ITP中T细胞活化信号分子c-Cbl和Cbl-b的表达变化

目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)中T细胞活化信号通路相关分子Cbl-b和c-Cbl基因的表达情况.方法:利用SYBR Green实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测18例ITP患者外周血单个核细胞(PBMC)中Cbl-b和c-Cbl基因的表达水平,20例健康成人作为对照.结果:ITP组Cbl-b的表达水平(中位数为0.091%)与健康成人组Cbl-b的表达水平(中位数为0.366%)相比,明显降低(P<0.001);而c-Cbl基因在ITP组中的表达水平(中位数为0.372%)与健康成人组的表达水平(中位数为0.298%)相比没有统计学差异,但c-Cbl基因在ITP女性患者样本中的表达水平(中位数为0.236%)明显低于男性患者样本c-Cbl的表达水平(中位数为0.479%)(P=0.039).结论:ITP患者外周血中Cbl-b表达下调,可能是其T细胞免疫异常活化的原因之一.

B7H3和c-Cbl基因在多发性骨髓瘤中的表达水平及临床意义

目的探讨共刺激因子B7同源体3(B7H3)和泛素连接酶c(c-Cbl)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达水平及临床意义。方法选取该院2017年1月至2018年9月收治的92例MM患者纳入MM组。选取90例同期同年龄层来该院体检的健康者纳入对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应测定MM组和对照组血清B7H3和c-Cbl的表达水平。通过Pearson相关分析B7H3和c-Cbl的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同B7H3和c-Cbl表达水平患者的生存情况。通过Cox回归模型分析患者预后的影响因素。结果MM组血清B7H3表达水平较对照组升高,而c-Cbl表达水平较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。MM患者血清B7H3表达水平与c-Cbl表达水平呈负相关(r=-0.818,P<0.05)。不同分化程度和国际分期系统(ISS)分期MM患者血清B7H3、c-Cbl表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。B7H3高表达组治疗有效率较B7H3低表达组降低,而c-Cbl高表达组治疗有效率较c-Cbl低表达组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。B7H3高表达组3年总生存率较B7H3低表达组降低,而c-Cbl高表达组3年总生存率较c-Cbl低表达组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析结果显示,ISS分期为Ⅱ、Ⅲ期,分化程度为中、高分化,B7H3≥3.52,以及c-Cbl≤0.73是影响MM患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论MM患者血清B7H3水平升高、c-Cbl水平降低,且均与分化程度和ISS分期有关。B7H3水平升高和c-Cbl水平降低时,不仅降低了MM患者的治疗有效率,更降低了MM患者的生存率,对临床进行针对性干预治疗具有重要指导意义。

E3泛素连接酶c-CBL对血管紧张素Ⅱ诱导后小鼠原代心肌成纤维细胞表型转换影响

目的探讨E3泛素连接酶c-CBL对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导后小鼠原代心肌成纤维细胞表型转换的影响。方法将细胞分为对照组(未刺激)与AngⅡ刺激组(不同浓度AngⅡ刺激细胞24 h),荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和Western blot检测c-CBL、α-平滑肌肌动蛋白(αSMA)表达。应用小干扰RNA转染法建立低表达c-CBL细胞(si-CBL)后,将细胞分为si-control组(小干扰RNA对照转染24 h),si-CBL组(c-CBL小干扰RNA转染24 h),si-control+AngⅡ组(小干扰RNA对照转染24 h后给予AngⅡ刺激24 h)以及si-CBL+AngⅡ组(c-CBL小干扰RNA转染24 h后给予AngⅡ刺激24 h)。应用荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞c-CBL、αSMA和胶原1(collagen 1)表达,应用免疫荧光染色检测各组细胞collagen 1表达。结果 AngⅡ组αSMA、c-CBL基因mRNA和蛋白均明显高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。siCBL组c-CBL基因mRNA及蛋白的表达显著低于si-control组,差异有统计学意义(P <0. 05)。AngⅡ刺激后,si-control+AngⅡ组和si-CBL+AngⅡ组αSMA基因mRNA、蛋白的表达均较si-control组和si-CBL组明显增加,si-CBL+AngⅡ组αSMA基因mRNA和蛋白均明显低于si-control+AngⅡ组,差异有统计学意义(P <0. 05)。AngⅡ刺激后,si-control+AngⅡ组和siCBL+AngⅡ组collagen 1基因mRNA均较si-control组和si-CBL组明显增加,且si-CBL+AngⅡ组collagen 1基因mRNA水平明显低于si-control+AngⅡ组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论 c-CBL可影响AngⅡ诱导后小鼠原代心肌成纤维细胞的表型转换。