上皮性卵巢癌血清人附睾分泌蛋白4和第二线粒体caspase激活蛋白检测的临床意义

目的探究上皮性卵巢癌的血清人附睾分泌蛋白4(human epididymis protein 4,HE4)、第二线粒体caspase激活蛋白(second mitochondrial activator of caspase,Smac)表达及临床鉴定价值。方法选取2018年4月至2019年8月湖南省常德市第一人民医院手术切除或活检确诊为上皮性卵巢癌患者46例以及良性卵巢肿瘤患者40例分别作为恶性组与良性组,另选取同期来院体检的健康女性40例作为对照组,检测全部研究对象的HE4、Smac表达情况并计算表达阳性率,比较分析HE4、Smac表达对上皮性卵巢癌的诊断价值。结果Smac水平对照组高于良性组和恶性组,良性组高于恶性组,差异有显著性(P<0.05);HE4水平对照组低于良性组和恶性组,良性组低于恶性组,差异有显著性(P<0.05);Smac、HE4阳性率对照组低于良性组和恶性组,良性组低于恶性组,差异有显著性(P<0.05)。病理分级Ⅰ级患者Smac水平高于Ⅱ级和Ⅲ级,Ⅱ级高于Ⅲ级,差异有显著性(P<0.05);Ⅰ级患者HE4水平低于Ⅱ级和Ⅲ级,Ⅱ级低于Ⅲ级,差异有显著性(P<0.05)。HE4、Smac联合诊断的特异度、阴性预测值均高于单一指标,差异有显著性(P<0.05),但灵敏度、阳性预测值比较,差异无显著性(P>0.05)。术后1周,恶性组的Smac水平低于良性组,HE4水平高于良性组,差异有显著性(P<0.05)。结论Smac、HE4对于上皮性卵巢癌诊断均具有一定的诊断价值,联合诊断价值更高,而且能够监测围术期病情变化,具有较高的应用价值。

NOS2基因诱导Caspase－3和caspase－4激活

目的本课题拟探讨内源性一氧化氮在FAS／FASL诱导的细胞凋亡中是否细胞内质网细胞器也参与此凋亡过程，以期了解许多肿瘤组织表达诱导性一氧化氮合成酶的分子和细胞学机制。方法用短暂转染在非洲绿猴肾细胞Cos-7中进行重组质粒载体转染。一氧化氮表达通过ponastroneA试剂进行诱导表达实现。Caspase活性通过相应试剂盒进行检测。结果内源性一氧化氮诱导的细胞凋亡中，caspase－4激酶活性亦显增加。结论细胞内质网细胞器也参与内源性一氧化氮在FAS／FASL诱导的细胞凋亡。

第二线粒体源性Caspases激活因子与非小细胞肺癌术后辅助化疗患者预后转归和生存期限的相关性

目的评价第二线粒体源性Caspases激活因子(Smac、Survivin、Bax和Bcl-2蛋白)与非小细胞肺癌术后辅助化疗患者预后转归和生存期限的相关性。方法选取2015年6月至2017年10月我院治疗的70例非小细胞肺癌患者作为研究对象,正常肺部组织为由疑似肺癌患者经皮穿刺肺活检法取得并经病理分析无异常的组织。术后辅助化疗采用DP方案。Western Blot法检测Smac、Survivin、Bax和Bcl-2蛋白表达量;采用Kaplan-Meier法计算患者3年生存率。结果不同TNM分期患者的Smac蛋白表达情况比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。Cox多因素回归模型分析结果显示,Smac蛋白表达情况为影响非小细胞肺癌患者预后的独立指标(P<0.05)。Western Blot结果显示,与正常肺部组织相比,非小细胞肺癌组织中的Smac、Bax蛋白表达量降低,Caspase 9、Bcl-2蛋白表达量升高(P<0.01)。结论第二线粒体源性Caspases激活因子(Smac、Survivin、Bax和Bcl-2蛋白)可作为非小细胞肺癌术后辅助化疗患者预后转归和生存期限的评估标志。

CASPASE与细胞凋亡

细胞凋亡是细胞生命的基本特征之一,凋亡过程中可分为启动期、效应期和降解期。其效应期中Caspase激活是一重要生化事件,本文就Caspase酶的家族成员、作用底物、激活及调控等作一简单探讨。

穿心莲内酯诱导人食管癌Ec9706细胞凋亡机制研究

目的在前期工作基础上进一步研究穿心莲内酯(an-drographolide,AD)抑制人食营癌Ec9706细胞增殖和诱导凋亡的机制。方法分光光度法分别检测AD处理Ec9706细胞6、12、18h对caspase-3活性的影响以及AD处理Ec9706细胞6h对caspase-8和caspase-9活性的影响,并用MTT法比较研究在有或无caspase广谱抑制剂Z-VAD-FMK时AD对Ec9706细胞增殖的影响;免疫组化法分析AD处理Ec9706细胞6h对bcl-2基因表达的影响。结果AD(30、60mg.L-1)下调bcl-2基因的表达(P<0.01),提高Ec9706细胞caspase-3和caspase-9活性,对caspase-8活性无明显影响,caspase广谱抑制剂Z-VAD-FMK减弱AD对Ec9706的细胞毒作用。结论AD通过下调bcl-2,激活caspase-9、caspase-3诱导Ec9706细胞凋亡。

丁苯酞软胶囊对颈动脉狭窄大鼠大脑缺血再灌注后Smac蛋白的影响

目的构建颈动脉狭窄大鼠模型,探讨丁苯酞对模型大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,以及对次级线粒体源性caspase激活因子(Smac)蛋白的影响。方法75只SD大鼠随机分为假手术组(15只)和颈动脉狭窄模型组(60只),随机分为对照组、低剂量丁苯酞组、中剂量丁苯酞组和高剂量丁苯酞组,每组15只。平衡木实验(BBT)进行神经功能评分,TUNEL染色检测细胞凋亡,Western blot检测Smac蛋白表达。结果假手术组、对照组、低剂量丁苯酞组、中剂量丁苯酞组、高剂量丁苯酞组SD大鼠BBT评分为1.07±0.12、5.64±1.06、4.84±0.82、4.13±0.65、3.76±0.52,凋亡指数分别为0.00±0.00、0.75±0.18、0.62±0.14、0.47±0.10、0.32±0.07,Smac蛋白相对灰度值分别为0.076±0.012、0.852±0.143、0.705±0.127、0.382±0.073、0.115±0.024,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论丁苯酞可以显著降低Smac蛋白表达,抑制颈动脉狭窄大鼠缺血再灌注损伤诱发的神经元凋亡,发挥神经功能保护作用。

雷酚萜甲醚抑制人胃癌细胞AGS增殖及诱导凋亡作用研究

目的研究雷酚萜甲醚(TME)在体外对人胃癌AGS细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察TME对人胃癌AGS细胞、正常人胃黏膜上皮细胞GES-1的增殖抑制作用;克隆形成实验观察细胞克隆的形成;光镜下及AO/EB染色观察细胞形态;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;JC-1染色和DCFH-DA荧光探针分别检测TME对AGS细胞线粒体膜电位的改变和活性氧产生的影响;Western blot检测凋亡蛋白caspase-3、caspase-8和Bcl-2、Bax表达情况,以及caspase广谱抑制剂z-VAD-fmk对caspase-3、caspase-8蛋白表达的影响。结果 TME可明显抑制人胃癌AGS细胞的增殖,并诱导其凋亡,作用48 h时IC50为23.85μmol·L-1,而对正常人胃黏膜上皮细胞GES-1的抑制作用明显低于AGS。TME能够抑制AGS细胞克隆形成,并使细胞出现明显的凋亡形态改变。Annexin V-FITC/PI双染实验表明,随TME剂量的增加,细胞凋亡百分数也增加。JC-1和DCFH-DA结果显示,TME使细胞内线粒体膜电位降低、细胞内活性氧水平增加。Western blot结果显示,TME增加了Bax/Bcl-2的比例,激活caspase-8和caspase-3,并且加入z-VAD-fmk后,caspase-3、caspase-8蛋白的表达降低。TME可使AGS细胞周期阻滞于G0/G1期。结论 TME能抑制人胃癌AGS细胞增殖和诱导凋亡,抗肿瘤作用机制与激活凋亡通路、影响细胞周期及Bcl-2蛋白家族相关。

藤梨根诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡的调节机制

目的研究藤梨根(Actinidia arguta)抑制人食管癌Eca-109细胞增殖和诱导凋亡的机制。方法采用MTT比色法,检测藤梨根正丁醇药液在不同浓度(1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml等)及不同时间(24 h、48 h、72 h等)对Eca-109细胞生长抑制作用;采用免疫组化SP法,检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及Caspase的表达。结果藤梨根正丁醇药液对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用,随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强,其生长抑制率可达87.2%。瘤细胞作用24 h﹑48 h﹑72 h后分别与对照组比较,用药组Bax蛋白表达明显增强(P<0.01);同时伴有Bcl-2表达减弱7,2 h后最明显,差异有显著意义(P<0.01)。藤梨根正丁醇药液促进Caspase-3、Caspase-9表达明显增强,而对Caspase-8表达影响较小。结论藤梨根可通过下调Bcl-2表达,激活Caspase-9、Caspase-3诱导Eca-109细胞凋亡。

两种藤梨根制剂促凋亡作用的实验研究

目的研究两种藤梨根制剂促进人食管癌Eca-109细胞凋亡的机制及差异。方法采用MTT比色法检测藤梨根正丁醇药液及乙酸乙酯药液在不同浓度(1μg/mL、10μg/mL、100μg/mL等)及不同时间(24h、48h、72h等)对Eca-109细胞生长的抑制作用;采用TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应;采用免疫组化SP法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及caspase的表达。结果藤梨根正丁醇药液对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用,随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强,其生长抑制率可达87.2%。两种藤梨根制剂对瘤细胞有明显的凋亡效应,而在对照组未见有明显凋亡现象。瘤细胞作用24h、48h、72h后分别与对照组比较,用药组Bax蛋白表达明显增强(P<0.01);同时伴有Bcl-2表达减弱,72h后最明显,差异有显著意义(P<0.01)。藤梨根正丁醇药液促进caspase-3、caspase-9表达明显增强,而对caspase-8表达影响较小。藤梨根乙酸乙酯药液作用于肿瘤细胞时也可观察到类似的效应,且正丁醇药液对肿瘤细胞生长的抑制率高于乙酸乙酯药液。结论藤梨根可通过下调Bcl-2表达,激活caspase-9、caspase-3诱导Eca-109细胞凋亡。

上皮性卵巢癌血清Smac表达的临床意义

目的:探讨血清Smac检测在上皮性卵巢癌(EOC)诊断和病情监测中的临床意义。方法:选取2015年12月—2017年1月于天津市中心妇产科医院经手术治疗的100例卵巢肿物患者,术后病理诊断明确,根据良恶性分为卵巢良性肿瘤组40例,上皮性卵巢癌组60例;另选取本院体检合格的健康对照组40例。分别收集手术前后及化疗过程中的清晨空腹血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清Smac水平。结果:血清Smac在上皮性卵巢癌组中的表达水平低于健康对照组和卵巢良性肿瘤组(P<0.05);根据受试者工作特征(ROC)曲线,确定血清Smac表达的临界值为429.39 pmol/L,Smac检测的敏感度为91.67%,特异度为95%;Smac在Ⅰ+Ⅱ期EOC的阳性数为14例,阳性率为87.50%;在Ⅲ+Ⅳ期的阳性数为41例,阳性率为93.18%,差异无统计学意义(P>0.05);在EOC中,血清Smac与患者年龄、病理类型、有无腹水、中性粒细胞/淋巴细胞(NLR)和血小板/淋巴细胞(PLR)无关,与国际妇产科联盟(FIGO)分期和淋巴结转移有关;手术后血清Smac的表达水平高于术前,差异有统计学意义(P=0.000),随着化疗次数的增加,Smac表达水平逐渐升高,Smac在第2疗程结束后升至正常。结论:血清Smac表达水平对EOC的早期诊断,鉴别卵巢良恶性肿瘤及EOC术后的病情监测均有一定临床价值。

藤梨根乙酸乙酯制剂诱导食管癌细胞凋亡机制的观察

目的：探讨藤梨根（Actinidia arguta）乙酸乙酯制剂促进人食管癌Eca-109细胞凋亡的机制。方法采用MTT比色法，检测藤梨根乙酸乙酯药液在不同浓度（1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml等）及不同时间（24h、48h、72h等）对Eca-109细胞生长抑制作用；采用TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应；采用免疫组化SP法，检测凋亡相关蛋白Bax 、Bcl-2及caspase的表达。结果藤梨根乙酸乙酯药液对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用，随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强，其生长抑制率可达87.2%。藤梨根制剂对瘤细胞有明显的凋亡效应，而在对照组，未见有明显凋亡现象。瘤细胞作用24h、48h、72h后分别与对照组比较，用药组Bax蛋白表达明显增强（P〈0.01）；同时伴有Bcl-2表达减弱，72h后最明显，差异有统计学意义（P〈0.01）。藤梨根药液促进caspase-3、caspase-9表达明显增强，而对caspase-8表达影响较小。结论藤梨根可通过下调Bcl-2表达，激活caspase-9、caspase-3诱导Eca-109细胞凋亡。

延迟预适应减少大鼠心肌缺血再灌注的细胞凋亡

目的以SMAC和XIAP的表达变化为着眼点,探讨心肌缺血延迟预适应抗心缺血再灌注(MI/R)后细胞凋亡的机制。方法SD大鼠分为对照组、假手术组、缺血再灌注组、延迟缺血预处理组。缺血再灌注组采用经典大鼠冠脉结扎,缺血1 h,再灌1 h。延迟缺血预处理组采用缺血5 min,再灌5 min,反复循环3次,24 h后缺血1 h,再灌1 h。流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率,检测caspase-3活性,Western blot分析胞质SMAC及XIAP的表达。结果与对照组相比,缺血再灌注组细胞凋亡率、caspase-3的活性及SMAC的表达明显升高(P<0.01),XIAP的表达明显下降(P<0.01)。延迟缺血预处理组细胞凋亡率、caspase-3的活性及SMAC的表达较缺血再灌注组明显下降(P<0.01),XIAP的表达较缺血再灌注组升高(P<0.01)。结论心肌缺血延迟预适应可以减少MI/R造成的细胞凋亡,机制与其阻碍SMAC自线粒体释放,从而保护XIAP对caspase家族的抑制密切相关。

贝伐单抗联合托泊替康治疗铂耐药性卵巢癌对血清Smac及SMRP水平的影响

目的:研究贝伐单抗(BEV)联合托泊替康对铂耐药性卵巢癌患者血清第二线粒体caspase激活蛋白(Smac)及可溶性间皮素相关蛋白(SMRP)的影响。方法:选取2014年10月至2016年10月在四川省巴中市中心医院诊治的84例卵巢癌患者作为研究对象,按随机数字表法分为研究组和对照组,每组42例。对照组患者采用托泊替康治疗,研究组患者采用BEV联合托泊替康进行治疗。比较两组客观有效率(ORR)、中位无进展生存期(PFS)、中位总生存时间(OS)、血清Smac和SMRP水平及不良反应发生率。结果:研究组ORR、PFS及OS均高于对照组(均P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组血清SMRP水平显著降低,Smac水平明显升高,且研究组变化更为显著(均P<0.05)。结论:BEV联合托泊替康治疗铂耐药的卵巢癌患者,疗效较好,可延缓疾病进展,延长生存时间,其作用可能与改善患者血清Smac及SMRP水平有关。

一类细胞凋亡诱导剂的结构特征研究

许多抗癌药物通过引起癌细胞的凋亡来达到治疗目的,因此开发能诱导癌细胞凋亡的药物一直是癌症研究的热点.以153个结构各异的具有caspase-3激活作用的细胞凋亡诱导剂为研究对象,通过三维定量构效关系(3D-QSAR)分析,得到了一个基于位阻场、静电场、疏水场、氢键供体场和受体场参数的最优比较分子相似性指数法(CoMSIA)模型.该模型(Q2=0.51、R2ncv=0.89和R2pred=0.82)具有良好的内部一致性和预测能力,通过对模型的等值线图分析发现:(1)R2取代基提高诱导剂活性的因素包括位阻大、负电性大、有亲水性和具有氢键供体作用;(2)位阻适中和/或具有氢键供体作用的R4取代基,以及位阻小和/或亲水的R1取代基对提高分子的活性是有利的;(3)N-甲基-N-苯基-1-萘胺类细胞凋亡诱导剂具有正电性的A环3号位或C环7号位取代基,以及具有负电性的B环1号位取代基有利于提高诱导剂的生物活性.对该模型的分析更有利于认识细胞凋亡诱导剂的分子特征,并为设计和开发新型细胞凋亡诱导剂提供理论指导.

急性胰腺炎大鼠腺泡细胞XIAP和Smac蛋白的表达

目的:探讨急性胰腺炎(AP)大鼠腺泡细胞中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及半胱天冬酶caspase的第二个线粒体激活因子/低等电点的IAP直接结合蛋白(Smac/DIABLO)的表达及其与AP严重程度的关系。方法:通过胆胰管逆行注射不同浓度的牛磺胆酸钠,制备大鼠急性水肿型胰腺炎(AEP)和急性坏死型胰腺炎(ANP)模型,同时制备假手术组为对照组。分别在模型制作3、6和12h取各组大鼠胰腺组织,对其进行病理学评分,并测定血清淀粉酶;应用免疫组织化学和蛋白免疫印迹法检测大鼠胰腺组织中XIAP和Smac蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,AEP和ANP组大鼠胰腺组织在各个时间点均有不同程度的病理损害,且血清淀粉酶明显升高(P<0.01),其中ANP组升高程度尤为明显(P<0.01)。免疫组织化学染色显示,XIAP和Smac蛋白在大鼠正常胰腺组织腺泡细胞中均呈弱阳性表达,ANP组XIAP的表达随模型制作后时间的延长而增强,12h时比对照组和AEP组明显增强,AEP组Smac蛋白的表达随时间延长而增强,12h时比ANP组及对照组增强。Westernblot结果显示造模后各时间点对照组XIAP和Smac蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05),3hAEP组XIAP表达较ANP组及对照组明显增强(P<0.01),6、12h时ANP组XIAP表达比AEP组和对照组明显增强(P<0.01)。3h时各组Smac表达差异无统计学意义(P>0.05),6、12hAEP组Smac蛋白表达比ANP组和对照组明显增加(P<0.01)。结论:AP病情轻重程度与XIAP及Smac蛋白表达有关。病情轻者XIAP表达无显著变化,Smac蛋白表达逐渐升高;病情重者XIAP表达逐渐升高,Smac蛋白表达则先升后降。XIAP和Smac蛋白的表达变化在AP的发病中具有一定作用。

紫杉醇和顺铂静脉化疗结合腹腔化疗对晚期上皮性卵巢癌的疗效观察

目的探讨紫杉醇与顺铂(TP方案)联合静脉化疗结合腹腔化疗对晚期上皮性卵巢癌(EOC)的临床疗效及对血清Dickkopf-2(DKK-2)和第二线粒体caspase激活蛋白(Smac)表达的影响。方法选取2012年6月至2014年6月间武警陕西总队医院收治的116例EOC患者,根据化疗方法不同进行分组,采用TP方案静脉化疗治疗的58例患者纳入对照组,采用TP静脉化疗联合紫杉醇腹腔灌注化疗的58例患者纳入观察组,比较两组患者的近期疗效、治疗前后的血清DDK-2和Smac水平,以及两组患者的不良反应和3年生存率。结果观察组患者总有效率为79.3%,高于对照组的60.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组患者血清DK-2和Smac水平高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组患者骨髓抑制发生率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组随访期间均失访1例,观察组患者3年生存率为61.4%(35/57),高于对照组的40.4%(23/57),差异有统计学意义(P<0.05)。结论TP方案静脉化疗结合腹腔灌注化疗能有效提高晚期EOC患者的近期和远期疗效,上调血清DDK-2和Smac水平,但会增加骨髓抑制风险,化疗前建议进行相应预防治疗。

VEGF和Smac/DIABLO对胶质瘤细胞凋亡及化疗敏感性的影响

目的:旨在研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和第二线粒体衍生的caspase激活剂(second mitochondrial activator of caspase,Smac)/低等电点凋亡抑制蛋白直接结合蛋白(direct IAP binding protein with low PI,DIABLO)在胶质瘤发生和发展中的作用。方法:采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默VEGF基因在胶质瘤细胞U251中的表达;分别采用实时荧光定量PCR(real-time?uorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测VEGF和Smac/DIABLO mRNA及蛋白在U251细胞中的表达水平;采用蛋白质印迹法检测磷酸化细胞外蛋白调节激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)的表达;FCM检测VEGF沉默对细胞周期的影响;MTT法检测VEGF沉默对U251细胞化疗敏感性的影响。结果:VEGF基因沉默可导致VEGF和Smac/DIABLO mRNA及蛋白表达水平的下调,并抑制磷酸化ERK的表达,提示VEGF是Smac/DIABLO的上游调节因子,通过激活ERK的信号通路调节Smac/DIABLO的表达水平。VEGF基因沉默导致U251细胞中处于S期的细胞比例增多,并增强顺铂对U251细胞的凋亡诱导作用。结论:VEGF可影响胶质瘤细胞周期的分布以及对顺铂的化疗敏感性。Smac/DIABLO参与了VEGF信号通路。

间歇低氧对大鼠认知功能的影响及其分子机制的研究

目的探讨间歇低氧对大鼠认知功能的影响及其分子机制。方法选用雄性Wistar大鼠64只,体质量(180±10)g,按随机数字表法分为正常对照组(UC组)和5%间歇低氧组(5%IH组),每组32只;每组按取材时间不同随机分为7、14、21、28 d四个亚组,每个亚组8只。UC组大鼠置于实验箱内持续注入空气,氧浓度为21%;5%IH组大鼠置于实验箱内,循环注入氮气及空气,使氧浓度在5%~21%之间变化,每120 s为1个周期。2组大鼠每日实验8 h,其余16 h常规饲养,分别持续进行7、14、21、28 d。各亚组实验后应用Morris水迷宫检测两组大鼠学习记忆功能。完成Morris水迷宫实验后处死并取出大鼠海马组织,制备切片标本:采用透射电镜观察大鼠海马CA1区神经细胞超微结构的改变;采用免疫组织化学法检测海马CA1区神经细胞凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)、第二个线粒体衍生的caspase激活因子(Smac)蛋白的表达情况;采用Tunel法检测海马CA1区神经细胞凋亡情况,并计算神经细胞凋亡指数。采用Pearson检验,分析UC组不同时间点Apaf-1及Smac蛋白的表达与神经细胞凋亡指数的相关性。结果(1)Morris水迷宫实验:UC组大鼠间歇性低氧7、14、21、28 d逃避潜伏期分别为(20.83±3.25)、(22.17±2.79)、(20.50±4.51)、(21.17±4.17)s,跨越目标象限时间分别为(52.17±4.17)、(52.50±2.74)、(51.50±2.43)、(52.00±4.78)s,各时间点差异均无统计学意义(P值均>0.05);5%IH组间歇性低氧7、14、21、28 d逃避潜伏期分别为(33.17±2.14)、(44.33±3.45)、(52.17±3.87)、(64.33±2.73)s,跨越目标象限时间分别为(44.00±3.03)、(34.50±3.94)、(27.83±3.01)、(20.83±1.94)s,随间歇低氧时间的增加,逃避潜伏期延长,跨越目标象限时间明显缩短,差异均有统计学意义(F=106.335、61.772,P值均<0.01)。两组间比较:5%IH组不同时间点逃避潜伏期时间均大于UC组,跨越目标象限时间均小于UC组,差异均有统计学意义(P值均<0.01)。(2)透射电镜观察神经细胞超微结构:UC组大鼠海马CA1区神经元核较大,核膜结构完整,呈椭圆形或圆形,染色质分布均匀呈细颗粒状,细胞器丰富,形态结构正常;5%IH组从7 d开始出现神经元水肿,细胞核变形,核膜模糊,核仁逐渐消失,细胞器肿胀溶解等,随着时间的延长,改变程度越重。(3)Apaf-1、Smac蛋白的相对表达量:UC组各个时间点海马CAl区神经细胞Apaf-1、Smac蛋白的相对表达量差异均无统计学意义(P值均>0.05);而5%IH组各个时间点Apaf-1、Smac蛋白的相对表达量均随间歇低氧时间的延长而升高,差异均有统计学意义(F=25.328、42.923,P值均<0.01)。两组间比较:5%IH组各个时间点Apaf-1、Smac蛋白的相对表达量均明显高于UC组,差异均有统计学意义(P值均<0.01)。(4)神经细胞凋亡情况:UC组各个时间点海马CAl区神经细胞神经细胞凋亡少,AI差异无统计学意义(P>0.05);5%IH组随间歇低氧时间的延长而升高,AI差异有统计学意义(F=25.799,P<0.01)。两组间比较:各个时间点海马CAl区神经细胞凋亡明显高于UC组,AI差异均有统计学意义(P值均<0.05)。(5)Pearson检验显示:5%IH组各个时间点大鼠海马CA1区Apaf-1、Smac蛋白的表达与凋亡指数均呈正相关(rApaf-1=0.735、0.736、0.685、0.747,rSmac=0.735、0.734、0.679、0.751,P值均<0.05)。结论间歇低氧可导致大鼠认知功能障碍,这可能与其引起大鼠海马CA1区神经细胞超微结构的改变,诱导凋亡相关蛋白Apaf-1、Smac的表达,进而造成神经元凋亡有关。