Cathepsin L与MMP-3在兔椎间盘退变中相关性研究

目的:探讨组织蛋白酶L(Cathepsin L)与基质金属蛋白酶-3(MMP-3)在兔椎间盘退变中的相关性。方法:健康大白兔60只随机分为实验组、阴性对照组、空白对照组,实验组分为三个亚组,椎间盘内注射3种不同浓度的Cathepsin L,阴性对照组中在椎间盘内注射生理盐水,空白对照组不做任何处理。采用HE染色组织学观察椎间盘的退变特征,免疫组织化学S-P法检测椎间盘组织中MMP-3的表达。结果:HE染色组织学观察6周时在实验组椎间盘中,组织学观察到不同程度的椎间盘退变特征:髄核脊索细胞逐渐减少,并逐渐被纤维软骨组织替代,纤维环与髄核之间失去明显的界限。免疫组织化学染色结果,3周、6周时实验组MMP-3的阳性率均高于空白对照组及阴性对照组(P<0.05)。结论:Cathepsin L与MMP-3共同参与了兔椎间盘的退变,CathepsinL可能促进MMP-3在椎间盘内的生成,从而导致椎间盘的退变。

温阳活血利水方含药血清对足细胞组织蛋白酶L、发动蛋白以及微丝、微管的影响

目的探讨温阳活血利水方治疗原发性肾病综合征蛋白尿的可能作用机制。方法将足细胞分为正常对照组、模型组、地塞米松组、10%中药血清组、20%中药血清组、空白对照组。除正常对照组、空白对照组外,其余各组用氨基核苷嘌呤霉素粉剂制备足细胞损伤模型。正常对照组和模型组加入完全培养基5 ml,地塞米松组加入392μg/L地塞米松5 ml,10%中药血清组、20%中药血清组、空白对照组分别加入10%中药血清、20%中药血清、空白对照血清各5 ml。RT-PCR法与Western blot分别检测各组足细胞胞浆组织蛋白酶L(CatL)、发动蛋白mRNA和蛋白表达含量,并用激光共聚焦观察各组中足细胞骨架微丝、微管的形态结构变化。结果与正常组比较,模型组CatL mRNA与蛋白含量升高,发动蛋白表达含量降低(P<0.01);与模型组比较,各中药血清组与地塞米松组CatL mRNA与蛋白表达含量降低,足细胞发动蛋白蛋白表达含量升高(P<0.01);与10%中药血清组比较,20%中药血清组CatL mRNA与蛋白表达含量降低,发动蛋白表达含量升高(P<0.01)。各组间足细胞发动蛋白mRNA表达含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论温阳活血利水方可能通过下调足细胞CatL的表达,减少CatL对发动蛋白的酶解,从而稳定细胞骨架中的微丝、微管等结构,减少足突融合,改善蛋白尿。