真武汤对转基因扩张型心肌病小鼠心脏结构及cTnTR141W基因表达的影响

目的：应用cTnTR141W转基因扩张型心肌病小鼠,研究真武汤对家族遗传性扩张型心肌病心肌细胞结构及cTnTR141W基因表达的影响。方法：（1）利用RT-PCR和HpaⅡ酶切检测空白组正常小鼠和转基因组小鼠cTnTR141W的表达水平。（2）将cTnTR141W转基因小鼠随机分为模型组和真武汤治疗组,1个月后作为给药终点,（1）光镜下观察空白组、模型组、真武汤治疗组心脏结构的病理改变;（2）透射电镜观察各组小鼠心肌的超微结构;（3）HpaⅡ酶切和RT-PCR鉴定各组小鼠心肌组织中cTnTR141W转基因的表达水平。结果：（1）HpaⅡ酶切和RT-PCR鉴定正常小鼠与转基因鼠cTnTR141W的表达结果表明：空白组小鼠的基因经酶切后未检测到转基因cTnTR141W,模型组小鼠的基因经酶切后检测到转基因cTnTR141W,转基因cTnTR141W是内源性cTnT的1倍;（2）扫描切片观察显示,模型组小鼠的心脏大于正常组小鼠的心脏,左室明显扩张,且室壁变薄;真武汤给药后全心变小,左心室腔较模型组减小,室壁相对厚度变大;（3）光镜下左心室心肌HE染色显示：cTnTR141W转基因小鼠心肌排列紊乱,真武汤给药后心肌细胞排列较整齐。（4）透射电镜观察显示,正常组小鼠的心肌纤维排列有序,结构规则,线粒体较多,闰盘平滑而整齐;而模型组小鼠的心肌纤维变细,甚至溶解并消失,线粒体肿胀并呈空泡化,闰盘卷曲而不整齐。中药真武汤干预组心肌纤维的排列、肌小节及线粒体的变化均有改善;（5）HpaⅡ酶切和RT-PCR鉴定显示,模型组转基因cTnTR141W是内源性cTnT的1.13倍,真武汤组转基因cTnTR141W是内源性cTnT的0.58倍。结论：真武汤可降低cTnTR141W转基因扩张型心肌病小鼠cTnTR141W基因表达,同时改善cTnTR141W转基因扩张型心肌病小鼠的心脏结构及心肌细胞的超微结构。

人参皂甙Rb1改善转基因扩张型心肌病模型小鼠的心功能和心脏重构

目的利用cTnTR141W转基因扩张型心肌病小鼠,研究人参皂甙Rb1对遗传性扩张型心肌病心功能及心脏重构的作用及其可能机制。方法将cTnTR141W转基因小鼠随机分为模型组和人参皂甙Rb1治疗组(70 mg/kg/d),连续给药7个月,取野生型小鼠作为对照组。心脏超声检测心脏功能及几何构型。HE染色观察心肌细胞变化。透射电镜分析心肌超微结构。RT-PCR检测心肌粘附蛋白的表达。免疫荧光激光共聚焦观察心肌粘附分子Itga8的表达与分布。结果Rb1长期给药能显著改善该模型的心脏功能及几何构型。光镜和透射电镜观察显示Rb1能减轻心肌细胞排列紊乱及超微结构的破坏。RT-PCR结果显示,在模型中Cx40表达降低,E-cad、itga8和itgb1bp3表达升高,但在Rb1组中接近正常水平。免疫荧光激光共聚焦结果显示Rb1可降低Itga8的表达量并调节其分布。结论Rb1可改善扩张型心肌病模型的心功能,抑制心脏重构,其作用可能部分通过调节粘附蛋白的表达而实现的。

人参皂甙Rb1抑制扩张型心肌病发生中的HB-EGF表达和纤维化

目的HB-EGF过表达可促进心肌纤维化及心肌细胞凋亡,本文研究人参皂甙Rb1对cTnTR141W转基因扩张型心肌病小鼠发病过程中的HB-EGF表达和心肌纤维化的影响。方法将cTnTR141W转基因小鼠随机分为模型组和人参皂甙Rb1组(70 mg/kg/d),连续给药7个月,取野生型小鼠作为对照组。用Kaplan-Meier法进行生存分析。心脏超声检测心功能及心脏几何构型。计算心重指数。光镜观察心肌细胞及间质变化。Western blot检测心脏HB-EGF,pSTAT3表达水平。结果Rb1长期给药能显著改善该模型的心功能和心脏几何构型,将死亡率降低50%。Rb1治疗组心重指数降低11.3%(P<0.05),光镜观察显示Rb1能减轻心肌细胞排列紊乱以及间质纤维化。Western blot结果显示Rb1能够显著降低模型中的HB-EGF及pSTAT3的表达。结论Rb1抑制心肌病发生中的HB-EGF表达及抑制下游信号pSTAT的激活,并改善扩张型心肌病模型的心功能及心脏重构。

真武汤对转基因扩张型心肌病小鼠心肌Acta1、Col3a1基因及蛋白表达的影响

目的:本研究旨在观察转基因扩张型心肌病小鼠心肌组织Acta1、Col3a1基因及蛋白表达变化,探究真武汤防治扩张型心肌病的分子生物学机制。方法:将cT nT R141W基因转入C57BL/6J小鼠,建立了心肌组织特异表达cT nT R141W基因的转基因小鼠模型,以C57BL/6J小鼠15只作为空白对照组,模型组小鼠60只,随机分为模型对照组、西药组、中药高剂量组及中药中剂量组,中药组以真武汤高中剂量对模型小鼠治疗4周,卡托普利为阳性对照药物。4周后采用qRT-PCR法检测各组心肌组织Acta1、Col3a1相对表达量; Western Blot法检测各组心肌组织Acta1、Col3a1蛋白表达。结果:与空白对照组比较模型对照组Acta1、Col3a1基因及蛋白表达显著升高(P <0. 01),与模型对照组比较西药组及中药高中剂量组Acta1、Col3a1基因及蛋白表达均显著下降(P <0. 01)。结论:DCM的发病机制与心肌组织中Acta1与Col3a1mRNA及蛋白表达升高有关,真武汤通过下调心肌组织中Acta1与Col3a1 mRNA及蛋白表达,抑制心肌细胞肥大及纤维化过程,起到防治DCM的作用。