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Ca^(2+)依赖性磷脂酶A_2有效表达系统的构建
1
作者
曾常茜
傅桂莲
王琰
《中国医师杂志》
CAS
2000年第7期391-393,共3页
为了构建Ca2 +依赖性磷脂酶A2 (CalciumdependentphospholipaseA2 ,cPLA2 )的有效表达系统 ,本实验应用SalⅠ消化cPLA2 -PMT2 重组体 ,电洗脱法回收cPLA2 片段并使其平末端化。应用NotⅠ消化PRC/CMV载体使其线性化 ,之后脱磷酸以防止自...
为了构建Ca2 +依赖性磷脂酶A2 (CalciumdependentphospholipaseA2 ,cPLA2 )的有效表达系统 ,本实验应用SalⅠ消化cPLA2 -PMT2 重组体 ,电洗脱法回收cPLA2 片段并使其平末端化。应用NotⅠ消化PRC/CMV载体使其线性化 ,之后脱磷酸以防止自身环化。cPLA2 与线性化且脱磷酸载体PRC/CMV进行平末端连接 ,转染鼠巨噬细胞 ,扩增培养 ,收集细胞 ,提取RNA ,Northernblot检测cPLAmRNA。结果表明 :PRC/CMV可以做为cPLA2 cDNA的有效表达载体 ,cPLA2 -PRC/CMV表达系统的成功构建为研究各种因素对cPLA2
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关键词
CPLA2
Northernblot
表达
原文传递
题名
Ca^(2+)依赖性磷脂酶A_2有效表达系统的构建
1
作者
曾常茜
傅桂莲
王琰
机构
北华大学医学院免疫教研室
出处
《中国医师杂志》
CAS
2000年第7期391-393,共3页
文摘
为了构建Ca2 +依赖性磷脂酶A2 (CalciumdependentphospholipaseA2 ,cPLA2 )的有效表达系统 ,本实验应用SalⅠ消化cPLA2 -PMT2 重组体 ,电洗脱法回收cPLA2 片段并使其平末端化。应用NotⅠ消化PRC/CMV载体使其线性化 ,之后脱磷酸以防止自身环化。cPLA2 与线性化且脱磷酸载体PRC/CMV进行平末端连接 ,转染鼠巨噬细胞 ,扩增培养 ,收集细胞 ,提取RNA ,Northernblot检测cPLAmRNA。结果表明 :PRC/CMV可以做为cPLA2 cDNA的有效表达载体 ,cPLA2 -PRC/CMV表达系统的成功构建为研究各种因素对cPLA2
关键词
CPLA2
Northernblot
表达
Keywords
cpla_2
Northern blot
Expression
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Ca^(2+)依赖性磷脂酶A_2有效表达系统的构建
曾常茜
傅桂莲
王琰
《中国医师杂志》
CAS
2000
0
原文传递
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