白念珠菌CDR1基因表达与氟康唑耐药的关系

目的 了解在白念珠菌氟康唑耐药或敏感菌株中CDR1基因的表达情况。方法 抽提氟康唑耐药 /敏感菌株的RNA ,采用Northernblot技术观察CDR1基因的表达。结果 白念珠菌耐药菌株CDR1基因的表达量明显高于对应的敏感菌株。结论 白念珠菌CDR1基因的高表达与氟康唑耐药有关。

光滑假丝酵母菌耐药基因CDR1、CDR2、SNQ2表达的研究

目的:探讨光滑假丝酵母菌耐三唑类抗真菌药物临床株耐药基因表达情况。方法:34株复发性外阴阴道假丝酵母菌病的临床分离株,通过26S rDNA D1/D2区分子鉴定为光滑假丝酵母菌,应用法国生物梅里埃酵母菌药敏试剂盒ATBTMFUNGUS3,进行体外药物敏感性试验。实时荧光定量PCR方法检测34株菌株耐药基因CDR1、CDR2、SNQ2表达量。结果:34株光滑假丝酵母菌中,有2株为敏感株,2株对ITR剂量依赖敏感,30株为耐药株,且呈现交叉耐药现象。对氟康唑(FCA)、伊曲康唑(ITR)、伏立康唑(VRC)抗真菌药物的耐药率分别为26.32%、86.84%、34.21%。耐药株CDR1、SNQ2基因表达明显高于敏感株(P<0.0005),CDR2表达量无差别(P>0.05)。结论:光滑假丝酵母菌对三唑类药物MIC值高,其药物敏感性低与耐药基因CDR1、SNQ2的过度表达有关。

白念珠菌CDR1/CDR2和MDR1基因高表达对氧化应激的影响

目的探索白念珠菌CDR1/CDR2和MDR1基因高表达对氧化应激的影响。方法以白念珠菌CDR1/CDR2和MDR1基因高表达株及其亲本株为研究对象,测定过氧化氢(H2O2)对菌株生长的影响。以H2O2建立氧化应激模型,比较各菌株细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential,ΔΨm)、氧化应激相关基因(CAP1和GRP2)和ROS清除相关基因(SOD2和SOD5)转录水平的差异。结果各菌株均在5mmol/L H2O2作用时出现100%生长抑制;H2O2能升高细胞内ROS和降低ΔΨm(P<0.05),其中高表达株中两者的变化幅度较亲本株低(P<0.05);同时高表达株中CAP1和GRP2基因在转录水平的表达上调以及SOD2和SOD5基因的下调也较亲本株少(P<0.05)。结论 CDR1/CDR2和MDR1基因高表达能够降低白念珠菌的氧化应激反应,增强其对氧化应激的适应性。

汉防己甲素对氟康唑抗白念珠菌增效活性的分子机制探讨

目的探讨汉防己甲素在体外对氟康唑增效作用的分子机制。方法分别提取16株白念珠菌酵母相总RNA，采用RT-PCR方法比较汉防己甲素作用前及作用24h后白念珠菌药物外排泵基因MDR1、FLU1、CDR1、CDR2在氟康唑敏感、剂量依赖性敏感、耐药株中的表达情况。结果在汉防己甲素作用前，MDR1、FLU1、CDR1、CDR2表达水平在氟康唑敏感、剂量依赖性敏感、耐药株间的差异均有统计学意义（P〈0．05）。汉防己甲素作用24h后，与作用前相比，MDR1在氟康唑耐药株中、FLU1在氟康唑剂量依赖性敏感、耐药株中、CDR1和CDR2在氟康唑敏感、剂量依赖性敏感、耐药株中表达水平的差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论汉防己甲素在体外对氟康唑抗白念珠菌活性增效作用的分子机制与抑制药物外排泵基因MDR1、FLU1、CDR1、CDR2的表达均有关。

阴道白假丝酵母菌的耐药性与ABC转运蛋白基因表达的关系研究

目的:探讨白假丝酵母菌中cdr1、cdr2基因表达水平与菌株对吡咯类药物敏感性下降的关系。方法:收集白假丝酵母菌感染患者的菌株60株,用科玛嘉念珠菌显色培养基作菌种鉴定,纸片扩散法进行药敏试验;实时定量PCR方法检测菌株中cdr1和cdr2的表达水平,并进行统计分析。结果:60株白假丝酵母菌中,38株为中度敏感或耐药株,其中12株菌株对氟康唑、酮康唑和咪康唑中度敏感或耐药,14株菌株对酮康唑和咪康唑中度敏感或耐药;氟康唑中度敏感或耐药组cdr1、cdr2相对表达量显著高于敏感组,酮康唑中度敏感或耐药组和咪康唑中度敏感或耐药组cdr1、cdr2相对表达量与敏感组比较,差异无统计学意义。结论:部分白假丝酵母菌耐药为多重耐药;cdr1及cdr2的高表达与临床白假丝酵母菌对氟康唑耐药有关,cdr1及cdr2的表达量与临床白假丝酵母菌对酮康唑或咪康唑耐药无关。