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Cdk2ap1在不同性别鸡胚中的表达 被引量:1
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作者 杨宇 俸艳萍 +4 位作者 龚萍 黄潘 李世军 彭秀丽 龚炎长 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期936-940,共5页
为研究通过抑制消减杂交筛选出的cdk2ap1基因在鸡胚胎发育过程中的表达,设计cdk2ap1引物并通过RT-PCR扩增cdk2ap1基因片段,构建cdk2ap1/pGEM-T重组质粒。以构建的重组质粒为模板,使用Sp6和T7RNA聚合酶合成地高辛(dig)标记的正、反义RNA... 为研究通过抑制消减杂交筛选出的cdk2ap1基因在鸡胚胎发育过程中的表达,设计cdk2ap1引物并通过RT-PCR扩增cdk2ap1基因片段,构建cdk2ap1/pGEM-T重组质粒。以构建的重组质粒为模板,使用Sp6和T7RNA聚合酶合成地高辛(dig)标记的正、反义RNA探针,借助胚胎整体原位杂交技术研究了cdk2ap1在雌雄鸡胚中的表达。结果表明cdk2ap1基因在4.0d两性胚胎的脑间质、菱脑、听囊、脊神经管、前肢等部位均有表达,且在雄性鸡胚中的表达量高于雌性;在雄性鸡胚的生殖脊、后肢部位中该基因有表达但在雌性胚胎对应部位却基本没有表达。鉴于该基因在雌雄鸡胚中的差异表达,推测cdk2ap1基因在鸡胚性别分化及性腺发育过程中起一定调节作用。 展开更多
关键词 cdk2ap1 基因克隆 整体原位杂交 鸡胚 性腺发育
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CDK2AP1基因过表达慢病毒载体的构建与鉴定
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作者 刘利军 杨向明 +2 位作者 张静 申致远 孙沫逸 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第4期751-754,共4页
目的:构建CDK2AP1基因慢病毒过表达载体,感染人口腔鳞癌细胞系SCC-25细胞系中,为CDK2AP1基因体内外实验研究奠定实验基础。方法:将pCDH-CMV-GFP慢病毒载体Sal I和Xba I酶切位点插入CDK2AP1基因序列,构建pCDH-GFP-CDK2AP1慢病毒质粒。经... 目的:构建CDK2AP1基因慢病毒过表达载体,感染人口腔鳞癌细胞系SCC-25细胞系中,为CDK2AP1基因体内外实验研究奠定实验基础。方法:将pCDH-CMV-GFP慢病毒载体Sal I和Xba I酶切位点插入CDK2AP1基因序列,构建pCDH-GFP-CDK2AP1慢病毒质粒。经PCR鉴定、测序验证CDK2AP1基因后,将其和慢病毒包装质粒混合物共同转染病毒包装细胞293TN,转染24小时后产生重组病毒GFPCDK2AP1慢病毒颗粒。经病毒浓缩纯化后,感染SCC-25口腔鳞癌细胞系并测定感染效率。结果:GFPCDK2AP1病毒中携有转染正确的CDK2AP1基因,感染人SCC-25细胞系后能稳定表达。结论:成功地在舌鳞癌细胞系SCC-25中构建了CDK2AP1基因的重组慢病毒过表达载体,为研究其在头颈鳞癌的生物学功能奠定基础。 展开更多
关键词 cdk2ap1 慢病毒 过表达载体
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靶向干扰CDK2AP1对乳腺癌MCF-7细胞体外迁移和侵袭的影响
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作者 魏任雄 李克强 +2 位作者 毛联钢 李旭军 冯伟云 《浙江医学》 CAS 2014年第12期1034-1037,共4页
目的探讨靶向干扰细胞周期调节蛋白依赖性激酶2-关联蛋白-1(CDK2AP1)对乳腺癌MCF-7胞体外迁移和侵袭的影响。方法构建重组慢病毒pGCLV-CDK2AP1-shRNA及重组空病毒pGCLV-GFP,分别稳定转染乳腺癌细胞系MCF-7,获得乳腺癌细胞株MCF-7/RNAi-N... 目的探讨靶向干扰细胞周期调节蛋白依赖性激酶2-关联蛋白-1(CDK2AP1)对乳腺癌MCF-7胞体外迁移和侵袭的影响。方法构建重组慢病毒pGCLV-CDK2AP1-shRNA及重组空病毒pGCLV-GFP,分别稳定转染乳腺癌细胞系MCF-7,获得乳腺癌细胞株MCF-7/RNAi-NC和MCF-7/RNAi-CDK2AP1。采用定量PCR法检测两组MCF-7细胞株的CDK2AP1mRNA表达,xCELLigence/RT-CIM实时细胞电子分析系统检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力。结果成功构建乳腺癌细胞株MCF-7/RNAi-NC和MCF-7/RNAi-CDK2AP1,相比MCF-7/RNAi-NC细胞组,MCF-7/RNAi-CDK2AP1细胞组的CDK2AP1mRNA表达受到明显抑制,其细胞迁移和侵袭能力均显著下降(P<0.05)。结论乳腺癌细胞MCF-7中CDK2AP1低表达能有效抑制细胞的体外迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 乳腺癌 cdk2ap1shRNA 细胞迁移 细胞侵袭
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Lentivirus-mediated RNA Interference and Over-expression of CDK2AP1 CDNA Regulate CDK2AP1 Expression in Human Lung Cancer A549 Cells 被引量:3
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作者 GAO Nan ZHANG Xing-yi +4 位作者 JIANG Rui WANG Guan LIJin-dong JINCheng-yan SUN Mei 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2011年第3期445-449,共5页
Cyclin-dependent kinase 2-associated protein 1(CDK2AP1), a cell growth inhibitory factor, is abnormally expressed in cancer cells, and might be implicated in the development of lung cancer. However, no studies on th... Cyclin-dependent kinase 2-associated protein 1(CDK2AP1), a cell growth inhibitory factor, is abnormally expressed in cancer cells, and might be implicated in the development of lung cancer. However, no studies on the function of CDK2AP1 in human lung cancer have been yet reported. In this study, overexpressing lentiviral vectors containing full-length CDK2AP1 cDNA and CDK2AP1 shRNA(short hairpin RNA) were constructed. Our results show that infecting A549 cells with lentivirus containing CDK2AP1 shRNA or full-length CDK2AP1 cDNA results in significantly down- or up-regulated the expression of CDK2AP1, respectively, thereby providing reliable tools for studying the function of CDK2AP1 in pulmonary carcinogenesis. Our data of MTT assay and flowcytometric analysis demonstrate that CDK2AP1 plays an important role in the proliferation/growth and cell cycling of A549 cells in vitro, and further investigation into its underlying mechanism of pulmonary carcinogenesis is needed. 展开更多
关键词 LUNG Cancer cdk2ap1 SHRNA LENTIVIRUS
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CDK2AP1在口腔白斑中的表达水平研究 被引量:1
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作者 陈俊 张国富 《湖北民族学院学报(医学版)》 2016年第3期11-12,16,共3页
目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶2关联蛋白1(CDK2AP1)在口腔白斑中的表达。方法采用免疫组化二步法(S-P)检测10例人正常口腔粘膜,22例口腔白斑组织中CDK2AP1蛋白的表达,收集数据并进行统计分析。结果 CDK2AP1蛋白在口腔白斑组织的阳性率... 目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶2关联蛋白1(CDK2AP1)在口腔白斑中的表达。方法采用免疫组化二步法(S-P)检测10例人正常口腔粘膜,22例口腔白斑组织中CDK2AP1蛋白的表达,收集数据并进行统计分析。结果 CDK2AP1蛋白在口腔白斑组织的阳性率(23.71%±7.93%)明显低于正常口腔粘膜组织(63.88%±11.72%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CDK2AP1在口腔粘膜中的表达水平随着口腔病变恶性程度增高而降低,本指标对口腔病变恶性程度的研究有一定临床意义。 展开更多
关键词 cdk2ap1 口腔白斑 免疫组化二步法
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口腔黏膜白斑和口腔鳞癌中Bcl-2、CDK 2AP 1的基因表达和临床意义 被引量:3
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作者 张国富 高建明 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第30期56-59,共4页
目的研究在口腔黏膜白斑和口腔鳞癌组织中Bcl-2和CDK2AP1的表达情况及临床意义。方法运用免疫组织化学和实时荧光定量PCR技术对组织中Bcl-2、CDK2AP1表达进行检测。结果在口腔正常黏膜组织、口腔黏膜白斑组织和口腔鳞癌组织中Bcl-2蛋白... 目的研究在口腔黏膜白斑和口腔鳞癌组织中Bcl-2和CDK2AP1的表达情况及临床意义。方法运用免疫组织化学和实时荧光定量PCR技术对组织中Bcl-2、CDK2AP1表达进行检测。结果在口腔正常黏膜组织、口腔黏膜白斑组织和口腔鳞癌组织中Bcl-2蛋白细胞阳性率依次为(2.72±1.45)%、(19.29±8.18)%和(57.20±19.37)%;CDK2AP1蛋白细胞阳性率依次为(62.68±11.07)%、(25.68±8.17)%和(7.87±2.18)%。Bcl-2和CDK2AP1 m RNA表达水平与蛋白表达水平一致。各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论随着口腔病变恶性程度增高,在口腔正常黏膜、口腔黏膜白斑和口腔鳞癌中Bcl-2表达水平上升,而CDK2AP1表达水平降低,这2个指标可能与口腔肿瘤的发生、发展及预后有关。 展开更多
关键词 BCL-2 cdk2ap1 口腔黏膜白斑 口腔鳞癌
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