Effects of Electrical Stimulation During Absolute Refractory Period on Contraction and Relaxation of Cardiomyocytes from Normal Guinea - pigs

Objectives To investi-gate the effect of electrical stimulation during absolute refractory period on contraction and relaxation of ventricular myocytes from normal guinea - pigs. Methods The guinea - pig ventricular myocytes were obtained by enzyme digesting, and the extent of its contraction and relaxation and Ca2+ transient were recorded through the motion edge detection system. Results (1) The contracting extent of guinea - pig ventricular myocytes increased 15.45±6.48% , and the peak velocity of shorting (contraction) and the peak veloci ty of relengthening (relaxation) increased 15.97 ± 8.37% and 21. 63±8. 06% respectively (n = 10); (2) The extent of ventricular myocytes fluorescence ra tio(360/380) (F360/F380) increased 22. 55±9. 08%, and the peak velocity of ventricular myocytes F360 /F380 increased 36. 75 ± 9. 77% and 23. 62±4. 47% during shorting and relengthening respectively (n = 6) . Conclusions Appropriate electrical stimulation may strengthen the contracting and relaxing function of normal guinea - pig ventricular myocytes.

Proposed case of mesalazine-induced cardiomyopathy in severe ulcerative colitis

Five-amino salicylic acids are recommended for use in the management of inflammatory bowel disease,cardiac complications are a rare although recognised phenomenon.This report aims to highlight this serious but rare adverse reaction.We report here a case of a young man presenting with cardiogenic shock in the context of recent mesalazine treatment in severe ulcerative colitis.

镍纹蛋白样β对脂多糖诱导心肌细胞损伤的抑制作用及其机制

目的探讨镍纹蛋白样β(Metrnβ)对脂多糖(LPS)诱导心肌细胞损伤的抑制作用及其可能的机制。方法取对数生长期的H9c2心肌细胞,将其分为LPS组、Metrnβ组、Metrnβ+LPS组及对照组。LPS组、Metrnβ组、Metrnβ+LPS组分别给予1 mg/L LPS、200 ng/mL Metrnβ、1 mg/L LPS+200 ng/mL Metrnβ,对照组给予等体积PBS,作用12 h。采用MTT法检测细胞增殖情况,ELISA法检测乳酸脱氢酶(LDH)、炎症反应相关因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1、IL-6]、氧化反应相关因子[活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)]及抗铁死亡蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)表达,Western blotting法检测炎症信号分子Toll样受体4(TLR4)、Gpx4蛋白相对表达量,总铁比色法检测细胞游离铁(Fe^(2+))含量。结果与Metrnβ组、对照组比较,LPS组及Metrnβ+LPS组细胞LDH、TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS、MDA表达均升高,细胞增殖率及GSH、Gpx4表达均降低,且LPS组变化更明显(P均<0.05)。与Metrnβ组、对照组比较,LPS组及Metrnβ+LPS组细胞Fe^(2+)含量升高、Gpx4蛋白相对表达量降低,且LPS组变化更明显(P均<0.05)。与Metrnβ组、对照组及Metrnβ+LPS组比较,LPS组TLR4蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。结论Metrnβ可以减轻LPS引起的心肌细胞损伤,其机制可能与减轻细胞氧化应激反应、炎症反应及铁死亡有关。

角蛋白CK10和CK19在组织工程皮肤和正常在体皮肤表达差异的意义

目的观察角蛋白CK10和CK19在组织工程皮肤和正常在体皮肤的表达,并探讨其差异表达的意义。方法用组织工程方法构建人全层皮肤,以正常在体皮肤为对照,免疫组化检测CK10和CK19在表皮层的表达。结果在组织工程皮肤中CK10表达阳性,CK19无明显阳性表达;正常在体皮肤CK10和CK19表达皆为阳性,其中CK19主要表达在基底膜附近。结论组织工程皮肤中表皮层细胞已经基本丧失了组织干细胞的特性,分化成熟。

镉诱导人外周血淋巴细胞金属硫蛋白-1基因亚型的表达

目的 研究金属硫蛋白- 1(MT- 1)基因在人外周血淋巴细胞 (HPBLs)中的基础表达和镉诱导表达水平。方法 应用RT- PCR方法检测HPBLs中 7种有功能的MT -1基因亚型的mRNA基础表达水平和不同时间、不同浓度镉诱导的表达水平。结果 HPBLsMT-1各亚型中 ,mRNAs的基础转录水平从高到低依次为MT -1X、MT- 1A、MT- 1H、MT- 1F、MT- 1E、MT- 1G ,而MT 1B没有表达 ,其中男性MT 1E的基础表达明显高于女性(P <0 . 0 5 )。在未引起细胞损伤时 ,80 μmol /LCdCl2 诱导 12小时可使MT- 1A ,MT- 1E ,MT 1XmRNA的转录水平开始显著增加 (P <0 . 0 5 ) ,4 0 μmol LCdCl2 诱导 4小时出现MT- 1FmRNA ,2 0 μmol/ LCdCl2 诱导 4小时出现MT- 1GmRNA ,80 μmol- LCdCl2 诱导 4小时出现MT -1HmRNA的转录水平开始显著增加 (P <0. 0 5 ) ,MT 1BmRNA表达无明显变化。结论 镉可诱导人外周血淋巴细胞MT-1F、MT -1G、MT- 1H、MT- 1XmRNA表达增加 ,并表现出剂量 -时间 -效应关系 ,可作为潜在的镉接触生物标志物。

以藻酸钙为载体的可注射性组织工程软骨和骨研究

目的在裸鼠背部皮下注射软骨细胞/藻酸钙复合物、骨髓基质成骨细胞/藻酸钙复合物,观察体内软骨、骨形成的可行性。方法分别从兔耳软骨和髂骨获取软骨细胞和骨髓基质干细胞,体外扩增培养,将获得的软骨细胞和骨髓基质成骨细胞与藻酸盐复合,注射于裸鼠背部皮下,以单纯藻酸钙植入作为对照组,6,12周后进行组织学检查和X线检查,观察软骨和骨的形成。结果注射软骨细胞复合物组,裸鼠背部皮下有软骨样组织形成,软骨细胞位于类似于正常软骨组织的陷窝中,注射骨髓基质成骨细胞复合物组,裸鼠背部皮下有骨样组织形成,具有骨髓腔样结构,而对照组无软骨或骨形成。结论藻酸钙可用作软骨和骨组织工程的支架材料,以藻酸钙为载体的可注射性组织工程软骨和骨是可行的。

卵巢早衰与卵子赠送22例分析

１９９２年１０月～１９９５年６月共进行卵巢早衰（ＰＯＦ）２２例３１周期卵子赠送。供者采用ＧｎＲＨ－ａ／ＨＭＧ／ｈＣＧ超排卵方案，受者采用外源性类固醇激素替代治疗（ＨＲＴ），周期第２１天行子宫内膜活检，选择子宫内膜分泌期病例采用受者丈夫精子于ＨＲＴ第１５～２０天进行体外授精和胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）。结果：临床妊娠率３６％（１１／３１），双胎妊娠４例，单胎任娠７例，１９９４年ｌ月１４日诞生国内首例ＰＯＦ卵子赠送新生儿，目前继续妊娠３例，流产６例。完整卵泡簇供卵组较ＩＶＦ－ＥＴ剩余卵子供卵组在移植胚胎数目、胚胎评分、移植后妊娠率显著提高，分别为Ｐ＜０．０５、＜０．００１及＜０．０５；而流产率显著降低，Ｐ＜０．００１；受卵者年龄＜３０岁组和＞３０组在移植胚胎数目和胚胎评分无显著差异（Ｐ均＞０．０５），而临床妊娠率分别为４２％和３２％，存在明显差异（Ｐ＜０．０５）。在ＨＲＴ第１６～１８天移植胚胎获得妊娠率较高（９／２２），大于ＨＲＴ第２０天或胚胎发育与子宫内膜发育相差超过±２天无妊娠病例。以上结果提示：ＨＲＴ和卵子赠送是ＰＯＦ患者获得妊娠的有效方法；卵子质量是影响胚胎发育、移植后妊娠率及自然流产率的重要因素；子宫内?

重度烧伤休克大鼠L-选择素转录水平表达的研究

目的和方法：２４只ＳＤ大鼠随机分为３组：正常对照组、烧伤１ｈ组、烧伤３ｈ组。用８０℃热水烫伤腰部以下肢体３０ｓ造成深Ⅱ度烧伤，复制大鼠重度烧伤休克模型。采集３组动物外周血，分离提取外周血白细胞总ＲＮＡ，与长臂光敏生物素标记的Ｌ－选择素探针进行点杂交。结果：与正常对照组比，两烧伤组Ｌ－选择素转录均下调，烧伤３ｈ组比烧伤１ｈ组又有下降。结论：休克时Ｌ－选择素转录减少可以减轻游离的白细胞进一步附壁粘着，这可能是休克时机体的自身保护机制之一；Ｌ－选择素转录减少可能造成炎症或感染时白细胞游出的减少，使机体的抵抗力下降。

以CD56^+小肠粒细胞肉瘤为首发表现的急性单核细胞白血病1例并文献复习

目的探讨粒细胞肉瘤的发病机制、诊治与转归。方法分析1例以CD56+小肠粒细胞肉瘤为首发表现的急性单核细胞白血病患者的临床病理特征及实验室检查结果,并复习相关文献。结果收治1例男性患者,39岁。小肠系膜切除物免疫组化检测示:粒细胞肉瘤,CD56阳性;骨髓细胞学检查示:急性单核细胞白血病,诊断为急性单核细胞白血病伴小肠粒细胞肉瘤。经IA方案诱导化疗后疾病达完全缓解,继续IA方案巩固化疗,拟行异基因造血干细胞移植。结论以小肠粒细胞肉瘤为首发表现的急性白血病较为少见。粒细胞肉瘤的预后差,CD56抗原阳性提示预后不良,经诱导化疗获疾病缓解的患者应尽快行异基因造血干细胞移植以期达到长期生存。

小鼠超排后的取卵时间对体外受精率的影响

为了提高小鼠的体外受精率,对ICR和C57BL/6J小鼠进行超数排卵,并观察超排后12～18h内每间隔1h所取卵的态及其体外受精(IVF)率。结果显示,注射hCG后13h、14h所取卵的体外受精率最高;其中超排后14h取卵的异常卵比例最低。实验表明,ICR和C57BL/6J小鼠IVF的最佳取卵时间为超数排卵后14h。在这之前或之后,体外受精率均有不同程度的下降。因此,准确掌握超数排卵后的取卵时间是提高体外受精率的关键之一。

大阪鲫鱼两种卵黄蛋白免疫细胞化学的研究

以电泳提纯的卵黄脂磷蛋白和卵黄蛋白Ｌ制备兔抗两种蛋白的抗血清。采用ＰＡＰ法对性腺成熟雌性大阪鲫鱼的肝细胞和卵母细胞进行两种蛋白免疫细胞化学定位研究。肝细胞的粗面内质网上有强烈的卵黄脂磷蛋白的阳性反应，特别是在线粒体的基质中也发现卵黄脂磷蛋白的阳性反应。而另外一种类似于卵黄高磷蛋白的卵黄蛋白──卵黄蛋白Ｌ在肝细胞的粗面内质网和线粒体均呈现阴性反应。提示卵黄脂磷蛋白的前体物质存在于肝细胞的粗面内质网和线粒体中，而卵黄蛋白Ｌ则不是来源于肝细胞。卵母细胞的卵黄颗粒上两种蛋白均呈现阳性反应。卵母细胞外的滤泡细胞也存在卵黄脂磷蛋白的阳性反应。透明带和卵母细胞表面的凹陷中存在卵黄脂磷蛋白的阳性反应颗粒物质，并发现大量纤维状物质存在于透明带和卵母细胞表面。这揭示卵黄脂磷蛋白的前体物质可能首先进入滤泡细胞，分解后经透明带被卵母细胞吞噬摄入，并与卵黄蛋白Ｌ共同存在于卵黄颗粒上。

氢化可的松琥珀酸钠对人和豚鼠心肌细胞钠电流的影响

目的 研究氢化可的松琥珀酸钠对人心房肌细胞和豚鼠心室肌细胞钠电流的影响。方法 应用酶解法分离单个心肌细胞 ,应用全细胞膜片钳技术记录氢化可的松琥珀酸钠对钠电流的作用。结果 氢化可的松琥珀酸钠 (1,3 ,10 μmol·L- 1)浓度依赖性地抑制人心房肌细胞和豚鼠心室肌细胞钠电流 ,IC5 0 分别为 6 97和 8 74μmol·L- 1。氢化可的松琥珀酸钠不改变INa的最大激活电压。氢化可的松琥珀酸钠对钠电流的抑制作用起效快 ,见于用药后 1～ 3min。结论 氢化可的松琥珀酸钠浓度依赖性地抑制钠电流 ,此作用出现快 。

SB203580对小鼠造血组织辐射损伤的保护作用

目的观察SB203580对接受γ射线照射的C57BL/6小鼠造血组织损伤的保护作用。方法小鼠随机分为对照(Ctr)组、照射(IR)组及SB203580给药(SB)组,以6.0 Gy 137Csγ射线全身均匀照射SB组和IR组的C57BL/6小鼠。收集并计数外周血红细胞、白细胞和血小板,以及单侧股骨骨髓有核细胞(BMMNC);骨髓细胞半固体培养法检测BMMNC增殖能力。另外收集小鼠BMMNC,同样分组,IR组与SB组细胞进行1 Gy体外照射,照射之后孵育过夜,酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果 SB组外周血白细胞、血小板的数量分别比IR组高111.8%和157.7%(P<0.05);SB组BMMNC较IR组高135.4%,CFU-GM高188.5%(P<0.05);SB组BMMNC内ROS较IR组低56.2%(P<0.05)。结论 SB203580对照射造成的小鼠造血组织损伤具有一定的保护作用,这种保护作用可能与其降低照射后细胞内ROS水平有关。

三维斑点追踪超声心动图在心尖肥厚型心肌病诊断中的应用

目的应用三维斑点追踪超声心动图(three-dimensional speckle tracking echocardiography,3D-STE)定量测定其心尖部心肌应变及旋转角度,探讨3D-STE在心尖肥厚型心肌病(apical hypertrophic cardiomyopathy,AHCM)诊断中的应用价值。方法分别对42例AHCM患者和20例正常被检者行心脏磁共振检查及超声心动图检查。将42例AHCM患者根据其MRI测量的左心室心尖部心肌厚度进行分型,其中早期心尖肥厚型心肌病患者(P-AHCM,舒张末期心尖壁厚度≥12 mm且<15 mm)20例、典型心尖肥厚型心肌病(T-AHCM,舒张末期心尖壁厚度≥15 mm)22例。所有受检者应用彩色超声诊断仪获取二维及三维全容积动态图像,并对左心室整体三维应变峰值(left ventricle global 3D strain,LVG3DS)、左心室心尖各节段三维应变峰值(left ventricle 3D strain,LV3DS)等三维应变参数及左心室心尖部各节段旋转角度(rotation angle,Rot)、左心室整体旋转角度(global rotation angle,G-Rot)进行分析,比较三组间上述指标的差异。结果与对照组比较,P-AHCM组和T-AHCM组的LVG3DS、LV3DS均减低(P<0.01),且T-AHCM组LV3DS减低更为显著(P<0.05),而P-AHCM组和T-AHCM组间的LVG3DS差异无统计学意义(P>0.05)。左心室心尖部旋转角度在T-AHCM组最高,P-AHCM组次之,对照组最低(P<0.01)。结论3D-STE能够定量测定AHCM患者左室心尖部心肌应变及旋转运动的改变,常规超声心动图结合3D-STE检查能够提高AHCM的诊断准确率。

二维斑点追踪成像心脏淀粉样变与其他引起左心室肥厚的疾病左心室旋转和扭转运动的研究

目的应用斑点追踪成像（STI）技术测量心脏淀粉样变（CA）与其他引起左心室肥厚的疾病左心室短轴方向旋转和扭转角度,探讨STI评价CA患者左心室旋转和扭转运动的临床价值。方法 24例CA患者（CA组）,其中男性15例,女性9例;年龄42-70岁,平均57.25岁。21例高血压左心室肥厚（HLVH）患者（HLVH组）,其中男性13例,女性8例;年龄39-73岁,平均年龄54.24岁。15例肥厚型心肌病（HCM）患者（HCM组）,其中男性9例,女性6例;年龄41-69岁,平均年龄55.07岁。健康志愿者28例（对照组）,其中男性17例,女性11例;年龄42-72岁,平均年龄54.75岁。对24例CA、21例HLVH、15例HCM及28例健康志愿者,分别行二维超声心动图检查,分别采集左心室短轴图像,测量各平面的内膜下心肌旋转（endo-rot）、外膜下心肌旋转（epi-rot）、平面旋转（bulk-rot）及跨壁扭转（mural-tor）峰值。计算左心室整体扭转（lv-tor）峰值。结果 1与对照组比,CA组各个水平旋转及扭转峰值、lv-tor峰值均减低（P〈0.05）;HLVH组心尖水平endo-rot、epi-rot、bulk-rot峰值减低（P〈0.05）;HCM组二尖瓣水平endo-rot、mural-tor峰值减低（P〈0.05）,心尖水平endo-rot、epi-rot、bulk-rot峰值明显减低（P〈0.005）。2CA组二尖瓣水平各旋转及扭转峰值低于HLVH组及HCM组（P〈0.05）,lv-tor峰值低于HLVH组（P〈0.05）。3HCM组与HLVH组比较,各旋转及扭转峰值差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 CA、HCM、HLVH患者心功能受损,左心室旋转及扭转运动发生变化,CA表现在全部水平及整体减低,HCM组及HLVH组主要集中在心尖水平减低,与HCM及HLVH组相比,CA旋转及扭转运动主要集中在基底水平,示二维STI能够从短轴各平面心肌旋转和扭转运动的角度更准确及敏感反映CA患者心肌功能变化。

轮状病毒肠炎伴心肌损害患儿血清细胞因子表达的相关性研究

目的评价细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白介素-6(IL-6)和转化生长因子-β(TGF-β)在轮状病毒肠炎伴心肌损害患儿早期诊断和治疗中的临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TGF-β、IL-6,化学发光法检测ICAM-1。结果中、重型轮状病毒肠炎伴心肌损害患儿血液中ICAM-1和IL-6水平明显高于轻型轮状病毒肠炎伴心肌损害患儿和健康对照组儿童;但TGF-β水平明显低于轻型轮状病毒肠炎伴心肌损害患儿和健康对照组儿童。不同病情轮状病毒肠炎伴心肌损害患儿血液中ICAM-1和IL-6与病情呈正相关。结论血清ICAM-1、IL-6和TGF-β联合检测能够早期、准确、灵敏地诊断轮状病毒肠炎伴心肌损害,尤其是IL-6水平的变化,为判断预后及病情发展提供了有效的免疫学依据。

牛、羊卵母细胞孤雌激活的研究

主要比较了离子霉素、电脉冲及培养基更换对牛羊体外成熟卵母细胞孤雌激活的影响。两种方法对牛胚胎的研究中,牛胚胎卵裂率无显著差异(90.61%vs94.40%,P>0.05),而离子霉素激活胚胎的囊胚发育率极显著高于电激活方法(12.3%vs2.4%,P<0.01)。两种方法对羊胚胎的研究中,羊胚胎卵裂率无显著差异(72.4%vs77.4%,P>0.05)。但是离子霉素激活胚胎的囊胚发育率显著高于电激活方法(3.67%vs10.4%,P<0.05)。本试验还采用两种方法来培养牛化学激活孤雌胚。方法一是把化学激活牛体外成熟卵母细胞放于SOFaa(Synthetic Oviduct Fluid aa)培养基中连续培养7d;方法二是把化学激活牛体外成熟卵母细胞放于SOFaa培养基中4 d后,再转移进入含有10%FBS(Fetal Bovine Serum)的SOFaa培养基中继续培养3 d。试验结果表明:方法一中的囊胚发育率显著高于方法二(11.64%vs3.49%,P<0.01)。这也说明了更换培养基不利于其体外囊胚发育率。

Ero1α在缺氧复氧致H9C2细胞内质网应激时的表达变化及意义

目的:观察内质网氧化还原酶(Endoplasmic oxidoreductin-1-like protein alpha,Ero1α)表达与内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)、细胞凋亡的关系。方法:将培养的H9C2心肌细胞随机分组:对照组(Control组)、缺氧/复氧1、3、6、12 h组(H/R1组,H/R3组,H/R6组,H/R12组)、4-苯基丁酸钠预处理+缺氧复氧6 h组(4PBA+H/R6组)。对照组心肌细胞正常培养至实验结束,H/R组行缺氧3 h后复氧1、3、6、12 h,4PBA+H/R6组分别于缺氧前2 h给4PBA再行缺氧/复氧6 h过程。Hoechst33258染色荧光显微镜下观察细胞凋亡情况。Western blot测定Ero1α,内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白(CHOP)、半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶12(caspase-12)的表达。结果:与对照组比较,Ero1α蛋白表达水平随着复氧时间的延长Ero1α表达量逐渐升高(P<0.01),在复氧3 h明显升高,6 h达到高点。Grp78在缺氧复氧后即明显升高(P<0.01),在复氧3 h达到高峰。细胞凋亡率也显著升高,其中复氧6 h最为显著。以缺氧3 h复氧6 h作为观测点,H/R6组Ero1α、GRP78、CHOP、Caspase-12蛋白表达较对照组明显增加(P<0.01);给予4PBA干预后,Ero1α、GRP78、CHOP、caspase-12蛋白表达较H/R6组明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论:缺氧复氧能够诱导心肌细胞凋亡及内质网应激,缺氧复氧诱导大鼠心肌细胞内质网应激时Ero1α的表达可出现相应的变化并与细胞凋亡相关。

葡萄糖替硝唑注射液的细菌内毒素测定

用细菌内毒素测定法检测替硝唑注射液细菌内毒素 ,重现性好 ,对鲎试剂无干扰 ,供试液浓度无需稀释 ,可有效地控制葡萄糖替硝唑注射液的质量。

红细胞参数在慢性肾衰中的应用

目的 探讨红细胞相关参数在慢性肾衰(CRF)中的应用.方法 采用SYSMEX XT-2000i型血细胞分析仪测定54例正常对照和54例CRF患者血常规.结果 ①病例组RBC、HGB显著低于对照组(P【0.01),RDW显著高于对照组;网织红细胞参教RET%明显高于照组(P【0.01),MFR、IRF明显高于对照组(P【0.05),HFR明显低于对照组(P【0.05),LFR低于对照组(P【0.05);②治疗后与治疗前比RET#、RET%、MCV、RDW有显著性差异,治疗后RET#明显高于治疗前(P【0.01),RET%、MCV、RDW高于治疗前(P【0.05);③RBC、HGB、RET#、RET%、HFR、RDW在对照组及CRF各组间的差别有统计学意义,其中BDW(P【0.05),其余的5项参数(P【0.01).结论 RBC、RET相关参数在CRD临床应用中具有一定的意义.