丹参酮ⅡA磺酸钠对原代培养猪冠脉平滑肌ATP敏感钾通道、钙激活钾通道的影响

目的 :探讨丹参酮ⅡA磺酸钠 (DS 2 0 1)对原代培养猪冠脉平滑肌上ATP敏感的的钾通道 (KATP)、钙激活钾通道 (KCa)的作用。方法 :采用膜片钳单通道电流记录技术进行定量研究。结果 :KATP(33 15pS)可被 30 μmol/L优降糖特异性阻断 ,而KCa(2 46 .5 3pS)则表现出明显的钙离子依赖性和TEA阻断作用等特点。内面向外式膜片下 ,浴液中加入DS 2 0 1可激活KATP及Ca。膜电位为 +5 0mV时 ,5、10、15 μmol/LDS 2 0 1分别使KATP开放概率 (NPo)从0 0 0 4± 0 0 0 1增加到 0 44 9± 0 0 0 4(n =5 ,P <0 0 1)、0 6 0 2± 0 0 32 (n =5 ,P <0 0 1)、0 90 4± 0 10 5 (n =5 ,P <0 0 1) ,2 0 μmol/LDS 2 0 1使KCa的NPo从 0 0 0 0增加到 0 0 11± 0 0 0 2 (n =3,P <0 0 1)。结论 :DS 2 0 1对KATP和KCa均有直接激活作用。

平滑肌细胞钙钳制技术

用金黄色葡萄球菌α毒素（α－ｔｏｘｉｎ）或β溶血皂素（β－ｅｓｃｉｎ）处理平滑肌小肌条，可将细胞膜穿通许多小孔，使膜对某些离子及物质的屏障作用消失，但不影响受体－Ｇ蛋白－第二信使系统的耦联。根据ｃａ￣（２＋）ＥＧＴＡ的平衡结合常数Ｋ进行计算，将高浓度（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）ＥＧＴＡ和具一定Ｃａ￣（２＋）浓度的溶液按一定比例混合，可获得所需Ｃａ￣（２＋）浓度的缓冲溶液。后者通过膜小孔进入细胞内可将胞浆游离Ｃａ￣（２＋）浓度“钳制”（ｃｌａｍｐ）在某一要求的水平上。在该模型上可方便地观察一些不依赖胞浆游离Ｇａ￣（２＋）浓度变化的细胞活动过程。该法最适宜于研究激动剂对平滑肌的钙增敏作用及其机制。如适当良，亦可用于心肌、骨骼肌及其它细胞，对研究细胞内信号传导、药物作用机理等方面，有独到的优点。