人结肠癌ccl227细胞系肿瘤干细胞生长特性研究

目的:研究体外培养条件下人结肠癌cc l227细胞系肿瘤干细胞的生长特性。方法:用荧光染料Hoechst33342染色培养在SSM和SFM中的cc l227细胞,荧光显微镜观察SP细胞。用6孔板接种的方法绘制cc l227细胞的生长曲线。显微镜观察肿瘤球的生长。结果:在两种培养条件下均观察到cc l227细胞系中存在浅染和拒染的SP细胞。生长曲线显示在两种培养条件下,cc l227细胞的繁殖能力不同。在玻璃培养瓶和低吸附6孔板中均可以培育出肿瘤球,但形态有些不同。结论:SSM和SFM培养条件下,cc l227细胞中均存在SP细胞;在SFM中,cc l227细胞增殖缓慢;SFM可培育出富含肿瘤干细胞的肿瘤球。在低吸附条件下,更易形成悬浮的肿瘤球。

人结肠癌ccl227细胞肿瘤球生长特性及裸鼠移植瘤形成研究

目的:研究人结肠癌ccl227细胞肿瘤球的生长特性及裸鼠移植瘤形成。方法:将培养在SSM中的ccl227细胞移入含有生长因子的SFM中接种在低吸附6孔培养板,观察肿瘤球的生长情况。将肿瘤球移回到SSM中,接种在培养皿中,观察肿瘤球的分化。96孔板接种检测ccl227细胞和肿瘤球细胞的克隆形成率。不同数量的ccl227细胞和肿瘤球细胞分别接种裸小鼠,观察移植瘤形成。结果:在SFM及低吸附的培养条件下观察到了肿瘤球的形成,呈悬浮状态,细胞圆而小。被移回到SSM中的肿瘤球,细胞逐渐贴壁、伸展。4.2%ccl227细胞形成克隆,13.5%肿瘤球细胞形成克隆。在裸小鼠移植中,高于106的ccl227细胞产生了移植瘤,而移植肿瘤球细胞仅需103个细胞。结论:在SFM培养条件下,ccl227细胞肿瘤球细胞可富集,血清可促进肿瘤球细胞分化。ccl227肿瘤球细胞比非肿瘤球细胞具有更强的致瘤性。