cGAS⁃STING通路介导酸性去氧胆酸诱导人正常食管上皮细胞炎症的机制研究

目的:探讨酸性去氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)诱导人正常食管上皮细胞(human esophagealepithelialcell,HEEC)线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)损伤及释放与环岛苷酸⁃腺苷酸合酶⁃干扰素基因刺激蛋白(cyclic GMP⁃AMPsynthase⁃stimulation ofinterferongene,cGAS⁃STING)通路在食管上皮炎症发生发展中的关联。方法:将HEEC分为对照组和酸性DCA处理组。CCK⁃8法检测细胞存活率;荧光显微镜及流式细胞术检测活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)、线粒体活性氧(mito⁃chondrial reactiveoxygenspecies,mtROS)及线粒体膜电位(mitochondrial membranepotential,MMP)的变化;化学发光法检测三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)水平;透射电镜观察线粒体超微结构改变;RT⁃qPCR检测mtDNA拷贝数变化;Western blot检测γH2AX、cGAS、STING、p⁃NF⁃κB p65及NF⁃κB p65的蛋白表达水平;RT⁃qPCR检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)⁃6及IL⁃1β的mRNA表达水平。结果:酸性DCA处理后细胞存活率呈剂量⁃时间依赖性降低;细胞内ROS及mtROS产生增多,同时MMP降低,ATP含量减少;与对照组相比,酸性DCA处理后γH2AX的表达水平升高;mtDNA释放入胞质,mtDNA拷贝数减少;cGAS、STING和p⁃NF⁃κB p65表达升高;炎症因子IL⁃6及IL⁃1β表达升高;cGAS抑制剂RU.521预处理抑制了cGAS、STING的表达水平及部分抑制了p⁃NF⁃κB p65的表达水平,炎症因子IL⁃6及IL⁃1β水平降低。结论:体外实验表明,酸性DCA诱导HEEC线粒体功能障碍,mtDNA损伤及释放,介导HEEC炎症反应,其机制可能与cGAS⁃STING通路的激活有关。

易黄汤对脾虚湿热型宫颈癌小鼠皮下移植瘤cGAS/STING/IRF-3信号通路及相关免疫因子的影响

目的探讨易黄汤对脾虚湿热型宫颈癌小鼠皮下移植瘤环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)/干扰素刺激基因(STING)/干扰素调节因子-3(IRF-3)信号通路及相关免疫因子的影响。方法选取6~8周龄SPF级雌性BALB/c小鼠50只,随机分为造模组40只和空白组10只。空白组正常喂养,造模组通过湿热环境及高脂高糖饮食建立脾虚湿热型小鼠模型,当小鼠出现嗜卧懒动、易激惹、形体消瘦、进食及饮水量减少、毛发疏松粗糙、粪便时干时溏、肛温稍有增加则认为造模成功。将2×106个/mL对数生长期HPV16阳性人宫颈癌CaSki细胞悬液0.2 mL接种于上述50只小鼠右腋下,5~7 d后可触及直径≥5 mm结节时即认为皮下移植瘤造模成功。将造模组按随机数字表法分为模型组和易黄汤低剂量、中剂量、高剂量组,每组10只。低、中、高剂量组均按体质量40.0 mL/kg分别予含生药浓度0.25、0.50、1.00 g/mL易黄汤药液灌胃,模型组和空白组予同等剂量生理盐水灌胃,均隔日1次,干预4周。干预后计算5组小鼠胸腺、脾脏指数和瘤质量、抑瘤率;ELISA法检测5组小鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;支链DNA信号扩增法检测5组小鼠皮下移植瘤组织HPV E6 mRNA转录水平;Western blot测定5组小鼠移植瘤组织中cGAS、STING、IRF-3蛋白表达量。结果与空白组比较,模型组胸腺和脾脏指数、IL-6、TNF-α水平显著下降(P<0.05),HPV E6 mRNA转录水平显著增加(P<0.05);易黄汤不同剂量组中以高剂量组的抑瘤率最高为(35.42±4.86)%(P<0.05);与模型组比较,低、中、高剂量组胸腺和脾脏指数、IL-6、TNF-α水平及cGAS、STING和IRF-3蛋白表达量显著增加(P<0.05),皮下移植瘤质量及HPV E6 mRNA转录水平显著降低(P<0.05),且降低程度与易黄汤剂量成正比。结论脾虚湿热能促进CaSki细胞生长、HPV表达增加,易黄汤可能通过激活cGAS/STING/IRF-3信号通路增强免疫功能,从而抑制HPV表达及宫颈癌小鼠移植瘤生长。

cGAS-STING信号通路调节剂在免疫治疗中的研究进展

环鸟嘌呤-腺嘌呤核苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激蛋白(STING)信号通路感知细胞质中的异常双链DNA后,诱导Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)和促炎细胞因子表达,从而激活宿主的免疫应答,增强机体抗肿瘤免疫反应和抗病原体感染。但是,cGAS-STING信号通路的持续激活会驱动自身免疫性疾病、衰老相关炎症和神经退行性病变等疾病。本文阐述了cGAS-STING信号通路参与调控多种免疫相关性疾病发生发展的机制,重点回顾了STING激动剂、cGAS抑制剂以及STING抑制剂的研发进展,为cGAS-STING调节剂的研发提供更多理论参考。

桂枝芍药知母汤抑制cGAS/STING/NF-κB通路对类风湿关节炎大鼠炎症活动的影响

目的基于环状GMP-AMP合成酶(cGAS)/干扰素基因刺激因子(STING)/核因子-κB(NF-κB)通路探讨桂枝芍药知母汤对类风湿关节炎大鼠炎症活动的影响及机制。方法取70只Wistar大鼠,随机选择10只作为正常组,其余60只大鼠制备胶原诱导性关节炎模型。将造模成功大鼠随机分为模型组、甲氨蝶呤组、雷公藤组及桂芍知母汤低、中、高剂量组,每组10只。甲氨蝶呤组给予0.104 mg/mL的甲氨蝶呤片混悬液灌胃,1次/周,其余时间每天给予蒸馏水灌胃1次;雷公藤组给予0.625 mg/mL的雷公藤多甙片混悬液灌胃,桂芍知母汤低、中、高剂量组分别给予0.958 g/mL、1.916 g/mL、2.874 g/mL的桂枝芍药知母汤灌胃,正常组、模型组给予蒸馏水灌胃,均1次/d。各组均干预4周。测量各组大鼠干预1,2,3,4周末足趾肿胀程度,并计算关节炎指数(AI);末次干预结束后,ELISA法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,Western blot法检测滑膜组织中cGAS、STING、NF-κB p65、IκBα蛋白表达情况。结果干预1,2,3,4周末,模型组大鼠的关节肿胀度均明显高于正常组(P均<0.05);随时间推移,模型组大鼠的关节肿胀度逐渐增加,各药物干预组大鼠的关节肿胀度有不同程度的降低,其中桂芍知母汤中剂量组干预4周末的关节肿胀度明显低于模型组(P<0.05)。干预1周末,各组间AI评分比较差异均无统计学意义(P均>0.05);干预2,3,4周末,桂芍知母汤高剂量组AI评分均明显低于模型组和桂芍知母汤低剂量组(P均<0.05),且桂芍知母汤高剂量组干预2周末的AI评分明显低于雷公藤组(P<0.05);干预3周末,甲氨蝶呤组、桂芍知母汤中剂量组AI评分均明显低于模型组(P均<0.05);干预4周末,甲氨蝶呤组、雷公藤组、桂芍知母汤中剂量组、桂芍知母汤低剂量组AI评分均明显低于模型组(P均<0.05)。与正常组比较,模型组血清IL-1β、IL-17、TNF-α水平及滑膜组织中cGAS、STING、NF-κB p65蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),滑膜组织中IκBα蛋白相对表达量明显降低(P<0.05);与模型组比较,各药物干预组血清IL-1β、IL-17、TNF-α水平及滑膜组织中cGAS、STING、NF-κB p65蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),滑膜组织中IκBα蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。桂芍知母汤高剂量组和甲氨蝶呤组血清IL-1β、IL-17和TNF-α水平及滑膜组织中cGAS、STING、NF-κB p65蛋白相对表达量均明显低于桂芍知母汤低剂量组(P均<0.05),滑膜组织中IκBα蛋白相对表达量均明显高于桂芍知母汤低剂量组(P均<0.05)。结论桂枝芍药知母汤可明显减轻类风湿关节炎大鼠关节肿胀和关节炎症,机制可能与抑制cGAS/STING/NF-κB通路,降低炎症因子水平有关。

cGAS-STING通路调控NCOA4介导的铁自噬在HT22细胞缺氧复氧损伤中的作用

目的探讨环鸟苷酸—腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激蛋白(STING)通路调控核受体共激活因子4(NCOA4)介导的铁自噬在小鼠海马神经细胞(HT22)缺氧复氧损伤中的作用。方法2020年9月—2022年12月于武汉大学人民医院中心实验室进行实验。将HT22细胞系随机分为4组,对照组(Ctrl组)、缺氧复氧组(HR组)、缺氧复氧+cGAS抑制剂(RU.521)组(HR+RU组)、缺氧复氧+RU.521+NCOA4过表达组(HR+RU+NCOA4组)。HR组于无糖缺氧条件下培养6 h再复糖复氧培养24 h构建缺氧复氧模型,HR+RU组及HR+RU+NCOA4组提前给予3.0μmol/L的RU.521处理24 h后构建缺氧复氧模型,HR+RU+NCOA4组于缺氧复氧前5 d给予NCOA4慢病毒转染,对照组常规培养。免疫荧光检测各组ROS,ELISA检测CCK8、LDH、SOD、MDA及亚铁离子,Western blot检测cGAS、STING、NCOA4、LC3B和铁蛋白。结果与Ctrl组比较,HR组细胞活力CCK8、SOD降低,LDH、ROS、MDA、cGAS、STING、NCOA4、LC3B、铁蛋白、亚铁离子升高(P<0.05);与HR组比较,HR+RU组细胞活力CCK8、SOD、铁蛋白升高,LDH、ROS、MDA、cGAS、STING、NCOA4、LC3B、亚铁离子降低(P<0.05);与HR+RU组比较,HR+RU+NCOA4组细胞活力CCK8、SOD、铁蛋白降低(P<0.05),LDH、ROS、MDA、NCOA4、LC3B、亚铁离子升高(P<0.05),cGAS、STING差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺氧复氧后HT22细胞cGAS-STING通路上调,NCOA4介导的铁自噬过度激活进而加重细胞损伤。

人乳头瘤病毒16型E7基因靶向调控cGAS-STING信号通路抑制宫颈癌细胞免疫功能的研究

目的:探讨HPV16 E7靶向调控cGAS-STING信号通路对宫颈癌细胞免疫功能的影响。方法:体外构建HPV16 E7过表达和干扰质粒,转染至SiHa细胞,qPCR检测HPV16 E7 mRNA表达水平,流式细胞术检测CD95、MICA/B、CD73、CD39、CTLA-4和CD25表达。在此基础上分别转染cGAS-siRNA和STING-siRNA至SiHa细胞,CCK8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡。qPCR和Western blot分别检测cGAS、STING、IFN-Ⅰ、HPV16 E7的mRNA及蛋白表达。流式细胞术检测细胞CD95、MICA/B、CD73、CD39、CTLA-4和CD25表达。结果:STING-siRNA+HPV16 E7过表达组CD95和MICA/B水平降低(P<0.05),CD73、CD39、CTLA-4和CD25水平升高(P<0.05)。cGAS、STING和IFN-Ⅰ蛋白表达水平降低(P<0.05)。STINGsiRNA+HPV16 E7干扰组结果与之相反。结论:HPV16 E7靶向调控cGAS-STING信号通路进而抑制宫颈癌细胞免疫功能。

电针对前交叉韧带断裂大鼠炎症反应及cGAS/STING信号通路的影响

目的:探究电针对前交叉韧带断裂后创伤性骨关节炎早期炎症反应与环状GMP-AMP合成酶(cGAS)/干扰素基因刺激因子(STING)信号通路的影响。方法:24只SD大鼠随机分为假手术组、前交叉韧带损伤(ACLT)组和电针组,每组8只。其中ACLT组和电针组实施前交叉韧带切断术。电针组大鼠予双侧“阳陵泉”“血海”“足三里”“太溪”电针刺激,1次/d,每周干预5 d,连续2周,其余两组不做处理。2周后ELISA法检测大鼠血清白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;取大鼠左膝关节软骨组织切片分别进行番红O-固绿染色和苏木精-伊红(HE)染色,镜下观察软骨损伤程度并评分(Mankin’s评分);RT-qPCR检测大鼠右膝关节软骨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)mRNA、cGAS mRNA、STING mRNA表达水平。Western blotting检测大鼠右膝关节软骨MMP-13、cGAS、STING蛋白表达水平。结果:ACLT组大鼠血清IL-1β、TNF-α水平均高于假手术组(P<0.05);电针组大鼠血清IL-1β、TNF-α水平均低于ACLT组(P<0.05)。番红O-固绿染色显示假手术组大鼠软骨表面光滑;ACLT组大鼠软骨表面出现轻微缺损和细小裂层;电针组大鼠软骨表面较平滑,无明显裂层。HE染色显示假手术组软骨表面平整且光滑,软骨细胞均排列规整;ACLT组大鼠软骨层表面变薄;电针组大鼠软骨表面略粗糙。ACLT组大鼠Mankin’s评分高于假手术组(P<0.05);电针组大鼠Mankin’s评分低于ACLT组(P<0.05)。ACLT组大鼠MMP-13 mRNA、cGAS mRNA、STING mRNA相对表达量均高于假手术组(P<0.05);电针组大鼠MMP-13 mRNA、cGAS mRNA、STING mRNA相对表达量均低于ACLT组(P<0.05)。ACLT组大鼠MMP-13、cGAS、STING蛋白相对表达量均高于假手术组(P<0.01);电针组大鼠MMP-13、cGAS、STING蛋白相对表达量均低于ACLT组(P<0.01)。结论:电针可能通过下调cGAS/STING信号通路而减轻ACLT大鼠炎症反应,延缓关节软骨退行性改变。

cGAS-STING信号通路在系统性红斑狼疮中的研究进展

cGAS-STING信号通路在免疫反应调控中发挥着至关重要的作用,其通过感知细胞质内DNA的存在,激活下游一系列分子,导致Ⅰ型干扰素等炎症细胞因子的释放,最终参与和调控免疫反应的发生。SLE发病机制复杂,免疫功能紊乱及Ⅰ型干扰素等细胞因子参与SLE的发生发展。本文将就cGAS-STING信号通路在SLE中的研究进展进行综述,以期为SLE的诊断及靶向治疗提供新方向。

微核激活cGAS-STING信号通路的机制及其肿瘤免疫功能

环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路可监测微生物入侵和组织损伤等生理病理异常状态,是天然免疫系统的重要组成之一。作为DNA感受器,cGAS主要识别异常定位于细胞质的双链DNA(dsDNA),通过催化合成二级信使环鸟苷酸-腺苷酸启动由STING介导的Ⅰ型干扰素和炎症信号通路。微核是有丝分裂后期染色体错误分离的产物,也是细胞质dsDNA的重要来源之一。作为一类不稳定的亚细胞器结构,微核核膜倾向于不可逆的破裂,导致微核基因组DNA暴露在细胞质中。暴露的微核基因组DNA招募并激活cGAS-STING信号通路,诱导STING下游信号通路活化,包括Ⅰ型干扰素信号通路和经典核因子κB(NF-κB)信号通路,导致细胞衰老、细胞凋亡和细胞自噬的发生,从而介导免疫系统的活化以清除肿瘤细胞,或者直接诱导肿瘤细胞死亡。另外,STING持续激活诱导的内质网应激,以及慢性Ⅰ型干扰素信号通路和非经典NF-κB信号通路的活化,营造了免疫抑制的肿瘤微环境,导致肿瘤细胞免疫逃逸,促进肿瘤转移和肿瘤细胞存活。因此,在肿瘤的发生发展和治疗过程中,活化的cGAS-STING免疫通路扮演着抑制或促进肿瘤的双重作用。本文阐述了肿瘤微环境中微核诱导cGAS-STING免疫通路活化的机制研究进展,探讨了其在肿瘤发生发展和治疗中的潜在重要作用。

cGAS-STING信号通路在骨质疏松症中的作用机制

cGAS-STING信号通路是一种新型的、重要的先天免疫信号通路,其被核酸物质激活,并与其他免疫应答相互作用,在炎症、感染、癌症等多种病理过程中发挥重要作用。近期研究发现cGAS-STING参与了各种与年龄相关的肌肉骨骼疾病的发生和发展,并对骨代谢产生影响。然而,在骨质疏松症(osteoporosis,OP)中确切的作用机制尚不清楚。因此,本文综述了cGAS-STING及其下游在OP中的作用机制,为开发OP新的治疗策略提供思路。

非洲猪瘟病毒拮抗宿主cGAS-STING信号通路的研究进展

非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)拥有多种逃逸宿主免疫应答的策略,造成病毒难以被宿主清除。cGAS-STING信号通路介导的天然免疫在抗ASFV感染中发挥了重要作用,然而病毒编码的多个蛋白靶向该通路中的不同分子以拮抗宿主的I型干扰素应答。利用基因编辑技术敲除这些病毒基因后,ASFV对宿主的致病性降低,成为基因缺失疫苗的研制潜在靶点。本文对目前已知参与调控宿主cGAS-STING信号通路的病毒蛋白进行总结,旨在阐明这些蛋白免疫逃逸cGAS-STING信号通路的分子机制,加深对ASFV免疫逃逸策略的理解,以期为ASFV致病机制研究与疫苗创制提供参考。

肿瘤免疫微环境中cGAS-STING信号通路的细胞间信号传递

环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路是肿瘤免疫治疗中备受关注的靶点。模式识别受体cGAS识别胞质双链DNA(dsDNA),生成第二信使2´3´-环鸟苷酸-腺苷酸(cGAMP),活化接头蛋白STING,介导干扰素和促炎性细胞因子的产生,从而促进肿瘤免疫。肿瘤免疫微环境中cGAS-STING通路的细胞间信号传递维持并增强天然免疫应答,推动适应性免疫的发展。基于膜系统的细胞外囊泡运输、吞噬作用和细胞膜融合传递dsDNA、cGAMP以及活化的STING蛋白,加强免疫监视和炎症应答。基于膜蛋白的缝隙连接、膜转运蛋白传递cGAMP和dsDNA对免疫调节至关重要。此外,配体-受体反应传递干扰素进一步放大抗肿瘤免疫反应。本文描述了肿瘤免疫微环境中cGAS-STING通路的细胞间信号传递及其调控,讨论这些机制如何影响和调节肿瘤免疫过程,以及针对这些信号传递机制的潜在干预和免疫治疗策略。

线粒体DNA与cGAS-STING通路在抗菌抗病毒免疫中的研究进展

线粒体除了产生ATP为真核生物提供能量外,还参与抗细菌病毒感染过程。线粒体DNA(mtDNA)在各种细菌病毒感染的刺激下均能引起损伤。细菌病毒感染能够引起线粒体转录因子A蛋白丢失,或通过Ⅶ型分泌系统、线粒体抗病毒信号蛋白和线粒体膜通透性转换孔介导等不同方式将mtDNA释放到细胞质中从而激活环状GMP-AMP合成酶(cGAS)、DEAD盒解旋酶41、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3和Toll样受体-9等DNA受体多种途径。其中cGAS可通过催化第二信使环鸟苷酸-腺苷酸后激活干扰素基因刺激因子(STING)依赖的信号通路并诱导Ⅰ型干扰素、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6等炎症因子的表达,并在抵抗病原微生物感染中发挥重要作用。本文综述了mtDNA-cGAS-STING通路在抗菌抗病毒免疫中的研究进展,为开发特异性杀死细菌病毒的新型抗菌药物奠定基础,同时也有助于更好地理解线粒体与宿主免疫系统的相互作用。

基于cGAS-STING通路探讨参白扶正颗粒调节肿瘤免疫应答的作用机制

目的 基于鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(cGAS-STING)通路探讨参白扶正颗粒调节肿瘤免疫应答的作用机制。方法 取KM小鼠60只,建立人胃癌MGC803细胞移植瘤模型,将42只成模小鼠按照随机数字表法分为模型组10只、参白扶正低剂量组10只、参白扶正中剂量组11只、参白扶正高剂量组11只,分别给予生理盐水和5 mg/g、10 mg/g、20 mg/g参白扶正颗粒溶液灌胃,均2次/d,连续灌胃15 d。末次灌胃结束后,剥离瘤体组织,称重并计算肿瘤抑制率,采用HE染色法观察肿瘤组织病理形态,流式细胞术检测肿瘤组织中免疫活化指标[CD4^(+)、CD8^(+)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CD45^(+)CD11c^(+)MHC-Ⅱ^(+)、CD40^(+)、CD70^(+)、CD4^(+)Foxp3^(+)Treg]水平,酶联免疫吸附法检测肿瘤组织中cGAS-STING通路相关细胞因子[β干扰素(IFN-β)、C-C类趋化因子22(CCL22)、C-C类趋化因子17(CCL17)、白细胞介素-10(IL-10)]水平,Western blot法检测肿瘤组织中cGAS-STING通路相关蛋白[STING、TANK结合激酶1(TBK1)、干扰素调节因子3(IRF3)]表达情况。结果 参白扶正各组瘤重均明显低于模型组(P均<0.05),且瘤重随参白扶正颗粒剂量增加而降低,肿瘤抑制率随参白扶正颗粒剂量增加而升高,两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。参白扶正各组小鼠胃黏膜炎症浸润、细胞间质充血水肿较模型组不同程度减轻,异型性不明显。参白扶正各组小鼠肿瘤组织中CD4^(+)、CD8^(+)、IFN-γ、CD45^(+)CD11c^(+)MHC-Ⅱ^(+)、CD40^(+)、CD70^(+)水平及cGAS、STING、TBK1、IRF3蛋白相对表达量均明显高于模型组(P均<0.05),且上述各指标随参白扶正颗粒剂量增加而升高(P均<0.05);参白扶正各组小鼠肿瘤组织中TNF-α、CD4^(+)Foxp3^(+)Treg、IFN-β、CCL22、CCL17、IL-10水平均明显低于模型组(P均<0.05),且上述因子水平随参白扶正颗粒剂量增加而降低(P均<0.05)。结论 参白扶正颗粒可抑制胃癌移植瘤小鼠肿瘤生长,可通过调节肿瘤免疫应答而增强小鼠免疫功能,减轻炎症反应,其机制可能与调控cGAS-STING通路有关。

松萝酸调节cGAS-STING信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 探究松萝酸调节环磷酸鸟苷-磷酸腺苷合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 选取50只SD健康大鼠,分为假手术组、模型组、松萝酸低剂量组(25 mg/kg)、松萝酸高剂量组(100 mg/kg)和RU.521组(cGAS抑制剂,5 mg/kg),每组10只通过结扎冠状动脉左前降支再灌注方法建立大鼠心肌缺血再灌注模型。HE染色观察大鼠心肌组织病理学变化;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况;NBT染色检测心肌梗死面积百分比;商品化试剂盒检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)水平;ELISA法检测大鼠血清肌酸激酶同工酶(CKMB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平;RT-PCR法检测心肌组织cGAS mRNA、STING mRNA表达;Western blot检测大鼠心肌组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3、cGAS、STING蛋白表达。结果 假手术组大鼠心肌组织结构形态正常,凋亡率较低;与假手术组比较,模型组大鼠心肌细胞受损严重、凋亡率、心肌梗死面积百分比、血清CKMB、TNF-α、IL-6水平、MDA水平、cGAS mRNA、STING mRNA表达水平、Bax、Caspase-3、cGAS、STING蛋白表达水平显著升高,SOD、CAT、Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,松萝酸低、高剂量组和RU.521组大鼠心肌细胞形态结构明显改善,炎性细胞浸润显著减少、细胞凋亡率、心肌梗死面积百分比、血清CKMB、TNF-α、IL-6水平、MDA、cGAS mRNA、STING mRNA表达水平、Bax、Caspase-3、cGAS、STING蛋白表达水平显著降低,大鼠心肌组织SOD、CAT、Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05);RU.521组各项指标与松萝酸高剂量组几乎相当。结论 松萝酸对心肌缺血再灌注大鼠具有保护作用,可能是通过抑制cGAS-STING信号通路实现的。

麝香酮调节cGAS-STING信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经炎症的影响

目的:探讨麝香酮对缺血性脑卒中(IS)大鼠神经炎症的影响及其作用机制。方法:将SD大鼠随机分为对照组、大脑中动脉闭塞(MCAO)组、MCAO+cGAS抑制剂(RU.521)组、麝香酮组、麝香酮+STING激动剂(2′3′-cGAMP)组,每组10只。采用MCAO法构建IS大鼠模型,对各组大鼠进行神经功能缺损评分,TTC染色检测脑梗死面积,HE染色和Nissl染色观察神经元病理变化和损伤,TUNEL法检测神经元凋亡,ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-α水平,Western blotting法检测cGAS-STING信号通路蛋白表达。结果:与对照组比较,MCAO组大鼠海马组织神经元细胞皱缩,Nissl体减少,神经功能缺损评分、脑梗死面积、神经元凋亡率、IL-6水平、IL-1β水平、TNF-α水平,以及IL-1β、TNF-α、cGAS、STING、p-IRF3蛋白表达均显著升高(P<0.05);与MCAO组比较,MCAO+RU.521组、麝香酮组大鼠海马组织神经元病理损伤减轻,Nissl体增加,神经功能缺损评分、脑梗死面积、神经元凋亡率、IL-6水平、IL-1β水平、TNF-α水平,以及IL-1β、TNF-α、cGAS、STING、p-IRF3蛋白表达均显著降低(P<0.05);STING激动剂可逆转麝香酮对IS大鼠海马组织神经元细胞损伤和神经炎症的改善作用(P<0.05)。结论:麝香酮可能通过抑制cGAS-STING信号通路激活,减少IS大鼠神经元损伤,改善神经炎症。

甲基莲心碱调控cGAS-STING信号通路对哮喘幼年大鼠气道炎症的影响

目的分析甲基莲心碱对哮喘幼年大鼠气道炎症的影响,并分析其对cGAS-STING信号通路的作用。方法将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、甲基莲心碱低(20 mg/kg)、高剂量(40 mg/kg)组、甲基莲心碱高剂量+2′3′-cGAMP组(40 mg/kg甲基莲心碱+500μg/kg 2′3′-cGAMP)。除对照组外,其余各组均构建哮喘模型,按照上述条件给药,测定大鼠支气管肺泡灌洗液中CysLTs、CysLTR1水平,对大鼠肺组织进行HE染色与PAS染色以评估大鼠支气管周围、血管周围炎性浸润以及杯状细胞的生成;ELISA试剂盒测定大鼠肺组织IL-4、IFN-γ水平,Western blot法测定大鼠肺组织cGAS-STING通路相关蛋白水平。结果与对照组比较,模型组大鼠血管内壁与支气管可见大量炎性细胞浸润,杯状细胞增生明显;甲基莲心碱低、高剂量组大鼠气道炎症减轻;与甲基莲心碱高剂量组比较,甲基莲心碱高剂量+2′3′-cGAMP组大鼠气道炎症加重。与对照组比较,模型组大鼠肺泡灌洗液中CysLTs水平、CysLTR1水平、肺组织炎症评分、黏液评分、IL-4水平、cGAS蛋白表达、STING蛋白表达升高,肺组织IFN-γ水平降低(P<0.05);与模型组比较,甲基莲心碱低剂量组、甲基莲心碱高剂量组大鼠上述改变均被逆转,且呈剂量依赖性;与甲基莲心碱高剂量组比较,甲基莲心碱高剂量+2′3′-cGAMP组大鼠肺组织炎症评分、黏液评分、IL-4水平、cGAS、STING蛋白表达、肺泡灌洗液中CysLTs、CysLTR1水平升高,肺组织IFN-γ水平降低(P<0.05)。结论甲基莲心碱可能通过抑制cGASSTING通路活化缓解新生哮喘大鼠气道炎症。

cGAS-STING信号通路与脓毒症肠屏障功能障碍相关性的研究进展

脓毒症的发病机制复杂。近年来研究证实,脓毒症发生时,cGAS-STING信号通路激活及作用机制对于改善脓毒症肠屏障功能障碍具有重要意义。该文就cGAS-STING信号通路的激活、cGAS-STING信号通路与脓毒症肠道炎症反应及cGAS-STING信号通路对肠屏障功能的影响作一综述。

氟氯氰菊酯通过cGAS-STING信号通路诱导肺损伤

目的 探讨氟氯氰菊酯诱导肺损伤及其相关机制。方法 40只SPF级SD大鼠,随机分为4组,即对照组、氟氯氰菊酯低剂量染毒组、中剂量染毒组、高剂量染毒组,雌雄各半。染毒4周后,HE染色观察大鼠的肺组织形态变化;透射电镜观察肺组织超微结构变化;通过称重观察大鼠体质量变化趋势和肺脏器系数;检测肺组织匀浆中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量的变化;采用Western blot、qPCR检测乙醛脱氢酶2(ALDH2)、环状GMP-AMP合成酶(cGAS)、干扰素刺激基因(STING)、核因子κB(NFκB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的蛋白及mRNA表达水平变化。结果 氟氯氰菊酯暴露高剂量组体质量减轻,中剂量组和高剂量组肺脏系数增加(P均<0.05)。HE染色结果显示氟氯氰菊酯暴露组肺组织和细胞结构受损。与对照组比较,暴露组MDA表达量升高,SOD、ALDH2表达量降低(P均<0.05)。与对照组相比,暴露组肺组织中cGAS、STING、NFκB、TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白表达水平均升高(P均<0.05)。结论 氟氯氰菊酯可引起肺组织损伤,与cGAS-STING通路激活有关。

绿原酸通过cGAS-STING信号通路改善慢性肾小球肾炎大鼠的T淋巴细胞免疫

目的探究绿原酸通过环状GMP-AMP合成酶(c GAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路对慢性肾小球肾炎(CGN)大鼠的免疫调节作用。方法取SD大鼠注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导建立CGN模型,随机分为模型组、绿原酸低剂量(60 mg/kg)组、绿原酸高剂量(120 mg/kg)组、绿原酸高剂量(120 mg/kg)+空载组、绿原酸高剂量(120 mg/kg)+cGAS过表达组,每组10只,另取10只SD大鼠注射等剂量生理盐水作为对照组,分组处理后测定肾功能指标-24 h尿蛋白含量和血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平;苏木素-伊红(HE)染色检测肾组织病理形态;免疫荧光染色检测肾组织IgG沉积;流式细胞术检测外周血CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞比例;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清炎性相关因子-肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)水平;免疫印迹法检测肾组织cGAS-STING信号通路蛋白表达。结果与模型组相比,绿原酸低剂量组、绿原酸高剂量组大鼠肾组织病理损伤均减轻,外周血CD4^(+)T淋巴细胞比例、血清IL-10水平均升高,24 h尿蛋白含量、Scr及BUN水平、肾组织IgG沉积的免疫荧光相对强度、CD8^(+)T淋巴细胞比例、血清TNF-α及IFN-γ水平、肾组织c GAS及STING蛋白表达均降低(P<0.05),绿原酸高剂量组的效果更好。c GAS过表达可逆转高剂量绿原酸对上述各个指标的影响(P<0.05)。结论绿原酸可抑制炎症反应,减轻CGN大鼠肾组织IgG沉积,通过影响T淋巴细胞而调节免疫,最终改善其肾功能,其机制可能与抑制cGAS-STING信号通路有关。