胃癌干样细胞向内皮细胞分化的研究

目的:研究胃癌肿瘤干样细胞(cancer stem like cells,CSLC)向内皮细胞的分化,以期发现抗肿瘤血管治疗新靶点,并降低抗血管靶向治疗的耐药性。方法:用长春新碱(VCR)筛选胃癌低分化腺癌SGC7901细胞系,加生长因子无血清培养的方法诱导胃癌CSLC,并对其在血管内皮细胞生长因子(VEGF)的刺激下向内皮细胞分化的生物学行为进行观察。结果:成功诱导绿色荧光蛋白(GFP)标记的胃癌CSLC。Western blot、immunofluorescence检测证实:内皮细胞的分子标记物CD31,CD34在经血管内皮细胞生长因子刺激后的CS-LC中呈阳性表达。成管实验结果显示CSLC在内皮环境中培养后较SGC7901细胞和无刺激的CSLC具有明显的成管能力。SGC7901和CSLC分别裸鼠皮下成瘤后,移植瘤免疫组化分析检测证实,肿瘤干样细胞移植瘤的组织切片用人源性血管内皮标志CD31、CD34抗体行免疫组化染色,可明确观察到人源性微血管形成。结论:胃癌CSLC具有向内皮分化的潜能;裸鼠移植瘤中含有人源性内皮细胞,提示胃癌CSLC可能参与胃癌肿瘤血管生成过程。

川芎和丹参对不同氧环境下肺癌干细胞样细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察川芎和丹参以及两药配伍后对不同氧环境下肺癌干细胞样细胞(CSLCs)血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:采用无血清成球培养法分离A549 CSLCs,建立常氧组和乏氧组A549 CSLCs荷瘤小鼠模型,分为对照组、川芎组、丹参组、川丹组及恩度组,ELISA法和RT-PCR法检测各组VEGF蛋白及mRNA的表达。结果:小鼠移植瘤形成实验发现A549球细胞较原代A549细胞更早成瘤,且成瘤率更高。ELISA法和RT-PCR法结果均显示,在常氧环境下,与对照组比较,川芎组、丹参组、川丹组和恩度组均显著抑制VEGF蛋白及mRNA的表达(P<0.01);在乏氧环境下,各组之间对VEGF蛋白及mRNA表达差异无统计学意义;与常氧组比较,乏氧环境下各组VEGF表达普遍增高。结论:无血清培养法分离富集的球细胞具有干细胞样细胞的干性,常氧环境下各给药组均抑制VEGF的表达;与常氧相比,乏氧环境各组VEGF表达普遍增高,这可能与乏氧本身作为信号促进VEGF的表达有关。