0.05),各受试组cGMP含量均无显著性差异;各受试组低剂量组的AC、PDE、cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP比值均无显著性差异。结论 5味山姜属中药的石油醚部位和乙酸乙酯部位能显著升高胃组织AC、cAMP含量及cAMP/cGMP比值,降低胃组织PDE含量,说明同属药的药性相类似,可能与其具有相同或类似的物质基础有关。

磷酸二酯酶4研究进展

环腺苷酸(cAMP)和环鸟苷酸(cGMP)对于细胞的许多功能有重要作用。磷酸二酯酶(PDEs)催化cAMP和cGMP水解开环分别生成AMP和GMP,这是细胞内降解cAMP和cGMP的唯一途径。PDEs可分为11个家族,其中有8个家族可以水解cAMP,包括能专一性地水解cAMP的PDE家族(如PDE4),和既可水解cAMP又可水解cGMP的PDE家族。PDE4同工酶主要存于在炎症细胞中。PDE4可分为A、B、C、D 4个亚家族,根据其N端的特殊结构,有长、短和超短三种形式。PDE4催化区三维结构的阐明有助于它们功能的研究和相关药物的设计。PDE4通过与其它蛋白如抑制蛋白、A激-酶锚定蛋白(AKAP)以及活化的C激酶1受体(RACK1)等相互作用使cAMP浓度区域化,选择性地调节各种细胞功能。PDE4作为一个治疗靶点,研究其选择性抑制剂具有重要的意义,可以用于治疗由炎症引起的疾病,如哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、阿尔采末病(AD)、帕金森病(PD)和中风等由潜在的炎症引起神经元受损造成的中枢神经系统疾病。

磷酸二酯酶在心力衰竭治疗中的研究进展

心力衰竭是心血管疾病发展的最终阶段,因而针对心力衰竭的精准治疗策略意义重大。环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)是调节信号转导的第二信使,它们在心脏和心肌细胞活动中有着重要意义。磷酸二酯酶(PDEs)是一组分布和功能各具特点的水解酶,它们能够有效调节cAMP和cGMP的浓度进而干预细胞活动。PDE3和PDE5的抑制剂是现在临床常用的针对心血管疾病治疗用药,对于它们的临床和基础研究不断更新。随着人们对这些PDEs功能和药理价值不断深入的探索,我们会对相应的心衰治疗策略有更加深入的认识,与此同时,了解这些研究的进展能够帮助我们洞悉心衰治疗的策略以及正性肌力药的发展方向。

5味山姜属中药乙醇提取物对胃溃疡寒证模型大鼠胃组织AC,PDE,cAMP,cGMP及cAMP/cGMP的影响

目的：观察高良姜、大高良姜、草豆蔻、红豆蔻、益智5味山姜属中药乙醇提取物对醋酸灌胃型胃溃疡寒证大鼠胃组织AC,PDE,cAMP,cGMP及cAMP/cGMP的影响,探讨同属中药温热药性的相关性及其本质。方法：采用灌服4℃冰知母水提液和浓度为15%的冰醋酸建立大鼠胃溃疡寒证模型,造模成功后随机分为模型组、西咪替丁组、附子理中丸组、各受试药物乙醇部位高、低剂量组,共14组,每组10只。观察各组中药的乙醇提取物对大鼠胃组织AC,PDE,cAMP,cGMP含量及cAMP/cGMP比值的影响。结果：5味山姜属中药乙醇提取物均能显著升高胃溃疡寒证大鼠胃组织中AC含量（P〈0.05或P〈0.01）,降低PDE含量（P〈0.05或P〈0.01）,升高cAMP含量及cAMP/cGMP比值（P〈0.05或P〈0.01）。结论：通过“性效关联”规律,利用“病证结合”模型验证了山姜属5味中药具有相似的药性。5味山姜属中药乙醇提取物都是通过升高胃组织细胞内AC与cAMP含量、降低PDE含量、调节cAMP/cGMP稳定而呈现温热性能,说明同属中药具有相似的药性,可能是由于具有亲缘关系的同属中药有相同的药效部位或相似的物质基础。

磷酸二酯酶及其抑制剂的研究进展

磷酸二酯酶(PDEs)是一类可水解细胞内第二信使环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)和环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)的酶类,可调节细胞内的多种信号传递和生理活动。PDEs由11种不同的家族组成,且各家族包含不同的亚型,各个亚型在细胞内分布、表达、调节方式以及对抑制剂的敏感性均不同,参与了炎症、哮喘、抑郁、勃起功能障碍等多种病理过程的发生发展,这些特点使得PDE作为新的药物靶点得到了越来越多的关注。该文将从PDE各家族生物学特点、生理病理学意义及其抑制剂的应用作一简单综述。

磷酸二酯酶5选择性抑制剂zaprinast对小鼠卵母细胞成熟的影响

目的研究磷酸二酯酶5(PDE5)选择性抑制剂扎普司托(zaprinast)对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法采用小鼠卵母细胞自发成熟、促卵泡刺激素(FSH)诱导次黄嘌呤(HX)阻滞成熟以及卵泡卵母细胞成熟三种体外培养模型。结果10μmol/L的zaprinast不仅能显著抑制小鼠卵丘卵母细胞复合体(COCs)和裸卵(DOs)的自发成熟(P<0.01),而且还能显著抑制FSH对HX阻滞的COCs的以及卵泡卵母细胞成熟的促进效应(P<0.01)。结论PDE5能促进小鼠卵母细胞的体外成熟。

2'-'5-三腺苷酸对巨噬细胞腺苷酸环化酶和cAMP-磷酸二酯酶活性的影响

1989年,我们曾首次证实干扰素作用介导物pppA2＇p5＇A2＇p5＇A(2＇-5＇-三腺苷酸,2＇-5＇P_3A_3)能引起巨噬细胞中cAMP,cGMP水平升高,表明这两种环核苷酸在传递干扰素信息中起着重要作用。在上述研究的基础上,本研究观察了2＇-5＇P_3A_3对腺苷酸环化酶(AC)和cAMP-磷酸二酯酶(cAMP-PDE)两种酶的活性影响,结果发现,1×10^(-6)mol/L的2＇-5＇P_3A_3可显著增加AC的活性,而对cAMP-PDE活性沒有显著影响,这说明2＇-5＇P_3A_3引起的细胞内cAMP水平的升高是由于激活AC而使其生成增多,而不是抑制cAMP-PDE而使其降解减少的结果。

高效液相色谱测定血小板cAMP-磷酸二酯酶活力

本文报道了离子交换高效液相色谱-紫外检测磷酸二酯酶(PDE)活力的方法。本方法的回收率为93.02±2.09％,重复性cv为3.16％,5’-AMP在17.0—90.7pmol/10μl、cAMP在138—1104pmol/10μl浓度范围内,相关系数分别为0.9986和0.9950。用5’-AMP生成率和cAMP的转化率表达PDE活力,两者吻合。本方法能灵敏地反映茶碱对PDE的抑制作用。

具抗癌活性的鬼桕毒电子自旋标记物的生物学作用研究——Ⅱ.对环腺苷酸磷酸二酯酶的影响

本文观察了鬼桕毒自旋标记衍生物对家兔脑环腺苷酸磷酸二酯酶活性的抑制作用,结果表明,化合物对该酶的活性有较强的抑制作用,抑制率接近阳性对照药物—氨茶碱的作用,达30～40％。

原发性肝细胞癌3′,5′-cPDE的组织化学研究

采用组织化学方法,对23例人的原发性肝细胞癌,7例正常肝组织及4例肝硬化,进行了3′,5′-环-磷酸腺苷磷酸二酯酶(cAMP-PDE)和3′,5′-环-磷酸鸟苷磷酸二酯酶(cGMP-PDE)的组织化学研究。结果表明:在正常肝组织内cAMP-PDE的阳性率为42.9%,cGMP.PDE阳性率为71.4%,两组间差异显著。同时还进行了cPDE与碱性磷酸酶(ALP),5′-核苷酸酶(5′-AT)、琥珀酸脱氲酶(SDH)三组酶的对比组化研究,这三组酶与cPDE之间没有明显的相关性,后者从特异性和敏感性方面均优于前者。

支气管哮喘药物治疗的发展趋势

作者综述了支气管扩张剂和非支气管扩张剂类抗哮喘药以及免疫药物等治疗支气管哮喘的应用现状和今后的研究发展趋势。

一类新的钙调素依赖性磷酸二酯酶抑制剂

噻吩骈〔3,4-d〕嘧啶—2,4—二酮类是人工合成的一类新化合物,结构与茶碱相似。实验结果表明,该类化合物对钙调素依赖性磷酸二酯酶(CaM—PDE)活性有较强的抑制作用,抑制强度与脲嘧啶环1,3位上的取代基密切相关。代表化合物NY_(14)的半抑制浓度(IC_(50))为47μmol/l,比茶碱(IC_(50),3.4mmol/l)作用强70余倍。酶抑制动力学表明,随抑制剂浓度增加,酶促反应最大速度Vmax不变,Km值增大,提示NY_(14)为cAMP竞争性抑制剂。药理实验证实,NY_(14)对豚鼠离体气管条有直接松弛作用,ED_(25)约为35μmol/L。

小鼠受精卵早期发育过程中PDE活性变化及其与MPF关系的研究

目的研究在小鼠受精卵早期发育过程中,磷酸二酯酶(PDE)的活性变化及与有丝分裂促进因子(MPF)活性变化相比较,初步探讨哺乳动物受精卵早期发育的细胞周期调控机制。方法以小鼠受精卵为材料,通过离子交换方法,检测PDE和MPF的活性。结果受精卵早期发育过程中PDE和MPF活性随细胞周期变化而波动,G2期PDE活性升高而MPF在M期活性升高。结论PDE参与了小鼠受精卵的早期发育并且作用时间早于MPF。