Development of New Strategy for Non-Antibiotic Therapy: Dromedary Camel Lactoferrin Has a Potent Antimicrobial and Immunomodulator Effects

The human and bovine lactoferrin have been studied extensively, but very few reports have been published concerning camel lactoferrin (cLf). The present study aimed to isolate cLf and evaluate its efficiency including antimicrobial activity and immunomodulator effects. cLf isolation was attempted from camel milk whey using a cation exchange chromatography by SP-Sepharose. The antimicrobial activity of the isolated cLf was investigated against Staphylococcus aureus (S. aureus), Streptococcus agalactiae (S. agalactiae), Escherichia coli (E. coli) and Pseudomonas aeruginosa (P. aerogenosa) strains. The immune effect of cLf was studied by lymphocyte transformation test. It was found that cLf was separated around molecular weight of 80 kDa and showed significant inhibitory effect against E. coli followed by P. aeruginosa, S. agalactiae and S. aureus. cLf increased lymphocyte transformations mean values in a dose dependant manner. The highest transformations mean value was determined at 50 μg/mL. In conclusion, these results suggest that cLf is a potent natural antimicrobial and novel immunomodulator agent.

驼乳乳铁蛋白DPP-IV抑制肽的筛选验证及其防治糖尿病潜在作用机制探究

目的:结合生物信息学,从驼乳乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)中筛选DPP-IV(Dipeptidyl peptidase IV,DPP-IV)抑制肽,并利用网络药理学探讨筛选肽段对糖尿病的潜在作用机制。方法:利用BIOPEP网站模拟酶切LF序列产生多条肽段,结合多肽数据库及分子对接筛选潜在的DPP-IV抑制肽,选择其中四条进行人工合成,验证其DPP-IV抑制活性,通过分子对接分析肽段与DPP-IV分子间相互作用方式,Lineweaver-Burk方法分析肽段抑制模式。选择抑制作用较强的GPQY进行网络药理学分析,预测其对糖尿病的潜在作用机制。采用Swiss Target Prediction和GeneCards数据库挖掘GPQY及糖尿病的作用靶点,String数据库获取蛋白与蛋白互作关系,Cytoscape 3.9.0软件构建PPI网络,DAVID数据库对靶点进行GO与KEGG通路富集分析。结果:筛选验证获得2条DPP-IV抑制GPQY和EACAF,其半抑制浓度(IC50)值分别为348.27±16.11和1024.89±19.67μmol/L,抑制模式分析表明GPQY为竞争性抑制,EACAF为混合型抑制。分子对接结果显示两条肽段通过氢键、疏水作用和静电作用与DPP-IV结合。由PPI网络筛选到GPQY有STAT3、MMP9、SRC、MAPK1等25个核心作用靶点,KEGG通路富集显示GPQY防治糖尿病通路涉及IL-17信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、肾素-血管紧张素系统、细胞凋亡等。结论:驼乳LF是DPP-IV抑制肽的良好来源,由其获得的四肽GPQY可通过多靶点、多通路参与炎症反应,影响细胞增殖分化等多方面防治糖尿病及其并发症。

骆驼乳及其制品中非热变性乳铁蛋白含量的快速电泳迁移检测

骆驼乳具有丰富的营养价值和保健功能,但其活性蛋白—乳铁蛋白对热处理加工工艺敏感,因此骆驼乳及其制品中非热变性乳铁蛋白含量的快速测定对其生产工艺控制和营养价值评估至关重要。文章研究了乳铁蛋白热变性对DNA结合的影响,发现特异性的DNA序列仅能够结合非热变性驼乳铁蛋白而不结合热变性乳铁蛋白,据此建立了骆驼源乳铁蛋白的快速电泳迁移检测方法,仅需5 min即可完成一个样品检测,检出限为5.45μg/mL。该方法无需肝素亲和柱富集提取等复杂的样品前处理步骤,即可直接检测样品中活性乳铁蛋白含量,可用于包括骆驼乳在内的各种特色乳制品热加工工艺的精准控制及乳制品营养价值的评估。

双峰驼乳中乳铁蛋白的体外抗菌活性及影响因素

采用试管二倍稀释法测定了双峰乳中驼乳铁蛋白(CLF)的抗菌活性。结果表明,CLF对大肠埃希菌的最小抑菌浓度(MIC)为3 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为2 mg/mL,与溶菌酶联合应用,则能明显增强其抗菌作用。CLF的抗菌活性还与其铁饱和度密切相关,随着铁饱和度的增加其抗菌活性明显下降。葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、牛血清白蛋白(BSA)、尿素和硫酸铵在0 mg/mL^10 mg/mL的质量浓度范围内,对CLF的抗菌活性影响不大。而NaCl或KCl的浓度为25 mmol/L^100 mmol/L,MgCl2或CaCl2的浓度为1.0 mmol/L^5.0 mmol/L时,CLF的抗菌活性则会明显降低。经较低温度加热处理后CLF能很好的保持其活性;而经较高温度加热处理会使CLF变性并失去抗菌活性。不同pH条件下的抗菌试验结果表明,当pH在7.5~8.0时CLF的抑菌效果最好。

骆驼乳的营养价值及在预防疾病中的应用与作用机制研究进展

本文总结了骆驼乳的营养价值,通过与其他乳类的对比展示了骆驼乳的特性;分析了骆驼乳表现出特定药用潜力的生物作用基础,包括其营养基础如所含特殊蛋白的药用特性,以及抗氧化、抗炎、调节免疫及肠道微生态等生物学作用基础;并梳理汇总了骆驼乳预防与缓解糖尿病、肾脏损伤、肝脏损伤、癌症、自闭症和高血压等多种疾病的作用机制及研究进展;最后简要整理了骆驼乳衍生品在功能食品开发中的应用研究。本文将为全面深入认识骆驼乳的医学应用潜能及骆驼乳功能食品的开发提供参考。