Notch1在TGF-β1诱导心肌成纤维细胞向肌成纤维细胞转化中的作用

目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)诱导心肌成纤维细胞(CFs)向肌成纤维细胞(MFB)转分化过程中Notch1的变化情况,探讨在此转分化过程中Notch1的可能作用.方法:体外分离培养CFs,以10μg/LTGF-β1诱导CFs向MFB转分化.实验分为对照组,TGF-β1作用24,48,72h组,采用消化法测定羟脯氨酸(HYP)含量;免疫荧光、免疫印迹法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;实时定量PCR、免疫印迹法测定Notch1 mRNA及蛋白表达.利用γ分泌酶抑制剂DAPT(75μmol/L)阻断Notch1受体活化.实验分对照组,DAPT作用24,48,72h组,检测SMA及胶原的表达变化.结果:TGF-β1作用后,与对照组相比较α-SMA,HYP表达量随TGF-β1诱导时间的增加呈上升趋势,而Notch1则呈下降趋势,均以72h最显著(P<0.01);加入DAPT后,与对照组相比较α-SMA,HYP表达量随DAPT作用时间增加呈上升趋势,以72h最显著(P<0.01).结论:TGF-β1可以诱导CFs向MFB转分化,Notch1在此过程中的表达呈下降趋势,而DAPT阻断Notch1活化后可以促进CFs向MFB转分化.

软骨中间层蛋白1在心肌纤维化中的研究进展

心肌纤维化是心肌损伤后出现的病理性重塑,主要表现为富含胶原蛋白的细胞外基质过度沉积和纤维瘢痕形成,过度的心肌不良重塑最终导致心脏的收缩和舒张功能障碍,引起心律失常、心力衰竭等疾病。软骨中间层蛋白1(CILP-1)是一种细胞外基质蛋白,其主要发挥抗心肌纤维化的作用,但在特殊情况下也会促进心肌成纤维细胞增殖。CILP-1是一种可以便捷测量的生物标志物,相关临床试验结果也肯定了其作为心肌纤维化新型标志物的潜力,有望为心肌纤维化的预防和治疗提供新策略。