嗜热厌氧杆菌分解代谢物调控蛋白A的克隆鉴定

分解代谢物调控蛋白A(CcpA)在低GC含量的革兰氏阳性菌株中,是一类非常重要的全局调控蛋白。本研究中,克隆获得了嗜热厌氧杆茵CcpA的编码基因及其上下游各约400 bp片段的基因序列。研究表明,克隆所得的ccpA基因编码长度为336个氨基酸的蛋白质,其理论等电点为5.69。序列比对分析结果显示,其N端的DNA结合位点具有非常高的序列保守性。在CcpA启动子上游含有cre序列,表明该基因转录存在自体调控。此外考察了克隆所得的CcpA编码基因在葡萄糖存在下,工程茵B.subtilis TA-1中amyE基因的表达及酶活均受到抑制。ccp4基因敲除的枯草芽孢杆菌中过量表达克隆所得的CcpA,证明所获蛋白在葡萄糖存在下,能够有效抑制淀粉酶的活力,且对枯草芽孢杆茵的生长产生负影响。

代谢调控蛋白A调控革兰阳性菌代谢与毒力偶联的研究进展

代谢调控蛋白A(catabolite control protein A,CcpA)是革兰阳性菌重要的多效调节因子,在磷酸烯醇丙酮酸依赖的磷酸转移酶系统辅助下,能与靶基因上的特异性DNA序列——代谢反应元件结合,促进或阻遏靶基因表达,从而调控细菌的生理过程和毒力。CcpA通过介导微生物碳分解代谢物阻遏效应,控制细菌摄取与利用外界环境中营养物质,保障其高效利用能源。CcpA通过直接或间接调控细菌的代谢过程和毒力基因表达,将细菌的代谢与毒力偶联。该文介绍了CcpA的作用机制及其对细菌多种代谢途径和致病性调控的研究进展。

革兰氏阳性菌代谢调控蛋白A研究进展

代谢调控蛋白A(catabolite control protein A,CcpA)是革兰氏阳性菌重要的全局性转录调节因子,通过与靶基因代谢反应元件(cre基序)结合,调控基因的转录与表达,参与碳分解代谢物阻遏效应、物质代谢、毒力及抗菌药物耐受等众多生命活动的调节。本文就CcpA蛋白的分子结构、作用机制、表达调控、生物学功能等方面的研究进展进行综述,以增加对CcpA蛋白及细菌复杂转录调控网络的认识,为革兰氏阳性菌感染的防控提供潜在靶标。

微生物分解代谢物控制蛋白CcpA的研究进展

碳分解代谢物阻遏(carbon catabolite repression,CCR)是指微生物在混合碳源发酵时优先利用速效碳源(通常为葡萄糖),且该碳源的代谢产物会抑制其他非速效碳源代谢相关的基因表达和蛋白活性,从而影响非速效碳源利用的现象。在低GC含量革兰氏阳性菌中,CCR效应的关键调控因子为分解代谢物控制蛋白CcpA(catabolite control protein A)。该调控蛋白具有多效性功能,除参与CCR外,还与中心碳、氮代谢的调控、生物被膜的形成和毒性基因的表达等多种生理过程相关。综述了近年来有关CcpA蛋白的功能、作用机制及分子结构的研究进展。

Pseudomonas protegens H78中Crc调控基因突变的转录组学分析

转录后调控子Crc蛋白(Catabolite repression control protein)在防御假单胞菌(Pseudomonas protegens)H78中发挥着重要的代谢调控作用。运用RNA-seq(RNA sequencing)技术,针对H78野生型和H78Δcrc突变株开展比较转录组学研究,利用COG(Clusters of orthologous groups of proteins)、KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)数据库对受到Crc调控的基因进行功能分类。转录组结果显示:Crc突变导致218个基因的转录子水平发生两倍以上的显著变化,其中105个基因表达上调,113个基因表达下调。Crc蛋白对碳、能量、脂肪及氨基酸代谢、抗生素合成等次级代谢具有全局调控作用,比如,脂质转运和代谢的基因簇(H78_00275~00283)表达显著下调约2.7~8.1倍,能量生产和转换的cyoA_2B_2C_2D_2E_1基因簇(H78_05248~05252)基因表达显著下调约3.4倍,调控氨基酸转运与代谢的H78_04826astAA_4DB基因簇(H78_04822~04826)基因表达显著上调约4倍,抗真菌剂藤黄绿菌素(pyoluteorin,Plt)的合成基因簇(pltLABCDEFG)、转运基因簇(pltIJKNOP)表达下调平均约3倍,而调控基因簇(pltR,pltM,pltZ)的表达平均下调不足2倍,整体上Plt合成受到Crc的显著正调控。Crc转录组学结果为进一步开展Plt等抗生素合成的分子调控网络与代谢工程研究奠定基础。