细粒棘球绦虫cDNA克隆EgA31在大肠埃希氏菌M15中的表达及重组蛋白的纯化和复性

为了获得细粒棘球绦虫 66ku抗原的重组蛋白和抗血清 ,用该抗原的cDNA克隆EgA3 1构建了pQE3 0EgA3 1重组质粒 ,在大肠埃希氏菌M15中表达 ,经亲和层析获得纯度较高的EgA3 1重组蛋白 ;用经复性处理的重组蛋白免疫动物 ,获得EgA3 1重组蛋白抗血清。本文就重组蛋白的稳定性和在复性处理中遇到的问题进行了讨论。

小麦TaCIPK31基因的克隆及生物信息学分析

根据小麦CIPK相关EST序列TC95390,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,从耐盐性、耐旱性较好的小麦品种石4185中克隆出5’末端和3’末端,序列拼接后获得全长基因,同源比对后命名为TaCIPK31(Gen-Bank登录号JX625142.1),并对该基因进行了生物信息学分析.结果表明,TaCIPK31编码区长1 350 bp,编码449个氨基酸;TaCIPK31的理论等电点为8.27,相对分子质量为50.9 kD,是亲水性较强的氨基酸;TaCIPK31的N-端激酶催化域含有该家族基因的典型激活环,C-端调节域含有CIPK家族中高度保守的NAF结构域,具有丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶的结构特征;氨基酸序列同源性分析表明,TaCIPK31与已报道的大麦HvCIPK31、水稻Os-CIPK3、玉米ZmCIPK31有较高的同源性.