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桑辛素通过调节胆固醇代谢改善油酸诱导的HepG2细胞脂质蓄积 被引量:1
1
作者 李艳 李子雯 +2 位作者 李利民 胡胜全 吴正治 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期140-144,I0004,I0005,共7页
目的观察桑辛素对油酸(oleic acid,OA)诱导的HepG2细胞脂质蓄积的改善作用,并探讨其可能机制。方法以300μM OA处理HepG2细胞24 h诱导建立脂质蓄积模型,2.5、5、10μM的桑辛素和OA共同作用于细胞24 h,采用CCK-8法测定细胞存活率,油红O... 目的观察桑辛素对油酸(oleic acid,OA)诱导的HepG2细胞脂质蓄积的改善作用,并探讨其可能机制。方法以300μM OA处理HepG2细胞24 h诱导建立脂质蓄积模型,2.5、5、10μM的桑辛素和OA共同作用于细胞24 h,采用CCK-8法测定细胞存活率,油红O染色观察细胞内脂质含量情况,DiI-LDL检测细胞脂质摄取能力,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定桑辛素对胆固醇代谢关键基因过氧化物酶体增殖物激活受体a(PPARα)和胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)蛋白表达的情况,并将桑辛素与低密度脂蛋白受体(LDLR)和PPARα通过AutoDock vina软件进行分子对接验证。结果OA刺激HepG2细胞导致细胞内脂滴颗粒明显增加,脂质含量明显升高(P<0.01)。与模型组相比,桑辛素可明显改善模型组肝细胞脂质蓄积,并降低脂质含量(P<0.05)。桑辛素可抑制HepG2细胞对DiI-LDL的摄取,上调细胞中PPARα和CYP7A1的蛋白表达水平(P<0.05)。分子对接显示桑辛素与LDLR和PPARα受体表现出良好的对接活性。结论桑辛素对HepG2细胞脂质蓄积模型有明显的改善作用,其机制可能与调节PPARα通路有关。 展开更多
关键词 桑辛素 hepg2细胞 油酸 PPARΑ 脂质蓄积
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大豆肽和豌豆肽对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢及其相关机制的研究 被引量:1
2
作者 刘婧 任玮 +5 位作者 程改平 李可 徐淼 闫九明 李明亮 秦修远 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期67-72,共6页
通过细胞实验探讨大豆肽与豌豆肽的复合物对II型糖尿病胰岛素抵抗作用,并初步探明其作用机制。采用1×10^(-6)mol/L的人胰岛素处理HepG2细胞24 h建立胰岛素抵抗模型;CCK-8法确定大豆肽及豌豆肽对HepG2细胞的安全剂量;检测不同复配... 通过细胞实验探讨大豆肽与豌豆肽的复合物对II型糖尿病胰岛素抵抗作用,并初步探明其作用机制。采用1×10^(-6)mol/L的人胰岛素处理HepG2细胞24 h建立胰岛素抵抗模型;CCK-8法确定大豆肽及豌豆肽对HepG2细胞的安全剂量;检测不同复配比例的大豆肽和豌豆肽实验组的葡萄糖消耗、葡萄糖吸收及细胞中的糖原含量反应糖代谢情况,通过Western Blot法检测各蛋白的表达。结果表明,与对照组相比,HepG2细胞置于含1×10^(-6)mol/L人胰岛素培养液孵育24 h,葡萄糖消耗量、葡萄糖吸收量、糖原含量都降低,表明建模成功。大豆肽及豌豆肽干预均能改善HepG2细胞的胰岛素抵抗状况,提高细胞对葡萄糖的吸收和消耗能力、糖原合成能力,并能够提高葡萄糖转运蛋白GLUT2、GLUT4的表达量及胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的磷酸化水平,其中质量浓度为200μg/mL、比例为2∶1的大豆肽和豌豆肽效果最好。大豆肽与豌豆肽以2∶1的质量比进行复配可以有效改善HepG2细胞的胰岛素抵抗状况,可能与肽提高细胞中GLUT2和GLUT4的表达量,以及提高IRS-1和Akt蛋白的磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 大豆肽 豌豆肽 胰岛素抵抗 hepg2细胞 糖代谢 IRS-1 Akt
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泽漆醇提取物抗氧化活性及对油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积的影响
3
作者 甘露珍 姜琼 +3 位作者 饶志威 张聪子 杜光 章登政 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第6期330-336,共7页
为了探究泽漆醇提取物体外抗氧化作用及其对油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积的影响。本研究采用浸渍法分别以25%、50%、75%甲醇和乙醇对泽漆粉末进行提取,评估不同泽漆提取物的体外抗氧化活性,并测定其总酚和总黄酮含量。建立HepG2细胞脂肪... 为了探究泽漆醇提取物体外抗氧化作用及其对油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积的影响。本研究采用浸渍法分别以25%、50%、75%甲醇和乙醇对泽漆粉末进行提取,评估不同泽漆提取物的体外抗氧化活性,并测定其总酚和总黄酮含量。建立HepG2细胞脂肪堆积模型,不同浓度(20、40、60μg/mL)泽漆50%乙醇提取物处理24 h,观察细胞内脂滴形成情况;测定细胞中甘油三脂(triglyceride,TG)含量、总谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)。结果表明,泽漆醇提取物均具有抗氧化活性,且有浓度依赖性,其中50%乙醇提取物在一定浓度范围内抗氧化效果最佳(P<0.05),且总酚(8.813%±1.344%)和总黄酮(17.938%±0.819%)含量也较高。与模型组比较,泽漆50%乙醇提取物能够降低HepG2细胞内脂滴和TG值,提高细胞GSH、T-AOC含量和SOD活性(P<0.05),具有浓度依赖性。综上可知,50%乙醇提取物可以抑制油酸诱导的HepG2细胞脂肪堆积,并增强细胞内源性抗氧化能力。 展开更多
关键词 泽漆 醇提取物 抗氧化作用 hepg2细胞 脂肪堆积
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EGFR siRNA序列的筛选及其对HepG2细胞活性的影响
4
作者 许楠 杨旭东 +3 位作者 薛丽 宁启兰 王慧莲 耿燕 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第5期935-939,944,共6页
目的构建EGFR shRNA重组真核表达载体,并筛选抑制效果最好的EGFR shRNA序列。方法应用在线工具设计人EGFR siRNA序列,采用限制性内切酶BamHI和HindIII切割真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建三种人EGFR的siRNA干扰序列载体(psilencer 4.1-CMV... 目的构建EGFR shRNA重组真核表达载体,并筛选抑制效果最好的EGFR shRNA序列。方法应用在线工具设计人EGFR siRNA序列,采用限制性内切酶BamHI和HindIII切割真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建三种人EGFR的siRNA干扰序列载体(psilencer 4.1-CMV neo-EGFR siRNA)。将重组质粒载体转化大肠杆菌DH5α感受态并筛选阳性克隆,通过DNA测序鉴定重组质粒。应用脂质体lipo2000将三种人EGFR siRNA干扰序列载体转染到HepG2细胞,通过荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR检测EGFR mRNA表达水平,MTT法检测细胞活性。结果Psilencer 4.1-CMV neo-EGFR siRNA重组质粒被成功克隆。EGFR shRNA-1、EGFR shRNA-2和EGFR shRNA-3敲低EGFR mRNA的效率分别是80%、60%和70%以上。shRNA-2和shRNA-3使细胞活性分别下降50%(P<0.05),但shRNA-1对细胞活性无明显影响(P>0.05)。结论重组psilencer 4.1-CMV neo-EGFR siRNA质粒可下调肝癌细胞株EGFR表达水平和细胞活性。EGFR shRNA-3较EGFR shRNA-1和shRNA-2对HepG2细胞的抑制作用更显著。 展开更多
关键词 基因治疗 肝癌 hepg2 EGFR 小干扰RNA
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circRNA CCND1对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响
5
作者 董辉 顾铃毓 +1 位作者 俞梦楚 张旭 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第8期1-8,共8页
目的 探讨circRNA CCND1对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。方法 采用荧光原位杂交(FISH)实验及实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测circRNA CCND1在HepG2细胞及L02细胞中的表达情况;进一步干扰及过表达circRNA CCND1... 目的 探讨circRNA CCND1对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。方法 采用荧光原位杂交(FISH)实验及实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测circRNA CCND1在HepG2细胞及L02细胞中的表达情况;进一步干扰及过表达circRNA CCND1后,通过qRT-PCR检测circRNA CCND1在HepG2细胞中的表达情况,CCK-8法和EDU法检测HepG2细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期,Transwell实验检测细胞侵袭情况,划痕实验检测细胞迁移情况。结果 HepG2细胞circRNA CCND1相对表达量较LO2细胞高(P <0.05)。Si-circRNA CCND1组circRNA CCND1相对表达量较Control组和Si-NC组下降(P <0.05),Oe-circRNA CCND1组较Control组和Oe-NC组升高(P <0.05)。各组细胞培养0、24、48、72和96 h后细胞增殖活性比较,经重复测量设计的方差分析,结果:(1)不同时间点细胞增殖活性比较,差异有统计学意义(P <0.05);(2)各组细胞增殖活性比较,差异有统计学意义(P <0.05);(3)各组细胞增殖活性变化趋势比较,差异有统计学意义(P <0.05)。与Control组及Si-NC组比较,Si-circRNA CCND1组细胞凋亡率升高(P <0.05),G_(0)/G_(1)期比值升高(P <0.05),S及G_(2)/M期比值下降(P <0.05);与Control组及Oe-NC组比较,OecircRNA CCND1组细胞凋亡率下降(P <0.05),G_(0)/G_(1)期比值下降(P <0.05),S及G_(2)/M期比值升高(P <0.05)。Si-circRNA CCND1组细胞侵袭数、细胞迁移数较Control组、Si-NC组少(P <0.05),Oe-circRNA CCND1组较Control组及Oe-NC组多(P <0.05)。结论 circRNA CCND1能够促进人肝癌细胞HepG2细胞增殖、侵袭和迁移,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 肝肿瘤 circRNA CCND1 hepg2 细胞生理学现象
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基于京尼平结构的衍生物设计与合成及其对HepG2细胞毒性的研究
6
作者 孙丽 苗健 +2 位作者 王丽丽 张帆 董振科 《中医药导报》 2024年第4期71-74,共4页
目的:设计并合成一系列基于京尼平结构的环烯醚萜类衍生物,并探讨其对HepG2细胞的毒性作用,为寻找具有肝保护作用的药物提供一定的理论指导。方法:以京尼平为起始物,以三氟化硼乙醚为催化剂,在低温无水无氧体系下与低碳醇(甲醇、乙醇、... 目的:设计并合成一系列基于京尼平结构的环烯醚萜类衍生物,并探讨其对HepG2细胞的毒性作用,为寻找具有肝保护作用的药物提供一定的理论指导。方法:以京尼平为起始物,以三氟化硼乙醚为催化剂,在低温无水无氧体系下与低碳醇(甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、叔丁醇)进行S_(N)1取代反应,获得的产物经^(1)H-NMR进行结构表征;采用CCK-8法评价化合物对HepG2细胞的细胞毒性,并以谷胱甘肽为阳性对照,以IC_(50)值表示其毒性强弱。结果:设计并合成了6个京尼平衍生物,分别是1-O-甲基京尼平、1-O-乙基京尼平、1-O-正丙基京尼平、1-O-异丙基京尼平、1-O-正丁基京尼平、1-O-叔丁基京尼平,经^(1)H-NMR表征其结构正确。细胞实验显示,谷胱甘肽的IC_(50)值>1 000μmol/L,京尼平的IC_(50)值为(558.70±22.81)μmol/L,1-O-正丙基京尼平、1-O-正丁基京尼平的IC_(50)值分别为(537.40±188.10)μmol/L、(586.10±42.41)μmol/L,细胞毒性均低于谷胱甘肽,但与京尼平相近;1-O-异丙基京尼平的IC_(50)值为(628.30±38.72)μmol/L,低于谷胱甘肽,但高于京尼平;1-O-甲基京尼平、1-O-乙基京尼平、1-O-叔丁基京尼平的IC_(50)值分别为(324.30±55.67)μmol/L、(111.95±18.06)μmol/L、(91.10±15.20)μmol/L,均低于谷胱甘肽和京尼平。结论:合成了6个京尼平衍生物,获得了一条简单的、可控的京尼平衍生物的合成方法;其中京尼平衍生物1-O-正丙基京尼平、1-O-异丙基京尼平、1-O-正丁基京尼平对HepG2细胞毒性较小。 展开更多
关键词 京尼平 京尼平衍生物 hepg2细胞 肝细胞毒性 肝保护作用
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南、北五味子蛋白抗氧化活性和对HepG2细胞氧化应激损伤的修复作用 被引量:2
7
作者 周泓妍 郑怡 +5 位作者 王海东 曹珺 张涵 张红印 李光哲 严铭铭 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期51-60,共10页
采用碱提酸沉法提取南五味子蛋白(Schisandra sphenanthera protein,SSP)和北五味子蛋白(Schisandra chinensis protein,SCP),并测定其体外清除自由基能力、还原能力和对H_(2)O_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤的修复作用。采用CCK-8法检测... 采用碱提酸沉法提取南五味子蛋白(Schisandra sphenanthera protein,SSP)和北五味子蛋白(Schisandra chinensis protein,SCP),并测定其体外清除自由基能力、还原能力和对H_(2)O_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤的修复作用。采用CCK-8法检测细胞增殖率,荧光检测胞内活性氧水平,酶联免疫吸附法检测细胞氧化应激产物和抗氧化物酶系活性。结果表明,SSP清除自由基和还原能力均优于SCP,SSP与SCP都能对H_(2)O_(2)诱导HepG2造成的细胞生长抑制起到修复作用(P<0.05),显著降低胞内活性氧、丙二醛水平(P<0.05),显著提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽的水平(P<0.05),且SSP对H_(2)O_(2)诱导的HepG2氧化应激损伤修复能力优于SCP。综上,2种五味子蛋白中SSP更适合应用于抗氧化功能性食品或保健食品工业中。 展开更多
关键词 蛋白 自由基清除 氧化应激 hepg2细胞 抗氧化
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人参皂苷Rb1通过KEAP1/PGAM5/AIFM1通路促进肝细胞癌HepG2细胞发生氧死亡
8
作者 朱敬轩 宋囡 +3 位作者 杨莹 王杰 高浩 贾连群 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期445-451,共7页
目的:探讨人参皂苷Rb1(Gn-Rb1)对肝细胞癌(HCC)HepG2细胞氧死亡的影响及其可能的分子机制。方法:采用生物信息学方法分析氧死亡的关键基因PGAM5表达对HCC患者生存期的影响。选取辽宁省肿瘤医院收治的8例HCC患者的HCC组织与癌旁组织,通... 目的:探讨人参皂苷Rb1(Gn-Rb1)对肝细胞癌(HCC)HepG2细胞氧死亡的影响及其可能的分子机制。方法:采用生物信息学方法分析氧死亡的关键基因PGAM5表达对HCC患者生存期的影响。选取辽宁省肿瘤医院收治的8例HCC患者的HCC组织与癌旁组织,通过WB法及qPCR检测氧死亡相关基因蛋白与mRNA的表达情况。将HepG2细胞随机分为对照组与Gn-Rb1组(予以200μmol/L Gn-Rb1干预),采用细胞克隆形成实验、划痕愈合实验分别检测Gn-Rb1对HepG2细胞的集落形成能力、迁移能力的影响,ELISA检测对细胞ROS生成水平的影响,微板法检测对细胞LDH释放水平的影响;WB法、qPCR法检测Gn-Rb1对HepG2氧死亡关键基因蛋白质与mRNA水平表达的影响。结果:生物信息学分析发现,PGAM5高表达肝癌患者总生存时间较低表达患者更长(P<0.05)。在临床HCC组织与癌旁组织样本中发现,相较于癌旁组织,在蛋白质与mRNA水平上,肿瘤组织KEAP1与PGAM5表达显著降低,NRF2表达显著升高(均P<0.01),p-AIFM1蛋白水平显著升高(P<0.05)。对HepG2细胞予以200μmol/L Gn-Rb1干预后,相较于对照组,Gn-Rb1组HepG2细胞的迁移能力与集落形成能力显著降低(均P<0.01),而LDH水平显著升高(P<0.05);相比于对照组,在mRNA和蛋白质水平上,Gn-Rb1组细胞中KEAP1、PGAM5表达均显著升高而NRF2表达均显著降低(均P<0.05),p-AIFM1蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:HCC组织中氧死亡被抑制,而Gn-Rb1能够通过调控KEAP1/PGAM5/AIFM1通路促进HepG2细胞氧死亡的发生,抑制细胞增殖和迁移能力。 展开更多
关键词 人参皂苷RB1 肝细胞癌 hepg2细胞 氧死亡 增殖 迁移
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野鸦椿果实乙酸乙酯萃取物化学成分及对HepG2细胞抑制作用研究
9
作者 康钦钊 叶章楷 +2 位作者 曾佑琴 谭玉柱 陈胡兰 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1472-1483,共12页
研究野鸦椿(Euscaphis japonica(Thunb.)Dippel.)干燥成熟果实的乙酸乙酯部位化学成分及对HepG2细胞的抑制作用。采用多种柱色谱技术和半制备HPLC分离技术,对野鸦椿果实的乙酸乙酯部分进行分离纯化,分离所得化合物运用核磁共振技术进行... 研究野鸦椿(Euscaphis japonica(Thunb.)Dippel.)干燥成熟果实的乙酸乙酯部位化学成分及对HepG2细胞的抑制作用。采用多种柱色谱技术和半制备HPLC分离技术,对野鸦椿果实的乙酸乙酯部分进行分离纯化,分离所得化合物运用核磁共振技术进行结构鉴定。并采用HepG2细胞模型对这些化合物的抗肿瘤作用进行探究。最终分离得到17个化合物,分别鉴定为齐墩果酸(1)、6β-羟基白桦脂酸(2)、木鳖子酸(3)、2-氧代坡模酸(4)、坡模酸(5)、熊果酸(6)、23-醛坡模酸(7)、1-氧泰国树脂酸(8)、annurcoic acid(9)、马斯里酸(10)、山柰酚(11)、柚皮素(12)、芹菜素(13)、木犀草素(14)、圣草酚(15)、没食子酸甲酯(16)、原儿茶酸(17)。其中,化合物2、9、12~15为首次从野鸦椿属中分离得到。化合物2、5、6、10、13对HepG2细胞有抑制作用。化合物5可抑制HepG2细胞增殖和迁移,阻滞细胞周期于G1期;促进细胞内活性氧的积累,降低线粒体膜电位,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 野鸦椿 化学成分 三萜 结构鉴定 hepg2细胞 细胞凋亡
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枸杞叶黄酮对HepG2细胞脂质代谢的影响及作用机制
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作者 杨超 裴宇芳 +3 位作者 孙霞芝 刘霜 张惠玲 范艳丽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第11期31-40,共10页
目的:以正常培养和油酸诱导培养的HepG2细胞为模型,探讨枸杞叶黄酮(Lycium barbarum leaves flavonoids,LBLF)对HepG2细胞脂质积累的影响。方法:实验划分为空白组、模型组、阳性对照组以及LBLF低、中、高剂量组。通过油红O染色判断各组... 目的:以正常培养和油酸诱导培养的HepG2细胞为模型,探讨枸杞叶黄酮(Lycium barbarum leaves flavonoids,LBLF)对HepG2细胞脂质积累的影响。方法:实验划分为空白组、模型组、阳性对照组以及LBLF低、中、高剂量组。通过油红O染色判断各组别的脂滴聚集情况,并测定各组别脂质水平、氧化应激指标,最后通过实时聚合酶链式反应和Western blot检测脂质生成相关关键基因mRNA水平和蛋白水平的表达情况。结果:LBLF可减少油酸诱导的HepG2细胞内甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇以及丙二醛和活性氧的水平,提升高密度脂蛋白胆固醇、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽、过氧化氢酶水平。同时,Western blot结果显示LBLF干预能上调磷酸化AMP活化蛋白激酶(phosphorylated adenosine 5’-monophosphate (AMP)-activated protein kinase,p-AMPK)/AMPK水平,下调甾醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element-binding protein 1c,SREBP-1c)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ(peroxisome?proliferator-activated?receptor?γ,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT enhancer binding proteinalpha,CEBPα)蛋白的表达;实时聚合酶链式反应结果表明,LBLF干预能下调ACC、FAS、SREBP-1c、SCD-1、PPARγ、CEBPα等基因的表达。结论:枸杞叶黄酮可通过调节脂质生成和氧化相关基因的表达水平,部分缓解由油酸诱导的HepG2细胞脂质代谢紊乱。 展开更多
关键词 枸杞叶黄酮 hepg2细胞 脂质代谢 作用机制
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Evaluation of the intracellular lipid-lowering effect of polyphenols extract from highland barley in HepG2 cells 被引量:3
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作者 Yijun Yao Zhifang Li +2 位作者 Bowen Qin Xingrong Ju Lifeng Wang 《Food Science and Human Wellness》 SCIE CSCD 2024年第1期454-461,共8页
Active ingredients from highland barley have received considerable attention as natural products for developing treatments and dietary supplements against obesity.In practical application,the research of food combinat... Active ingredients from highland barley have received considerable attention as natural products for developing treatments and dietary supplements against obesity.In practical application,the research of food combinations is more significant than a specific food component.This study investigated the lipid-lowering effect of highland barley polyphenols via lipase assay in vitro and HepG2 cells induced by oleic acid(OA).Five indexes,triglyceride(TG),total cholesterol(T-CHO),low density lipoprotein-cholesterol(LDL-C),aspartate aminotransferase(AST),and alanine aminotransferase(ALT),were used to evaluate the lipidlowering effect of highland barley extract.We also preliminary studied the lipid-lowering mechanism by Realtime fluorescent quantitative polymerase chain reaction(q PCR).The results indicated that highland barley extract contains many components with lipid-lowering effects,such as hyperoside and scoparone.In vitro,the lipase assay showed an 18.4%lipase inhibition rate when the additive contents of highland barley extract were 100μg/m L.The intracellular lipid-lowering effect of highland barley extract was examined using 0.25 mmol/L OA-induced HepG2 cells.The results showed that intracellular TG,LDL-C,and T-CHO content decreased by 34.4%,51.2%,and 18.4%,respectively.ALT and AST decreased by 51.6%and 20.7%compared with the untreated hyperlipidemic HepG2 cells.q PCR results showed that highland barley polyphenols could up-regulation the expression of lipid metabolism-related genes such as PPARγand Fabp4. 展开更多
关键词 Highland barley Polyphenols extract Lipid-lowering effect hepg2 cells
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白茅根多糖理化性质及对HepG2细胞的降糖作用研究
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作者 魏菱鸽 李慧 +2 位作者 米圣成 路祺 朱明华 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第17期198-208,共11页
该文以高温高压超声波辅助法提取白茅根多糖(Rhizoma imperatae polysaccharides,RPS),通过响应面法优化RPS提取工艺。经Sevag法脱蛋白,DEAE-DE纤维素52层析柱和Sephadex G-100凝胶层析柱分离纯化,得到2种RPS(RPS-DS 0和RPS-DS 0.1)。... 该文以高温高压超声波辅助法提取白茅根多糖(Rhizoma imperatae polysaccharides,RPS),通过响应面法优化RPS提取工艺。经Sevag法脱蛋白,DEAE-DE纤维素52层析柱和Sephadex G-100凝胶层析柱分离纯化,得到2种RPS(RPS-DS 0和RPS-DS 0.1)。采用α-淀粉酶抑制实验,测定RPS的体外降糖作用。构建胰岛素抵抗HepG2细胞(insulin-resistant HepG2,IR-HepG2)模型,测定RPS-DS 0.1对IR-HepG2细胞中葡萄糖消耗量、糖原含量、己糖激酶和丙酮酸激酶活性的影响。结果表明,在液料比(mL∶g)为20∶1、提取温度112℃、提取时间15 min、超声波功率410 W、超声波处理时间25 min时,RPS质量分数得率为14.79%。RPS-DS 0和RPS-DS 0.1是分子质量分别为179.14 kDa和29.79 kDa的均一中性多糖。RPS-DS 0由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖和甘露糖组成,其物质的量比为6.79∶9.68∶75.52∶4.38∶1.88。RPS-DS 0.1由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成,其物质的量比为2.48∶11.76∶20.08∶50.92∶10.25∶2.08∶2.12。RPS-DS 0和RPS-DS 0.1对α-淀粉酶的半数抑制浓度分别为0.40和0.21 mg/mL。细胞实验结果表明,RPS-DS 0.1能显著提高IR-HepG2细胞中葡萄糖消耗量、糖原含量、己糖激酶和丙酮酸激酶活性,调节糖代谢,从而达到降糖作用。 展开更多
关键词 白茅根多糖 响应面 分离纯化 结构特性 降糖活性 hepg2细胞
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基于转录组测序分析葡萄籽原花青素对HepG2细胞基因及其相关功能的影响
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作者 郑万财 党斌 +2 位作者 张迹 罗巧玉 冯作山 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2024年第3期188-195,共8页
目的:基于转录组测序分析葡萄籽原花青素对HepG2细胞基因及相关功能的影响,明确原花青素处理HepG2细胞的关键基因及代谢通路。方法:通过转录组测序,筛选差异基因,基因功能注释和KEGG通路的富集分析,进行葡萄籽原花青素处理细胞后的转录... 目的:基于转录组测序分析葡萄籽原花青素对HepG2细胞基因及相关功能的影响,明确原花青素处理HepG2细胞的关键基因及代谢通路。方法:通过转录组测序,筛选差异基因,基因功能注释和KEGG通路的富集分析,进行葡萄籽原花青素处理细胞后的转录组学研究。结果:葡萄籽花青素处理HepG2细胞后主要富集到的生物学过程为细胞过程、代谢过程、生物调控过程、免疫系统过程、繁殖调节、生长调节。细胞凋亡的12个关键差异基因与TNF、p53、MAPK、PI3K-Akt、NF-κB信号通路密切相关。结论:细胞凋亡与TNF信号通路、p53信号传导途径、PI3K/Akt信号通路、NF-κB信号通路、MAPK信号通路密切相关。 展开更多
关键词 葡萄籽 原花青素 转录组测序 hepg2细胞 基因功能
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20-羟基蜕皮激素对高糖诱导HepG2细胞氧化损伤的作用及机制研究
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作者 王梦媛 刘咸筠 +3 位作者 孟祥龙 李皓 李占东 殷玉和 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第20期369-377,共9页
目的:探究20-羟基蜕皮激素(20-Hydroxyecdysone,20-HE)对高糖诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用及相关分子机制。方法:利用高糖(50 mmol/L葡萄糖)建立HepG2细胞氧化损伤模型,分别采用CCK-8法、caspase-3活性检测实验、荧光探针法和比色... 目的:探究20-羟基蜕皮激素(20-Hydroxyecdysone,20-HE)对高糖诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用及相关分子机制。方法:利用高糖(50 mmol/L葡萄糖)建立HepG2细胞氧化损伤模型,分别采用CCK-8法、caspase-3活性检测实验、荧光探针法和比色法检测细胞的活力、凋亡、活性氧(Reactive Oxygen Specie,ROS)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的水平。基于生物信息学分析的方法对参与20-HE调控作用的相关信号通路进行预测,采用Western blot检测Akt蛋白的磷酸化水平,评价PI3K/Akt信号通路的激活水平,利用PI3K/Akt信号通路的抑制剂(LY294002)验证其是否参与20-HE发挥的调控作用。结果:20-HE的浓度低于20μmol/L对HepG2细胞没有显著毒性作用;20-HE可以显著提高损伤细胞的活力(P<0.05),显著抑制损伤细胞的凋亡(P<0.05),显著下调损伤细胞的ROS水平(P<0.05),显著提高SOD和CAT的水平(P<0.05),显著下调MDA水平(P<0.05);PI3K/Akt信号通路是20-HE发挥调控作用的潜在下游机制;20-HE可以显著上调损伤细胞中PI3K/Akt信号通路的水平(P<0.05);LY294002可以逆转20-HE对损伤细胞发挥的保护作用。结论:20-HE通过激活PI3K/Akt信号通路发挥对高糖诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用。 展开更多
关键词 20-羟基蜕皮激素 高糖 hepg2细胞 氧化应激 PI3K/AKT信号通路
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辣椒素与槲皮苷通过EGFR/PI3K/Akt信号通路调节HepG2细胞脂质代谢作用机制
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作者 祝文轩 师全英 +3 位作者 王向红 杨瑞利 程鑫颖 米思 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第10期45-53,共9页
为探究辣椒素与槲皮苷协同调节肝脏脂质代谢的分子机制,本实验利用油酸诱导的HepG2高脂细胞模型,研究辣椒素单独处理及辣椒素与槲皮苷联合处理对HepG2细胞存活率的影响,采用油红O染色法观察HepG2细胞脂质积累情况,同时测定细胞内总甘油... 为探究辣椒素与槲皮苷协同调节肝脏脂质代谢的分子机制,本实验利用油酸诱导的HepG2高脂细胞模型,研究辣椒素单独处理及辣椒素与槲皮苷联合处理对HepG2细胞存活率的影响,采用油红O染色法观察HepG2细胞脂质积累情况,同时测定细胞内总甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、总胆汁酸的含量水平,采用免疫印迹法测定表面生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)及法尼醇X受体1(farnesoid X receptor 1,FXR1)、胆固醇7α羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)、成纤维细胞生长因子19(fibroblast growth factor 19,FGF19)的表达量。结果显示,各处理组HepG2细胞的增殖率均大于75%,表明药物对细胞没有明显毒性,可进行后续实验。油红O染色结果表明,加药处理组细胞内脂质积累减少。辣椒素与槲皮苷处理可降低细胞内总甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量,提高高密度脂蛋白胆固醇和胆汁酸含量;同时各实验组上调了EGFR、PI3K、Akt及FXR1、FGF19蛋白的表达水平。综合来看,辣椒素与槲皮苷在调节肝脏脂质代谢方面具有协同效应,二者在高剂量水平以3∶1比例混合效果最佳。 展开更多
关键词 辣椒素 槲皮苷 hepg2细胞 脂质代谢 分子机制
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红曲色素的抗氧化活性及对HepG2氧化损伤的保护作用研究
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作者 陈琴 王顺 +3 位作者 周坚 贾喜午 沈汪洋 陈轩 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第8期58-65,共8页
目的研究纯化后的红曲色素(monascus pigments,MPs)抗氧化活性及对HepG2细胞氧化损伤的修复作用。方法以红曲米粉为原料,对其含有的MPs进行提取、纯化和鉴定。通过测定MPs的总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picry... 目的研究纯化后的红曲色素(monascus pigments,MPs)抗氧化活性及对HepG2细胞氧化损伤的修复作用。方法以红曲米粉为原料,对其含有的MPs进行提取、纯化和鉴定。通过测定MPs的总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]阳离子自由基清除率评估了其抗氧化活性。同时,选用0.20 mmol/L的H2O2建立氧化应激模型,探索不同浓度MPs对细胞氧化损伤的保护机制。结果纯化后的MPs含有4种MPs单体,分别为安卡红曲黄素、红曲玉红素、红曲素和潘红胺。MPs的总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除率与其浓度呈正相关。用不同浓度的MPs预处理后,与MC组相比,较低浓度(10μg/mL)的MPs能显著提高细胞的存活率,但较高浓度的MPs(20μg/mL)显著降低了细胞的存活率,这可能是H2O2与MPs协同作用导致的。随着MPs浓度增加,细胞中活性氧累积量逐渐减少。当MPs质量浓度为20μg/mL时,过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性分别从14.75 U/mL±0.04 U/mL、3.87 U/mL±0.09 U/mL提升至15.25 U/mL±0.05 U/mL、8.29 U/mL±0.68 U/mL。结论MPs有较强的自由基清除能力,对H2O2诱导的氧化损伤有保护作用,这可能是与MPs提高了抗氧化酶活性,降低了细胞内ROS累积量有关。 展开更多
关键词 红曲色素 自由基清除 hepg2细胞 抗氧化
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益生菌发酵栀子对酒精性氧化损伤HepG2细胞的保护作用
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作者 廖静如 严静 +5 位作者 赵文俊 陈冬球 王烈宇 张琦琳 杜冰 黎攀 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第21期350-357,共8页
探究乳酸芽孢杆菌DU-106和植物乳杆菌混合菌发酵栀子对HepG2细胞酒精性氧化损伤的影响。采用CCK-8法探索最佳酒精性氧化损伤造模浓度和栀子提取液干预浓度,评价发酵栀子水提液对超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物... 探究乳酸芽孢杆菌DU-106和植物乳杆菌混合菌发酵栀子对HepG2细胞酒精性氧化损伤的影响。采用CCK-8法探索最佳酒精性氧化损伤造模浓度和栀子提取液干预浓度,评价发酵栀子水提液对超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量等抗氧化能力指标以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)等转氨酶类释放量、促炎细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)等肝损伤评价指标的影响。结果表明栀子提取液(Gardenia jasminoides Ellis extract,GE)和发酵栀子提取液(fermented Gardenia jasminoides Ellis extract,FGE)可显著提高酒精诱导HepG2细胞活力(P<0.05),与模型组(MN)相比,GE和FGE显著提高细胞的抗氧化应激能力,减轻脂质过氧化、减少GSH耗竭、降低细胞因子水平(P<0.01),减少细胞中AST、ALT和LDH的释放,改善酒精诱导的HepG2细胞膜的受损程度。其中,FGE具有显著的抗氧化和抗炎特性,在酒精性肝损伤中具有潜在的应用前景,可以保护HepG2细胞免受酒精性氧化损伤,为开发具有护肝功能的食品提供了有益的线索。 展开更多
关键词 乳酸芽孢杆菌DU-106 肝损伤 氧化应激 抗炎 hepg2细胞
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基于转录组测序技术分析补骨脂素对HepG2细胞的作用机制 被引量:1
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作者 汪思云 李艺博 +1 位作者 谭春霞 卢涛 《临床输血与检验》 CAS 2024年第1期35-41,共7页
目的利用转录组测序(RNA-sequencing,RNA-seq)技术分析补骨脂素对肝癌HepG2细胞的作用机制。方法利用CCK-8法检测不同浓度的补骨脂素(0、62.5、125、250、500μM)作用HepG2细胞12 h和24 h后存活率的变化;流式细胞术检测250μM补骨脂素对... 目的利用转录组测序(RNA-sequencing,RNA-seq)技术分析补骨脂素对肝癌HepG2细胞的作用机制。方法利用CCK-8法检测不同浓度的补骨脂素(0、62.5、125、250、500μM)作用HepG2细胞12 h和24 h后存活率的变化;流式细胞术检测250μM补骨脂素对HepG2细胞处理24 h后细胞周期的变化;RNA-seq测序获得对照组和补骨脂素组差异表达基因并进行GO富集分析和KEGG通路分析;实时荧光定量PCR技术验证差异基因表达水平。结果与对照组相比,补骨脂素作用HepG2细胞后,其存活率明显下降(P<0.01),细胞周期在G0/G1期比例提高(P<0.05);RNA-seq测序分析共有286个差异显著基因,其中包括130个上调基因和156个下调基因;GO功能富集和KEGG信号通路主要集中在细胞周期相关生物学过程及信号通路;qPCR结果显示HepG2细胞经补骨脂素处理后p 53和GADD 45B基因上调(P<0.05,P<0.01),CDK 2、RRM2和CCND 1基因下调(P<0.05,P<0.01)。结论补骨脂素对HepG2细胞产生毒性,阻滞细胞周期进程,其作用机制可能与调控细胞周期相关基因(p 53,CDK2,GADD45B,CCND1,RRM2)的表达有关。 展开更多
关键词 补骨脂素 hepg2 RNA测序 细胞周期
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泽泻醇A对HepG2细胞脂质沉积的影响及其降脂活性研究
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作者 颜伟泓 张鸿燕 +4 位作者 李玲燕 曾敏洁 吴艺锦 陈全成 张伟云 《上海中医药杂志》 CSCD 2024年第10期63-70,共8页
目的通过体外细胞实验、网络药理学和分子对接技术,探究泽泻醇A的降脂作用机制。方法选用人肝癌HepG2细胞进行油红O染色实验和胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)含量测定,初步判断泽泻醇A是否具有改善HepG2细胞脂质沉积的活性;通过网络药理学收... 目的通过体外细胞实验、网络药理学和分子对接技术,探究泽泻醇A的降脂作用机制。方法选用人肝癌HepG2细胞进行油红O染色实验和胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)含量测定,初步判断泽泻醇A是否具有改善HepG2细胞脂质沉积的活性;通过网络药理学收集泽泻醇A和降血脂的靶点,根据二者的交集靶点绘制蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络和“泽泻醇A-潜在靶点-降血脂-通路”网络,并进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,最后将泽泻醇A与降血脂潜在靶点进行对接。结果细胞实验结果提示,泽泻醇A抑制了油酸-棕榈酸诱导的HepG2高脂细胞模型的脂质沉积;通过网络药理学筛选出泽泻醇A的11个降血脂潜在靶点,靶点蛋白富集通路主要有过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路等;分子对接结果显示泽泻醇A和潜在靶点具有较强结合活性。结论泽泻醇A可抑制HepG2高脂细胞模型的脂质沉积,推测其可能具有降脂活性,作用机制可能涉及PPAR等多个信号通路和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)等11个靶点,为今后研究泽泻醇A降脂活性及作用机制提供理论基础。 展开更多
关键词 高脂血症 泽泻醇A 降脂机制 hepg2细胞 网络药理学 分子对接 中药研究
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越橘叶黄酮脂质体制备及对HepG2细胞的影响 被引量:1
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作者 成圆 丁淼 +1 位作者 王思宇 樊梓鸾 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1996-2005,2030,共11页
对红豆越橘叶采用超声辅助提取和AB-8型大孔树脂纯化获得了黄酮含量高的馏分(L6),经HPLC-MS分析越橘叶黄酮为主要成分。以L6为芯材,采用乙醇注入法制备了脂质体L6-Lips,经不同质量分数羧甲基壳聚糖(CMCS)水溶液修饰制备了CMCS-L6-Lips... 对红豆越橘叶采用超声辅助提取和AB-8型大孔树脂纯化获得了黄酮含量高的馏分(L6),经HPLC-MS分析越橘叶黄酮为主要成分。以L6为芯材,采用乙醇注入法制备了脂质体L6-Lips,经不同质量分数羧甲基壳聚糖(CMCS)水溶液修饰制备了CMCS-L6-Lips。通过FTIR、粒径分析、Zeta电位和透析法对CMCS-L6-Lips进行了表征,探究其在不同pH下体外释放能力及对HepG2细胞抑制能力。结果表明,L6的黄酮含量可达899.44 mg/g,主要含有芦丁、槲皮素、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、槲皮素3-O-鼠李糖苷-7-O-葡萄糖苷、圣草酚-7-O-葡萄糖苷、儿茶素和绿原酸7种成分;CMCS溶液质量分数与CMCS-L6-Lips粒径、包封率、Zeta电位具有相关性。添加质量分数为0.4%CMCS水溶液时脂质体表面修饰效果最佳,此时,Zeta电位为–35.65 mV,表明CMCS成功附着在L6-Lips表面,且CMCS-L6-Lips颗粒之间的排斥力明显更强,稳定性更高。CMCS-L6-Lips具有pH敏感性,在pH=4.0时体外释放能力最高,动力学方程符合Weibull模型,为骨架溶蚀释放;CMCS-L6-Lips可有效抑制HepG2细胞增殖,减缓细胞迁移能力并阻滞细胞停留在S期和G2期。脂质体包封有效提高了越橘叶黄酮的溶解性,使细胞对药物摄取的能力提升,而CMCS的修饰增加了脂质体的靶向能力,有利于治疗肿瘤。 展开更多
关键词 越橘叶 黄酮 HPLC-MS 脂质体 pH敏感型 hepg2细胞 动力学方程 活性跟踪法 医药原料
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