茶籽蛋白的营养价值评价

以FAO/WHO必需氨基酸参考模式为标准模式,采用氨基酸比值系数法和模糊识别法对茶籽蛋白进行营养价值评价。结果表明:茶籽蛋白含有17种人体所需氨基酸,其中8种为人体必需氨基酸,种类比较齐全;必需氨基酸占全部氨基酸的25.98%,第一限制性氨基酸为苏氨酸,第二限制性氨基酸为异亮氨酸;氨基酸比值系数分为20.36,贴近度为0.767;色氨酸含量丰富,为标准模式的2.27倍。因此,茶籽蛋白可作为一种色氨酸营养强化剂应用到食品中。

超声波辅助水酶法提取油茶籽蛋白中五种酶的比较及响应面优化的工艺的研究

以油茶籽为原料,采用水酶法结合超声波预处理技术提取油茶籽蛋白,在此基础上比较得出五种酶对油茶籽蛋白提取率的影响。在单因素基础上通过正交实验选出最佳的超声参数,然后采用最优超声参数,在料水比1:6,酶解时间3.5h,加酶量0.02%。在最适pH和温度下,油茶籽蛋白提取率由高到低依次为:Kemzyme>ViscozymeL>Protex7L>Alcalase2.4L>Protex6L。在单因素实验基础上,采用响应面优化方法确定蛋白提取的最优条件,得到的最佳条件为:采用Kemzyme,料水比1:5,酶解时间3.24h,酶解温度68℃,pH7.28,加酶量0.048%,响应面最优值为20.42%。

油茶籽粕蛋白提取工艺研究

对油茶籽粕的基本组分进行测定,采用碱溶酸沉法制备油茶籽粕蛋白,在测定等电点基础上探讨油茶籽粕粉碎粒度、浸提液pH值、料液比、浸提时间、浸提温度对蛋白提取率的影响。设计正交试验,得出提取油茶籽粕蛋白最佳工艺条件为料液比1:25(g/mL)、pH10、浸提时间80min、浸提温度45℃和粉碎粒度80目,在此条件下,蛋白提取率为57.8%。

油茶籽粕分离蛋白及其超滤组分的功能特性研究

分析了油茶籽粕分离蛋白(茶籽蛋白)及其超滤组分(≥10 ku和<10 ku)的化学组成与功能特性,探讨了p H和温度对其功能特性的影响。结果表明:茶籽蛋白及其超滤组分≥10 ku和<10 ku的蛋白质量分数分别为85.7%、89.3%和84.2%,还含有少量的多糖、多酚及皂苷;超滤组分<10 ku拥有良好的持油性,但持水性较差,而超滤组分≥10 ku则相反。超滤组分<10 ku拥有良好的蛋白溶解性,泡沫稳定性较差;茶籽蛋白及其超滤组分≥10 ku显示出良好的泡沫稳定性和乳化性;p H和温度对其功能特性的影响因分子量差异而不同,超滤组分<10 ku的温度耐性较强,80℃下依然拥有良好的乳化稳定性,但酸性环境中其乳化稳定性和泡沫稳定性较弱。茶籽蛋白及其超滤组分在60℃表现出最好的蛋白溶解性和乳化性。

考马斯亮蓝法测定茶籽多糖中蛋白质含量条件的优化

为建立高效、快速测定茶籽多糖中蛋白质含量的方法,以吸光度为考察指标,通过单因素和正交试验,对采用考马斯亮蓝法测定茶籽多糖溶液中蛋白质含量的试验条件(考马斯亮蓝G-250用量、反应时间、反应温度)进行了优化。结果表明,优化后的方法为:精确吸取茶籽多糖溶液1.0mL,加入考马斯亮蓝G-250溶液(0.01%)4.0mL,以蒸馏水补至总体积为10.0mL,混匀,25℃条件下放置35min,于595nm处测定其吸光度。该方法的精密度RSD为0.506%;稳定性RSD为0.836%;重现性RSD为1.57%;样品的平均加标回收率为99.19%,RSD为0.86%,表明该方法是测定茶籽多糖溶液中蛋白质含量的有效方法。

不同提油方法的油茶粕蛋白制备工艺研究

测定热榨、冷榨、有机溶剂萃取、水酶法浸提等不同提油方法所得的5种油茶粕的基本成分，采用碱提酸沉法提取油茶粕蛋白。结果表明，5种油茶粕样品的等电点pH值存在差异，范围为3．5～4．5，而冷榨、有机溶剂萃取、水酶浸提后的油茶粕蛋白酸沉时出现类似两个等电点现象。采用分段酸沉可提高蛋白质沉降率。在经正交试验优化碱提工艺奈件下，水酶法浸提茶油后的油茶粕蛋白的提取率达到66．8％。

油茶饼粕蛋白提取及抗氧化酶解产物的制备

测定油茶饼粕的基本组成;确定茶粕蛋白提取的方法和工艺及其测定方法;通过微生物发酵、酶解等方法生产茶粕蛋白多肽,测定经处理后蛋白分子量分布情况,并测定其清除DPPH.和羟自由基能力。实验表明,茶粕营养丰富,通过碱液水浴浸提可获得18.70%蛋白质,浸提液酶解后可制备具有抗氧化能力的酶解产物,抗氧化能力随着水解时间呈先增后减的趋势,而茶粕经发酵后能得到较大比例的低分子量产物。油茶饼粕的经济价值还有待进一步开发。

油茶籽粕蛋白质提取工艺及功能特性研究

以油茶籽粕为原料,采用碱溶酸沉法提取油茶籽粕中的蛋白质,运用正交试验方法确定最佳提取工艺条件,并与大豆分离蛋白的功能性进行比较研究。结果表明:当料液比1∶20,pH值8.0,浸提时间130 min,浸提温度60℃时提取效果最好,蛋白提取率可达48.59%;油茶籽蛋白的吸油性、乳化稳定性和起泡性优于大豆分离蛋白;而大豆分离蛋白的吸水性、乳化能力和泡沫稳定性优于油茶籽蛋白。

油茶籽粕蛋白功能特性及其酶解产物抗氧化活性研究

采用碱溶酸沉法提取油茶籽粕中的蛋白质,运用正交试验优化提取的最佳条件,并分析油茶籽粕蛋白功能特性及其木瓜蛋白酶水解物的抗氧化活性。结果表明,在pH 10、料液比1∶30(m/V)、提取时间3h、提取温度50℃的最佳条件下,油茶籽粕蛋白的得率为4.99%。油茶籽粕蛋白等电点在pH 5左右。乳化能力、乳化稳定性和起泡能力随p H增加呈先降后升的趋势,与蛋白溶解度密切相关。木瓜蛋白酶能有效提高油茶籽粕蛋白溶解性,其蛋白水解物对DPPH·自由基和羟基自由基均具有很好的清除能力(清除率>85%),对铜离子的螯合能力大于对铁离子的螯合能力。

水酶法同时提取油茶籽油及蛋白研究

采用水酶法从油茶籽仁中同时提取油与蛋白。经筛选,使用碱性蛋白酶水解油茶籽仁水液,并对酶解工艺条件进行优化。通过单因素实验及正交试验,确定水酶法提取油茶籽油和蛋白的最佳工艺参数为料液比1∶5、蛋白酶用量1.5%、酶解p H 8,酶解温度60℃、酶解时间4 h。在此最佳条件下进行实验验证,油茶籽油得率为74.61%,油茶籽蛋白得率为82.28%。

油茶籽油加工过程中蛋白含量的变化研究

以油茶籽油为原料,采用离子液体-盐离子双水相体系(ABS)对油中的微量蛋白进行提取,并考察离子液体和盐浓度对提取效率的影响,通过单因素实验确定茶油中微量蛋白提取的最佳组合浓度,并利用此方法进行油茶籽油精炼过程中蛋白含量的变化研究、压榨与浸提油中蛋白含量的差异研究。结果表明,采用200 g/L的[Bmin]Cl+500 g/L的K_(2)CO_(3)为最佳的双水相体系萃取油中的微量蛋白,方法变异系数4.39%,加标回收率(80.95±0.05)%,油茶籽油精炼工艺中的过滤、脱胶、碱炼、脱色工序均能显著性降低油中蛋白含量,其中过滤工序影响最大,蛋白含量减少76.03%,压榨与浸提成品油茶籽油中蛋白含量差异极显著,在实际商品鉴定中具有极大的应用潜力。

茶树籽蛋白质微波辅助酶解制备多肽的研究

以碱提酸沉法制备茶树籽蛋白质,并用微波辅助酶解法制备茶树籽多肽。研究了胃蛋白酶用量、酶解温度、酶解时间、酶解液pH值等工艺因素对酶解产物的蛋白质水解度和多肽浓度的影响,并采用正交试验法优化微波辅助酶解的工艺条件。结果表明,产物的蛋白质水解度和多肽浓度随着加酶量提高和水解时间延长呈稳定上升后趋于平缓的趋势,而随着水解温度提高和酶解液pH值升高呈先上升后下降趋势,酶解液pH值对结果有显著影响。微波辅助酶解工艺可显著缩短蛋白质酶解进程、提高酶解液中多肽的含量,在胃蛋白酶用量6000 u/g、酶解温度50℃、酶解时间15 min、酶解液pH值3.5等的优化条件下,酶解产物的蛋白质水解度为13.65%、多肽浓度为13.18 g/L。

山茶籽醇提物对去卵巢AD大鼠学习记忆、脑组织p-tau蛋白的影响

目的探讨山茶籽醇提物对去卵巢阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆、脑组织p-tau蛋白的影响。方法 SD大鼠40只随机分为假手术组、模型组、山茶籽组、雌二醇(E2)组。山茶籽组给予山茶籽醇提取物灌胃,10 ml·kg^(-1)·d^(-1);E2组经皮下注射E2 200μg/kg,2次/w。假手术组和模型组给予等体积0.9%盐水灌胃(10 ml·kg^(-1)·d^(-1))。各组第8周大鼠称重后进行水迷宫实验;免疫组织化学染色及Western印迹法测定脑组织p-tau蛋白。结果与假手术组比较,造模后模型组到达平台错误率显著升高(P<0.05),p-tau蛋白阳性细胞数及光密度值显著增大(均P<0.01);与模型组比较,山茶籽组及E2组错误率显著降低(均P<0.01),p-tau蛋白阳性细胞数及光密度值显著减小(均P<0.01)。结论山茶籽醇提物有雌激素样作用,可以减少去卵巢AD模型大鼠脑组织p-tau蛋白,提高其学习记忆能力。

超声波辅助水酶法提取油茶籽蛋白中五种酶的比较及响应面优化的工艺的研究

以油茶籽为原料,采用水酶法结合超声波预处理技术提取油茶籽蛋白,在此基础上比较得出五种酶对油茶籽蛋白提取率的影响。在单因素基础上通过正交实验选出最佳的超声参数,然后采用最优超声参数,在料水比1∶6,酶解时间3.5 h,加酶量0.02%。在最适pH和温度下,油茶籽蛋白提取率由高到低依次为:Kemzyme>Viscozyme L>Protex 7L>Alcalase 2.4L>Protex 6L。在单因素实验基础上,采用响应面优化方法确定蛋白提取的最优条件,得到的最佳条件为:采用Kemzyme,料水比1∶5,酶解时间3.24 h,酶解温度68℃,pH 7.28,加酶量0.048%,响应面最优值为20.42%。

油茶籽干渣固态发酵生产单细胞蛋白菌种筛选

以水酶法提取油茶籽油后的油茶籽干渣为原料,通过添加适量辅料,用酵母菌、霉菌和枯草芽孢杆菌进行单菌和混菌组合的发酵试验。试验结果表明:康宁木霉能充分利用油茶籽渣液态发酵培养基和固态发酵培养基中的营养基质从而良好生长。以10%的总接种量将菌种接种到固态发酵培养基中,在28℃下进行恒温发酵,两天翻曲一次,培养6 d后,烘干至恒重测定粗蛋白含量,其中以康宁木霉和啤酒酵母接种量1∶1组合产粗蛋白含量最高,达到了21.23%,与初始培养基相比提高了89.68%。

Co-rrp基因小干扰RNA载体的构建及烟草中的遗传转化

为研究油茶种子成熟调控蛋白基因的功能,以pCAMBIA1304质粒为载体,根据油茶种子成熟调控蛋白基因的cDNA序列设计了小干扰RNA(Si RNA)序列,构建了油茶种子成熟调控蛋白基因小干扰RNA植物表达载体pCAMBIA1304-si RNA,并借助农杆菌介导叶盘法将pCAMBIA1304-si RNA转化到野生型烟草中,获得了稳定表达的转基因烟草苗。为下一步的油茶种子成熟调控蛋白基因的功能鉴定奠定了基础。

山茶籽对雌激素缺乏AD大鼠脑组织形态、β淀粉样蛋白及学习行为能力的影响

目的了解山茶籽提取物对雌激素缺乏AD大鼠脑组织结构和记忆辨别能力、相应脑组织区域β淀粉蛋白(Aβ)的影响。方法5月龄雌性大鼠32只,分成4组(n=8):对照组、模型组、山茶籽组、雌二醇组。山茶籽组用相当生药5 g/g山茶籽的水溶液定时定量灌胃[10 ml/(kg·d)];雌二醇组用雌二醇皮下注射200μg/kg,2次/w。对照组和模型组用等容量生理盐水[10 ml/(kg·d)]灌胃。造模后给药第12周各组取8只大鼠,称体重后,进行水迷宫实验,水迷宫实验完成后麻醉取血5 ml,并处死大鼠取脑。观察左侧大脑常规组织片;右侧大脑低温条件下匀浆后提取Aβ。结果模型组学习行为能力明显下降(P<0.01),大脑海马区Aβ沉积明显增加,山茶籽组和雌二醇组的学习行为能力较模型组明显提高(P<0.01),大脑海马CA1 Aβ阳性细胞计数明显减少(P<0.01),相应Aβ电泳带光密度值显著变小(P<0.01)。结论山茶籽有植物性雌激素作用,可以减少AD大鼠脑海马区Aβ沉积,减少其对大脑学习记忆区组织损害,提高学习行为能力,对雌激素缺乏AD大鼠有明显防治效果。

蒸汽爆破辅助提取油茶籽蛋白及其功能性质分析

研究了蒸汽爆破结合碱溶酸沉法提取油茶籽蛋白工艺,确定了最佳提取条件,同时分析了pH、蛋白质量浓度、NaCl浓度和蔗糖浓度对蒸汽爆破处理前后油茶籽蛋白功能性质的影响。结果表明:最佳提取条件为蒸汽爆破压力0. 8~2. 3 MPa、蒸汽爆破时间30~120 s、料液比1∶10、提取温度40℃、pH 10、提取时间50 min,在此条件下,油茶籽蛋白提取率为71. 01%,显著高于未经蒸汽爆破处理的58. 74%;经蒸汽爆破处理得到的油茶籽蛋白吸油性和吸水性均有所提高;pH、蛋白质量浓度、NaCl浓度均对油茶籽蛋白的起泡性和泡沫稳定性、乳化性和乳化稳定性有不同程度的影响;蔗糖浓度对油茶籽蛋白起泡性作用比较明显,但对泡沫稳定性无显著改善作用,对乳化性、乳化稳定性起到改善作用。

不同方法提取茶籽蛋白及其抗氧化活性研究

以茶籽粕为原料,用碱法、盐法和缓冲液法提取茶籽蛋白,并测定其抗氧化活性。结果表明:盐法的茶籽蛋白得率和蛋白质含量均高于其他两种方法;盐法最佳提取条件为硫酸铵浓度0.005mol/L,料液比1∶50,时间180 min,pH 10;在盐法最佳提取条件下,茶籽蛋白得率为5.24%,蛋白质含量为82.65%。3种提取方法所得茶籽蛋白对DPPH自由基、羟自由基、Fe3+都具有抗氧化活性,当盐法所得茶籽蛋白在质量浓度8.0 mg/mL时,对DPPH自由基的清除率为74.78%,优于碱法和缓冲液法所得茶籽蛋白。

超声波辅助酶法提取油茶粕蛋白工艺优化及其功能活性

油茶籽粕(Camellia oleifera seed-cake,COS)是油茶籽油生产过程中的副产物,其中含有10%~20%的植物蛋白质和多种人体必需氨基酸,是潜在的优质植物蛋白资源。为提高地方资源开发综合利用效率,减少资源浪费,采用超声波辅助酶法(ultrasonic-assisted enzymatic extraction,UAEE)提取油茶籽粕粗蛋白(Camellia oleifera seed-cake crude protein,COCP),并对其抗氧化活性和降脂能力进行探究。通过单因素试验及正交试验分析得到最佳提取工艺:淀粉酶和纤维素酶添加量分别为2.5%和0.9%、酶解时间150 min、酶解pH4.5、酶解温度50℃,使用70%乙醇,料液比1∶40(g/mL),在350 W功率下连续超声处理100 g酶解物60 min,酸沉后干燥得到COCP,回收率最高可达(83.3±0.6)%,较未经超声及酶解处理的回收率增加0.54倍。该法所得提取物在50 mg/mL时,对羟自由基、DPPH自由基、ABTS+自由基清除率分别达到66.5%、70.7%、67.9%,对胆酸盐具有一定的吸附效果,对胰脂肪酶的抑制率呈剂量依赖性,在1.0 mg/mL时,抑制率达(49.5±0.5)%,结果表明COCP具有一定的抗氧化特性和体外降脂能力。