斑蝥酸钠在诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡相关基因表达中的作用机制研究

目的:探讨斑蝥酸钠在诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡相关基因表达中的作用机制。方法:2023年1月—2023年12月购买1株人宫颈癌Hela细胞,培养至对数生长期后开始实验,将其分为4组,分别加斑蝥酸钠0μmol/L(空白对照组)、4μmol/L(4μmol/L组)、8μmol/L(8μmol/L组)和16μmol/L(16μmol/L组),每个浓度分别设置5个复孔(每组样本量为5),以细胞活力试验(CCK-8)检测细胞增殖情况,以流式细胞仪检测细胞凋亡情况,以实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-time PCR)检测B淋巴细胞瘤2(BCL-2)、人细胞凋亡调节因子(Bax)、人半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达情况。结果:4μmol/L组、8μmol/L组和16μmol/L组的细胞增殖抑制率、凋亡率和Caspase-3相对表达量水平均高于空白对照组,BCL-2/Bax相对表达量水平低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着斑蝥酸钠浓度的升高,人宫颈癌Hela细胞增殖抑制率、凋亡率和Caspase-3随之也升高,BCL-2/Bax相对表达量逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。经斑蝥酸钠处理后可见细胞皱缩、变圆,细胞边缘出芽形成多花环结构的凋亡小体。结论:斑蝥酸钠具有抑制人宫颈癌Hela细胞增殖、促进其凋亡的作用,具有剂量依赖性,其对细胞凋亡的调控作用可能与调控BCL-2,Bax和Caspase-3表达有关。

斑蝥酸钠注射液中蛋白质的含量测定

目的:建立2,2′-联喹啉-4,4′-二羧酸(BCA)测定斑蝥酸钠注射液中残留蛋白质含量的方法。方法:依据蛋白质分子在碱性溶液中将Cu^(2+)还原为Cu^(+),2,2′-联喹啉-4,4′-二羧酸(BCA)与Cu^(+)结合形成紫色复合物,在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用紫外-分光光度法测定供试品中蛋白质含量。结果:蛋白质在20~100μg范围内,线性关系良好(R=0.9979),精密度RSD为1.6%,稳定性RSD为3.2%,重现性RSD为3.2%,平均回收率为93%,RSD为1.3%(n=9)。结论:此方法专属性强、精密度稳定性良好、准确度较高,可用作斑蝥酸钠中蛋白质的含量测定方法,确保用药安全及关注厂家的工艺是否合理并建立斑蝥酸钠中蛋白质残留的检测标准,以便更科学地进行斑蝥酸钠的质量控制。

斑蝥酸钠维生素B6注射液与化疗药物联合治疗非小细胞肺癌的效果分析

目的分析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者在化疗药物的基础上联合斑蝥酸钠维生素B6注射液(sodium cantharidinate/vitamin B6,SC/VB6)治疗取得的效果。方法方便选取2022年6月—2023年5月宁德师范学院附属宁德市医院收治的88例NSCLC患者为研究对象,按照随机数表法分为对照组和研究组,每组44例。对照组采用常规化疗治疗,研究组采用SC/VB6注射液与化疗联合治疗。比较两组患者治疗疗效,肿瘤标志物水平,以及不良反应发生率。结果研究组治疗有效率54.55%高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=4.632,P<0.05)。治疗后,研究组细胞角蛋白19片段、神经元特异性烯醇化酶、癌胚抗原低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组胃肠道反应及骨髓抑制的发生率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组患者肝肾功能异常、周围神经毒性发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论化疗联合SC/VB6注射液治疗可改善NSCLC患者肿瘤标志物水平,保障治疗效果,降低不良反应发生率。

斑蝥酸钠对人胃癌裸鼠皮下移植瘤组织中血管生成作用的研究

目的:研究斑蝥酸钠对人胃癌裸鼠移植瘤组织中血管生成的影响。方法:采用人胃癌BGC823细胞株种植裸鼠皮下建立人胃癌移植瘤模型。应用免疫组化法测定斑蝥酸钠对移植瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)及肿瘤内微血管密度(MVD)表达的影响。结果:中、高剂量斑蝥酸钠治疗组VEGF表达积分极显著低于低剂量组和对照组(P<0.01),中剂量组与高剂量组、低剂量组与对照组之间VEGF表达积分无差异(P>0.05)。中、高剂量斑蝥酸钠治疗组MVD极显著低于对照组和低剂量组(P<0.01),但中剂量组和高剂量组之间无显著性差异(P>0.05)。结论:斑蝥酸钠可能通过下调肿瘤细胞分泌VEGF,抑制肿瘤血管生成而抑制肿瘤细胞生长。

斑蝥素、斑蝥酸钠和斑蝥酸镁抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的研究

目的比较斑蝥素、斑蝥素酸钠和斑蝥素酸镁对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响,筛选出最佳斑蝥素类抗肿瘤药物。方法将斑蝥素、斑蝥素酸钠及斑蝥素酸镁作用于人胃癌细胞SGC-7901;采用CCK-8法检测上述三种药物对SGC-7901细胞的生长抑制率。结果斑蝥素、斑蝥素酸钠和斑蝥素酸镁均对SGC-7901细胞有抑制作用,且呈效应-剂量关系。上述三种药物的半数抑制浓度分别为18.591、17.676、4.105μmol·L-1。结论斑蝥素、斑蝥素酸钠和斑蝥素酸镁均能抑制人胃癌细胞生长,其中斑蝥素酸镁的抗肿瘤活性最佳。

斑蝥酸钠维生素B6联合PT方案对卵巢癌组织淋巴管生长因子影响

目的:研究斑蝥酸钠维生素B6联合PT方案对卵巢癌组织淋巴管生长因子的影响。方法:选择本院接诊的80例卵巢癌患者进行研究,随机分为实验组、对照组,每组各40例。对照组仅采用PT化疗方案进行治疗,实验组在采用PT化疗方案之外,再加用注射中药斑蝥酸钠维生素B6。再对患者的生活质量、病情情况、淋巴细胞比值、淋巴细胞分型变化、淋巴细胞总数以及不良反应方面分别记录进行分析。结果:实验组生活质量提高者例数明显高于对照组,而实验组生活质量降低者例数明显低于对照组,实验组病情情况提高者例数明显比对照组高,而实验组病情情况降低者例数明显比对照组低,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组治疗后淋巴细胞各项指标比较,差异具有统计学意义(P<0.05);两组在治疗后淋巴细胞总数对比,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组的各项生化指标及恶心、呕吐的发生率都要明显低于对照组的发生率。结论 :采用斑蝥酸钠维生素B6联合PT方案对卵巢癌组织进行治疗,能有效抑制淋巴管生长因子,可以明显提高治疗的效果,值得在临床上推广应用。

斑蝥酸钠诱导人食管癌Eca109细胞凋亡实验研究

目的观察斑蝥酸钠体外对人食管癌Eca109细胞凋亡的影响。方法应用MTT法,流式细胞仪检测,分析斑蝥酸钠对人食管癌Eca109细胞的生长和凋亡的影响。结果斑蝥酸钠作用24h可使人食管癌Eca109细胞生长明显抑制(P<0.01),并出现典型的凋亡峰。结论斑蝥酸钠对人食管癌Eca109细胞生长有抑制作用,可诱导食管癌细胞凋亡。

二苓苡仁汤联合斑蝥酸钠维生素B6治疗晚期结肠癌的临床观察及免疫调控作用

目的：探讨二苓苡仁汤联合斑蝥酸钠维生素B6治疗晚期结肠癌的效果及免疫调控作用。方法：选取96例晚期结肠癌患者,采用随机排列表法将入选患者分为观察组（n=48）和对照组（n=48）。两组均采用Xelox方案化疗,同时静脉滴注斑蝥酸钠维生素B6,21 d为1个化疗周期,两组均连续进行4个化疗周期。观察组在上述治疗的基础上联合二苓苡仁汤辨证加减治疗,连续治疗3个月。治疗前后评价两组患者主要中医证候积分变化及疗效,评价并比较两组细胞免疫功能、FACT-C评分、KPS评分及化疗不良反应情况,随访观察患者生存情况。结果：治疗后两组口干口苦、腹痛、消瘦及观察组纳呆食少积分降低,两组大便稀溏积分升高,且观察组上述各项症状积分均低于对照组（P〈0.05）。观察组有效率60.42%显著高于对照组37.50%（P〈0.05）。与治疗前比较,治疗后两组CD3＋、CD4＋比例及CD4＋/CD8＋比值均升高,CD8＋水平均降低（P〈0.05）,且两组间差异显著（P〈0.05）。治疗后,观察组FACT-C及KPS评分均较治疗前升高,且高于对照组（P〈0.05）。治疗期间,观察组恶性、呕吐及腹泻的发生率均低于对照组（P〈0.05）。随访期间,观察组平均PFS较对照组延长,2年生存率较对照组升高（P〈0.05）。结论：二苓苡仁汤联合斑蝥酸钠维生素B6治疗晚期结肠癌可促进患者中医症状的改善,调节细胞免疫功能,且胃肠道不良反应发生率降低,患者生存质量及生存率提高。

斑蝥酸钠对人肺癌LAC细胞周期的影响及分子机制的研究

【目的】探讨斑蝥酸钠对人肺癌LAC细胞周期的影响及其分子机制。【方法】取指数生长期的LAC细胞,分别加入2.5、12.5、25μg/mL的斑蝥酸钠和20μg/mL羟基喜树碱(HCPT),并以生理盐水作阴性对照,每组均设3个复孔;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测斑蝥酸钠对人肺癌LAC细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪定量检测药物作用后肿瘤细胞凋亡及p53、bcl-2基因的蛋白表达。【结果】斑蝥酸钠具有显著性抑制人肺癌LAC细胞增殖的作用,其抑瘤效应优于HCPT。斑蝥酸钠作用于人肺癌LAC细胞后引起S期细胞明显减少,细胞被阻止于G0/G1期,部分细胞发生凋亡,效应优于HCPT(P<0.01)。经斑蝥酸钠作用后,LAC细胞的p53基因表达上调,而bcl-2基因表达下调。【结论】斑蝥酸钠抑制人肺癌LAC细胞增殖的作用可能与其能上调p53基因、下调blc-2基因的表达和诱导LAC细胞凋亡有关。

斑蝥酸钠维生素B_6注射液对GP方案治疗晚期非小细胞肺癌减毒增效作用观察

目的观察斑蝥酸钠维生素B6注射液对接受GP方案(吉西他滨+顺铂)治疗的晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床疗效、免疫功能及止痛效果的影响。方法将79例晚期NSCLC患者分为观察组和对照组,2组患者均给予GP方案化疗,同时观察组予斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗,疗程为2个周期。评价2组近期疗效,对比免疫功能,并评估止痛效果。结果观察组的客观缓解率为72.50%(29/40),对照组为48.72%(19/39),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组CD3+、CD4+、CD8+T细胞及CD4+/CD8+、NK细胞百分数均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组疼痛缓解总有效率为75.00%(30/40),对照组为51.28%(20/39),差异有统计学意义(P<0.05)。结论斑蝥酸钠维生素B6注射液联合GP方案治疗晚期非小细胞肺癌可提高近期疗效,增强患者免疫功能并减轻癌痛,进而改善患者的生存质量。

斑螯酸钠维生素B6联合PC方案对卵巢恶性肿瘤组织中血管内皮生长因子表达的影响

目的:分析斑螯酸钠维生素B6联合PC方案对卵巢恶性肿瘤组织中血管内皮生长因子表达的影响。方法:选择本院接诊的126例卵巢恶性肿瘤患者,将其随机分为观察组(63例)和对照组(63例),观察组采用斑螯酸钠维生素B6联合PC方案对患者进行治疗,对照组采用常规的化疗方式(PC方案)对患者进行治疗。对比两组疗效、住院时间、卵巢恶性肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达以及患者不良反应等。结果:对照组治疗后的血清VEGF下降程度明显低于观察组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组的不良反应总发生率低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组的治疗有效率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:斑螯酸钠维生素B6联合PC方案对卵巢恶性肿瘤组织中血管内皮生长因子影响明显,疗效好,值得临床推广应用。

斑蝥酸钠维生素B_6注射液联合XELOX方案治疗晚期结肠癌的临床观察

目的探讨斑蝥酸钠维生素B_6注射液联合XELOX方案治疗晚期结肠癌的临床效果以及对T淋巴细胞亚群的影响。方法对2013年12月—2015年12月收治的96例晚期结肠癌患者进行回顾性分析。根据已经实施治疗方法将患者分成对照组和观察组,每组48例。对照组给予XELOX方案化疗,观察组在对照组基础上给予斑蝥酸钠维生素B_6注射液。比较两组的生活质量、不良反应及临床疗效。同时检测两组的血清T淋巴细胞亚群水平变化情况。结果观察组总有效率和改善生活质量有效率明显高于对照组(P<0.05)。观察组胃肠道反应、血小板减少、白细胞减少发生率明显低于对照组(P<0.05)。治疗3个月后,观察组CD3+、CD4+水平明显高于治疗前和对照组(P<0.05),而CD8+水平明显低于治疗前和对照组(P<0.05);对照组CD3+、CD4+水平低于治疗前(P<0.05),而CD8+水平高于治疗前(P<0.05)。结论晚期结肠癌患者应用XELOX方案化疗过程中,加用斑蝥酸钠维生素B_6注射液可提高临床疗效,提高细胞免疫功能,改善生活质量,降低不良反应发生率。

斑蝥酸钠诱导RTP801表达促进结肠癌细胞HCT116凋亡

目的探讨斑蝥酸钠注射液对结肠癌细胞凋亡的影响作用及分子机制。方法通过异硫氰酸荧光素(FITC)-右旋糖酐渗透实验观察终浓度为0.1、0.25、0.5、1、2μg/m L斑蝥酸钠注射液处理24 h后对HCT116细胞凋亡的影响;分别用real-time PCR和Western blot方法检测终浓度为0.1、0.25、0.5、1、2μg/m L斑蝥酸钠注射液处理24 h后对促凋亡基因DNA损伤修复基因(RTP801)表达的影响;运用低氧诱导因子1α(HIF-1α)质粒和HIF-1α-si RNA转染检测HIF-1α信号通路对RTP801的影响。结果斑蝥酸钠注射液诱导单层细胞渗透性增加,FITC-右旋糖酐渗透率增高。细胞受斑蝥酸钠注射液刺激后,RTP801的m RNA和蛋白水平上调,且都呈浓度依赖性。HIF-1α质粒转染后,RTP801蛋白表达增加;加入HIF-1α-si RNA,斑蝥酸钠注射液对RTP801的上调作用降低,且FITC-右旋糖酐渗透率下降。结论斑蝥酸钠通过HIF-1α途径增加RTP801的表达,诱导结肠癌细胞HCT116凋亡。

斑蝥酸钠协同雷公藤甲素诱导肝癌细胞株7721凋亡

目的:探讨斑蝥酸钠协同雷公藤甲素对人肝癌7721细胞生长的影响及机制。方法:采用系列浓度的斑蝥酸钠与雷公藤甲素单独或联合作用于人肝癌7721细胞,应用MTT法检测它们对人肝癌7721细胞生长抑制率的影响,荧光倒置显微镜法观察细胞形态的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western印迹法分别测定各组用药对人肝癌7721细胞中NF-κB p65和caspase-3表达的影响。结果:斑蝥酸钠和雷公藤甲素单独用药均可抑制人肝癌7721细胞的生长(P<0.05),且呈剂量和时间依赖性。两药联合作用对人肝癌7721细胞生长抑制率和凋亡率均大于单独用药(P<0.05),并且两药联用可以显著下调NF-κB p65表达(P<0.05),显著上调caspase-3的表达(P<0.05)。结论:斑蝥酸钠和雷公藤甲素均可抑制人肝癌7721细胞的生长,通过影响凋亡相关蛋白的表达诱导细胞凋亡;斑蝥酸钠可协同雷公藤甲素上调caspase-3的表达并下调NF-κB p65表达,联合用药效应明显。

斑蝥酸钠对人胃癌细胞BGC823中Bcl-2、p53基因表达的影响

目的研究斑蝥酸钠对人胃癌细胞BGC823中Bc1-2、p53基因表达的影响。方法采用流式细胞仪检测、分析斑蝥酸钠处理前后人胃癌细胞BGC823中Bc1-2、p53基因表达的变化。结果不同剂量斑蝥酸钠作用24h均可使Bc1-2、p53基因在人胃癌细胞BGC823中的表达下降。结论斑蝥酸钠可抑制Bc1-2、p53基因在人胃癌细胞BGC823中的表达。

斑蝥酸钠维生素B_6联合腹腔热灌注化疗治疗胃肠肿瘤恶性腹水

目的观察斑蝥酸钠维生素B6注射液在腹腔热灌注化疗治疗胃肠肿瘤恶性腹水中的临床疗效,以及对腹腔热灌注化疗不良反应的影响。方法对2010年4月-2012年6月收治的170例胃肠肿瘤恶性腹水病例按照治疗方法随机分入治疗组(斑蝥酸钠维生素B6联合腹腔热灌注化疗)和对照组(单纯腹腔热灌注化疗)。比较两组的近期疗效、疾病进展期、总生存期、KPS评分变化和不良反应。结果治疗组的近期有效率为71.1%,对照组为49.4%,两组间比较,差异有统计学意义(P=0.005);两组治疗前后的KPS评分差异有统计学意义(P=0.016)。治疗组的中位生存期为12.62,对照组中位生存期为12.06,差异无统计学意义(P=0.065)。治疗组的中位疾病进展时间为6.47个月,对照组中位疾病进展时间为6.04个月,差异无统计学意义(P=0.179)。在不良反应中,消化道反应差异有统计学意义(P=0.016);骨髓抑制,心脏毒性等差异无统计学意义(P>0.05)。结论斑蝥酸钠维生素B6注射液在腹腔热灌注化疗治疗恶性腹水中近期疗效好,有延长生存时间趋势,可减少不良反应,能提高生活质量。

化疗联合斑蝥酸钠维生素B6注射液对非小细胞肺癌患者的治疗效果及其机制

目的:探讨化疗联合斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗非小细胞肺癌(NSCLC)患者的效果及其对患者生存质量的影响,并阐明其作用机制。方法:110例NSCLC患者根据采用的治疗方法不同分为化疗组(55例,采用单纯化疗)和联合组(55例,采用化疗联合斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗)。比较2组患者的治疗有效率,治疗前后采用欧洲癌症研究与治疗组织肺癌生存质量(EORTC QLO-C43)量表对患者的生存质量进行评分,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素12 (IL^(-1)2)水平。结果:联合组患者治疗后总有效率高于化疗组,但组间比较差异无统计学意义(χ~2=0.806,P=0.369)。治疗前联合组和化疗组患者功能性量表、总体健康状况、症状子量表、肺癌特异性子量表评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后联合组患者功能性量表和总体健康状况评分明显高于化疗组(P<0.05),症状子量表和肺癌特异性子量表评分明显低于化疗组(P<0.05)。治疗前联合组和化疗组患者血清中VEGF、TNF-α和IL^(-1)2水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后联合组患者血清中VEGF水平明显低于化疗组(t=3.608,P<0.05),TNF-α和IL^(-1)2水平明显高于化疗组(t=3.426,P<0.05;t=2.849,P<0.05)。结论:化疗联合斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗NSCLC患者的效果较好,且能明显改善NSCLC患者生存质量,其机制可能与降低血清中VEGF水平及升高血清中TNF-α和IL^(-1)2水平有关。

斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株毒性作用的研究

目的:探讨斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株的毒性作用。方法:采用5,10,20μg/ml斑蝥酸钠作用于EJ细胞株2,4,24,48 h后,观察细胞形态改变,MTT法检测药物对细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞增殖周期的改变以及细胞凋亡情况。结果:5μg/ml斑蝥酸钠作用2,4 h后细胞无明显改变,10,20μg/ml作用2,4 h后细胞出现水肿、空泡、核固缩以及细胞溶解现象;药物作用细胞后其抑制率显著增高(P<0.05);细胞周期中G2/M期延长,细胞凋亡明显增加(P<0.05)。结论:斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株有明显的毒性作用,通过诱导细胞凋亡的途径抑制细胞生长。

斑蝥酸钠维生素B_6注射液对人肺癌细胞系A549增殖抑制及核因子κB和Caspase3/7的影响

目的探讨斑蝥酸钠(SC)维生素B6注射液对人非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡及核因子κB(NF-κB)、凋亡分子Caspase3/7的影响。方法用不同浓度(0、1.0、2.5、5.0 mg/L)的SC维生素B6注射液处理A549细胞,观察光镜及Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡形态;用噻唑蓝(MTT)比色法检测SC维生素B6注射液对细胞增殖的抑制作用;罗丹明123检测线粒体膜电位;Caspase3/7活性检测试剂盒检测Caspase3/7活性;蛋白印迹检测NF-κB P65、I-κB蛋白表达。结果 SC维生素B6注射液对A549细胞的体外增殖有明显抑制作用,细胞形态出现明显凋亡改变,5.0 mg/L组作用A549细胞72 h后,细胞增殖抑制率最大达到67.37%。细胞线粒体膜电位检测结果显示,随着SC维生素B6注射液浓度的增加及时间的延长,线粒体膜电位逐渐减弱,同时Caspase3/7蛋白活性增强;SC维生素B6注射液作用A549细胞后NF-κB P65蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而I-κB蛋白表达水平则无显著变化。结论 SC维生素B6注射液可能通过抑制NF-κB P65表达,激活Caspase-3/7活性,从而抑制A549细胞增殖,诱导细胞凋亡。

斑蝥酸钠的合成

目的合成标题化合物,并进行工艺改进。方法由斑蝥素在碱性条件下水解制得。结果总收率为62.4%,所得产物经元素分析、紫外光谱、红外光谱、核磁共振谱及质谱等确证了结构。结论该合成工艺具有收率高、成本低、易于工业化生产等特点。