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绿鳍马面鲀ERα基因部分cDNA序列克隆及其表达研究 被引量:4
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作者 赵梅琳 温海深 +2 位作者 张冬茜 何峰 李吉方 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期81-88,共8页
雌二醇是与生殖相关的重要的性类固醇激素之一,它与雌激素受体相结合作用于靶器官从而发挥生物活性。为进一步阐明绿鳍马面鲀雌激素受体α(Estrogen receptorα,ERα)的生理功能提供了科学依据,同时也为其人工繁育提供一定的理论基础,... 雌二醇是与生殖相关的重要的性类固醇激素之一,它与雌激素受体相结合作用于靶器官从而发挥生物活性。为进一步阐明绿鳍马面鲀雌激素受体α(Estrogen receptorα,ERα)的生理功能提供了科学依据,同时也为其人工繁育提供一定的理论基础,作者利用简并引物扩增得到绿鳍马面鲀(Navodon septentrionalis)ERα部分cDNA序列,共1410bp,编码470个氨基酸。通过半定量RT-PCR技术分别检测了其在雌鱼、雄鱼中各组织的表达情况,结果表明ERα在雌鱼体内的表达较雄鱼更广泛,在雌鱼垂体、心脏和卵巢的表达量最高,在雄鱼的垂体、肝脏、肾脏、精巢也有较高的表达。采用实时定量RT-PCR技术,分析了ERα在性腺中的周年表达情况,卵巢中ERαmRNA在5月表达量最高,7月最低:精巢中在5月最低,9月最高。该项研究表明ERα与绿鳍马面鲀生殖周期存在密切关联,提示在性腺发育过程中发挥一定作用。 展开更多
关键词 绿鳍马面鲀(Navodon septentrionalis) 雌激素受体 cdna部分序列克隆 组织分布 MRNA表达
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杉木CCoAOMT基因部分cDNA克隆与序列分析 被引量:7
2
作者 蒋向辉 佘朝文 +2 位作者 许栋 张青桦 赵旺 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期24-28,共5页
利用CODEHOP设计CCoAOMT基因的简并引物,通过RT-PCR的方法,从杉木茎段中克隆到1个长度为614 bp的PCR产物,产物经pMD18-T载体克隆转化至DH5α大肠杆菌中,序列通过同源性比对后显示该片段与其它植物的CCoAOMT基因具有较高的同源性.利用生... 利用CODEHOP设计CCoAOMT基因的简并引物,通过RT-PCR的方法,从杉木茎段中克隆到1个长度为614 bp的PCR产物,产物经pMD18-T载体克隆转化至DH5α大肠杆菌中,序列通过同源性比对后显示该片段与其它植物的CCoAOMT基因具有较高的同源性.利用生物信息学方法分析发现,该序列在112-651 bp片段上有一个开放性阅读框,该序列编码的是一个酸性蛋白,亲水性较弱,疏水性较强;信号肽序列为第23位至第45位,二级结构以α-螺旋(40.62%)与不规则盘绕(45.31%)为主,没有发现β转角区域. 展开更多
关键词 生物技术 杉木 CCoAOMT基因 cdna克隆 序列分析
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水稻中编码甘油-3-磷酸转酰酶部分cDNA的克隆及序列分析 被引量:4
3
作者 刘继梅 陈善娜 +2 位作者 鄢波 黄兴奇 杨明挚 《云南植物研究》 CSCD 1998年第3期339-342,共4页
参照国外报道的几种双子叶植物的甘油-3-磷酸转酰酶的相对保守的氨基酸序列,设计并合成一对简并引物,提取抗冷性强的水稻品种“丽梗2号”的RNA,采用RT-PCR技术,扩增出了315bp的一段cDNA片段。扩增产物经纯化... 参照国外报道的几种双子叶植物的甘油-3-磷酸转酰酶的相对保守的氨基酸序列,设计并合成一对简并引物,提取抗冷性强的水稻品种“丽梗2号”的RNA,采用RT-PCR技术,扩增出了315bp的一段cDNA片段。扩增产物经纯化后直接克隆到pGEM-T载体系统中,经PCR法鉴定,所得的重组质粒中含有315bp的片段。证明已克隆到水稻甘油-3-磷酸转酰酶部分cDNA。采用双链双脱氧法定序分析,表明所克隆的该段cDNA序列与国外所报道的双子叶植物的该段cDNA的核苷酸序列及氨基酸序列的同源性均达到70%以上,提示了该基因在进化上具有一定的保守性。 展开更多
关键词 GPAT PCR 基因克隆 水稻 cdna 克隆 序列分析
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庚型肝炎病毒(HGV)NS5区部分基因的克隆和cDNA序列测定 被引量:9
4
作者 周育森 陈薇 +3 位作者 王海涛 赵秋敏 徐静 王竞 《中国病毒学》 CSCD 1997年第1期50-53,共4页
用RT-PCR技术从一例献血员血清标本中扩增出HGV非结构区的部分基因片段,克隆后测定。cDNA序列。该序列与国外三株HGV的核苷酸同源性在90%以上;与GBV—A和GBV—B的同源性分别为44.7%和33.17%;与已发表的23个HCV全序列的相应序... 用RT-PCR技术从一例献血员血清标本中扩增出HGV非结构区的部分基因片段,克隆后测定。cDNA序列。该序列与国外三株HGV的核苷酸同源性在90%以上;与GBV—A和GBV—B的同源性分别为44.7%和33.17%;与已发表的23个HCV全序列的相应序列比较,同源性均小于40%。结果表明,克隆的病毒株为HGV中国株。同时,用RT—PCR检测了河北固安和南京地区的115份HCV感染者标本.HGVRNA阳性率为3.47%。表明我国某些特殊人群中HGV感染率较高,是一个不容忽视的问题。 展开更多
关键词 庚型肝炎病毒 cdna序列 基因克隆
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草鱼出血病病毒基因组的cDNA合成、克隆及部分序列分析 被引量:13
5
作者 田静 邹桂平 方勤 《中国病毒学》 CSCD 1999年第1期87-92,共6页
采用差速离心的方法纯化感染草鱼出血病病毒的细胞悬液。提纯的病毒粒子经蛋白酶K处理和酚氯仿抽提,在1%琼脂糖凝胶电泳条件下分离得到11条dsRNA,利用柱离心式胶回收试剂盒纯化各基因片段。纯化的dsRNA溶于90%的... 采用差速离心的方法纯化感染草鱼出血病病毒的细胞悬液。提纯的病毒粒子经蛋白酶K处理和酚氯仿抽提,在1%琼脂糖凝胶电泳条件下分离得到11条dsRNA,利用柱离心式胶回收试剂盒纯化各基因片段。纯化的dsRNA溶于90%的DMSO中,70℃变性15min,然后采用随机引物法反转录合成各基因片段的cDNA,并平头连接于pZErO2.0载体的EcoRV位点,电转化TOP10感受态细胞。重组质粒经酶切、PCR扩增得到大小不等的插入片段,cDNARNA斑点杂交的结果进一步证实其插入为目的基因片段。采用循环PCR测序的方法,对其插入片段进行了序列测定,对其中第11片段的部分序列作了报道。 展开更多
关键词 草鱼出血病 病毒 cdna克隆 序列分析
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人骨形成蛋白3基因cDNA部分序列的RT-PCR克隆 被引量:3
6
作者 张涌 戴博 +1 位作者 刘建忠 郑月茂 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2003年第2期1-5,共5页
针对人骨形成蛋白 3基因的 c DNA序列设计引物 ,通过反转录 PCR技术 ,从人骨纤维肉瘤组织中扩增出目的片段。从胶中回收目的片段 ,将其与 p MD18- T载体连接 ,转化大肠杆菌 DH 5α后 ,经 H ind 酶切鉴定 ,进行测序。结果显示所得到的片... 针对人骨形成蛋白 3基因的 c DNA序列设计引物 ,通过反转录 PCR技术 ,从人骨纤维肉瘤组织中扩增出目的片段。从胶中回收目的片段 ,将其与 p MD18- T载体连接 ,转化大肠杆菌 DH 5α后 ,经 H ind 酶切鉴定 ,进行测序。结果显示所得到的片段大小为 84 5 bp,与所设计的序列同源性为 10 0 % ,说明已经成功地扩增、克隆了人骨形成蛋白 3(h BMP- 3)基因 c DNA的大部分序列。 展开更多
关键词 人骨形成蛋白3基因 cdna序列 RT-PCR 基因克隆 骨形成蛋白 转基因动物乳腺
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南方鲇促生长激素释放激素基因的部分cDNA克隆及序列分析 被引量:4
7
作者 魏玲 程道军 王志坚 《西南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期57-62,共6页
促生长激素释放激素(GHRH)是一种重要的内分泌激素,主要功能是调节脑垂体分泌生长激素(GH).实验旨在克隆分析南方鲇GHRH基因的cDNA序列.从南方鲇的脑组织中提取总RNA并反转录成cDNA,再根据已知GHRH基因的保守区域序列设计引物,通过反转... 促生长激素释放激素(GHRH)是一种重要的内分泌激素,主要功能是调节脑垂体分泌生长激素(GH).实验旨在克隆分析南方鲇GHRH基因的cDNA序列.从南方鲇的脑组织中提取总RNA并反转录成cDNA,再根据已知GHRH基因的保守区域序列设计引物,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)实验,获得了一条334 bp的片段并进行了测序.序列信息分析表明,该序列与沟鲇的GHRH基因同源,相似性达99%.根据同源性检索结果推测该序列编码110个氨基酸,并基于该编码序列分析了南方鲇GHRH的功能结构域以及南方鲇同其他物种的遗传发生关系. 展开更多
关键词 南方鲇 促生长激素释放激素 cdna克隆 RT—PCR 序列分析
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玉米ST和ATPS部分cDNA序列克隆及分析 被引量:3
8
作者 朱超 王保莉 曲东 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1742-1746,共5页
硫酸盐转运蛋白(ST)和ATP硫酸化酶(ATPS)是根系吸收硫酸盐和植物体内硫酸盐同化过程的关键蛋白和酶,在硫酸盐的生物转运过程中具有重要作用.以水培玉米农大108根系为材料,并根据已报道的玉米的硫酸盐转运蛋白和ATP硫酸化酶基因保守序列... 硫酸盐转运蛋白(ST)和ATP硫酸化酶(ATPS)是根系吸收硫酸盐和植物体内硫酸盐同化过程的关键蛋白和酶,在硫酸盐的生物转运过程中具有重要作用.以水培玉米农大108根系为材料,并根据已报道的玉米的硫酸盐转运蛋白和ATP硫酸化酶基因保守序列分别设计PCR引物对,采用RT-PCR方法克隆到783 bp和820 bp的部分硫酸盐转运蛋白和ATP硫酸化酶cDNA片段,分别命名为ST_ND108和ATPS_ND108.序列分析和比对结果显示,ST_ND108与已报道的玉米和水稻的高亲和型硫酸盐转运蛋白基因同源性分别为99%和85%;而ATPS_ND108与已报道的玉米ATP硫酸化酶基因同源性达到97%,进化树聚类分析和预测氨基酸的BLAST结果证实ST_ND108为高亲和性硫酸盐转运蛋白基因片段,ATPS_ND108为质体ATP硫酸化酶基因片段. 展开更多
关键词 玉米根系 硫酸盐转运蛋白 ATP硫酸化酶 cdna基因克隆 序列分析
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中国部分地方品种鸡CD4和CD8α基因cDNA的克隆与序列分析 被引量:1
9
作者 胡青海 焦新安 +2 位作者 潘志明 黄金林 殷月兰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期216-221,共6页
用Trizol分别提取4~6周龄白莱航鸡、狼山鸡、大骨鸡、北京油鸡、仙居鸡、茶花鸡、固始鸡和隐性白羽鸡胸腺细胞的总RNA,再用Oligo-dT纤维索富集mRNA后,用RT-PCR分别扩增出鸡CD4和cD8α基因cDNA。将PCR产物克隆进T载体后测序。序列分... 用Trizol分别提取4~6周龄白莱航鸡、狼山鸡、大骨鸡、北京油鸡、仙居鸡、茶花鸡、固始鸡和隐性白羽鸡胸腺细胞的总RNA,再用Oligo-dT纤维索富集mRNA后,用RT-PCR分别扩增出鸡CD4和cD8α基因cDNA。将PCR产物克隆进T载体后测序。序列分析显示不同品种鸡的CD4 cDNA序列完全一致;中国地方品种鸡与国外品种的白莱航鸡、RPL7系鸡在CD8α胞外区有6~13个氨基酸的差异,仙居鸡与其他5个中国地方品种鸡在CD8α胞外区有4~5个氨基酸的差异,狼山鸡、北京油鸡和隐性白羽鸡CD8α cDNA的核苷酸序列及推导的氨基酸序列完全一致。这些结果表明,中国地方品种鸡CD4基因序列高度保守;中国地方品种鸡与国外品种鸡的CD8α cDNA序列之间具有遗传多态性,而中国地方品种鸡之间CDSα cDNA序列遗传多态性低,为进一步研究CD4分子和CD8α链的结构和功能提供了条件。 展开更多
关键词 CD4 CD8Α cdna 克隆 序列分析
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水稻矮缩病毒(RDV)基因组cDNA克隆和部分DNA序列分析 被引量:4
10
作者 高谦 欧阳新 +2 位作者 刘玮 潘乃穟 陈章良 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1990年第1期13-18,共6页
采用氯仿处理、聚乙二醇沉淀和蔗糖密度梯度离心的方法,从感病的水稻叶片中分离、纯化了水稻矮缩病毒(RDV)。在琼脂糖凝胶板上电泳分离到了9个 RNA 片段的 RDV 基因组。用电泳回收的方法纯化了 RDV 基因组的各 RNA 片段。利用 ollgo dT... 采用氯仿处理、聚乙二醇沉淀和蔗糖密度梯度离心的方法,从感病的水稻叶片中分离、纯化了水稻矮缩病毒(RDV)。在琼脂糖凝胶板上电泳分离到了9个 RNA 片段的 RDV 基因组。用电泳回收的方法纯化了 RDV 基因组的各 RNA 片段。利用 ollgo dT 作为引物,合成并克隆了其中几个片段的 cDNA。通过对 cDNA 克隆的物理图谱分析,建立了亚克隆,测定了它们的 cDNA 序列。这里报告其中第8条片段的 cDNA 部分序列。 展开更多
关键词 水稻矮缩病毒 RDV cdna 克隆 序列
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小菜蛾肌球蛋白重链部分cDNA序列克隆、表达概况及分析 被引量:1
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作者 龚亮 钟国华 +1 位作者 任珍珍 胡美英 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期85-89,共5页
肌肉肌球蛋白重链在生物运动过程中具有至关重要的作用,但在昆虫中此类基因极少被报道。首次克隆和分析小菜蛾肌球蛋白重链部分cDNA序列,GenBank登录号为FJ462712,其长408个碱基,推测编码135个氨基酸。同源分析表明:此多肽序列与凤蝶、... 肌肉肌球蛋白重链在生物运动过程中具有至关重要的作用,但在昆虫中此类基因极少被报道。首次克隆和分析小菜蛾肌球蛋白重链部分cDNA序列,GenBank登录号为FJ462712,其长408个碱基,推测编码135个氨基酸。同源分析表明:此多肽序列与凤蝶、家蚕、果蝇的同源性分别为95%,93%,82%。半定量RT-PCR研究表明:小菜蛾MHC基因在不同的生长发育阶段的表达皆不相同,在老熟幼虫和成虫中的表达量显著高于低龄幼虫和蛹。为进一步鉴定小菜蛾肌球蛋白重链的生理特征提供基因序列信息。 展开更多
关键词 小菜蛾 肌球蛋白重链 cdna克隆 序列分析 表达概况
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中国南京庚型肝炎病毒部分基因的克隆及cDNA序列分析 被引量:1
12
作者 徐俊杰 周育森 +4 位作者 许家璋 鞠九龙 王晓英 陈薇 王海涛 《肝脏》 1996年第4期196-198,共3页
采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)从南京地区某输血后丙型肝炎患者血清中克隆出庚型肝炎病毒(HGV)非结构区部分基因。序列分析结果表明,该序列与国外发表的庚型肝炎病毒HGU 44402,HGU 45966和HGU 36380(GBV-C)对应位置核苷酸序列同源... 采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)从南京地区某输血后丙型肝炎患者血清中克隆出庚型肝炎病毒(HGV)非结构区部分基因。序列分析结果表明,该序列与国外发表的庚型肝炎病毒HGU 44402,HGU 45966和HGU 36380(GBV-C)对应位置核苷酸序列同源性分别为89.09%,92.12%和87.27%,与已报道的HGV河北株序列同源性为93.94%。对40份输血后丙型肝炎血清和30份非甲非乙非丙非丁非戊型肝炎血清进行了检测,HGV RNA阳性率分别为10.00%和6.67%。 展开更多
关键词 庚型肝炎病毒 HGV 输血后 丙型肝炎 基因 血清 克隆 cdna序列分析 GBV-C 戊型肝炎
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嗜热真菌Thermomyces langinosus编码丝/苏氨酸蛋白激酶部分cDNA的克隆及序列分析(英文) 被引量:1
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作者 李伟 李多川 +1 位作者 张世宏 彭友良 《山东科学》 CAS 2003年第1期17-21,共5页
根据几种丝状真菌保守的氨基酸序列,设计了一组简并性的引物,从嗜热真菌Thermomyceslanginosus中提取总RNA,利用RT-PCR的方法,我们得到了一个1243bp的cDNA的片段。片段回收纯化后连接到pGEM-Teasy载体上,PCR扩增重组质粒证实这个长约120... 根据几种丝状真菌保守的氨基酸序列,设计了一组简并性的引物,从嗜热真菌Thermomyceslanginosus中提取总RNA,利用RT-PCR的方法,我们得到了一个1243bp的cDNA的片段。片段回收纯化后连接到pGEM-Teasy载体上,PCR扩增重组质粒证实这个长约1200bp片段已经插到载体上。序列分析发现和裂殖酵母的蛋白激酶dis1非常相似,比较两者3'氨基酸序列发现同源性达28%以上。其推断的氨基酸序列上包含有6个丝/苏氨酸蛋白激酶的保守亚区。这些都表明它编码的基因可能是一个新的丝/苏氨酸蛋白激酶。 展开更多
关键词 嗜热真菌 基因编码 丝氨酸蛋白激酶 苏氨酸蛋白激酶 cdna序列分析 基因克隆 氨基酸序列
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油菜ATP硫酸化酶部分cDNA克隆及序列分析
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作者 王帮庆 邱睿 王保莉 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期126-130,共5页
ATP硫酸化酶(ATP sulfurylase,ATPS,EC 2.7.7.4)广泛存在于动物、植物、微生物中,可催化ATP和SO42-生成APS和PPi,也可以催化此过程的逆反应。用Genbank公布的的油菜ATPS全长序列与甘蓝、拟南芥以及洋葱的序列进行比对,得到一段保守性比... ATP硫酸化酶(ATP sulfurylase,ATPS,EC 2.7.7.4)广泛存在于动物、植物、微生物中,可催化ATP和SO42-生成APS和PPi,也可以催化此过程的逆反应。用Genbank公布的的油菜ATPS全长序列与甘蓝、拟南芥以及洋葱的序列进行比对,得到一段保守性比较强的序列。采用RT-PCR方法从油菜‘秦优8号’的叶片获得880 bp长的cDNA片段,命名为RATPS_8。序列分析和比对结果表明:RATPS_8与已报道的甘蓝、芥菜和油菜的基因同源性分别为95%、92%和91%,进化树聚类分析和预测氨基酸的BLAST结果证实,RATPS_8为油菜‘秦优8号’ATP硫酸化酶的部分基因片段。 展开更多
关键词 油菜 ATP硫酸化酶 cdna 基因克隆 序列分析
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三个品种家鸡催乳素基因cDNA的克隆及序列分析 被引量:41
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作者 周敏 张细权 +1 位作者 施振旦 曹永长 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第7期614-620,共7页
从粤黄鸡、丝毛乌骨鸡及伊莎蛋鸡的垂体中快速抽提总RNA,根据国外已发表的肉用仔鸡催乳素基因cDNA的序列,设计并合成了能与特定载体末端互补的1对引物,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增获得了特异性片段。... 从粤黄鸡、丝毛乌骨鸡及伊莎蛋鸡的垂体中快速抽提总RNA,根据国外已发表的肉用仔鸡催乳素基因cDNA的序列,设计并合成了能与特定载体末端互补的1对引物,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增获得了特异性片段。将扩增片段与线性化质粒 pBSSK连接,克隆后进行序列分析,与已报道的肉用仔鸡、矮脚鸡和火鸡催乳素基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行了比较。结果表明,不同品种间核苷酸同源性介于93.97%~99.87%之间,其中丝毛乌骨鸡与矮脚鸡间的同源性最高,为99.87%。推导的相应氨基酸序列的同源性在98.25%~100%之间,也是丝毛乌骨鸡与矮脚鸡间的同源性最高,为100%。在粤黄鸡、丝毛乌骨鸡和伊莎蛋鸡中,发现前两者的催乳素前体的cDNA片段推导的氨基酸序列中信号肽裂解位点跟肉用仔鸡、矮脚鸡及火鸡的一样,为 Leu-Pro-Ile-Cys,而伊莎蛋鸡的信号肽裂解位点则不一样,为Pro-Pro-Ile-Cys。此位点的差异可能导致催乳素前体翻译加工的不同,使伊莎蛋鸡无就巢性。这3个家鸡品种与国外的肉用仔鸡、矮脚鸡催乳素氨基酸序列还在以下位置出现差异:71、141、150、175。在肉用仔鸡、丝毛乌骨鸡? 展开更多
关键词 家鸡 催乳素 基因克隆 序列分析 cdna
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一个新的白血病相关基因LRP16全长cDNA的克隆、序列分析及表达特征 被引量:60
16
作者 韩为东 于力 +5 位作者 楼方定 王全顺 赵瑜 史子江 焦宏远 周建军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期209-214,共6页
克隆一个与白血病复发相关基因 (LRP1 6)的全长 c DNA序列 ,对其进行染色体定位、组织表达谱分析 ,并对该基因编码蛋白质进行原核表达 .首先用获得的一段 3kb DNA片段在 NCBI提供的 h ESTs数据库中进行电子杂交并对重叠克隆片段组装 ,... 克隆一个与白血病复发相关基因 (LRP1 6)的全长 c DNA序列 ,对其进行染色体定位、组织表达谱分析 ,并对该基因编码蛋白质进行原核表达 .首先用获得的一段 3kb DNA片段在 NCBI提供的 h ESTs数据库中进行电子杂交并对重叠克隆片段组装 ,再设计引物进行 c DNA末端快速扩增(RACE技术 ) .采用 Northern印迹方法进行组织表达分析 .以高通量基因组序列 (HTGS)数据库为基础进行染色体定位 .对构建的克隆菌用 IPTG诱导重组蛋白表达后进行 SDS- PAGE,同时对重组体测序确证 .钓取了该基因全长 c DNA、推导所编码的氨基酸序列 ,并将该基因定位于染色体1 1 q1 2 .2 .原核表达筛选获得了该基因重组子的一个缺失体 .对 LRP1 6基因全长 c DNA的序列分析提示 ,该基因可能编码两种 N端不同的蛋白质 ,且该基因的转录本可能存在一种丰度较低的剪接体 . 展开更多
关键词 白血病 相关基因 LRP16 重组蛋白 原核表达 cdna 克隆 序列分析
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牛催乳素基因组及其cDNA全长序列的分子克隆和分析 被引量:30
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作者 曹新 王强 +3 位作者 颜景斌 阳飞昆 黄淑帧 曾溢滔 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第9期768-773,共6页
通过LongPCR等技术首次克隆得到全长 9388bp的牛催乳素 (bPRL)基因组序列 (GenBank登录号AF4 2 6 315 ) ,其中包括bPRL基因全部 5个外显子和 4个内含子 ,5′端 85 4bp的上游调控区以及 3′端 6 9bp的UTR。AF4 2 6 315基因编码的蛋白质在... 通过LongPCR等技术首次克隆得到全长 9388bp的牛催乳素 (bPRL)基因组序列 (GenBank登录号AF4 2 6 315 ) ,其中包括bPRL基因全部 5个外显子和 4个内含子 ,5′端 85 4bp的上游调控区以及 3′端 6 9bp的UTR。AF4 2 6 315基因编码的蛋白质在GenBank中的序号为AAL2 80 75 ,由 2 2 9个氨基酸残基组成 ,1~ 30位氨基酸残基为信号肽序列 ,成熟的多肽含有 199个氨基酸残基。将bPRL基因组DNA真核表达载体转染COS 7细胞后通过RT PCR得到长度为80 4bp的bPRLcDNA序列 ,该序列涵盖了bPRL基因的全部ORF区 ,证明本研究所获得的bPRL基因组DNA具有转录的生物学功能。Blast搜索结果显示 ,GenBank数据库中收集有多条bPRL基因的mRNA和EST序列 ,各序列间存在多个SNP位点 ,主要分布于下游编码区和 3′端的UTR ,这些位点均未改变相应的氨基酸残基的性质 ,此外 。 展开更多
关键词 分子克隆 全长序列 长距离PCR 序列分析 牛催乳素基因组 cdna
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一个新的水稻C2H2型锌指蛋白cDNA的克隆与序列分析 被引量:28
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作者 黄骥 张红生 +3 位作者 曹雅君 王东 王建飞 杨金水 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期110-112,共3页
关键词 水稻 C2H2 锌指蛋白 cdna 克隆 序列分析
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家蝇防御素基因的cDNA克隆及序列分析 被引量:23
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作者 王来城 王金星 +1 位作者 王来元 赵小凡 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期408-413,共6页
Defensin is a kind of cationic, inducible antimicrobial peptide found in a large range of living organisms that contributes to host defense by disrupting the cytoplasmic membrane of microorganisms. With their broad an... Defensin is a kind of cationic, inducible antimicrobial peptide found in a large range of living organisms that contributes to host defense by disrupting the cytoplasmic membrane of microorganisms. With their broad antimicrobial spectrum and strong pharmaceutical effects, antimicrobial peptides, including defensins, represent a source of novel antibiotic agents. A novel full-length 430 base pairs cDNA of an insect defensin was cloned using polymerase chain reaction (PCR) from the cDNA library of houseflies (Musca domestica) that had been challenged by E. coli and Staphylococcus aureus. Sequence analysis revealed that the open reading frame of the cDNA encoded a 92-amino acid peptide, which contained an NH 2-terminal signal sequence (1-22) followed by a propeptide and the mature peptide (53-92). The sequence identity with other insect defensin is between 51% and 73%. The mature peptide, with a predicted molecular weight of 4\^0 kDa, and pI of 8\^69, has 1 negative charged amino acid and 4 positice ones. The putative housefly defensin is characterized by 6 invariant cysteine residues forming 3 disulfide bonds, Cys1-Cys4, Cys2-Cys5 and Cys3-Cys6. These results suggest that the novel full-length cDNA of the defensin gene, denominated Mdde, has been successfully cloned from houseflies. 展开更多
关键词 家蝇 防御素基因 cdna 克隆 序列分析 昆虫 免疫防御系统
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南方鲇生长激素完整cDNA的克隆及其DNA序列分析 被引量:16
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作者 宋平 向筑 +2 位作者 潘云峰 胡隐昌 胡珈瑞 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期262-280,共19页
采用RT-PCR法和3'、5'RACE(Rapid amplification of cDNA ends)法从南方鲇脑垂体RNA克隆出生长激素(Growth hormone,GH)cDNA。此cDNA全长1087nt(含 Poly(A)》,其5'端非编码区长52nt、阅读框(Open reading frame,ORF)长603nt... 采用RT-PCR法和3'、5'RACE(Rapid amplification of cDNA ends)法从南方鲇脑垂体RNA克隆出生长激素(Growth hormone,GH)cDNA。此cDNA全长1087nt(含 Poly(A)》,其5'端非编码区长52nt、阅读框(Open reading frame,ORF)长603nt、3'端非编码区长415nt。其推导的GH由200个氨基酸组成,其中前24个氨基酸为信号肽部分。氨基酸序列比较表明,南方鲇GH与Pangasianodongigas、Ictaluruspunctatus和Heteropneustes fossilis三种鲇类的同源性分别为97.5%和95.0%,与鲢、鳙、草、鲤和鲫鱼的GH同源性达76.0%以上,而与人的GH(Ⅰ、Ⅱ)同源性最低为31.0%和29.5%. 展开更多
关键词 RT-PCR 南方鲇 生长激素 cdna 克隆 DNA序列分析
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