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The expression of foreign gene under the control of cauliflower mosaic virus 35s RNA promoter
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作者 WangHao BaiYongyan 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1990年第1期1-10,共10页
The promoter region of cauliflower mosaic virus (CaMV) 35s RNA was employed to construct an intermediate expression vector which can be used in Ti plasmid system of Agro-bacterium tumefaciens. The original plasmid, wh... The promoter region of cauliflower mosaic virus (CaMV) 35s RNA was employed to construct an intermediate expression vector which can be used in Ti plasmid system of Agro-bacterium tumefaciens. The original plasmid, which contains a polylinker between CaMV 35s RNA and its 3' termination signal in pUC18 was modified to have another antibiotic resistance marker (kanamycin resistance gene Kmr) to facilitate the selection of recombinant with Ti plasmid. Octopine synthase (ocs) structural gene was inserted into this vector downstream of CaMV 35s RNA promoter. This chimaeric gene was introduced into integrative Ti plasmid vector pGV3850, and then transformed into Nicotiana tobaccum cells. A binary plasmid vector was also used to introduce the chimaeric gene into tobacco cells. In both cases, the expression of ocs gene was demonstrated. The amount of oc-topine was much more than the nopaline synthesized by no-paline synthase (nos) gene transferred at the same time with Ti plasmid vector. This demonstrated that CaMV 35s RNA promoter is stronger in transcriptional function than the promoter of nos in tobacco cells. 展开更多
关键词 Agrobacterium tumefaciens gene expression cauliflower mosaic virus 35s RNA promoter.
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花椰菜花叶病毒(CaMV)的基因表达调控 被引量:1
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作者 王海河 周仲驹 谢联辉 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期34-40,共7页
花椰菜花叶病毒(CaMV)是一种具有重要经济价值和生物学意义的植物双链DNA病毒,它有7个开放阅读框(ORF),其中6个呆各自编码一种蛋白产物。35S启动子区域含有3个转录因子专一的结合位点;RNA多腺苷化位点具有AAUAAA特征序列,它和... 花椰菜花叶病毒(CaMV)是一种具有重要经济价值和生物学意义的植物双链DNA病毒,它有7个开放阅读框(ORF),其中6个呆各自编码一种蛋白产物。35S启动子区域含有3个转录因子专一的结合位点;RNA多腺苷化位点具有AAUAAA特征序列,它和其上游序列对35SRNA的加工和翻译有影响作用;下游ORFI在转录激活因子存在时可被翻译。由此表明,CaMV的表达调控表现在不同调控机制工作的基础之上。 展开更多
关键词 花椰菜花叶病毒 基因表达 调控
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CONSTRUCTION OF INFECTIOUS CLONE OF CAULIFLOWER MOSAIC VIRUS (XINJIANG ISOLATE)
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作者 吴世宣 张春霞 +2 位作者 张英华 王革娇 田波 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1989年第20期1733-1735,共3页
I. INTRODUCTION Cauliflower mosaic virus (CaMV)is a double stranded DNA virus. It attracted attention in the pasf few years because of its special replication process and its possible use as a vector in plant genetic ... I. INTRODUCTION Cauliflower mosaic virus (CaMV)is a double stranded DNA virus. It attracted attention in the pasf few years because of its special replication process and its possible use as a vector in plant genetic engineering. For a further study it is important to get the infectious clone of the CaMV genome at first. Although several infectious clones have been 展开更多
关键词 cauliflower mosaic virus genome INFECTIOUS CLONE
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花椰菜花叶病毒(新疆分离物)基因组DNA的全部核苷酸序列 被引量:1
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作者 方荣祥 吴晓军 +3 位作者 卜明 田颖川 蔡发兴 莽克强 《病毒学报》 CAS 1985年第3期247-256,共10页
用Maxam-Gilbert化学切断法,从含全长病毒DNA的克隆pCaMV C17中,测定了CaMV-XJ基因组的全部核苷酸序列。CaMV-XJ DNA含有8,060个碱基对。在不同的译读相位中,CaMV基因组含有6个主要ORF或可能的基因,与其他巳作全序列测定的三个CaMV分离... 用Maxam-Gilbert化学切断法,从含全长病毒DNA的克隆pCaMV C17中,测定了CaMV-XJ基因组的全部核苷酸序列。CaMV-XJ DNA含有8,060个碱基对。在不同的译读相位中,CaMV基因组含有6个主要ORF或可能的基因,与其他巳作全序列测定的三个CaMV分离物比较,有三个显著的差别;(1)ORFⅥ编码的氨基酸变化达16%,显著高于其他区域的变化和其他三个分离物之间的差别,(2)在ORFⅣ的近氨基末端有39bp的插入,它与被插入区的序列几乎是直接重复;(3)由于核苷酸置换而引入了终止信号,所以T.Hohn[2]推测,可能存在的ORFⅦ不可能编码有功能的蛋白。 展开更多
关键词 花椰菜花叶病毒 DNA序列分析 植物遗传工程
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侵染花椰菜的芜菁花叶病毒及RT-PCR扩增外壳蛋白基因研究 被引量:4
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作者 许建平 李德葆 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期151-157,共7页
从杭州市郊区及本校附近菜园地表现严重花叶症状的花椰菜上分离到一种线状病毒,接种6科31种鉴别寄主,能侵染5科22种植物。病组织超薄切片可见风轮状内含体和片层聚集状内含体。感病的芥菜叶片,用0.5mol/L磷酸钾缓冲液... 从杭州市郊区及本校附近菜园地表现严重花叶症状的花椰菜上分离到一种线状病毒,接种6科31种鉴别寄主,能侵染5科22种植物。病组织超薄切片可见风轮状内含体和片层聚集状内含体。感病的芥菜叶片,用0.5mol/L磷酸钾缓冲液(pH7.5)匀浆后汁液加4%PEG-8000沉淀3h,5%~40%甘油梯度离心纯化病毒,可获得较高的产量。提纯的病毒均为一弯曲的线状颗粒,长度740nm左右。病毒提纯液于264nm处有一吸收峰,为典型的核蛋白紫外吸收。TuMV-H分离株抗血清包被的铜网能大量吸附病毒颗粒。用特异的PCR引物扩增其外壳蛋白基因,可得-0.9Kb的片段。 展开更多
关键词 芜菁花叶病毒 花椰菜 外壳蛋白基因
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高灵敏度电化学发光PCR方法检测花椰菜花叶病毒35 S启动子 被引量:1
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作者 朱德斌 邢达 刘晋峰 《激光生物学报》 CAS CSCD 2007年第4期485-489,共5页
大多数转基因植物中使用花椰菜花叶病毒(cauliflower mosaic virus,CaMV)35 S作为启动子,因此可通过检测该启动子来判断植物样品中是否含有转基因成分。实验将高灵敏度电化学发光PCR方法用于检测转基因烟草中的CaMV35 S启动子,将该启动... 大多数转基因植物中使用花椰菜花叶病毒(cauliflower mosaic virus,CaMV)35 S作为启动子,因此可通过检测该启动子来判断植物样品中是否含有转基因成分。实验将高灵敏度电化学发光PCR方法用于检测转基因烟草中的CaMV35 S启动子,将该启动子的PCR产物与生物素标记的探针杂交,可以起到特异性筛选产物的作用;与发光标记物——三联吡啶钌标记的探针杂交,从而实现电化学发光检测。两种探针同时与待测样品的PCR产物进行杂交,进一步对样品进行特异性筛选,从而提高了检测的准确性,避免了假阳性结果的产生。实验结果表明:该法可以准确的区分待测样品中是否含有35 S启动子,从而区别转基因烟草和非转基因烟草。电化学发光PCR方法灵敏度高,可靠性强,操作简便,结果准确,有望成为一种高效的转基因植物检测方法。 展开更多
关键词 电化学发光-PCR 花椰菜花叶病毒35S启动子 探针杂交
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核酸分子“光开关”作探针荧光光谱法检测转基因启动子病毒DNA特定序列
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作者 曾国平 郑平 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期174-179,共6页
合成核酸分子"光开关"Ru(phen2)(dppx)2+,并以其作为荧光探针检测转基因花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV 35S)序列片段(5’-CATCGTT GAAGA TGCCTCTGCC G-3’).通过对检测条件的优化,测定CaMV 35S病毒DNA的线性范围为1.4×1... 合成核酸分子"光开关"Ru(phen2)(dppx)2+,并以其作为荧光探针检测转基因花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV 35S)序列片段(5’-CATCGTT GAAGA TGCCTCTGCC G-3’).通过对检测条件的优化,测定CaMV 35S病毒DNA的线性范围为1.4×10-9~6.9×10-8 mol.L-1,线性关系:ΔI=1.6913C+5.5783(式中ΔI为标准溶液的荧光强度与空白溶液的荧光强度之差),R2=0.9938,检出限为8.6×10-10 mol/L.实验表明该方法有操作简单、灵敏度高和选择性好等特点,同时可以较好地识别碱基错配序列和非互补序列ssDNA. 展开更多
关键词 "光开关"Ru(phen)2(dppx)2+ 花椰菜花叶病毒 DNA片段 定量检测
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电化学DNA传感器制备及用于花椰菜花叶病毒35S启动子快速检测
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作者 刘亚倩 刘克勤 +2 位作者 高娇娜 操小栋 叶永康 《安徽农业科学》 CAS 2018年第17期183-186,共4页
[目的]构建一种新型DNA电化学传感器,并用于花椰菜花叶病毒35S启动子片段检测。[方法]通过使用氨基化多壁碳纳米管对玻碳电极进行修饰,利用氨基化多壁碳纳米管对硫堇-金纳米粒子-DNA纳米复合物的吸附固定得到用于识别目标DNA的捕获界面... [目的]构建一种新型DNA电化学传感器,并用于花椰菜花叶病毒35S启动子片段检测。[方法]通过使用氨基化多壁碳纳米管对玻碳电极进行修饰,利用氨基化多壁碳纳米管对硫堇-金纳米粒子-DNA纳米复合物的吸附固定得到用于识别目标DNA的捕获界面,并将亲和素-辣根过氧化物酶修饰的金纳米粒子作为结构末端的信号分子,完成夹心结构传感器组装。试验采用循环伏安法对辣根过氧化物酶催化过氧化氢得到的还原电流进行测试。[结果]该传感器可实现对目标DNA定量检测,线性范围为1×10-18~1×10^(-11)mol/L,检测限低至6.95×10^(-20)mol/L,可特异性识别错配序列,并且表现出良好的重现性和稳定性。[结论]该传感器在转基因食品的检测方面有良好的应用前景。 展开更多
关键词 电化学DNA生物传感 花椰菜花叶病毒35S启动子 多壁碳纳米管 硫堇 辣根过氧化物酶
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LAMP技术检测食品中转基因成分CaMV35S启动子的研究 被引量:8
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作者 肖维威 周琳华 +3 位作者 吴永彬 蔡翠霞 马文丽 刘唐书 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第4期149-155,共7页
目的:建立一种快速检测CaMV35S启动子基因的环介导等温扩增技术检测方法。方法:针对CaMV35S启动子设计4对特异性引物,在链置换酶(Bst酶)作用下,65℃扩增1h。通过对转基因大豆GTS40-3-2等8种转基因标准品的检测,对该方法进行特异性评价。... 目的:建立一种快速检测CaMV35S启动子基因的环介导等温扩增技术检测方法。方法:针对CaMV35S启动子设计4对特异性引物,在链置换酶(Bst酶)作用下,65℃扩增1h。通过对转基因大豆GTS40-3-2等8种转基因标准品的检测,对该方法进行特异性评价。以F3、B3为引物,转基因大豆GTS40-3-2为模板,纯化后的PCR扩增产物与pMD-18T载体连接,构建含有CaMV35s启动子的质粒标准分子。配制7个浓度梯度的标准质粒分子,进行灵敏度分析。同时应用该方法和荧光PCR方法检测35种农产品及其加工品。结果:该方法特异性强,结果可视,检测灵敏度达200copies/μL,35种样品的检测结果与SYBRGreen荧光PCR检测结果一致。结论:建立的LAMP法具有快速,简单,可视化,灵敏度高和特异性强等优点,可应用于转基因产品的初步筛选。 展开更多
关键词 花椰菜花叶病毒 环介导等温扩增技术 转基因食品
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花椰菜花叶病毒CaMV 35S启动子LAMP检测方法的建立 被引量:4
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作者 孙敏 梁成珠 +2 位作者 高宏伟 林超 刘彩霞 《食品科技》 CAS 北大核心 2010年第4期255-258,共4页
针对花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子的保守序列设计特异性引物,并进行条件优化,建立CaMV35S启动子的LAMP检测方法。该方法具有良好的特异性,检测灵敏度可达0.002%。对80份各类植物及其加工品进行检测,检测结果与实时荧光PCR法完全相符。... 针对花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子的保守序列设计特异性引物,并进行条件优化,建立CaMV35S启动子的LAMP检测方法。该方法具有良好的特异性,检测灵敏度可达0.002%。对80份各类植物及其加工品进行检测,检测结果与实时荧光PCR法完全相符。CaMV35S启动子的LAMP检测方法,在检验检疫行业和食品加工业具有广阔的应用前景,对于加强转基因产品检测监管,促进进出口贸易具有重要意义。 展开更多
关键词 花椰菜花叶病毒 35S启动子 环介导等温扩增技术 检测
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Plant infection by two different viruses induce contrasting changes of vectors fitness and behavior 被引量:1
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作者 Quentin Chesnais Aude Couty +2 位作者 Maryline Uzest Veronique Brault Arnaud Ameline 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2019年第1期86-96,共11页
Insect-vectored plant viruses can induce changes in plant phenotypes,thus influencing plant-vector interactions in a way that may promote their dispersal according to their mode of transmission (i.e.,circulative vs.no... Insect-vectored plant viruses can induce changes in plant phenotypes,thus influencing plant-vector interactions in a way that may promote their dispersal according to their mode of transmission (i.e.,circulative vs.noncirculative).This indirect vector manipulation requires host-virus-vector coevolution and would thus be effective solely in very specific plant-virus-vector species associations.Some studies suggest this manipulation may depend on multiple factors relative to various intrinsic characteristics of vectors such as transmission efficiency.In anintegrative study,we tested the effects of infection of the Brassicaceae Camelina sativa with the noncirculative Cauliflower mosaic virus (CaMV)or the circulative Turnip yellows virus (TuYV)on the host-plant colonization of two aphid species differing in their virus transmission efficiency:the polyphagous Myzus persicae,efficient vector of both viruses,and the Brassicaceae specialist Brevicoryne brassicae,poor vector of TuYV and efficient vector of CaMV.Results confirmed the important role of virus mode of transmission as plant-mediated effects of CaMV on the two aphid species induced negative alterations of feeding behavior (i.e.,decreased phloem sap ingestion)and performance that were both conducive for virus fitness by promoting dispersion after a rapid acquisition.In addition,virus transmission efficiency may also play a role in vector manipulation by viruses as only the responses of the efficient vector to plant-mediated effects of TuYV,that is,enhanced feeding behavior and performances,were favorable to their acquisition and further dispersal.Altogether,this work demonstrated that vector transmission efficiency also has to be considered when studying the mechanisms underlying vector manipulation by viruses.Our results also re- inforce the idea that vector manipulation requires coevolution between plant,virus and vector. 展开更多
关键词 APHID vector cauliflower mosaic virus electrical penetration graph HOST-PLANT selection life history traits TURNIP YELLOWS virus
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