p53、p73与生存素及caspase-7蛋白酶在喉癌组织中的表达及临床意义

目的探讨p53、p73、生存素(survivin)及caspase7蛋白酶在喉癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化(SP法)检测49例喉癌组织和42例喉正常组织中突变型p53、p73、survivin及caspase-7蛋白的表达水平,并分析其与喉癌临床病理参数和预后的关系。结果突变型p53、p73、survivin及caspase-7蛋白在喉癌组织中有较高阳性表达率,分别为71.4%、87.8%、91.8%、95.9%,而在喉正常组织中其阳性表达率明显降低(P<0.05),分别为21.4%、23.8%、76.2%、47.6%。四种蛋白表达与喉癌临床病理参数和预后分析显示,突变型p53、p73蛋白表达随着喉癌临床分期的演进而增加,且喉癌中有淋巴结转移的p53、p73蛋白表达显著高于无淋巴结转移组(P<0.05),p73蛋白表达还与喉癌病理分级和临床不良预后密切相关(P<0.05);survivin蛋白表达与喉癌临床分期和病理分级相关(P<0.05);caspase-7蛋白高表达患者,其病理分级和预后较好(P<0.05)。相关性分析发现喉癌组织中Survivin蛋白表达分别与p73(r=0.372,P<0.01)、caspase-7(r=0.476,P<0.01)蛋白表达呈正相关。结论突变型p53、p73、survivin及caspase-7蛋白在喉癌组织中均存在高表达,Survivin蛋白表达分别与p73、caspase-7蛋白表达正相关,p73、survivin、caspase-7蛋白表达均与患者临床预后有关,可成为喉癌治疗、预后判断的潜在生物学指标。

基质金属蛋白酶7在肝癌细胞迁移及免疫细胞浸润中的作用与预后价值

目的评估基质金属蛋白酶7(MMP7)在肝癌细胞迁移及免疫细胞浸润中的作用及预后价值。方法分别构建下调或上调靶基因MMP7的MMP7_siRNA、pMMP7转染肝癌细胞株(MHCC97H)。采用RT-qPCR、Western Blot分别检测细胞中靶基因mRNA及蛋白的表达水平。扫描电镜和Transwell小室实验分别观察细胞伪足和迁移能力的变化,并采用生物信息学的方法,在TCGA、TIMER数据库分析MMP7与免疫细胞及肝癌患者免疫浸润评分之间的相关性,并进一步研究MMP7与肝癌患者预后的相关性。相关性分析采用Spearman方法。Sanger Box在线工具评估MMP7在肝癌总体生存期、疾病特异性生存期方面的意义。Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Log-rank检验评估不同组样本之间的预后差异。结果构建的MMP7_siRNA、pMMP7转染MHCC97H细胞后均能有效下调或上调靶基因MMP7的表达,在MHCC97H细胞中MMP7被干扰后细胞伪足明显减少,并且变短,但是过表达MMP7之后细胞表面丝状伪足数量明显增多,并且伪足长度变长,放射状排列。Transwell小室结果发现,MMP7_siRNA2能够显著降低细胞迁移能力(P<0.05),而转染pMMP7后,细胞迁移能力显著增加(P<0.05)。MMP7的表达与B淋巴细胞(r=0.37)、CD4+T淋巴细胞(r=0.40)、中性粒细胞(r=0.49)、巨噬细胞(r=0.49)、树突状细胞(r=0.47)显著相关(P值均<0.05)。在TCGA数据库中,基于总体生存期最佳截断值将肝癌患者分成MMP7高表达组(n=267)和MMP7低表达组(n=146),结果发现,MMP7高表达组的总体生存期明显低于MMP7低表达组(P<0.05);基于疾病特异性生存期最佳截断值将肝癌患者分成MMP7高表达组(n=257)和MMP7低表达组(n=145),结果发现,MMP7高表达组的疾病特异性生存期也低于MMP7低表达组(P<0.05)。结论MMP7促进了肝癌细胞的迁移,并在免疫细胞浸润中发挥主要作用,MMP7的表达也与肝癌的预后具有明显相关性。

血红蛋白、基质金属蛋白酶-7水平与老年糖尿病肾病患者肾间质纤维化以及预后的关系分析

目的探讨血红蛋白(Hb)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)水平与老年糖尿病肾病患者肾间质纤维化(RIF)以及进展为终末期肾病(ESRD)的关系。方法选择2014年4月至2020年4月石家庄市第三医院肾内科收治的103例老年糖尿病肾病患者(肾病组),95例单纯糖尿病患者(糖尿病组),59例体检志愿者为对照组。所有患者均接受Hb、MMP-7、肾功能、RIF血清学指标检测,出院后随访至2022年4月,统计ESRD发生情况。Pearson分析Hb、MMP-7与肾功能、RIF血清学指标的相关性。Kaplan-Meier生存曲线分析不同Hb、MMP-7水平下糖尿病肾病患者肾脏累积存活率。单因素或多因素COX风险比例回归分析老年糖尿病肾病患者ESRD的危险因素。结果肾病组Hb、估算肾小球滤过率(eGFR)低于对照组(P<0.05),MMP-7、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、转化生长因子(TGF)-β1、TGF-α水平高于对照组(P<0.05)。肾病组Hb与eGFR呈正相关(P<0.05),与Scr、BUN、TGF-β1、TGF-α呈负相关(P<0.05),MMP-7与eGFR呈负相关,与Scr、BUN、TGF-β1、TGF-α呈正相关(P<0.05)。低Hb水平组无ESRD累积存活率低于高Hb水平组(P<0.05),高MMP-7水平组无ESRD累积存活率低于低MMP-7水平组(P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示TGF-β1、TGF-α、MMP-7是糖尿病肾病患者ESRD的危险因素(P<0.05),Hb、eGFR是糖尿病肾病患者ESRD保护因素(P<0.05)。结论老年糖尿病肾病患者Hb水平降低,血清MMP-7水平增高,且与肾功能下降、RIF以及ESRD发生有关。

温针灸对兔膝骨关节炎软骨中ASC、Caspase-1和P2X7蛋白表达的影响

目的 观察温针灸对膝骨关节炎(KOA)模型兔关节软骨组织中凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、嘌呤能离子通道型受体7(P2X7)表达的影响,研究温针灸治疗KOA的作用机制。方法 取40只雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、抑制剂组和温针灸组,每组10只。除空白组外,其余各组采用经典右后肢膝关节伸直位,用石膏管型固定4周制备兔KOA模型。造模成功后,各组给予相应干预措施。应用Lequesne MG评分量表评估兔膝关节状态改变与行为学改变,HE染色观察膝关节软骨病理形态学改变,免疫组织化学法和Western blot法检测软骨组织中ASC、Caspase-1、P2X7蛋白的表达,免疫荧光检测Caspase-1蛋白的表达。结果 造模前,各组实验兔Lequesne MG评分差异无统计学意义(P>0.05);造模后,与空白组相比,其余组Lequesne MG评分均上升(P<0.05);干预治疗后,与模型组比较,温针灸组和抑制剂组评分降低(P<0.05)。HE染色显示,空白组软骨表面结构完整,软骨细胞排列均匀;模型组软骨表面粗糙不平,软骨受损明显,软骨细胞形态大小不一,排列紊乱;抑制剂组和温针灸组软骨表面相对光滑、完整,软骨细胞分布较为均匀,软骨层结构相对清晰。与空白组比较,模型组Mankin’s评分升高(P<0.05);与模型组比较,温针灸组和抑制剂组Mankin’s评分降低(P<0.05)。免疫组织化学法、免疫荧光及Western blot检测结果显示,与空白组比较,模型组ASC、Caspase-1、P2X7的表达均升高(P<0.05);与模型组比较,温针灸组和抑制剂组ASC、Caspase-1、P2X7的表达均降低(P<0.05);温针灸组和抑制剂组相比,ASC、Caspase-1、P2X7表达差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 温针灸可减轻兔KOA软骨损伤,其机制可能与ASC、Caspase-1、P2X7表达降低及细胞焦亡抑制有关。

抑制泛素特异性蛋白酶7改善血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大

目的探究泛素特异性蛋白酶7(USP7)抑制剂FT671在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的H9c2细胞肥大中的作用和潜在机制。方法将H9c2细胞随机分为四组:对照组、FT671组、AngⅡ组、FT671+AngⅡ组。利用α-actinin细胞免疫荧光染色检测心肌细胞表面积;Western blot检测心房钠尿肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)以及NADPH氧化酶4(Nox4)的蛋白表达水平;RT-PCR检测ANP、BNP、β-肌球蛋白重链(β-MHC)、IL-6、MCP-1、TNF-α的mRNA表达;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;细胞计数试剂8(CCK8)实验检测各组细胞活力;活性氧(ROS)染色检测细胞内氧化损伤水平。结果与对照组相比,AngⅡ组USP7蛋白表达明显增加,而使用FT671后,USP7表达明显被抑制。与AngⅡ组相比,FT671+AngⅡ组心肌细胞面积减小;ANP、BNP、Bax的蛋白表达减少,ANP、BNP、β-MHC、Bax、IL-6、MCP-1以及TNF-α的mRNA表达减少;Bcl-2的蛋白和mRNA表达均增加。与AngⅡ组相比,FT671+AngⅡ组TUNEL阳性细胞明显减少,心肌细胞活力增强,ROS生成减少,Nox4、NLRP3蛋白表达减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论FT671通过抑制Nox4/ROS/NLRP3炎症通路减轻AngⅡ诱导的心肌细胞中的氧化应激和炎症反应,从而减轻心肌细胞肥大。

泛素特异性蛋白酶7功能和在结直肠癌中的研究进展

泛素特异性蛋白酶7(ubiquitin-specific protease 7,USP7)是一种广泛参与各种细胞过程的去泛素化酶。USP7在调控细胞增殖与凋亡,细胞分裂、分化,DNA损伤修复,表观遗传学调控等生物学过程中有关键作用。本文对USP7的结构及其广泛的生物学功能进行综述。

抗结核药物性肝损伤小鼠模型细胞角蛋白18与基质金属蛋白酶7的表达水平

目的 分析抗结核药物性肝损伤(ATB-DILI)模型小鼠组织及血清中细胞角蛋白18(CK18)与基质细胞金属蛋白酶7(MMP-7)表达,探讨CK18与MMP-7在肝损伤发生中的临床价值。方法 6周龄SPF级雄性KM小鼠20只,体重18~24 g,按照随机区组法分为4组,每组5只。选择3组进行卡介苗(BCG)滴鼻使小鼠感染结核分枝杆菌,其中两组分别灌胃异烟肼(INH)45 mg/(kg·d)、利福平(RIF)90 mg/(kg·d),持续3周,记为INH 3周组及RIF3周组,剩余一组为BCG感染对照组;未经任何处理的为空白对照组。通过PCR检测小鼠肺组织BCG含量,病理观察小鼠肝损伤证实动物模型建立成功。比较各组肝脏指数、病变范围;比较各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、总胆红素(TBil)、CK18、MMP-7表达情况;比较各组小鼠肝脏组织CK18、MMP-7蛋白表达情况。结果 BCG感染对照组与空白对照组小鼠ALT、AST、ALP、GGT、TBil表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);INH 3周组和RIF 3周组小鼠ALT、AST、GGT、TBil表达高于BCG感染对照组(P<0.05)。空白对照组、BCG感染对照组小鼠肝脏组织CK18、MMP-7蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);INH 3周组、RIF 3周组小鼠肝脏组织CK18、MMP-7蛋白表达高于BCG感染对照组(P<0.05)。空白对照组、BCG感染对照组小鼠血清CK18、MMP-7表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);INH 3周组、RIF 3周组小鼠血清CK18、MMP-7表达高于BCG感染对照组(P<0.05)。空白对照组、BCG感染对照组小鼠肝脏指数、病变范围比较,差异无统计学意义(P>0.05);INH 3周组、RIF 3周组小鼠肝脏指数、病变范围高于BCG感染对照组(P<0.05)。结论 CK18与MMP-7可能影响ATB-DILI,明确CK18与MMP-7表达水平,提前干预,可以降低ATB-DILI发生风险。

尿液胰岛素样生长因子结合蛋白-7与金属蛋白酶组织抑制剂-2在脓毒症急性肾损伤中的应用价值

目的分析尿液胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP-7)和金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)在脓毒症急性肾损伤(AKI)中的早期预测价值。方法选取2020年1月—2021年12月山西省人民医院急诊科监护室收治的脓毒症患者58例,并根据KDIGO的诊断标准分成脓毒症AKI组22例和非AKI组36例。分别在入组后0 h、24 h、48 h、72 h采集患者尿液及血液标本,并检测血肌酐(SCr)与尿IGFBP-7、TIMP-2水平。分析SCr、尿IGFBP-7、TIMP-2与脓毒症AKI的相关性。受试者工作特征曲线(ROC)分析SCr、尿IGFBP-7及TIMP-2在脓毒症早期急性肾损伤中的诊断价值。结果与非AKI组比较,AKI组各时点SCr、尿IGFBP-7、尿TIMP-2水平均升高,差异具有统计学意义(F/P=147.848/<0.001、330.849/<0.001、136.777/<0.001)。SCr与尿IGFBP-7、尿TIMP-2均呈正相关(r/P=0.680/<0.001,0.392/0.002),尿IGFBP-7与尿TIMP-2呈正相关(r/P=0.618/<0.001)。ROC曲线分析显示,SCr、尿IGFBP-7、尿TIMP-2及尿IGFBP-7联合TIMP-2预测脓毒症AKI的曲线下面积(AUC)分别为0.586、0.907、0.738、0.914,尿IGFBP-7、尿IGFBP-7联合TIMP-2优于SCr(Z/P=4.117/<0.001,4.196/<0.001);尿IGFBP-7、尿IGFBP-7联合TIMP-2优于尿TIMP-2(Z/P=2.663/0.008,3.378/0.008)。结论尿IGFBP-7、尿TIMP-2与尿IGFBP-7联合TIMP-2均可以作为早期预测脓毒症急性肾损伤发生的指标,且尿IGFBP-7、尿IGFBP-7联合TIMP-2的预测价值优于尿TIMP-2。

基质金属蛋白酶-7在胆道闭锁中的研究进展

金属蛋白酶-7(MMP-7)是锌依赖性内肽酶家族中的重要成员,其参与细胞外基质中各种蛋白质的降解,且在白细胞浸润和组织炎症中也发挥重要作用。MMP-7在正常肝脏中不表达或很少表达,而在胆道闭锁中表达增强。研究发现MMP-7能够有效地鉴别胆道闭锁与其他胆汁淤积性疾病,对胆道闭锁的诊断有很高的敏感性和特异性,对胆道闭锁的肝衰竭和肝移植有一定的预测作用。因此,提高对MMP-7的认识,早期诊断胆道闭锁是当今研究的热点。现对MMP-7在胆道闭锁的研究进行综述,以期为胆道闭锁的临床诊断、预后评估和治疗胆道闭锁提供参考。

血清组织蛋白酶K、解聚蛋白样金属蛋白酶-7与慢性心力衰竭患者心室重构和预后的关系

目的 探讨血清组织蛋白酶K(Cat-K)、解聚蛋白样金属蛋白酶-7(ADAMTS-7)水平与慢性心力衰竭(CHF)患者心室重构和预后的关系。方法 选取2018年2月—2020年6月邯郸市中心医院CHF患者195例(CHF组)、健康体检者101名(对照组)。收集CHF患者的一般资料。检测所有研究对象的随机血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、氨基末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)、B型钠尿肽(BNP)、Cat-K、ADAMTS-7水平和左心室射血分数(LVEF)、心室重构参数[左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室后壁厚度(LVPWT)、室间隔厚度(IVST)],计算左心室质量指数(LVMI)。根据纽约心脏协会(NYHA)分级将CHF患者分为Ⅱ级组(65例)、Ⅲ级组(82例)、Ⅳ级组(48例)。采用Pearson相关分析评估各项指标之间的相关性。采用Logisitc回归分析评估CHF患者预后不良的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标判断CHF患者预后不良的效能。结果 CHF组血清Cat-K、ADAMTS-7高于对照组(P<0.05)。NYHAⅣ级组血清Cat-K、ADAMTS-7、BNP、NT-proBNP、LVEDD、LVPWT、IVST、LVMI显著高于NYHAⅢ级组和NYHAⅡ级组(P<0.05),LVEF低于NYHAⅢ级组和NYHAⅡ级组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,Cat-K、ADAMTS-7与BNP、NT-proBNP、LVEDD、LVPWT、IVST、LVMI均呈正相关(P<0.05),与LVEF呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,NT-proBNP、NYHA分级、Cat-K、ADAMTS-7升高和LVEF降低均是CHF患者预后不良的危险因素[比值比(OR)值分别为1.057、1.772、1.075、1.335、0.903,95%可信区间(CI)分别为1.003~1.113、1.159~2.709、1.034~1.116、1.091~1.634、0.819~0.996]。ROC曲线分析结果显示,NT-proBNP、LVEF、NYHA分级、Cat-K、ADAMTS-7单项检测和联合检测判断CHF患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.729、0.704、0.803、0.720、0.688、0.886。结论 血清Cat-K、ADAMTS-7与CHF患者心室重构和预后不良有关。

蛋白酶体α7亚基在癌症中的研究进展

蛋白酶体α7亚基(PSMA7)是20S蛋白酶体核心复合物的一个亚基。通过泛素-蛋白酶体途径在细胞增殖、免疫微环境调节、细胞周期调控及细胞分化等生理过程中发挥关键性作用,亦与癌症的发生、发展、转移以及预后密切相关。本文对PSMA7在不同癌症中的作用作一综述,以期为癌症诊断和治疗提供潜在生物标志物的同时为癌症治疗靶向药物的开发提供理论依据。

七种不同基质金属蛋白酶在抗结核药物性肝损伤小鼠模型中的表达与临床价值

目的 探讨7种不同基质金属蛋白酶(MMP)在抗结核药物性肝损伤小鼠模型中的表达与临床价值。方法选取120只雄性昆明小鼠,SPF级,6周龄,体重18~24 g,随机区组法分为6组,每组20只。一组设为对照组,五组感染结核分枝杆菌后分别灌胃异烟肼(INH)45 mg/(kg·d)(INH组)、利福平(RIF)90 mg/(kg·d)(RIF组)、乙胺丁醇(EB)135 mg/(kg·d)(EB组)、吡嗪酰胺(PZA)180 mg/(kg·d)(PZA组)、四联抗结核药(INH+RIF+EB+PZA)剂量同上(四联药组),建立抗结核药物性肝损伤小鼠模型。通过酶联免疫吸附试验法检测药物灌胃后12 h及1、2、3周小鼠模型血清中MMP-1、2、3、7、9、13、14的表达水平,分析其与肝脏指数变化的相关性,探讨不同MMP在抗结核药物性肝损伤中的作用。结果 给药12 h,与对照组比较,RIF组MMP-7表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。各组MMP-1、2、3、9、13、14,肝脏指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。连续灌胃1周,与对照组比较,INH组、RIF组和四联药组小鼠MMP-2和MMP-7表达上调,肝脏指数升高,差异有统计学意义(P<0.05);各组MMP-1、3、9、13、14,肝脏指数,与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。连续灌胃药物2、3周后,与对照组比较,RIF组、INH组、四联药组小鼠血清MMP-2、7、9表达上调,肝脏指数升高,差异有统计学意义(P<0.05);各组其他MMPs表达水平和肝脏指数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。INH组MMP-2、7、9与肝脏指数无相关性(P>0.05),四联药组MMP-2、7、9与肝脏指数无相关性(P>0.05)。RIF组MMP-7与肝脏指数呈正相关(r=0.981,P<0.05)。结论 抗结核药物性肝损伤小鼠血清MMP-2、MMP-7和MMP-9明显升高,提示MMP-2、MMP-7和MMP-9介导的炎症反应与抗结核药物性肝损伤密切相关,其中MMP-7可用于预判抗结核药物性肝损伤严重程度。

基质金属蛋白酶7(MMP7)和硫酸乙酰肝素糖蛋白2(HSPG2)在胰腺癌中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶7(MMP7)和硫酸乙酰肝素糖蛋白2(HSPG2)在胰腺癌患者中的表达及临床意义。方法选取2018年1月—2020年12月广西医科大学附属肿瘤医院收治的胰腺癌患者30例,收集胰腺癌组织标本及其血清样本,同时收集癌旁正常组织以及30例健康志愿者血清样本作为对照。采用免疫组化方法检测胰腺癌组织及癌旁正常组织中MMP7和HSPG2蛋白表达;采用酶联免疫吸附法检测胰腺癌患者和健康对照者血清样本中MMP7和HSPG2的表达水平;收集患者临床资料并分析MMP7和HSPG2表达与临床病理特征、生存预后的关系。计量资料两组间比较采用成组t检验。计数资料组间比较采用χ^(2)检验或Fisher确切概率法。MMP7与HSPG2表达的关系采用Spearman相关分析。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存情况比较采用Log-rank检验。结果免疫组化结果显示,胰腺癌组织中MMP7和HSPG2蛋白阳性表达均高于癌旁组织,差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为31.093、35.623,P值<0.05)。胰腺癌患者血清中MMP7、HSPG2水平均显著高于健康对照组(t值分别为20.174、32.600,P值<0.05)。MMP7和HSPG2表达均与肿瘤直径、TNM分期有关(P值<0.05)。Spearman相关性分析显示,HSPG2与MMP7之间的表达呈正相关(r=0.539,P=0.002)。MMP7和HSPG2蛋白阳性表达患者总生存率明显低于阴性对照患者(χ^(2)值分别为4.084、12.554,P值均<0.05)。结论MMP7和HSPG2在胰腺癌组织和血清中呈阳性表达,且与肿瘤的直径、TNM分期有关,两者可能在胰腺癌的发生发展中存在某种关联,有望成为胰腺癌诊断和判断预后的潜在标志物。

GRP78 caspase-12在蛋白酶抑制剂MG-132诱导人脑胶质瘤细胞凋亡中的表达及意义

在当前细胞分子水平的研究中,内质网应激（ERS）越来越成为研究热点^（[1]）。我们目前仍无法有效治疗胶质瘤,所以我们试图通过研究内质网应激来揭示胶质瘤治疗的相关分子机制。本课题采用预先筛选好的最佳抑制浓度为5μmol/L的MG-132试剂干预人脑胶质瘤细胞SHG-44,选取不同时间点进行观测.

miR⁃504调控蛋白酶体激活因子抑制人乳腺癌细胞系MCF⁃7增殖及迁移

目的观察miR-504在模型裸鼠以及乳腺癌细胞生物学行为的调节作用,寻找miR-504在调控过程中的关键靶基因,探究miR-504在乳腺癌中的调控机制。方法构建乳腺癌模型小鼠并观察miR-504对瘤体生长的影响。TargetScan筛选miR-504的靶基因并通过双荧光素酶报告基因实验证实;RT-qPCR、Western blot检测蛋白酶体激活因子复合体亚基3(PSME3)在乳腺癌组织和癌旁组织中的表达;CCK8法、流式细胞测量术和Transwell小室法检测miR-504和PSME3对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖,周期和迁移能力的作用。结果在乳腺癌裸鼠移植瘤模型中miR-504能抑制瘤体生长;PSME3是miR-504的靶基因,在乳腺癌组织的表达明显升高(P<0.01),上调miR-504的表达能抑制PSME3的表达(P<0.01);较NC组,miR-504 mimic组能抑制乳腺癌细胞增殖、S期阻滞和迁移能力,而较miR-504 mimic组,miR-504 mimic+PSME3组MCF-7细胞增殖、S期比例和迁移能力升高(P<0.01)。结论miR-504可能通过靶向调控PSME3在乳腺癌中发挥抑癌作用。

人重组骨形态发生蛋白7通过下调半胱氨酸蛋白酶-1/焦孔素D信号通路抑制高糖诱导的近曲小管上皮细胞的焦亡

目的 观察人重组骨形态发生蛋白-7(recombinant human bone morphogenetic protein-7,rhBMP-7)对高糖诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2)的焦亡和炎症反应的作用。方法 体外培养高糖(high glucose,HG)刺激的HK-2细胞模拟糖尿病肾病模型。分为正常浓度葡萄糖对照组(Control)、高浓度葡萄糖组(HG)、Control+rhBMP-7组、HG+rhBMP-7组。采用免疫荧光方法检测HK-2细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SAM)、焦孔素D(gasderminD, GSDMD)蛋白和焦孔素E(gasderminE, GSDME)蛋白;TUNEL染色检测细胞死亡情况;蛋白质印迹法检测各组HK-2细胞中焦亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、半胱氨酸蛋白酶-4(caspase-4)、半胱氨酸蛋白酶-5(caspase-5)、 N-GSDMD和GAPDH的表达;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组HK-2细胞培养上清液中炎症因子白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达。结果 与Control组相比,高糖组HK-2细胞Tunel染色的阳性率明显增加,差异具有统计学意义(P<0.000 1),α-SMA蛋白和α-SMA mRNA表达量也显著增加(P<0.000 1),E-cadherin蛋白和Ecadherin mRNA表达量显著下降(P=0.000 6,P<0.000 1);HG组添加rhBMP-7后α-SMA蛋白和m RNA水平显著下降(P=0.011 7, P=0.002), E-cadherin蛋白和m RNA水平明显升高(P=0.001 5,P<0.000 1)。与对照组比较,HG组HK-2细胞GSDME/GSDMD蛋白的荧光信号明显增强。进而,HG组添加rhBMP-7后GSDME/GSDMD蛋白荧光信号显著减弱。同样,HG组HK-2细胞中焦亡相关蛋白caspase-1、caspase-4、caspase-5以及GSDMD的表达量显著高于对照组,差异明显(均P<0.001)。HG组添加rhBMP-7后焦亡相关蛋白的表达明显下降(分别P<0.001,P=0.002,P<0.001)。与对照组比较,HG组HK-2细胞培养上清液中IL-1β和IL-18蛋白浓度显著增加(均P<0.001)。进而导致rhBMP-7干预后HG组细胞上清液中IL-10和IL-1β蛋白浓度明显减少(P<0.001)。结论 rhBMP-7具有抑制HK-2细胞焦亡的作用,其通过调控caspase-1/GSDMD信号通路减缓高糖诱导的HK-2细胞焦亡。

超声弹性成像联合血清基质金属蛋白酶7、血小板比率指数对儿童胆道闭锁的诊断价值

目的 分析超声弹性成像联合血清基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)、血小板比率指数(aspartate aminotransferase-to-platelet ratio index,APRI)对儿童胆道闭锁的诊断价值。方法 选取2021年2月至2023年2月成都市妇女儿童中心医院收治的70例胆道闭锁患儿作为胆道闭锁组,选取同期来院治疗的55例非胆道闭锁患儿作为非胆道闭锁组,比较两组患儿以及胆道闭锁组不同肝硬化程度患儿的生化指标、超声弹性成像肝脏硬度值(liver stiffness measurement,LSM)、MMP-7、APRI,采用Pearson相关性分析胆道闭锁患儿LSM、MMP-7及APRI的相关性。绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析超声弹性成像联合MMP-7及APRI对胆道闭锁的诊断价值。结果 胆道闭锁组谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素、LSM、血清MMP-7水平及APRI均高于非胆道闭锁组,而血小板计数低于非胆道闭锁组(P<0.05)。70例胆道闭锁患儿均存在肝纤维化,其中明显肝纤维化、轻度肝纤维化分别46例、24例,明显肝纤维化的胆道闭锁患儿谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素、LSM、血清MMP-7水平及APRI均高于轻度肝纤维化患儿,而血小板计数低于轻度肝纤维化患儿(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,胆道闭锁患儿LSM与MMP-7、APRI均呈正相关,MMP-7与APRI呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,LSM联合血清MMP-7、APRI诊断胆道闭锁的曲线下面积最大(0.898),敏感度、特异度、准确度分别为85.235%、81.342%、83.142%,高于各项指标单独诊断结果。结论 超声弹性成像联合血清MMP-7、APRI对儿童胆道闭锁有较高诊断价值,值得在临床应用。

基质金属蛋白酶-7与多发性肌炎/皮肌炎相关间质性肺疾病关系的研究进展

多发性肌炎/皮肌炎常易合并间质性肺疾病,是患者重要的死亡原因。其发病机制尚不明确,但近年来多项研究表明基质金属蛋白酶-7在多发性肌炎/皮肌炎肺部病变发生过程中起着关键性作用。本文就近年来国内外研究作一综述,分析其在DM/PM并发ILD中发挥的相关作用。

人脑胶质瘤中survivin、Caspase-3、Caspase-7蛋白的表达及意义

目的研究人脑胶质瘤组织中凋亡相关蛋白survivin、Caspase-3、Caspase-7的表达,探讨其与细胞凋亡、增殖的关系。方法采用免疫组化SP法检测survivin、Caspase-3、Caspas-7在48例人脑胶质瘤和8例正常脑组织中的表达情况。结果胶质瘤组织中的survivin、Caspase-3、Caspase-7的阳性率分别为56.2%、70.8%、68.8%,均高于正常脑组织(P<0.01);Caspase-3、Caspase-7之间呈正相关(P<0.05)。结论survivin的表达水平能反应胶质瘤的恶性生物学行为;Caspase-3、Caspase-7在凋亡过程中可能存在协同作用。