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心脏干细胞分泌的exosome对氧化应激下心肌细胞的保护作用研究 被引量:5
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作者 肖静 潘宇 +5 位作者 李晓红 姜霖 杨翔宇 吴岳恒 雷和平 余细勇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1656-1660,共5页
目的探索心脏干细胞分泌的外泌体(exosome)对体外氧化应激所致心肌细胞凋亡的保护作用。方法磁珠分选出Sca-1^+CPCs进行培养,流式细胞术鉴定;分离CPCs分泌的exosome,并用Western blot进行表型鉴定和用Nanosight进行粒径分析;免疫荧光法... 目的探索心脏干细胞分泌的外泌体(exosome)对体外氧化应激所致心肌细胞凋亡的保护作用。方法磁珠分选出Sca-1^+CPCs进行培养,流式细胞术鉴定;分离CPCs分泌的exosome,并用Western blot进行表型鉴定和用Nanosight进行粒径分析;免疫荧光法及PKH26标记技术观察心肌细胞H9c2对exosome的摄取作用;通过H_2O_2处理诱导H9c2细胞凋亡,用Western blot检测对照组与CPC-exo处理组凋亡相关蛋白水平,观察exosome对心肌细胞凋亡的保护作用。结果 1磁珠分选出的细胞用免疫荧光检测发现Sca-1呈阳性表达,且纯度可达95%以上。2从Sca-1^+CPCs细胞培养上清中提取出的exosome其表面标记蛋白CD63呈阳性表达,Nanosight结果显示大部分粒子都处于(82.33±3.06)nm(n=3)。免疫荧光显示H9c2细胞中可见大量PKH26标记的exosome在胞质聚集。3Western blot结果显示,与对照组相比,CPC-exo处理组总的caspase-3表达不变,而激活型caspase-3表达水平明显降低(P<0.05)。结论 CPCs分泌的exosome可被H9C2细胞所摄取,可以保护心肌细胞由于氧化应激引起的凋亡。 展开更多
关键词 心脏干细胞 外泌体 磁珠分选 旁分泌效应 氧化应激 凋亡
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心脏祖细胞来源的外泌体可减轻心肌梗死小鼠的心肌损伤:基于mTOR途径诱导Treg细胞分化
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作者 何艳娟 李卓颖 +2 位作者 申琳 石丁华 李申堂 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1644-1650,共7页
目的研究心脏祖细胞来源的外泌体(CPCs-Exos)对心肌梗死(MI)小鼠调节性T细胞(Treg)分化的影响及其作用机制。方法结扎小鼠左冠状动脉前降支制备MI动物模型。所有小鼠随机分成3组,即对照组(只开胸,不结扎)、MI组(结扎左冠状动脉前降支)和... 目的研究心脏祖细胞来源的外泌体(CPCs-Exos)对心肌梗死(MI)小鼠调节性T细胞(Treg)分化的影响及其作用机制。方法结扎小鼠左冠状动脉前降支制备MI动物模型。所有小鼠随机分成3组,即对照组(只开胸,不结扎)、MI组(结扎左冠状动脉前降支)和CPCs-Exos组(结扎左冠状动脉前降支后尾静脉注射CPCs-Exos)。收集小鼠血清与心脏组织,流式细胞术与全自动生化仪检测Treg细胞、CD4+IL-10+T细胞百分比及LDH、CK-MB含量,TTC染色检测小鼠心肌梗死面积。收集小鼠脾脏naive CD4+T细胞,并将细胞分成对照组、CD4+T细胞活化组(CD3+CD28)、CPCs-Exos处理活化CD4+T细胞组(CD3+CD28+CPCs-Exos)、mTOR激活剂(CD3+CD28+CPCs-Exos+mTOR activator)与抑制剂组(CD3+CD28+CPCs-Exos+mTOR inhibitor)。Western blotting法检测细胞中mTOR、p-mTOR表达水平,流式细胞术检测Treg、CD4+IL-10+T细胞百分比。结果整体动物实验结果显示,与对照组相比,MI组小鼠心肌梗死面积显著增加,血清中CK-MB(P=0.0002)、LDH(P<0.001)显著增多,Treg、CD4+IL-10+T细胞有增加趋势。与MI组相比,CPCs-Exos组小鼠梗死面积降低,CK-MB(P=0.003)、LDH(P=0.003)含量减少,Treg细胞(P=0.001)、CD4+IL-10+T(P=0.004)细胞百分比显著增加。离体细胞水平结果显示,与Control组相比,CD3+CD28组Treg细胞(P=0.03)、CD4+IL-10+T细胞百分比(P=0.004),mTOR(P=0.04)、p-mTOR(P=0.04)表达水平有增加趋势;与CD3+CD28组相比,CD3+CD28+CPCs-Exos组Treg细胞(P=0.01)、CD4+IL-10+T细胞百分比(P=0.004),mTOR(P=0.009)、p-mTOR(P=0.009)表达水平显著增加。与CD3+CD28+CPCs-Exos组相比,CD3+CD28+CPCs-Exos+mTOR activator组Treg细胞(P=0.04)、CD4+IL-10+T细胞(P=0.01)百分比显著增加,而CD3+CD28+CPCs-Exos+mTOR inhibitor组Treg细胞(P=0.04)、CD4+IL-10+T细胞百分比(P=0.04)显著降低。结论CPCs-Exos能够诱导Treg细胞分化,其机制与mTOR途径有关。 展开更多
关键词 心脏祖细胞来源的外泌体 MTOR 调节性T细胞 心肌损伤
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不同细胞来源外泌体保护心脏的特点与效应 被引量:2
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作者 蒲锐 陈子扬 袁凌燕 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第31期5065-5071,共7页
背景:越来越多的研究表明,外泌体已成为各种疾病诊断与治疗的新方向,在心脏保护中发挥重要作用,但其具体机制尚未完全阐明。目的:总结外泌体在心血管疾病中的诊断作用,并对不同细胞来源外泌体在心脏保护中的研究进行归纳总结,以期为更... 背景:越来越多的研究表明,外泌体已成为各种疾病诊断与治疗的新方向,在心脏保护中发挥重要作用,但其具体机制尚未完全阐明。目的:总结外泌体在心血管疾病中的诊断作用,并对不同细胞来源外泌体在心脏保护中的研究进行归纳总结,以期为更好地防治心血管疾病提供理论参考。方法:作者以“exosomes,cardioprotection,cardiomyocytes,endothelial cells,cardiac fibroblasts,cardiac progenitor cells,mesenchymal stem cells”为英文主题词和“外泌体,心脏保护,心肌细胞,内皮细胞,心脏成纤维细胞,心脏祖细胞,间充质干细胞”为中文主题词,检索1981至2020年间各种细胞来源外泌体与心脏保护相关的国内外文献。根据纳入及排除标准最终纳入72篇文献进行汇总与归纳。结果与结论:①外泌体与心血管疾病的发生发展关系密切,且在多种心血管疾病的筛查、诊断以及预后效果中发挥有益效应,因此外泌体可作为心血管疾病诊断的潜在生物标记物;②心肌细胞、内皮细胞、心脏成纤维细胞、心脏祖细胞和间充质干细胞来源外泌体介导miRNA与相关蛋白在心脏保护中发挥重要作用。 展开更多
关键词 外泌体 心脏保护 心肌细胞 内皮细胞 心脏成纤维细胞 心脏祖细胞 间充质干细胞 综述
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